鸡新城疫中等毒力毒株的分离鉴定

从山东省某种鸡场分离到 1株病毒 ,经血凝 (HA)和血凝抑制 (HI)试验证实为新城疫病毒。经用SPF鸡胚和SPF鸡测定 ,该毒株的鸡胚平均致死时间 (MDT)为 5 5 .2h ,1日龄鸡脑内致病指数 (ICPI)为 0 .8,6周龄鸡静脉接种致病指数 (IVPI)为 0 .3 1,属于中等毒力的毒株。该毒株点眼、滴鼻不引起 6周龄SPF雏鸡发病 ,将其做成灭活油佐剂疫苗 ,对鸡的保护率为 95 %。该新城疫毒株可用作疫苗毒株     

血清4型禽腺病毒广西分离株人工感染SPF鸡的病理学观察

为深入研究血清4型禽腺病毒广西分离株的致病机理,对4周龄的SPF鸡人工感染血清4型禽腺病毒(FAdV-4),建立病理模型,在感染后第1～21天随机剖杀试验组的SPF鸡,采集心脏、肝、脾、肺、肾、胸腺、法氏囊、胰腺、腺胃和脑,通过病理学方法研究FAdV-4感染SPF鸡后各个组织器官的动态病理变化规律。结果显示,以滴鼻点眼方式感染4周龄SPF鸡可以成功建立人工感染模型。感染后第4天开始出现临床症状,第5天开始出现死亡,第7天病鸡开始恢复,发病率为72%,死亡率为34%。剖检发现典型病变为心包积液,肝肿大、黄染。组织学检查发现肝细胞中存在大量核内包涵体,免疫器官出现广泛性的组织变性坏死、炎性细胞浸润。本研究为FAdV-4的防控和临床诊断提供了科学依据,为今后深入研究FAdV-4的致病机制奠定了基础。     

三株腺胃型传染性支气管炎病毒分离毒株对鸡的致病性试验

为探明腺胃型传染性支气管炎病毒(IBV)对鸡的致病性,采用滴鼻、点眼和滴口方法,用QXIBV、DYIBV、FCIBV分离毒株对未免疫鸡和SPF鸡进行了攻毒致病回归试验。结果显示,未免疫的10日龄鸡攻毒后致死鸡的剖检变化与20日龄未免疫的被攻毒鸡相似,均有腺胃肿大,腺胃黏膜出血、溃疡,肾肿大、尿酸盐沉积等病变;20日龄(高日龄)攻毒鸡较低日龄(10日龄)攻毒鸡死亡率偏高。被攻毒的SPF鸡均出现精神沉郁、羽毛蓬乱、腹泻等与自然发病鸡相同的临床症状和病理变化(腺胃肿大,黏膜出血、溃疡,肾肿大、尿酸盐沉积等病变);被攻毒的未免疫鸡、SPF鸡与自然发病鸡死亡率相似。试验结果表明,用这3株腺胃型IBV分离株均能人工复制出与自然发病鸡基本一致的临床症状和病理变化。     

鸡传染性鼻炎的诊断

传染性鼻炎系由副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragllinarum)引起鸡的一种急性呼吸道传染病,临床上以流水样鼻涕,面部水肿和流泪为主要特征。本病现在世界各地均有发生,给养鸡业带来一定的经济损失。我国虽未见有本病的详细报道,但资料表明,一些地区曾有类似于本病的鸡病发生。为建立SPF鸡群的检测方法,我们对人工感染本病鸡只进行了病原学和血清学诊断的研究。     

腺胃型鸡传染性支气管炎病毒Hu98株的分离鉴定

1998年首次从哈尔滨市某鸡场鸡腺胃肿大为特征的病例中分离到IBV-Hu98毒株.将该病毒株接种SPF鸡胚并传至5代(F5),结果接种胚出现规律性死亡和典型胚胎病变特征,EID50为10-6.40/0.2 mL.IBV-Hu 98 F5感染SPF鸡胚尿囊液经负染电镜观察,可见直径为80～120 nm、有囊膜和纤突的冠状病毒粒子.用IBV-Hu98 F5毒株人工感染1日龄SPF鸡能引起与自然病例相似的病理组织学变化,死亡率为80%(4/5),用IBV-Hu 98J1人工感染1日龄SPF鸡死亡率为100%(5/5),并可从死亡鸡中分离到冠状病毒.     

