动物赤羽病

赤羽病是赤羽病毒(Akabane virus)引起的牛、绵羊及山羊的一种传染病(有人译为阿卡班病)。该病以流产、早产、死胎、新生犊牛畸形以及大脑缺损为特征。因有先天性关节弯曲和脑水肿的症状,曾称为关节弯曲—积水性无脑综合征(Arthrogryposis-hydranencephaly syndrome),简称A—H综合征。 在日本,本病可能发生于1949年,但长期处于不明阶段。直到1972～1975年发生大流行时,才开始深入研究,最初怀疑是中毒性疾病,但未找出可信赖的证据。后来从日本群马县赤羽村(现为馆林市)的畜舍内采集的金色库蚊和三带喙库蚊分离出真正的病原病毒,故而将该病毒称为赤羽病毒,由赤羽病毒引起的     

牛羊赤羽病的发生和诊断

赤羽病(Akabane disease)是布尼安病毒属诱发的牛羊胎儿的严重先天性缺损症。主要是通过库蠓叮咬而传播,呈季节性散发和流行。临床特点主要表现为胎儿畸形、流产,死胎,木乃伊胎儿,早产,机能障碍等。 (一)病原学 其病原为Akabane病毒,属于虫媒病毒的血清学亚类的Simbu病毒类(grope),根据它的形态学、微生物学及血清学交叉反应,而归属为布尼安病毒属(Bu-     

赤羽病病毒核衣壳蛋白原核表达及单克隆抗体制备

为制备赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核衣壳(N)蛋白单克隆抗体,本研究构建了pET-28a-AKAV-N重组质粒,并将其转化至BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达和镍柱纯化获得重组N蛋白.用重组N蛋白4次免疫小鼠后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞,利用亚克隆技术和ELI...     

牛羊赤羽病病毒环介导等温扩增检测方法的建立

为建立一种能够快速、简便地检测牛、羊赤羽病病毒的分子生物学方法,根据赤羽病病毒特异性S基因的6个特异区域设计了2对引物,首次建立了赤羽病病毒环介导等温扩增(LAMP)检测方法,对LAMP反应条件进行了优化,并将其与普通PCR方法进行比较。结果显示,LAMP检测方法的特异性好,只对赤羽病病毒进行扩增,且操作简便。本研究确定的最佳反应温度为63℃,核酸检测的最低检出限为1.08ng/μL,比普通PCR的灵敏度高2个数量级。该方法为赤羽病病毒的一种最新的快速、简便的检测方法,可用于出入境牛、羊赤羽病的快速检测。     

赤羽病病毒核衣壳蛋白基因的表达纯化及活性鉴定

为获得赤羽病病毒(Akabane virus,AKAV)核衣壳蛋白重组抗原,经RT-PCR扩增了OBE-1株的S节段,将其插入到pMD 18-T载体,然后用带有酶切位点的引物从该重组载体亚克隆出表达核衣壳蛋白的N基因,用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后与同样处理的表达载体pET-28a( )进行连接,转化感受态细胞BL21(DE3)。将筛选出的阳性克隆进行测序、IPTG诱导表达和融合蛋白纯化及活性鉴定。结果表明,N基因含有1个全长702 bp的ORF,编码233个氨基酸,通过SDS-PAGE和Western-blotting分析,证实重组菌株可高效表达有免疫活性的分子质量约27 ku的可溶性融合蛋白,用薄层扫描仪分析,其最高表达量占可溶性菌体蛋白总量的58.5%。工程菌经超声波裂解高速离心后,上清液在ProBondTMPurification System(含Ni2 )天然状态下纯化,可获得高纯度的融合蛋白。     

赤羽病病毒核衣壳蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

以纯化的重组赤羽病病毒核衣壳蛋白作为诊断抗原,建立了检测牛血清特异性核衣壳蛋白抗体的间接ELISA方法,初步组装成便于现地使用的试剂盒。经对试验条件进行优化,确定最佳抗原包被量为每孔1μg(100μL),样品稀释度为1∶100,兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1∶8 000。经特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。应用初步研制的间接ELISA试剂盒和微量中和试验法分别对云南省的89份、内蒙古的100份牛血清样本进行了检测,以中和试验为参照,经统计学处理,得出检测临界值分别为0.411和0.303,2种方法的符合率分别为72.7%(56/77)和91.4%(85/93)。试剂盒在37℃保存3 d,对敏感性无明显影响。     

