应用酶联免疫吸附试验诊断弓形虫病

1984～1986年,本课题协作组在广西、北京、福建、安徽、黑龙江、浙江等省市的6个单位进行了弓形虫病酶联免疫吸附试验诊断方法的研究,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)。 葡萄球菌A蛋白—酶联免疫吸附试验(SPA—ELISA)固相免疫酶底物珠试验(DASS),玻片虫体过氧化物酶联免疫吸附试验(TSHE),玻片虫体—葡萄球菌A蛋白酶联吸附试验(TSSH)5种酶联试验方法,现汇总报告如下。     

酶联免疫吸附试验诊断猪囊虫病的研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)在兽医实验诊断和研究中的应用日趋广泛,而用于猪囊虫病的试验方法及条件进行了研究,探讨了其理化性质和免疫特性,并初步解决了抗原纯化问题。随后,通过474例已知血清的试验,对大样本的检出率及细颈囊尾蚴的交叉反应问题进行了研究。在此基础上又进行了现场应用试验,并且探讨了以全血代替血清简化操作步骤的可能性。现报告如下。     

应用酶联免疫吸附试验诊断猪旋毛虫病的研究

旋毛虫病是一种人畜共患的主要寄生虫病。病原为毛形科的一种线虫(Trichinella spiralis, Owen, 1835),成虫寄生于宿主的小肠,幼虫寄生于横纹肌内,引起人和多种动物的旋毛虫病(Trichinosis)。由于病原传播的极其复杂性,故这一疾病至今尚未能有效的控制,在世界各地仍然普遍流行。据文献报道,该病现已在欧、美、亚、非四大洲的70多种哺乳动物中流行。我国自1881年从福建厦门的猪肉中发现旋毛虫以来,嗣后陆续在云南、西藏、吉林、黑龙江和河南(1982)、广西(1983)、湖北(1984)等省都发现了人的旋毛虫病,发病死亡率高达10％以上。猪的旋毛虫病更为严重。如河南某地区猪旋毛虫感染率逐年上升,流行面积在扩大,已有12个县(市)发生本病,其中感染率最高达50％。     

应用酶联免疫吸附试验检测猪旋毛虫病

根据1982年商业部下达的任务,中南五省猪旋毛虫病研究协作组进行了猪旋毛虫病生前诊断方法的研究。南阳肉联厂应用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法,并与虫体检查方法(镜检法、消化法)对照检测,表明ElISA间接法检测猪旋毛虫病具有微量、特异、灵敏、快速等优点,是当前诊断猪旋毛虫病的一     

应用酶联免疫吸附试验诊断猪钩端螺旋体病的初步研究

钩端螺旋体病(Leptospirosis)是人畜共患传染病,我国南方沿海地区尤其多发本病,由于家富感染率高(特别是猪),因此对人的危害极大。目前国内外对钩端螺旋体病的血清学诊断方法仍以显微凝集试验(MAT)为主,但MAT必须经常传代保存一套标准菌种,并以活菌操作,需在暗示野显微镜下观察结果,比较麻烦,而且不能达到快速诊断要求。     

棘球蚴囊液抗原A和B在酶联免疫吸附试验中的应用比较

用醋酸缓冲液和４０％饱和硫酸铵连续沉淀法从绵羊棘球蚴囊液（ＳＨＣＦ）中得到部分纯化抗原（ＳＰＰＣＦ），并从中分离了抗原Ａ和抗原Ｂ，分别用单克隆抗体反向间接血凝试验（Ｍ－ＲＰＨＡ）、单克隆抗体双扩散试验（Ｍ－ＤＤ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）进行了鉴别，表明自制的三株单克隆抗体（ＭｃＡｂ）均识别ＳＨＣＦ、ＳＰＰＣＦ及抗原Ｂ，而不识别抗原Ａ；用ＥＬＩＳＡ对阳、阴性血清检测，ＳＰＰＣＦ、抗原Ａ和抗原Ｂ的阳性检出率分别为８３．３３％、８３．３３％和７５％，阴性符合率分别为７２．２２％、８６．１１％和７５％，表明抗原Ａ的敏感性和特异性均优于ＳＰＰＣＦ和抗原Ｂ。     

