血痕预试验检测的应用现状与研究进展

血迹是凶杀、伤害等案件中最常见和最重要的一种物证。血痕预试验是利用化学检测的方法从现场大量可疑的斑迹中初步筛选出可能是血的痕迹物证。本文对常用血痕预试验试剂的应用现状及其灵敏度、特异性、稳定性等进行分析比较,同时对预试验检测中存在的问题及今后的发展趋势进行综述,旨在为更好地研究、利用血痕预试验试剂提供参考。     

用双色荧光原位杂交技术鉴定血痕性别

目的 探讨荧光原位杂交技术在血痕性别鉴定中应用及其价值。方法对20例新鲜人血及20例1-2年人血痕的X、Y染色体采用双色荧光探针进行原位杂交分析。结果 人新鲜血,男性X、Y信号检出的完整率为98.8％,其中Y信号的检出率为100％,女性X、X信号检出的完整率为96.5％;1-2年人血痕,男性X、Y信号检出的完整率为88％,其中Y信号的检出率为90％,女性X、X信号检出的完整率为80％;40例血液(痕)性别检测的符合率为100％。结论双色荧光原位杂交技术可以鉴定血痕性别。     

新鲜血痕样本直接扩增试验条件比较

目的探讨新鲜血痕在不同直接扩增试剂盒的试验条件。方法存放2d内的新鲜血痕FTA卡540份和存放1~3m的陈旧性血痕FTA卡270份,各分别随机均分为3组,每份血痕打3片1.0mm纸片,分别用DNATyperTM15Plus试剂盒、GoldeyeTM20A试剂盒和华夏TM试剂盒在标准条件(说明书条件)、优化条件1(标准条件+1μL DMSO)和优化条件2(标准条件+室温浸泡1h)扩增检验,比较在3种条件下各组STR检验成功率。结果陈旧血痕样本用3种直扩试剂盒,在3种条件下,检验成功率均97.00%,且均高于新鲜血痕。新鲜血痕在标准条件和优化条件1下,成功率为27.22%~31.67%,在优化条件2下,检验成功率相似(97.00%),与标准条件和优化条件1比较,有统计学差异(P0.01)。结论新鲜血痕在加入直接扩增试剂后于室温浸泡1h,可有效提高STR检验成功率。     

新鲜血痕样本直接扩增试验条件比较

目的探讨新鲜血痕在不同直接扩增试剂盒的试验条件。方法存放2d内的新鲜血痕FTA卡540份和存放1～3m的陈旧性血痕FTA卡270份,各分别随机均分为3组,每份血痕打3片1．0mm纸片,分别用ONATyper^TM15Plus试剂盒、Goldeye^TM20A试剂盒和华夏。”试剂盒在标准条件（说明书条件）、优化条件1（标准条件＋1μLDMSO）和优化条件2（标准条件＋室温浸泡1h）扩增检验,比较在3种条件下各组STR检验成功率。结果陈旧血痕样本用3种直扩试剂盒,在3种条件下,检验成功率均〉97．00％,且均高于新鲜血痕。新鲜血痕在标准条件和优化条件1下,成功率为27．22％～31．67％,在优化条件2下,检验成功率相似（〉97．00％）,与标准条件和优化条件1比较,有统计学差异（P〈0．01）。结论新鲜血痕在加入直接扩增试剂后于室温浸泡1h,可有效提高STR检验成功率。     

一种检验血痕的新方法——氯丙嗪试验

以往法医工作中对可疑斑痕要确定是否是血,需应用"血色原结晶试验"或"氯化血红紊结晶试验",但这两种试验的共同缺点是灵敏度低、用材量大,在法医实践中使用很不方便.较常用的"联苯胺试验"虽应用简便,但自然界中不少植物汁液和其它物品对它都呈阳性反应,故只能作为一种预试验.加之联苯胺是一种致癌药,来源也很紧张,为解决这个问题,我们参考有关资料,研究出了简便、灵敏、特异且安全无毒的"氯丙嗪试验".经过我们对数百种物质     

凶器上潜在陈旧血痕DNA检验

<正>1案例检验1.1简要案情2001年5月某日,郭某(男)的出租车在田间路上被焚烧,其本人右侧颈总动脉破裂失血性休克死亡在车内。2013年9月底案件侦办单位要求对距离现场600m处提取的折叠不锈钢刀进行DNA检验,并与死者分型进行同一认定。1.2 DNA分型检验检验方法经鲁米诺试验检验,发现刀盒内侧和刀刃与刀盒结合部有浅蓝色荧光。用生物物证提取棉签(公安部物证鉴定中心研制)二步擦拭法     

血痕预试验的改进

在法医物证检验中鉴定血痕首先应进行预试验,从而确定下一步检验.实验检查血痕一直沿用血红蛋白(以下缩写为Hb)有过氧化酶活性的原理来进行检验的.但是现场提取的检材中往往含有植物氧化酶、化学触酶或其它氧化剂,它们同样具有过氧化酶的活性,对血痕预试验有强烈的干扰作用,给血痕的认定带来了很大困难.为解决这一     

微量生物物证提取套装在现场微量血痕DNA检验中的应用

目的 探讨微量生物物证提取套装应用于提取现场微量血痕DNA的检验效果.方法 将静脉血制成地面血痕.分别应用微量生物物证提取套装法和普通法提取血痕.分别于恒温摇床放置2、24、48、72、96 h(每组50份)进行血痕DNA检验,对比各组检验结果.结果 恒温摇床上分别放置24、48、72、96 h后,微量生物物证提取套装...     

