利用AutoMate Express~(TM)自动化法医DNA提取系统提取骨骼及牙齿DNA

目的探讨建立骨骼及牙齿DNA自动化提取的新方法。方法将33份骨骼及15份牙齿样本分别用冷冻研磨和手工处理两种方法研磨成粉,采用AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统提取DNA并定量。结果 AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统能够在3h左右完成骨骼、牙齿DNA的提取,两种方法处理的骨骼样本所得DNA质量浓度差异无统计学意义。冷冻研磨处理的骨骼和牙齿样本均获得了较好的STR分型结果,且牙齿样本所得DNA质量浓度高于手工提取所得。结论应用AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统是自动化提取骨骼、牙齿DNA的一种新方法,可应用于法医实际案件检验。     

不同前处理方法提取牙齿DNA的比较

目的对三种不同前处理方法提取的牙齿DNA浓度进行比较,建立一种操作简便、经济适用、浓度较高的牙齿DNA提取的前处理方法。方法选择源自7具尸体的共21颗磨牙,每具尸体的3颗磨牙随机按牙屑法、球磨法、液氮研磨法进行前处理,并分别称取50 mg,采用Auto Mate Express~(TM)法医DNA提取系统提取DNA,对三种方法提取的DNA浓度和STR分型结果进行比较。结果牙屑法、球磨法和液氮研磨法提取的DNA质量浓度分别为0.055 6~1.989 1、0.036 6~1.175 6和0.037 8~1.249 0 ng/μL,牙屑法提取的DNA质量浓度较高(P0.05),且STR分型成功率高。结论牙屑法结合Auto Mate Express~(TM)法医DNA提取系统是提取牙齿DNA的一种切实可行的方法,可应用于法医学鉴定实践中。     

水中白骨化尸体的DNA检验

<正>白骨化尸体的身源鉴定往往是法医学鉴定的难点之一。通常选用长骨、牙齿作为检材,然而对于水中浸泡的白骨化尸体则增加了DNA检验的难度,如何建立稳定、有效的检验方法具有重要意义。本研究就本实验室近年来对在水中浸泡后形成的50例白骨化尸体的DNA检验,总结经验,介绍如下。1材料与方法1.1材料各类案件发现的水中白骨化尸体50例,共取得股骨50根、牙齿50枚。     

两种提取骨骼、牙齿DNA的方法

目的建立提取骨骼、牙齿DNA的新方法。方法收集380例骨骼、牙齿检材,其中347份为常规骨骼、牙齿(常规组),33份为陈旧骨骼、牙齿(疑难组)。常规组检材以Handy-Eco仪器、疑难组则用冷冻研磨仪研磨成粉,以Kingfisher自动化系统提取DNA,用Identifiler Plus进行STR分型检测。结果用HandyEco Kingfisher法(H-K法)成功提取345例常规骨骼、牙齿检材的DNA,成功率99.42%;用Freeze-mill Kingfisher法(FM-K法)成功获取32例疑难骨骼、牙齿检材的DNA,成功率96.97%。结论采用H-K法和FM-K法对骨骼和牙齿DNA的检验成功率较高,可选择应用于工作实践中。     

陈旧骸骨DNA身份鉴定的法医学进展

骨骼和牙齿是重要的生物样本,由于结构特殊,抗降解能力强,是自然条件下保留DNA理想的生物检材。在历史人物鉴定案例中,陈旧的骨骼和牙齿样本常常是唯一的生物检材,但其DNA呈微量、毁损和不同程度降解状态,需要经过特殊的实验处理以实现身份鉴定。本文综合近年来相关研究报道,从采集检材、DNA提取、DNA富集、检测分析方案等方面进行综述,以期促进陈旧骨骼和牙齿检测体系的进一步发展和完善。     

非窒息性死亡腐尸牙齿赤色变初步探讨

本文对97例非窒息性死亡腐尸牙齿的变化进行了检验研究,发现32例腐尸牙齿呈赤色变(玫瑰齿),占检验数的33%。非窒息性死亡腐尸赤色齿出现率较高的原因,均与尸体腐败、环境潮湿、尸体头低脚高和俯卧姿式等因素有关。     

牙齿的DNA提取及STR分型研究

目的建立有效的牙齿DNA提取方法。方法使用物理及化学方法去除牙齿表面污染物,经脱钙、裂解、纯化从牙粉中提取DNA进行STR分型。结果对96例牙齿检材进行DNA检验,获得STR分型的有94例,在查找尸源的案件中发挥了重要作用。结论本方法操作简单快速,能够显著提高牙齿DNA检验的成功率。     