酶联免疫吸附试验诊断猪旋毛虫病的扩大试验研究

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断实验感染猪旋毛虫病的方法建立之后,在改进抗原制备方法,完善操作程序,提高检测效果的同时,对人工感染的101头猪血清及采自旋毛虫流行区和非流行区的3012头屠宰猪血清进行了血清抗体检测,并对流行区991份血清相对应的猪膈肌肉样进行了压片检查和消化对比试验,取得了满意的结果。     

BA-ELISA诊断棘球蚴病的研究

应用生物素-亲和素系统(BAS)的BA法分别在两种载体上与常规ELISA法对比,进行了诊断人、绵羊棘球蚴病实验研究。结果以聚苯乙烯板为载体的BA-ElISA法诊断人棘球坳病:敏感性92～100％,特异性95～100％,常规ELISA法敏感性67～83％,特异性92～100％,检测绵羊棘球蚴病,敏感性61～90％,特异性67～90％、常规ELISA法敏感性为49～72％,特异性80～93％。用硝酸纤维素膜为载体的BA-Dot-ELISA法检测人血清:敏感性100％,特异性91.7～100％,Dot-ELISA检测绵羊血清:敏感性73.3～75.6％,特异性78.9～89.5％。试验证明BA法较常规ELISA有着更高的敏感性和特异性,斑点法可以取得与聚苯乙烯板完全等同的效果。     

圆斑-酶联免疫吸附试验诊断囊虫病

囊虫病是严重危害人体健康和畜牧业生产的重要人畜共患寄生虫病之一。我们应用圆斑-酶联免疫吸附试验,(Dot-ELISA),以酶联葡萄球菌A蛋白作为第二抗体诊断囊虫病,效果很好,现将试验结果报告如下。 (一) 材料和方法     

斑点酶联免疫吸附实验诊断猪囊虫病的研究

用Dot—ELISA法诊断猪囊虫病在国内还属首次。该法在接到病料后2.5小时内准确报告结果,结果判定不但简易直观,不需酶标检测仪,而且还可作为技术资料长期保存。以抗原制备的快诊膜在室温下保存数月不失活,可通过信封邮递,从此彻底解决了基层单位多年来需要冰箱保存抗原和多年来抗原运输中存在的一系列难题,从而更加方便了基层。本法以纤维素膜作为载体,抗原用量由常规ELISA的100μl减少为1μl,其他器材和试剂用量也较常规ELISA少,因而大大降低了检测成本。与4种寄生虫病(棘球蚴、细颈囊尾蚴、旋毛虫、弓形虫)阳性血清不发生交叉反应。对按“四部”规程肉检确认为猪囊虫阴性血清314头份,阳性血清108头份,经Dot—ELISA法检测,其阴性符合率为99.36％,阳性符合率 为99.10％,对长春市肉联厂的784头份商品猪血清和辽、吉、黑、内蒙古四省区部队的3653头份猪血清进行检测,其猪囊虫病阳性检出率分别为5.36％和4.9％,与有关资料统计结果相符。对55头份阳性血清和60头份阴性血清进行4次重复性试验,其重复率达100％。实验结果证明,该法符合“简便、快速、敏感、准确、经济”的原则,尤其易于在基层推广应用。     

澳大利亚棘球蚴病考察报告

受农牧渔业部、中国农科院派谴,中国棘球蚴病考察组于1988年2月27日至3月12日对澳大利亚进行了两周考察。先后访问了国家和一个州的农业主管部门、四所大学的有关实验室、三个州的兽医研究推广机构、一个农场、三个屠宰场、及其脏器销毁装置、一个棘球蚴病展览中心和一些野猪捕杀设施。 (一)棘球蚴病流行情况 澳大利亚绵羊约1亿6千余万只。每一农户饲养牧羊狗6～10只。绵羊和狗共处造成棘球蚴病在其人、畜集中的东南部严重流行,主要是新南威尔士、维多利亚、塔斯马尼亚三个州和堪培拉特区。     

家畜棘球蚴病的间接血凝试验

家畜棘球蚴病(Echinococcosls, Hydatidosis)是一种人畜共患性寄生虫病。严重危害人畜健康,成为世界公共卫生中的一个重要问题。由于棘球蚴寄生于中间宿主脏器组织的深层,临床上难以发现特征性变化,生前亦不能用寄生虫学方法加以检查。人医临床所应用的物理学方法,如X射线、超声波、同位素扫描或Casoni皮肤试验,目前在兽医上尚难付诸实际应用。近年来,国内外学者非常重视血清学诊断方法的研究。综览文献资料,间接血凝试验(IHA)操作方便,从免疫学发展历史来看,还是一种新技术。国内在兽医方面应用间接血球凝集试验诊断家畜棘球蚴的资料不多,仅见陈德明等(1982)的报告。为此,我们对本方法继续进行了探讨,结果如下。     

