用间接血凝试验检测猪传染性胸膜肺炎

经戊二醛化鞣酸化处理的绵羊红细胞用胸膜肺炎嗜血杆菌（ ＨＰ） 抗原致敏,以间接血凝试验（ＩＨＡ） 检测猪传染性胸膜肺炎病猪血清抗体。致敏红细胞抗原的最佳浓度为１００ ～１５０ μｇ／ ｍ Ｌ,超免疫血清的抗体效价达１∶５１２ ～１∶１０２４ ,对人工感染１４ ｄ 的猪血清阳性检出率达８０ ％ ,与猪瘟、猪肺疫、猪喘气病、猪萎缩性鼻炎阳性血清无交叉反应     

上海市猪胸膜肺炎的血清学调查

于上海地区随机采集281头份大小猪血清,测定了胸膜肺炎补体结合试 验抗体。除抗补体外,264头份中64头份(24.24％)有阳性抗体。以胸膜肺炎放线 杆菌的血清型(S)计,共检测了2652型次,型的抗体平均阳性率为3.05％。其中 主要为S_5b、S_4、S_(10)和S_2,分别为9.47％,5.81％,4.65％和4.55％。随机抽检屠宰猪血清的抗体阳性率,北郊为5.789％,显然高于南郊的15.39％(P<0.01)。     

猪囊虫旋毛虫弓形虫组联快诊膜及全血斑点ELISA检测法的建立

将纯化猪囊虫、旋毛虫、弓形虫抗原分别定点包被于直径为5mm的混合纤维素酯微孔滤膜上,制成三虫组联快诊膜;自猪耳尖采取全血10μl作为Dot-ELISA检测样品,2小时内同时检测3种寄生虫病。以猪囊虫、弓形虫抗体阳性血清各90份、旋毛虫阳性血清26份进行检测,只在其相应位点呈阳性结果,无交叉反应;对720头份商品猪血清进行检测,其阳性检出率分别是:猪囊虫4.3％(31/720),旋毛虫0.14％(1/720)、弓形虫抗体阳性46.7％(336/720),与当地检出率平行:用350头商品猪的微量全血和其相应微量血清进行检测对比,结果猪囊虫阳性检出率,微量全血法为4.3％(15/350),微量血清法为4.6％(16/350),弓形虫抗体阳性检出率,微量全血法为45.7％(160/350),微量血清法为47.1％(165/350),经X~2检验,两种样品检测结果相差不显著(P>0.05)。     

免疫复合物及其检测

微生物成分、药物与蛋白质形成的复合物、变性的免疫球蛋白和异种血清等抗原物质进入机体后,都能刺激B淋巴细胞系统产生IgG,IgM或IgA,分泌于血流中,如果部分抗原也进入血流,二者相遇,则可形成免疫复合物(Immune complex,简称IC)。而IC出现的过程,就是机体的一种保护性反应。由于抗原在体内持续的存在,随时可与血流中的抗体结合形成IC,或者机体清除IC的功能发生障碍,IC沉积于肾小球基底膜、皮肤终末血管基底膜或关节滑膜等处,补体被不适当地激活,使基底膜发生损伤,导致急性或慢性炎症,临床上即将这种现象称为免疫复合物病,这类疾病属于第夏型变态反应的范畴。 免疫复合物病的发病机理比较复杂,以肾小球肾炎为例。目前,认为IC易于沉积于肾     

应用酶联免疫吸附试验检测羊衣原体性流产抗体的研究

免疫酶技术是一项新兴的免疫化学测定技术。而ELISA(酶联免疫吸附试验)用于人和畜禽的衣原体抗体的检测,只是近几年来才开展研究。自Lewis(1977年)报道了用ELISA法检测衣原体抗体以来。Evans(1982年)和Nancy J.(1983年)又分别报道了用ELISA检测人血清中衣原体抗体的试验,之后Evans(1983年)又发表了用ELISA法检测鸭血清中衣原体抗体的试验报告。他们通过ELISA与CF(补体结合反应)和MIF微量荧光试验)比较,认为ELISA是一种简单、方便、敏感的试验方法。用ELISA法检测羊衣原体抗体,在国内还未见报道。为此,我们进行了ELISA法检测羊衣原体抗体的试验。其结果:免疫及强毒感染山羊95％表现ELISA阳性;健康对照山羊均表现为阴性反应;从送检的流产山羊血清样品中,有61％查出了衣原体抗体。     