赤羽病病毒N基因硫氧还蛋白融合表达载体的构建与表达

为获得赤羽病病毒 (Akabanevirus ,AKAV )的核蛋白重组抗原 ,根据其基因序列(SmRNA)设计合成了 1对特异性引物 ,对AKAVN基因进行RT PCR扩增 ,产物大小约为 6 96bp ,回收纯化后 ,将其克隆至 pMD18 T质粒载体中 ,经核苷酸序列分析 ,与已报道的多株AKAV编码核衣壳蛋白N的SmRNA基因比较后发现 ,所测定毒株的核苷酸序列与TIN毒株的同源性高达 98.3% ,推测的氨基酸同源性为 97.6 % ,证实为AKAV的N基因。将该基因片段亚克隆插入pBAD/ThioTOPO表达载体 ,转化TOP10细胞 ,成功地构建了AKAVN基因重组表达载体。经L araboinose诱导表达 ,可稳定、高效地表达AKAV核蛋白抗原。表达蛋白为融合蛋白 ,分子质量约 4 2 .5ku ,其表达产量约占菌体总蛋白的 2 8% ,融合蛋白中含有AKAV特异性核蛋白抗原 ,可作为ELISA包被抗原     

羊衣原体性流产病的防治方法简介

羊的衣原体性流产是由鹦鹉衣原体(Chla-mydia psittaci)引起的一种传染病,世界上许多国家都发现存在有此种病,它不仅对畜牧业的发展造成巨大危害,同时也造成很大的经济损失,例如在英国,每年由于此病原引起羊衣原体性流产所造成的经济损失可达2000万英镑左右;在我国,许多省区都证实有此病的存在,特别是在牧区流行范围更大,有的牧区羊只由衣原体引起的流产率高达     

《第三届国际马立克氏病讨论会》简介

(一)会议概况 1988年9月12～16日在日本大阪市举行了第三届国际马立克氏病专题讨沦会(该讨论会每四年召开一次)。大阪大学加滕四郎(Shiro Kato)教授是这次讨沦会的组委会主席。 参加会议的有近20个国家约200人,其中以东道主日本人为最多,英国毫顿家禽研究所原所长Biggs、现任所长Payne,美国东兰辛家禽研究所所长Witter等著名专家均参加了会议。我国是第一次以正形代表身份参加此讨沦会,2名代表(大陆1名,台湾1名),1名特邀代表。加滕教授致开幕词后,会议按讨沦内容划分为十个部分,每个部分有两名执行主席。这十个部分的内容是:①特邀报告。这部分专门介绍人类疱疹病毒研究的最新进展,有4名专家作报告,中国预防医学科学院副院长曾毅教授是第二位特邀报告人,报     

王路刚简介

王路刚,1964年12月26日生于河北省农村,自幼酷爱绘画,1984年考入中央美术学院,1988年毕业,获文学学士学位。毕业后从事美术     

鸡传染性腔上囊病病毒的反向遗传操作

传染性腔上囊病病毒 (infectiousbursaldiseasevirus ,IBDV)是引起鸡传染性腔上囊病 (IBD)的病原。IBD是严重危害养鸡业的三大传染病之一 ,除直接引起易感鸡发病及死亡外 ,更重要的是破坏机体的免疫器官 ,引起严重的免疫抑制 ,使鸡群对其他病原的易感性增加 ,并导致疫苗免疫失败 ,从而给世界养鸡业造成了巨大的经济损失。IBDV属于双链RNA病毒科禽双RNA病毒属的成员[1] ,有 2个血清型 (1型及 2型 ) ,但只有血清 1型病毒有致病性 ,同时血清 1型在毒力上存在着很大的差异 ,可分为古典强毒株、弱毒株、变异株和超强毒株。超强毒株的抗原…     

欧盟对中亚援助概况

经过2004年与2007年两度东扩,欧盟与中亚五国在地理上越来越近。2007年6月22日,欧盟通过了第一份系统全面的中亚战略文件——《欧盟与中亚:新伙伴关系战略》,显著提升了对中亚的战略关注。新战略出台以来,欧盟与中亚关系取得了长足进展,标志着欧盟已成为中亚地区新的"战略玩家"。对中亚实施援助是欧盟与中亚关系的主线,本文拟将欧盟对中亚援助的总体情况及具体援助计划和工具等作一简介。     

英国情报与安全机构

英国是一个有着悠久情报历史的国家,其16世纪中期第一个情报机构正式成立至今已有400多年,可称西方情报机构的鼻祖。随着大英帝国国力的衰弱,其情报安全机构也开始走下坡路,但不可否认的是,英国情报安全机构在欧洲国家中仍是最出色的。     

西尼罗河病毒病

20 0 2年 ,美国很多州流行西尼罗河病毒 (WestNilevirus ,WNV)病 ,目前 ,有关西尼罗河病毒病的报道很多[1～ 10 ] 。该病为人畜共患传染病 ,患病的人和动物出现脑炎症状 ,如果与其他疾病混合感染 ,则可以导致死亡。因目前尚无治疗西尼罗河病毒病的有效方法 ,造成了人们对WNV的恐惧。本文仅就西尼罗河病毒病的病原学、流行病学及流行情况等作一介绍 ,以使人们正确认识西尼罗河病毒病的危害及其防治。1　病原学WNV是RNA病毒 ,属于黄病毒科 ,其病毒质粒大小约为 4 0nm。本病毒的核酸为不分节段的单股正链RNA。本病毒RNA依赖的RNA聚合…