双乙酸钠对鸡血液生理生化指标的影响

将 15只临床健康、日龄相同的岭南黄公鸡随机分为 3组 ,每组 5只 ,并分别饲喂不加双乙酸钠的基础日粮、含双乙酸钠 2 g/kg和 4 g/kg的日粮 ,饲喂 2 1d。饲喂结束后 ,颈静脉放血采集血样 ,测定血清中 13项生理生化指标。结果表明 ,试验鸡与对照鸡的生理生化指标大多无显著差异 ,表明饲料中添加 4 g/kg以下的双乙酸钠对鸡机体的多数内脏器官无损伤     

鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定及其致病性的研究

本研究从江苏省某鸡场疑似鸡传染性支气管炎(IB)的病料中,利用SPF鸡胚尿囊腔接种的方法分离出1株传染性支气管炎病毒(IBV),命名为CK/CH/JS/TZHY48。经RT-PCR检测,该株IBV的S1基因全长1 638 bp。遗传进化分析显示,分离株属于基因Ⅵ型,与常规疫苗株H120和H52的同源性较远。分离株对鸡胚有明显的致矮小化作用;对新城疫病毒有显著的干扰作用。动物回归试验结果显示,该分离株对7日龄SPF鸡的发病率为100%,致死率为40%,发病鸡出现气管啰音,甩头流鼻涕等呼吸道症状;病死鸡的剖检病理变化主要表现为肾苍白肿大,花斑肾,有大量明显的白色尿酸盐沉积,气管环出血。本研究可为IBV的遗传进化、致病机制以及免疫防控提供参考。     

REV感染的SPF鸡免疫器官中免疫相关因子动态变化的研究

先天性免疫反应是机体抵御病原微生物感染的第一道防线.为了解禽网状内皮组织增生症病毒(REV)感染的SPF鸡早期的天然免疫反应,本研究利用qRT-PCR技术检测了REV感染的SPF鸡主要免疫器官中的免疫应答情况.结果 显示,与病毒未感染组相比,感染鸡免疫器官中天然免疫受体TLR3和TLR7和Ⅱ型干扰素IFN-γ以及Vip...     

常山散对靶动物鸡的安全性试验

为评价常山散对靶动物鸡的安全性,将80只岭南黄羽肉鸡随机分为4组,每组20只。常山散按推荐剂量的1倍(0.1 g/kg)、3倍(0.3 g/kg)和5倍(0.5 g/kg)进行给药,连用7 d,同时设置空白对照组。试验期间每日观察记录鸡的精神、采食、饮水、粪便等外观表现,测定给药7 d后和休药7 d后血常规指标、血液生化指标、脏器系数,并进行肝肾病理学观察。结果显示,常山散各剂量组鸡的临床状态、饮食和粪便均正常。与空白对照组比较,给药7 d后,常山散1倍和3倍剂量组鸡血常规指标、血液生化指标和脏器系数均无显著性变化(P0.05),解剖各脏器未发现肉眼可见病变;5倍剂量组的肝和肾出现轻度肿胀和淤血,肝系数显著降低(P0.05)。休药7 d后,除5倍剂量组鸡丙氨酸氨基转移酶显著降低外(P0.05),其他各项指标均无显著性变化(P0.05)。空白对照组鸡临床表现和各项检测指标均正常。结果表明,常山散按1倍和3倍推荐剂量给药对靶动物鸡无毒副作用,临床使用安全。     

禽腺病毒血清4型河南株的分离鉴定及对鸡胚致病性的研究

为探明河南省某鸡场疑似禽腺病毒血清4型发病鸡群的感染情况和病毒特征,本试验对发病鸡群进行了病毒分离鉴定,并研究所分离到的病毒对鸡胚的致病性。采集发病鸡群鸡肝,处理后经尿囊腔接种SPF鸡胚,尿囊液禽腺病毒血清4型PCR鉴定和hexon基因序列分析,尿囊液经过浓缩定量和梯度稀释,接种SPF鸡胚,观察鸡胚病变,计算ELD_(50),同时荧光定量PCR测定病毒在鸡胚肝和尿囊液中的载量。结果显示,在鸡胚尿囊液中扩增出大小934 bp的基因片段,序列分析表明,该序列与禽腺病毒血清4型同源性为98.2%~99.8%。感染病毒的鸡胚的胚体矮小、发育不良,肝肿大、质脆,呈黄色或棕黄色,胸肌、腿肌明显出血,病毒载量和鸡胚病变与接种剂量有关。该毒株的ELD_(50)为1.36×10~7copies/L,相同时间内病毒在肝中的载量高于尿囊液。本试验为进一步开展禽腺病毒血清4型的研究和防控提供了必要的参考依据。     

新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒的安全性及免疫效力

将重组鸡痘病毒rFPVLP-SF分别皮下接种1日龄SPF鸡和26日龄商品鸡,评价其安全性和免疫效力.SPF鸡接种后除282E4株鸡痘病毒组在接种部位出现痘斑外,其他组鸡无任何临床症状.抗体检测结果表明,免疫接种后rFPVLP-SF组鸡的血清抗体水平没有显著变化,免疫后第21 d以1×105ELD50的F48E8株NDV滴鼻攻毒,观察14 d,rFPVLP-SF和油乳剂灭活疫苗免疫鸡的保护率分别为92%和100%,二者没有显著差异;大空斑株鸡痘病毒组和攻毒对照组鸡均全部死亡.结果显示,该重组病毒具有良好的安全性和免疫效力,有一定的应用前景.     