鸡蛋黄血凝抑制抗体的提取和测定

以往主要是根据鸡血清中血凝抑制(HI)抗体滴度的高低来确定新城疫疫苗的接种时间。但是采血捉鸡不仅耗费人力物力,而且对鸡群干扰很大,影响其产蛋量。后来有人报道,用鸡蛋代替血清,通过测定卵黄中的抗体来反映鸡群HI抗体水平,取得了一定效果。为了提取卵黄中的HI抗体,消除卵黄中其它物质对HI试验凝集图形的影响,找出卵黄提取液与血清的HI抗体几何均数(HI—GMT)的关系,以便以鸡蛋取代血清,我们在禽病学专家Yamamoto,R.的提示下,用氯仿将卵黄处理后再进行抗体测定,结果很满意。 (一)材料与方法     

山羊关节炎-脑炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立检测山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)血清抗体的间接ELISA方法,采用PCR方法扩增山羊关节炎-脑炎病毒CA蛋白编码基因序列,然后克隆至原核表达载体pET-28a(+),诱导含有重组载体pET-28a(+)-CA的大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白rHis-CA。采用Ni柱亲和层析方法纯化重组蛋白rHisCA,并以纯化的rHis-CA为包被抗原建立检测山羊关节炎-脑炎血清抗体的间接ELISA方法。结果表明重组蛋白rHis-CA以包涵体形式表达,具有良好的反应原性。所建立的rHis-CA间接ELISA方法的最适抗原包被质量浓度和血清稀释度分别为0.4 μg/mL和1∶100,血清阴阳性的D_(450)临界值为0.45。该方法仅与山羊关节炎-脑炎病毒阳性血清发生特异性反应,不与山羊痘病毒、蓝舌病病毒和口蹄疫病毒阳性血清发生交叉反应。对来自陕西地区的48份山羊血清进行CAEV抗体检测,rHis-CA ELISA和琼脂凝胶免疫扩散试验的阳性检出率分别为35.41%(17/48)和31.25%(15/48)。对来自天津地区2个山羊场的240份山羊血清样本进行CAEV抗体检测,rHis-CA ELISA方法和琼脂凝胶免疫扩散试验的检测结果均为阴性。     

陕甘宁青四省(区)人畜棘球蚴病的血清学调查

1986年4月～1987年2月用甘肃省人民医院的棘球蚴微量间接血凝诊断液,对驻陕甘宁青4省(区)24个团以上单位共1776份人畜血清进行了抗体检测,检出阳性456份,检出率为25.68％。人血清941份,阳性113份,阳性率占12.01％(其中:藏、蒙族人67份,阳性13份,占19.40％;汉族人874份,阳性100份,占11.44％。男性909份,阳性107份,占11.77％,女性32份,阳性6份,占18.75％);牛血清266份,阳性132份,阳性率占49.62％;羊血清569份,阳性211份,阳性率占38.08％。感染棘球蚴阳性抗体最高滴度人血清1:256,牛血清1:8192,羊血清1:4096。     

免疫复合物与寄生虫病

抗原和相应抗体结合所形成的复合物称为免疫复合物(Immune Complex,IC)。在一般情况下,体内免疫反应产生的IC是有利的。但在比例失调情况下,可出现IC病或IC参与的组织损伤。深入研究这些问题是当前免疫学及病理学的重要课题之一。本文仅就IC及其在若干寄生虫病发病过程中的作用作一概述。 (一)IC的形成、清除、沉积与致病机理 有不少学者对这一问题作了论述,现将不同情况下形成的IC的性质及危害性列于下表。     

免疫微球平板凝集试验诊断猪囊虫病方法的研究

本研究以苯乙烯为单体,合成带有羧基官能团的聚苯乙烯微球作抗原载体,通过碳化二亚胺反应,把猪囊尾蚴囊液抗原的氨基与微球衍生物末端的羧基偶联,制备成猪囊虫抗原免疫微球,以平板凝集反应对33份囊虫病猪血清和130份非囊虫猪血清进行了检测。检测结果表明,对囊虫病猪血清检出符合率为100％,对非囊虫猪血清检出阴性符合率为98.4％,假阳性反应1.6％。试验证明了免疫微球凝集试验技术对猪囊虫病生前快速诊断的可靠性。     

