日本血吸虫重组多表位核酸疫苗的构建与免疫保护效果评估

为构建重组日本血吸虫多表位核酸疫苗,并通过小鼠免疫保护试验比较不同重组多表位疫苗诱导的免疫保护效果,筛选并以PCR方法扩增日本血吸虫抱雌沟蛋白(SjGCP)、谷胱甘肽-S-转移酶(Sj28GST)的抗原表位和23ku膜抗原大亲水区(LHD-Sj23)的编码DNA片段,构建了pCMV-LHD-Sj23-BSj28,pCMV-BGCP-LHD-Sj23,pCMV-BGCP-LHD-Sj23-BSj28三种日本血吸虫多表位核酸疫苗;采用肌肉注射法接种昆明系小鼠;用日本血吸虫尾蚴攻击感染后,剖杀小鼠,计算减虫率。结果显示,3种重组的真核表达质粒在免疫小鼠中分别获得了6.30%,14.76%和64.95%的减虫率。表明该重组多表位核酸疫苗可诱导较高的免疫保护效果,获得的三价核酸疫苗pCMV-BGCP-LHD-Sj23-BSj28具有潜在的应用价值。     

三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建

为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,设计引物扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)的基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEASY-M1Expression Vector直接进行T-A连接,构建得到了重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3。将这3个重组真核表达质粒分别转染293T细胞,采用实时荧光定量RT-PCR检测目的基因,并进行SDS-PAGE电泳分析和Western-blot鉴定。结果显示,重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3在转染的293T细胞中均可表达一约20.5ku的目的蛋白,且具有良好的HEV抗原性。本试验获得的3个HEV ORF2连续片段的候选核酸疫苗为今后进一步研制HEV核酸疫苗奠定了基础。     

犬细小病毒病基因工程疫苗的研究进展

从犬细小病毒病亚单位疫苗、表位疫苗、核酸疫苗、活载体疫苗等方面,论述了近年来国内外在犬细小病毒病新型疫苗研究方面的新进展,并对各种新型疫苗的优缺点及应用前景进行了讨论,为犬细小病毒病新型疫苗的研制提供理论基础。提出各种犬细小病毒病基因工程疫苗互有优劣,可以通过技术手段采用不同种类的新型疫苗的交叉组合、免疫原的集成使用等研制出更理想、更有效的疫苗。     

邓颖超对祖国和平统一大业的贡献

树高千丈,根深叶茂,泉泻高山,云水相激。中共第一代领导人为解决港澳台问题所制定的各项政策措施,是今天中共“一国两制”方针的先导。可以说,毛泽东、周恩来等人当时提出的主要设想和主张,经过第二代、第三代领导人的具体推进,已在港澳回归中实现,对台湾和平统一的基本想法,也正在几代领导人所提出的方针政策的努力实施下一步步向前推进。在中共对台工作中,邓颖超是新时期开展具体工作的重要领导人,是第一代和第二代领导人思想相承、发展的重要参与者和运作者。宏扬第一代领导人对海峡对岸的政策感召力中共解决台湾问题的最高决策机构是中…     

新城疫热稳定性天然弱毒B95株核酸疫苗的构建

将含有新城疫热稳定性天然弱毒B95株F基因的重组克隆质粒 pGEM F用NotⅠ单酶切 ,电泳回收纯化目的片段 ,与同样用NotⅠ单酶切并经去磷酸化处理的真核表达载体 pcDNA3.1连接 ,构建了新城疫核酸疫苗 ,并用所构建的新城疫核酸疫苗与载基因阳离子脂质体结合进行了免疫试验 ,通过ELISA、淋巴细胞转化试验检测了核酸疫苗在鸡体内的表达。结果显示 ,表达产物作为抗原物质刺激机体产生了特异性应答反应 ,引起了机体特异性的体液免疫和细胞免疫 ,对新城疫强毒攻击的保护率为 75 %。     

牛源金黄色葡萄球菌与无乳链球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗的研制与免疫原性研究

为了评价牛源金黄色葡萄球菌J581株和无乳链球菌A20株荚膜多糖蛋白结合疫苗的免疫原性,对制备的3批荚膜多糖进行了多糖、蛋白质及核酸含量检测,同时分别用纯化的J581和A20株荚膜多糖与破伤风类毒素偶联制备了质量浓度分别为5、10、15μg/m L的6种荚膜多糖蛋白结合疫苗及质量浓度各为10μg/m L的J581和A20株荚膜多糖蛋白结合混合疫苗,用这几种疫苗对小鼠进行免疫,采用间接ELISA方法及Ig G试剂盒对免疫前后不同时间段的小鼠血清进行抗J581和A20株荚膜多糖的特异性抗体水平及Ig G抗体效价检测。结果表明,制备的3批纯化荚膜多糖中,J581多糖平均质量浓度为49.78 mg/L,A20多糖平均质量浓度为55.76 g/L,2种多糖中蛋白和核酸含量均低于1%,符合疫苗生产要求;小鼠免疫试验结果表明,6种不同多糖含量的荚膜多糖蛋白结合疫苗和荚膜多糖混合疫苗均能刺激机体产生一定水平的特异性抗体效价及Ig G抗体,且在第28天抗体水平达到最高,其中荚膜多糖蛋白混合疫苗组中J581和A20抗体效价及特异性Ig G水平均显著高于6种单疫苗组（P<0.05）。本研究为研制金黄色...     