DNATyper19~(TM)与Identifiler~(TM)Plus试剂盒对疑难检材检验比较

<正>本研究应用DNATyper19~(TM)试剂盒和Identifiler~(TM) Plus试剂盒对骨骼、牙齿和脱落细胞等疑难检材DNA进行平行扩增,从分型结果一致性、检出率等方面进行分析,探讨DNATyper19~(TM)试剂盒在疑难检材检验中应用的可行性[1-5]。1材料与方法1.1样本来源510例生物检材均来自本实验室日常检案积累,其中包括:骨骼70例、牙齿50例、脱落细胞390例(包     

2种陈旧骨骼、牙齿DNA纯化方法的比较

目的比较有机法+QIAquick纯化法和DNA IQ磁珠法对陈旧骨骼和牙齿DNA的纯化效果。方法选择10份陈旧骨骼和12份牙齿样本,进行消化后分别采用有机法+QIAquick纯化法和DNA IQ磁珠法进行提取纯化,进行DNA定量后用SinofilerTM试剂盒进行检测。结果 2种方法纯化的骨骼、牙齿DNA的IPC CT值无显著差异。有机法+QIAquick纯化法纯化的骨骼、牙齿DNA平均浓度分别为0.180ng/μL±0.068ng/μL和0.132ng/μL±0.027ng/μL,所有样品均获得全部基因分型。DNA IQ磁珠法纯化的DNA平均浓度分别为0.038ng/μL±0.028ng/μL和0.036ng/μL±0.007ng/μL,有5份骨骼和6份牙齿样本仅获得部分基因分型或未能分型。结论有机法+QIAquick纯化法对陈旧骨骼、牙齿DNA的纯化效果优于DNA IQ磁珠法。     

人骨骼及牙齿DNA提取方法的比较和优化

目的人骨骼和牙齿DNA提取方法的比较和优化。方法收集18份不同个体的长骨、30颗磨牙和同一个体2根股骨、8颗磨牙。利用TissueLyser-Ⅱ组织破碎仪和PreFiler Express BTA^TM法医DNA提取试剂盒（BTA法）,应用Automate Express^TM自动化法医DNA提取系统提取DNA,进行STR分型,与脱钙法进行比较,并进行实验条件优化。结果用TissueLyser-Ⅱ结合BTA法,约2.5h即可完成骨骼和牙齿的DNA提取,分型成功率分别为94.4%和96.7%。与脱钙法比较,两种方法获得DNA质量浓度和检出率比较接近（P〈0.05）,但BTA法在操作过程方面更具优势。最佳样本量为100mg,消化时间为2h。结论采用TissueLyser-Ⅱ组织破碎仪结合BTA法对骨骼和牙齿进行DNA提取和分型检验,能满足实际检案的要求,可在法医学实践中选择使用。     

高度腐败尸体指印的提取

目前对无名尸体尸源认定的方法主要有尸体相貌、DNA分析、指纹等等。当命案现场中的无名尸体高度腐败时，尸体面容完全改变，相貌辨认条件丧失；同时，高度腐败尸体细胞中的DNA已经高度降解，DNA测序大多难以得到准确结果。对于这类案件，可以通过尸体指纹与生前所留指印的同一认定来进行尸源认定，如何成功的提取高度腐败尸体的指纹是能否通过指纹进行尸源认定的关键。笔者就实际工作中所遇到的案例介绍一种教科书上未提及的高度腐败尸体指纹提取方法。     

重庆地区汉族未成年人牙龄推断的研究

目的运用牙齿曲面断层影像技术,研究6周岁～15周岁重庆市未成年人牙齿钙化的规律,从而建立根据牙齿钙化程度推断年龄的方法。方法依据牙齿钙化分级标准对1321名（男性577名,女性744名）重庆市6周岁～15周岁未成年人牙齿曲面断层片上的牙齿钙化程度进行分级评分;将评分值与对应的性别和年龄分别输入SPSS13.0软件进行统计分析,最终建立推断年龄的方程。结果左右侧同名牙齿钙化程度无统计学差异（P〉0.05）,但性别间有统计学差异（P〈0.05）;下颌左右侧8颗牙齿的钙化程度与年龄相关系数均大于0.58;所建利用不同牙齿组合推断年龄的线性回归模型调整拟合优度均大于0.67,估计值标准误男性为0.95周岁～1.11周岁、女性为1.02周岁～1.12周岁。结论该方法可用于法庭科学领域中推断重庆市6周岁～15周岁未成年人活体以及尸体的年龄。     

腐败尸体DNA提取的新方法

在法医日常检案中,对于无名尸体常需要提取并检测DNA以确定尸体身源,传统提取肋软骨的方法是开放式提取法,即用手术刀“十字”划开肋软骨相应部位的皮肤而后切取部分肋软骨,此方法效率低,对尸体有较大破坏.本文介绍一种利用穿刺针提取腐败尸体肋软骨DNA的新方法.     