禽腺病毒血清4型广东株的分离鉴定及致病性研究

2016年本实验室从广东省分离到1株禽腺病毒血清4型(FAd V-4),被命名为HZ-06-01。为研究该毒株的生物学特性,首先将它在鸡肝癌细胞(LMH)上进行传代及蚀斑纯化,然后对该病毒的hexon、ORF19及ORF27基因进行序列分析;结果显示,该毒株与国内代表毒株HB1510、JSJ13的hexon基因的序列相似性为100%,且存在ORF19和ORF27基因的缺失。将HZ-06-01株通过肌肉注射和灌喂两种途径对3周龄SPF鸡攻毒,结果,肌肉注射组死亡率为100%(10/10),且在病死鸡的多个脏器中均能检测到病毒;灌喂组死亡率为0(0/10),但攻毒后第2周能检测到抗体;病理组织学观察可见病死鸡肝有明显的核内包涵体、脾淋巴细胞减少等病变。结果表明,HZ-06-01株属于FAd V-4,且注射途径攻毒可以使SPF鸡表现出典型的心包积液综合症。本试验结果为心包积液综合症的诊断及防控提供了基础数据。     

中药抗球虫制剂TF-103的亚慢性毒性试验

将 2周龄肉用AA鸡分为A、B、C、D 4组 ,全程 (5 6d)对A、B、C组鸡分别按 10、5 0、10 0g/kg在饲料中添加中药复方制剂TF 10 3。结果显示 ,A组鸡的生长和增重正常 ,各器官及血液学、血清生化指标均未发现与药物相关的异常表现 ,但大剂量组显示对白细胞的成熟和分化有一定影响     

禽流感重组禽痘病毒疫苗不同途径及剂量接种的免疫效力

将表达禽流感病毒 (AIV)H5HA和N1NA基因的重组禽痘病毒 (rFPV HA NA)以不同剂量分别经翅下刺种、肌肉注射、皮下注射、点眼及滴鼻途径接种于 4周龄SPF鸡。结果 ,该疫苗经翅下刺种、肌肉注射和皮下注射途径接种的SPF鸡 ,能够诱导其产生血凝抑制 (HI)抗体 ;用10 0LD50 的HPAIVA/Goose/Guangdong/ 1/ 96 (H5N1)毒株攻击后 ,免疫鸡无一发病和死亡 ,免疫保护率为 10 0 %。以点眼和滴鼻途径免疫的SPF鸡 ,大剂量接种能够诱导产生一定水平的抗体 ,攻毒后的保护率分别为 83.3%、6 6 .7% ;而小剂量接种则不产生免疫反应 ,保护率为 0。表明rFPV HA NA疫苗只有经翅下刺种、肌肉注射和皮下注射途径接种 ,才能够诱导机体产生高水平的免疫力。     

基于抗原蛋白Fiber-2及细胞因子佐剂的Ⅰ群4型禽腺病毒亚单位疫苗的开发

为了开发一种抗I群4型禽腺病毒(FAd V-4)的亚单位疫苗,选择I群禽腺病毒血清4型流行毒株衣壳蛋白Fiber-2作为保护性抗原蛋白。利用昆虫细胞-杆状病毒系统生产Fiber-2蛋白,通过Westernblot检测重组蛋白的表达情况,利用双向琼脂扩散法检测重组Fiber-2的免疫原性。为了增强亚单位疫苗的免疫保护效果,添加鸡源白细胞介素2(chIL-2)和鸡源γ-干扰素(ch IFN-γ)作为免疫佐剂,与重组Fiber-2单独或混合使用,制备多种形式的亚单位疫苗,并进行动物攻毒保护试验。重组蛋白的Western-blot鉴定结果显示,63 ku处出现Fiber-2蛋白目的条带;双向琼脂扩散试验结果显示,重组蛋白效价达到1∶128,表现出良好的反应原性。动物攻毒保护试验结果显示,单独使用Fiber-2免疫SPF鸡,在50 μg/只的剂量下,可为SPF鸡提供100%的保护效果,以chIL-2和chIFN-γ为免疫佐剂,与重组Fiber-2联合免疫SPF鸡,可显著增强Fiber-2在低剂量(10 μg/只)下的免疫保护效果,上述结果表明重组Fiber-2联合chIL-2和chIFN-γ细胞因子佐剂所制备的亚单位疫苗在抗I群4型禽腺病毒感染领域具有良好的应用前景。     