口蹄疫单层细胞组织培养疫苗的研究——仔猪肾上皮细胞组织培养疫苗(对仔猪二)

(一)种毒:适应仔猪肾上皮细胞的A型35代细胞毒。TCID_()50=10~(7.25) (二)疫苗:制铝胶苗及甘油苗两种,病毒含量为50％,方法见第一报。 (三)安全性、免疫性试验:所用疫苗为APKF_(35)铝胶苗及APKF_(35)甘油苗,测其安全性、免疫性及保存期,供试验的猪只从宁夏买来,健康,50天左右,猪只大小不等营养状况不均。     

中国的“俄罗斯村”———中国俄罗斯族语言能力研究简

中国黑龙江省边境地区的俄侨后裔是俄侨东部分支,他们掌握俄语的水平是多样的,并取决于多种因素.第一代后裔还掌握俄语,而第二、三代几乎完全丧失了俄语会话能力.     

轮状病毒弱毒疫苗田间效力试验

1981年,我们在乌兰县从剖检3～7日龄下痢羔羊采集肠道及其内容物,进行细胞培养分离,获得了引起初生羔羊腹泻的轮状病毒,后经犊牛肾初代细胞培养高代次低温致弱,获得了轮状病毒弱毒株,用于制备弱毒疫苗。1988～1989年,用该疫苗在乌兰县赛什克乡进行田间效力试验,取得了较好效果。(-)材料     

论拉美国家的结构性改革

结构性改革是为消除供给侧领域中各种问题的改革。拉美的第一代结构性改革始于20世纪80年代,改革取得了积极成效,但也产生了多方面的问题。因此,20世纪90年代末,拉美的第一代结构性改革开始向第二代结构性改革过渡。与第一代改革相比,第二代改革更具有战略性、长期性和艰巨性。目前要对第二代改革作出全面而深刻的评价并非易事,但可初步得出如下几个结论:社会发展领域的成就开始显现,政府与市场的关系渐趋正常,宏观经济形势日益稳定,金融监管机制不断完善,企业的国际竞争力稳步上升,基础设施的"瓶颈"现象有所缓和,对外经济关系的多元化格局基本形成。在分析拉美的两代结构性改革时,有必要对以下问题进行更为深入的研究:如何判断拉美结构性改革的成效,如何评估"中国因素"对拉美结构性改革作出的贡献,如何看待左翼政府在结构性改革中的作用,如何处理发挥比较优势与调整产业结构的关系,如何处理政府与市场的关系。     

猪水肿病疫苗的研究进展

水肿病是猪生产中的常见病之一,造成了严重的经济损失。产志贺毒素大肠杆菌(STEC)是引起水肿病的病原菌,F18菌毛和Stx2e毒素是其重要的致病因子。STEC通过菌毛介导的黏附作用,定植于肠上皮细胞并产生毒素,引起微血管的病理学改变,表现出水肿病的临床症状。疫苗免疫仍然是防控水肿病的最佳途径。近年来,随着水肿病致病机制研究的深入,以及菌蜕疫苗、转基因植物疫苗、核酸疫苗等新型疫苗的试验性报道为水肿病的预防带来了新的认识和起点。本文概述了当前致病机制及STEC疫苗的国内外研究进展,对各类疫苗的优劣及试验研究情况进行了梳理,为今后疫苗研发提供参考。     

巴西生物质能发展可持续性研究

本文以巴西生物质能产业为例,从经济、社会、环境和技术四个维度对生物质能产业的可持续发展问题进行研究。研究结果表明,巴西生物质能产业存在显著资源禀赋优势,并未危及巴西粮食安全,巴西生物质能产业在经济和社会维度上的可持续性不存在显著障碍。然而,生物质能生产及其原料处理过程中存在大量污染,且能源作物种植面积扩大引起土地利用变化会造成严重的环境污染,因此,环境可持续性是未来最有可能限制巴西生物质能可持续发展的因素。生物质能技术分析表明,第二代和第三代生物质能技术相对于第一代生物质能技术而言,不会引发潜在的粮食安全问题,并且对于环境的污染较少。若巴西继续加大对第二代和第三代生物质能技术的研发投入,最终实现其商业化,则巴西生物质能产业将具有更好的可持续发展前景。本文最后结合中国国情,从资源禀赋、能源政策和技术成熟度的角度,给出了中国可持续发展生物质能产业的相关建议。     