猪圆环病毒2型和猪生殖与呼吸综合征病毒混合感染的检测

对采自甘肃省天水市某猪场的24份病猪组织器官样品(肺、脾、肾和淋巴结)进行了病毒分离,同时设计特异性引物,建立了分别检测猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的PCR和RT-PCR方法,应用ELISA方法检测了血清中PCV-2及PRRSV抗体,以调查该猪场PCV-2和PRRSV混合感染的情况.结果显示,有14份样品均扩增出了PCV一2和PRRSV的目的基因片段,且PCV-2及PRRSV抗体均呈阳性.证实,该猪场出现了PCV-2和PRRSV的混合感染,阳性率为58.33%.     

ELISA检测鸭病毒性肝炎抗体的研究

本文报道用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鸭病毒性肝炎(DVH)抗体,并与琼脂免疫扩散试验(AGDP)进行了比较。ELISA的特异性与AGDP相一致;而在敏感性方面,ELISA的检出率为100％,而AGDP为60％。在ELISA抗体效价判定上,本文采用阳/阴血清OD值(P/N)≥2.1及阳性血清OD值不得小于0.4的综合阳性判定标准,减少了假阳性反应。研究表明,DVH抗体的ELISA检测法是一种快速、敏感,简便实用而准确的检测方法。     

非洲猪瘟

非洲猪瘟是由一种和古典猪瘟病毒不同的一病毒所引起的和高度传染性的猪病。急性型的特征是发热出血性症候群,发病率和死亡率都达到100％。病猪不产生中和抗体,尚无有效的免疫接种方式。家猪因和病猪直接接触或受污染物或受感染的argasid扁虱所叮咬,而散布非洲猪瘟。 (一)易感动物 病毒可以存在于非洲的一种疣猪体内(一种野猪,脸部有肉疣),而它     

IHA AGP及Dot-ELISA检测猪瘟抗体的比较试验

从1990年以来,我们用血凝抑制(IHA)和琼脂扩散(AGP)试验在本省12个县(市),对猪瘟疫苗免疫猪群进行抽样检测血清抗体,结果:IHA法检测的阳性率(达保护抗体滴度)为89.26％(1869/2094);AGP法检测的阳性率(出现沉淀线)为73.84％(1284/1739)。其中黄平、惠水两县分别使用三联苗和猪瘟冻干苗,给田间猪群免疫,均用150个免疫量,免疫后2月检测抗体。两种方法共检测521头(份)血清,均为阳性的有427头(份),其阳性率为81.95％[IHA法的阳性率为86.76％(452/521);     

猪传染性萎缩性鼻炎疑似病猪的病原分离及血清学调查

以疑似猪萎缩性鼻炎的病猪 ,采集鼻腔分泌物进行细菌分离培养 ,经鉴定为猪支气管败血波氏杆菌。并对秦皇岛、唐山等地 8个规模化猪场的 2 98份血清样品采用猪萎缩性鼻炎乳胶凝集诊断试剂盒进行了血清学监测 ,检出血清抗体阳性猪 16 8头 ,阳性率平均 5 6 .3%。以 2～ 3月龄育肥猪的检出率最高 ,达 75 .2 % ,感染情况较为严重。     

驻陕甘宁青部队猪囊虫病的血清学调查

本调查采用吉林省兽医科学研究所提供的猪囊虫病ELISA检测方法及诊断液,于1987年10月对我区驻陕甘宁青四省(区)部队的17个单位的猪群血清共608份进行了猪囊虫抗体血清学检测,检出阳性42份,阳性检出率为6.91％。17个受检单位的猪群血清有10单位检出猪囊虫抗体,其中,以驻陕西陇县某部为最高,达26.09％,青海玉树分区检出率最低(2.38％),经统计学处理,相差非常显著。按受检单位驻地分省(区)统计结果:陕西检出率为9.52％;甘肃检出率为6.81％;宁夏为5.63％;青海为7.26％,分省统计结果经统计学处理,相差不显著。     