牙齿结构变化图像分析测量指标与个体年龄相关性的研究

用图像分析法对牙齿结构变化指标与个体年龄相关性进行研究,所用牙齿标本均取自香港大学口腔生物中心牙库,共得到人体牙齿842颗,标本来源的个体年龄范围为13～84岁,采用Kontron电子计算机图像分析仪直接测量法进行各牙齿标本的外表和切片检查,检查所得数据均输入电子计算机数据库软件,并使用社会科学统计专用软件包(spss)进行相关性分析。结果表明,与个体年龄相关性较好的指标依次为TP2’,S2,T2’,EP,TCI等,如按牙齿类型分类,与个体年龄相关性较好的指标为:T2’,S2’,TCI等(切牙与尖牙类),CCP’,EP’,E’等(前磨牙类),TP2’,S2’,EPWNL’等(磨牙类)。     

一种牙齿DNA的提取方法

<正>在高度腐败及白骨化的未知名尸源鉴别中,牙齿检材因其自身的组织结构特性而往往优于骨骼检材,而成为DNA工作人员优先检验的样本。在牙齿检验中,手工提取及自动化提取方法在文献中均有报道~([1-2]),本文在参照牙齿传统手工DNA提取方法的基础上进行了改良,形成了一种既快速又适合所有DNA试验室的牙齿DNA提取方法。现介绍如下。     

利用牙齿推断死后经过时间的研究进展

死后经过时间推断一直是法医学研究的重点和难点。牙齿作为个体死后可以保存最久的生物检材之一,目前在死亡时间推断方面的利用程度并不高。近年来,随着法医牙科学的兴起,国内外研究者们利用大体形态学、病理组织学、分子生物学等方法探究了牙齿与死后经过时间的关系。本文综述了近年来利用牙齿推断死后经过时间的研究进展,总结其在法医学死后经过时间推断中的潜在应用价值,以期为早日实现利用牙齿推断PMI提供参考。     

土埋60余年牙齿DNA检验1例

随着DNA检验技术的进步,各种微量、陈旧和复杂检材的DNA检验已逐见报道,本文作者遇到1例死后在土中埋葬60余年牙齿DNA检验的案例,报道如下。     

白骨化尸体枪弹创认定1例

1案例某日,某市郊某农田发现一具白骨化尸体,尸体头南脚北呈俯卧位,经检验为男性尸体。尸长170cm,发长5cm,全身仅剩后背及左臂部分皮肤附着,剩余皮肤风化干燥,后背皮肤处见多个孔状破损。颅骨未见骨折,牙齿无缺损。左侧第3、4、5肋骨近胸骨处均粉碎性骨折,并伴有类圆形骨质缺损     

中国黑龙江地区汉族未成年人的牙钙化程度及年龄推断

目的探讨未成年人牙齿钙化程度与其年龄的关系,建立根据牙齿钙化程度推断未成年人年龄的方法。方法拍摄黑龙江地区1510名未成年人（男737名,女773名,年龄6～15周岁）牙齿曲面断层影像片,利用计算机观察全口曲面断层影像片中下颌恒牙牙位处钙化程度的影像特征,并建立牙齿钙化分级评分标准,然后根据此标准对下颌牙齿进行分级评分;将其结果输入SPSS13.0软件统计,按α=0.05对牙齿钙化分值分性别分年龄段组进行非参数检验和与年龄的相关性分析,最终建立根据牙齿钙化程度推断年龄的回归方程。结果同名牙左右侧无差异（P〉0.05）,而性别间有差异（P〈0.05）;男女性下颌牙齿的钙化程度均与年龄高度相关（r〉0.7）;所建方程模型合理可靠,盲测结果显示推断年龄与实际年龄间无统计学差异,误差绝对值的平均值男性为（0.367±0.257）岁,女性为（0.367±0.245）岁。结论本研究中未成年人牙齿钙化程度随年龄的增长而呈现增高趋势,直至完全钙化;根据牙齿钙化程度建立的回归方程可用于未成年人活体以及无名尸体的年龄推断。     

硅胶膜法用于蜡化尸体骨密质DNA检验1例

正1案例资料1.1简要案情及尸体检验某女报警称与其姐于1年前失去联系,疑已遇害。3d后,在某出租房附近花园内挖出女性尸体1具。尸体装于一白色半透明塑料储物箱内,外用黄色封箱胶带缠扎。尸体高度腐败,颈部、胸腹部、会阴部和四肢的皮肤及软组织呈灰褐色蜡样改变。提取该尸体股骨及报警人父母血样送检,要求进行亲缘鉴定。1.2 DNA检验采用硅胶膜法提取股骨骨密质DNA。去除股骨上附着的腐败肌肉,蒸馏水洗净、晾干,70%乙醇消毒;锉取骨密质0.8g,置于15mL试管内,加入8mL