论以色列的社会分化与政党演变

以色列是一个移民国家，犹太人是其主体民族，在500多万犹太人当中，半数以上是第一代和第二代犹太移民及其后裔，其余来自世界80多个国家。其中既有欧美国家的西方犹太人，也有亚非国家的东方犹太人；既有来自繁华都市且受过系统高等教育的企业家、银行家、科学家和艺术家，也有来自穷乡僻壤且目不识丁的游牧民；     

反义核酸技术及其在寄生虫学研究中的应用

反义核酸技术及其在寄生虫学研究中的应用陈启军，李德昌（解放军农牧大学长春１３００６２）反义核酸是指一段与基因组ＤＮＡ或ＲＮＡ互补的ＤＮＡ或ＲＮＡ。它包括三个方面的内容，即反义ＤＮＡ、反义ＲＮＡ和核酶。反义核酸技术（Ａｎｔｉｓｅｎｓｅｎｕｃｌｅ－ｉｃａ...     

金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖偶联抗原的制备及免疫原性分析

为建立金黄色葡萄球菌5型荚膜多糖(CP5)纯化与偶联技术方法,获得具有免疫原性的CP5偶联抗原,采用高压破碎菌体的方法释放荚膜多糖,酶处理去除核酸和蛋白质,通过离子交换层析进一步纯化,得到纯化的CP5,并对其纯度和反应原性进行检测;采用己二酸二酰肼(ADH)间桥法制备CP5-牛血清白蛋白(CP5-BSA)偶联抗原,加佐剂免疫小鼠,进行抗体水平测定。结果表明,纯化的CP5纯度为675.1g/kg,经用免疫琼脂双扩散试验检测,纯化多糖仅与同型菌株抗血清发生沉淀反应,偶联抗原CP5-BSA可以刺激小鼠产生CP5免疫应答。此研究结果为奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的研制提供了试验依据。     

口蹄疫联合免疫的研究进展

理想的疫苗应具有良好的免疫原性，一次接种则可产生巩固的终生免疫力，且无副作用。现在我们离这种“理想疫苗”的要求尚很远。除少数疫苗外，大多数疫苗都需要注射若干次，才能获得持久免疫力。在实际生产过程中，每头家畜都要接种多种疫苗，不仅接种次数繁多，而且容易...     

四价抗球虫疫苗和抗球虫药在生产中的使用效果比较

四价抗球虫疫苗和抗球虫药在生产中的使用效果比较周景忠卢淑惠尹秀凤（北京华都肉鸡联营公司种鸡场１０２２１１）我场是年饲养量为１０万套ＡＡ（爱拔益加）父母代的种鸡场。球虫病是我场生产中最为多发的一种疾病，对鸡群的危害虽然不象烈性传染病那么严重，但是每批鸡...     

弓形虫HAD2b基因缺失株的构建及生物学功能研究

弓形虫是一种很成功的专性细胞内寄生的机会性致病原虫,可感染几乎所有温血动物,导致的弓形虫病是一种重要的人兽共患寄生虫病,目前尚无有效的疫苗.为了研究弓形虫卤代酸脱卤酶(haloacid dehalogenase,HAD)家族中一个保守蛋白HAD2b的功能,本研究通过利用CRISPR/Cas9技术成功构建了弓形虫Ⅰ型RH...     

生物素标记核酸探针的应用概况

目前,基因探针已用于人和家畜传染病、寄生虫病的诊断及流行病学的调查。它具有高度的敏感性,并且基因探针的检测是建立在探针和待检基因序列同源性的基础上,因此具有高度的特异性。基因探针采用的标记方法有同位素标记、生物素标记和化学修饰核酸标记。但在这之前,用得较多的仍然是同位素标记的核酸探针。然而,由于放射性同位素的应用存在着不够安全方便、实验周期长、半衰期短、价格昂贵以及污染等缺点,使分子杂交技术的推广应用受到一定程度的局限。为此,各国研究工作者一直在探讨一种非放射性的核酸标记方法。近年出现的生物素标记的核酸探针技术就是这方面的一大突破,此种生物素化的脱氧尿嘧啶苷,     

反义核酸及反义核酸技术

反义核酸及反义核酸技术韩雪清（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）反义核酸以其独特的方式“特异性封闭”来调节和控制基因乃至许多生命现象，得到了生物界的高度重视。８０年代发展起来的反义核酸技术以其全新的思路和分子遗传学手段成为一门最新兴的生命科学...