H5N1亚型禽流感病毒NA基因在重组禽痘病毒中的表达及其产物的免疫原性

将禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)株的NA基因及LacZ报告基因克隆到禽痘病毒载体pSY681中,构建重组转移载体pSY(NA+LacZ),将其转染鸡胚成纤维细胞,经蓝白斑筛选,纯化表达NA基因的重组禽痘病毒rFPV-NA,用其免疫SPF鸡,检测该重组禽痘病毒的免疫原性。结果显示,该重组禽痘病毒能够在体外培养细胞内表达具有生物学活性的NA蛋白,表达产物的分子质量约为55 ku;用该重组禽痘病毒免疫SPF鸡后,能够使免疫鸡获得对H5N1和H7N1两种亚型HPAIV攻击的部分保护。表明,重组禽痘病毒rFPV-NA具有良好的免疫原性。     

芪松楂散靶动物鸡安全性试验

为了研究芪松楂散对靶动物鸡的安全性,选择17日龄AA白羽肉鸡120只,随机将其分成4组,每组30只,设置芪松楂散推荐剂量的1倍剂量组(3 g/kg)、3倍剂量组(9 g/kg)、5倍剂量组(15 g/kg)和空白对照组。各试验组鸡进行拌料饲喂连续20 d,空白组饲喂基础饲粮,试验期间观察AA白羽肉鸡的精神状态、生产性能、解剖变化、组织学病理变化、血液生理指标和血液生化指标的变化。结果,芪松楂各剂量组及空白对照组肉鸡的精神状态正常,运动、呼吸及排泄物未见异常;各剂量组显著(P0.05)提高了肉鸡增重、饲料消耗量、饮水量和降低了料重比;各剂量组鸡只的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、胃、肠道和肾脏眼观和镜检未见明显异常。各剂量组鸡血液生理指标和生化指标没有发生显著(P0.05)变化。上述结果表明,芪松楂散在15 g/kg剂量范围内使用是安全的。     

牛前胃疾病血液学及血清生化值的变化

据统计,在牛非传染性内科病中,前胃疾病占50％。为了早期确诊这类疾病,一些兽医工作者曾在临诊与治疗上做过不少探索。但是,病牛在发病过程中体内所发生的变化,特别是血液学和血清生化指标的改变,却报告很少。为此,我们进行了本项试验,以期为临床诊断与治疗提供一定的理论数据。(一)材料与方法1.实验动物:(1)病牛:利用甘肃农大黄羊镇家畜病院住院的前胃病病牛,共62例。这些病牛经全面系统的     

鸭源H5N1亚型禽流感疫苗候选株的构建

H5N1亚型clade 2.3.4为我国南方地区的优势毒株.A/mallard/Huadong/S/2005(S)病毒在遗传进化上属于clade 2.3.4,而A/mallard/Huadong/Y/2003(Y)病毒属于clade 2.通过删除S病毒和Y病毒的HA多碱性氨基酸序列,S病毒由PLRERRRKRGL改变为PLREGRGL,Y病毒由PQRERRKKRGL改变为PQREGRGL,使之成为低致病性特征的HA基因.将S病毒和Y病毒的NA基因和突变的HA基因分别组合,由A/Puerto Rico/8/34(PR8)病毒提供6个内部基因,进行拯救,共获得4个致弱病毒(SS,SY,YS,YY).这4个致弱病毒对SPF鸡的静脉内致病指数(IVPI)为0,对10日龄SPF鸡胚无致病性.SS、SY、YS、YY病毒第10代鸡胚尿囊液的HA效价分别为9、11、11、11 1b.     

纳川珠利对鸡的亚慢性毒性试验

为进一步评估纳川珠利在靶动物临床应用中的安全性,在80只浦东黄羽肉鸡标准饲料中全程添加0、3、15、30mg/kg纳川珠利,观察它对鸡的临床表现和血液学指标的影响。结果显示,纳川珠利对鸡无不良临床反应;对鸡的血液生化指标无显著影响;试验期间各组之间体重增重变化的差异无统计学意义(P0.05);剖检时肉眼未见明显异常,但肝指数、脾指数和肺指数显著减小(P0.05);用药后第28天,药物处理组红细胞浓度和红细胞压积显著增加(P0.05),推测药物对育成期雏鸡的红细胞成熟分化可能有一定的促进作用。结果表明,纳川珠利对靶动物鸡的整体毒性较低,临床应用是安全的。