匹拉米洞与联苯胺在血痕预实验中的灵敏性及DNA损伤检测研究

目的血液痕迹是暴力犯罪现场最易遗留的一类痕迹,是法医学检验中最常见和最重要的一类物证。血痕预实验是利用化学检测的方法从现场大量分布的可疑斑迹中初步筛选可能是血痕的重要方法,是法医学鉴定的重要前提。本文比较匹拉米洞法和联苯胺法的灵敏度、对DNA-STR检验的影响以及对细胞核的损伤情况,以探索匹拉米洞法应用于血痕预实验的可行性。方法对新鲜全血进行梯度稀释,观察比较检测灵敏度;利用Chelex-100提取匹拉米洞、联苯胺等试剂预检后的血痕样本中的DNA,应用PCR-STR技术及荧光检测技术检测样本的STR分型,观察STR分型结果,比较两种方法对后续DNA-STR检验的影响;在细胞培养液中加入联苯胺、匹拉米洞,应用彗星电泳技术评价细胞核DNA的损伤。结果匹拉米洞法可检测的最低血红蛋白浓度为25μg/m L,灵敏度低于联苯胺法(5μg/m L);DNA-STR有效分型率为96.67%,远高于联苯胺法(18.09%);联苯胺组彗星尾长为52.40±9.21、尾距为43.29±4.85、尾部DNA含量为16.25±2.35,显著高于匹拉米洞组。结论匹拉米洞法可用于血痕预实验,对血痕中DNA的损伤、对DNA-STR分型的影响均低于联苯胺法,可替代联苯胺作为新的法医学血痕预实验方法。     

5种免提取试剂盒检验滤纸血痕结果的比较

目的探讨5种免提取试剂盒对滤纸血痕样本检验的效果。方法陈旧滤纸血痕(存放时间12～14个月)及新鲜滤纸血痕(存放时间小于1个月)各920份,分别随机分为5组。应用AGCU 17+1、Goldeneye 20A、Powerplex16HS、Identifiler Plus、Identifiler Direct 5种免提取试剂盒进行检验,对比各组检验结果。结果陈旧滤纸血痕5种试剂盒的检验成功率为98.91%～100%,各组间无差异(P>0.05);新鲜滤纸血痕,Identifiler Plus和Identifiler Direct试剂盒检验成功率高于AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒(P<0.01);将样本做陈旧化处理后再用成功率较低的3种试剂盒进行检验,成功率分别升至100%、99.46%、99.46%;Identifiler Plus试剂盒扩增循环27次效果优于28次。结论本文5种试剂盒均可用于滤纸血痕的直接扩增检验,但使用AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒需将新鲜血痕做陈旧化处理;Identifiler Plus试剂盒需将循环次数降为27次。     

环状RNA在法医学中的应用

随着分子生物学性质和功能的日渐深入,RNA在法医学的体液鉴别,血迹形成时间、损伤时间及死亡时间的推断,死亡原因分析等方面的作用受到了广大法医学者的重视,逐渐成为目前法医学应用研究的热点之一。近年来,环状RNA在法医学中表现出广泛的应用前景。本文对环状RNA在法医学中可应用的范围进行综述,并对其未来的前景进行了展望。     

尼龙植绒拭子与棉拭子血痕DNA分型效果比较

目的探讨尼龙植绒拭子与棉拭子血痕DNA分型检验的效果。方法取抗凝全血用去离子水倍量稀释2、4、8、16、32、64、128倍,各取1μL分别滴加于尼龙植绒拭子与棉拭子头部,干燥制成血痕,应用Chelex-100提取每个浓度两种材质拭子的血痕样本DNA,采用Identifiler Plus试剂盒进行复合扩增,3500XL型遗传分析仪进行检测,对比各组DNA分型检验成功率。结果 1检验成功率:稀释16~64倍尼龙植绒拭子血痕均明显高于相同稀释倍数的棉拭子血痕(P0.001);其余浓度血痕两种材质拭子的检验成功率无明显差异;2分型图谱峰高和均衡性:不同浓度尼龙植绒拭子血痕峰高多为棉拭子血痕的2倍以上,16~64倍稀释血痕尼龙植绒拭子均衡性更好。结论尼龙植绒血痕拭子的检验效果优于棉拭子血痕,在微量血痕检验时优势更明显。     