牛新孢子虫病和弓形虫病的流行病学调查

为了调查我国牛新孢子虫和弓形虫的感染情况,应用新孢子虫酶联免疫吸附试验(ELISA)和弓形虫间接血凝试验(IAT)分别检测了来自国内10个省(市、自治区)的262份乳牛、10份肉牛和40份水牛血清。结果显示,乳牛新孢子虫的抗体阳性率为17.2%,弓形虫的抗体阳性率为2.3%,没有检测到既有新孢子虫抗体又有弓形虫抗体的乳牛血清。各牛场所检乳牛血清的新孢子虫抗体阳性率在0~34.4%之间。在水牛和肉牛血清中未检测到新孢子虫抗体和弓形虫抗体。流产乳牛血清的新孢子虫抗体阳性率为20.2%,未流产乳牛为16.1%,其中血清抗体阳性乳牛主要在妊娠中晚期流产。各个年龄段乳牛血清的抗体阳性率差异不显著(P>0.05)。不同妊娠胎次的乳牛血清抗体阳性率差异不显著(P>0.05)。确认新孢子虫病在国内大部分牛场存在。     

野外猪中对猪水泡病病毒的低效价抗体的剖析——从与科赛奇B_5型病毒的关系来研究

1973年11月到12月,以神奈川县的种猪产地为原发地点,在日本开始爆发了由肠道病毒引起的猪水泡病(SVD)。后来,为了研究这种病毒对猪的侵害程度,而对猪水泡病病毒的抗体进行调查时,在认为同SVD的发病没有关系的血清中,即 在SVD发生以前采集的血清中,还有在认为同区域性发生没有关系的地方农家自养猪的血清中,检出了对SVD病毒的抗体。 SVD病毒是同人的肠道病毒的科赛奇B_5型(CB_5)病毒在抗原上极为一致的病毒。调查了野外猪血清中对CB_5病毒的扩体,研究了它同对SVD病毒抗体之间的关系,所得结果如下: 1.SVD发生前、发生终止1个月后、5个月后三个时间由全国收集的猪血清中,无论是来自哪一个时间的,均检出SVD的阳性例,两种病毒抗体效价的相关系数分别为0.34、0.31和0.34,是相当低的。 2.来自发生SVD养猪场的病猪血清中,发现两种病毒抗体效价间有非常高的关系系数(r=0.74～0.85)。 3.来自发生SVD养猪场的猪血清中,发病不明显的或者未发病而耐过的,其相关系数低到0.44,即使从认为处于抗体上升期的猪采集的血清(抗体效价<4~(4·0)),其相关系数也低到0.53。 从这些结果可以看出,在日本国内猪只中产生低效价抗体的主要原因是这种病不伴发水泡病症,即不显性感染所致;在这种病毒中,应考虑还存在同SVD病毒在抗原方面一     

浅谈猪瘟的实验室诊断方法

本文对20多年来有关猪瘟的实验室诊断技术和方法所取得的进展予以回顾。 (一)荧光抗体组织切片试验(FATST) 1963年Scair等首次用FATST诊断猪瘟取得了可喜结果。后来许多研究者对其可靠性作了证实。采取猪瘟早期病猪的扁桃体和淋巴结或晚期病猪的脾脏和肾脏等组织,作冰冻切片或组织印片,丙酮固定后用猪瘟荧光体染色检查,感染猪组织细胞呈现特异性的胞浆荧光。用这种方法对病猪的检出率为90％以上,实验感染猪瘟病毒(HCV)后2天,即可查到病毒荧光。其优点是准确、简便、快速,一般在2小时内即可得出结果。但有人报道,猪接种猪瘟弱毒活疫苗后短时间内,苗毒荧光干扰对野毒的诊断。     

陕西省猪伪狂犬病血清学调查

2000年1-3月份,在陕西省11个地区(市)的59个县(市)对7458份种猪血清进行了猪伪狂犬病抗体乳胶凝集试验.共检出抗体阳性血清1394份,阳性率为18.69%.对其中44个县(市)的5089份血清进行了详细统计,母猪的血清抗体阳性率为14.85%(544/3662),公猪的血清抗体阳性率为18.81%(120/638),后备母猪的血清抗体阳性率为20.43%(141/690),后备公猪的血清抗体阳性率为28.28%(28/99).