二次溅落状血迹形态的模拟实验观察

目的观察二次溅落状血迹的形态特征,探讨其形成机理及与行为方式的关系。方法建立室内现场环境,用10mL血液,以单滴连续滴落或一次性倾倒方式,从10～160 cm高度以10 cm为间隔,制作二次溅落状血迹模型;用棍棒打击及撞击方式制作低位打击及头部撞击溅落血迹模型。观察各种血迹分布,并分析比较其形态差异。结果二次溅落状血迹和头部撞击溅落状血迹在垂直面上均形成倒三角形空白区域的分布形态,但前者分布面积较后者小;低位打击溅落在垂直面上的血迹无此特征,且打击飞溅血滴的飞行角度大于二次溅落血迹。结论利用二次溅落状血迹的形态特征,对于鉴别低位溅血、分析行为方式、证实相关证词具有重要价值。     

H-Y抗原的法医学应用前展

雄性特异性次要组织相容性抗原,简称H-Y抗原(male specific minor histompatibility antigen)是由Y染色体上的基因编码的一组次要组织相容性抗原,其与X染色体上的H-X抗原同源。H-Y抗原为一种雄性动物特有的物质,其在雄性个体中表达具有普遍性,分布无组织和器官特异性,其最初是作为一种移植抗原被发现的。近年来很多文献报道了H-Y抗原的相关研究,作者主要综述H-Y抗原在性别控制和鉴定方面的研究,并在法医学应用方面的前景作出了一些展望。     

动脉喷溅血迹动力学及形态学的模拟实验观察

目的观察不同压力、管径对在水平方向上形成的喷溅状血迹的喷射距离及形态的影响。方法建立室内现场环境,利用自制的模拟喷射装置,在60～210mmHg范围内设6种压力,在1.5～4.5mm范围内设4种管径条件,于50、100、150cm 3种高度,制作动脉喷溅血迹。观察水平面上不同喷射高度的喷溅血迹的分布范围、血迹大小及形态特征,并测量其距离,采用SPSS 13.0统计软件进分析,并进行方差检验。结果在不同高度,血液喷射距离随压力增大而增加,随管径增大而减小,两因素间存在交互作用,距离与压力及管径存在较好的线性关系,可得出回归方程。而喷溅血迹的形态特征总体趋势为:高度越高圆形血滴直径约大;管径越粗,边缘毛刺状突起越明显;压力越大,喷射距离越远,且卫星状血迹逐渐增多,拖尾更拉长;随管径的增加,出现椭圆形血滴所需的压力越高。结论动脉喷溅血迹的形态及喷射距离的观察与测量,可用于推断命案现场喷溅源位置及人体受损伤时的体位。     

4种固相颗粒吸附法提取滤纸血痕DNA效果的比较

目的探讨4种固相颗粒吸附法提取滤纸血痕样本DNA的效果。方法含有1μL静脉血的滤纸血痕180份,分为4组,每组45份。分别采用4种固相颗粒吸附法(DNAIQ~(TM)系统、D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规的硅珠法)对上述样本进行DNA提取,对比各组DNA溶液的浓度及STR分型检验结果。结果 D盾超敏DNA提取试剂盒[(3.764±1.790)μg/mL]、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒(3.634±1.112)及常规硅珠法(3.350±1.250)提取到DNA溶液的浓度无统计学差异(P0.05),但均高于DNA IQ~(TM)系统(1.864±1.207)(P0.001);D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒及常规硅珠法样本图谱峰高大于DNA IQ~(TM)系统(P0.001),超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规硅珠法样本图谱峰高大于D盾超敏DNA提取试剂盒(P0.01)。结论 D盾超敏DNA提取试剂盒、超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒及常规硅珠法对于滤纸血痕的DNA提取效率高于DNA IQ~(TM)系统;超高效硅珠纯化DNA提取试剂盒和常规硅珠提取到的DNA溶液可能具有更高的质量。     

Y-SNP在法庭科学中的应用

本文介绍了Y-SNP的遗传特性、在世界特别是在东亚人群中的分布特点,以及在法庭科学中应用的研究做一综述,旨在利用现场罪犯遗留生物学检材的Y-SNP检测来推测其人种或地理来源,为案件调查提供帮助.     

磁珠DNA自动提取系统在法医检验中的应用

磁珠DNA自动提取系统是将磁珠分离技术与DNA自动提取工作站结合运用,以达到高效提取DNA的目的,它具有操作时间短、准确性高、检材用量少等特点,特别适用于大批量生物检材的快速提取,是目前主流的DNA自动化提取方法。本文对磁珠DNA自动提取系统的基本组成、工作原理、操作流程及其在法医检验领域中的应用等进行了综述,并对该系统的发展前景进行了展望。     

焦磷酸测序技术分析单核苷酸多态性在法医学中的应用

单核苷酸多态性（SNP）是新一代的法医学遗传标记,有望成为法医实践中解决高度降解检材及特殊案件DNA鉴定的重要工具。近年来涌现出许多高通量的SNP分析方法,如引物延伸结合时间飞行质谱分析法、微测序法、SNP lex以及焦磷酸测序法等。本文重点对焦磷酸测序技术的原理、步骤及其在法医学中的应用进展进行简要的综述。