应用酶联免疫吸附试验检查牛羊布氏杆菌病

为了将酶联免疫吸附试验(ELISA)更有效地应用于牛、羊布氏杆菌病的诊断,我们对该方法所用的抗原、酶标抗体、检测程养基,37℃培养72小时。将耶氏09接种于普通琼脂培养基,于25℃培养36小时。用灭菌生理盐水将三种培养物洗下,于60℃水浴中1小时杀死。用胰酶消化法提取可溶性成分,定量分装,     

甘肃省棘球蚴病防治试点县家畜棘球蚴病流行病学调查

几年来,我省家畜主要寄生虫病得到基本控制,但人兽共患的棘球蚴病的危害显得日益严重。在这种情况下,我省将天祝、漳县和环县列为棘球蚴病的防治试点县,要求卫生、兽医部门对人、畜棘球蚴病实行综合防治,争取在我省尽快控制此病。为了更好地采取有力措施,迅速有效地防治此病,我们于1991年在上述三县和天祝羊场进行了家畜棘球蚴病流行病学调查。     

绵羊肺棘球蚴病的X线诊断

作者对不同地区的四个羊群,共847只绵羊,先后进行了胸部的X线检查,检出109例肺棘球蚴病羊,检出率为12.86％。本文对109例绵羊肺棘球蚴病的X线特征进行了较详细的叙述和分析。为了验证X线的诊断,对10例经X线检出的病羊做了Casoni氏皮内变态反应试验,对17例病羊做了病理剖检,结果均与X线所见基本上符合。故认为绵羊肺棘球蚴病的X线诊断是一种较为理想的诊断方法。它不但能够了解肺部有无棘球蚴囊肿,而且尚能确定其数目、大小、部位、形状、性质以及有无并发症等。如能结合其他诊断方法,常能迅速做出准确的诊断,故可作为羊群大批普查的手段。     

棘球蚴病的研究概况

棘球蚴病 (Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｏｓｉｓ)又称包虫病 (Ｈｙｄａｔｉｄｏｓｉｓ)是一种世界范围内流行的人畜共患寄生虫病。长期以来 ,世界各国对该病进行了广泛深入地研究 ,从理论与技术等方面指导了该病各项防制措施的实施 ;近年来 ,经过各国科学家的不懈努力 ,该病的研究又获得新的进展。1　流行病学棘球蚴病虽然发病和流行范围较广 ,但各国的发展情况并不一致。据Ｍｏｏｓａ等、Ｂａｂｂａ等、Ｃｒａｉｇ等报道 ,约旦用ＥＬＩＳＡ检测人的棘球蚴病抗体 ,阳性率为 2 .4% ;突尼斯经外科手术确诊当地居民的患病率为 2 .3 10万 ,血清学和影…     

鸭棘球蚴病一例

棘球蚴(Echinococcus)是细粒棘球绦虫(E.granulosus)的幼虫,可寄生在绵羊、山羊、黄牛、水牛、骆驼、猪、马等家畜及多种野生哺乳动物和人的肝脏、肺脏以及其它各种器官。在以往的文献资料上尚无有关禽类寄生棘球蚴病的报道。1981年9月,我们在山东省兖州地区的一群麻鸭中发现棘球蚴病一例,现将情况简介如下;     

直接法单克隆抗体酶联免疫吸附试验和常规酶联免疫吸附试验诊断耕牛日本血吸虫病的比较

比较了直接法单克隆抗体酶联免疫吸附试验（ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和常规酶联免疫吸附试验诊断耕牛日本血吸虫病方面的差异，实验结果表明，直接法ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对实验感染耕牛的阳性检出率为１００％（３２／３２），对安徽省自然感染耕牛（粪孵阳性）的阳性检出率为９３．９０％（４１８／４４５），对健康耕牛的阴性符合率为９８．５０％（６６／６７）；而常规ＥＬＩＳＡ对实验感染耕牛的阳性检出率为９５．３５％（４１／４３），对安徽省同一地区的自然感染耕牛的阳性检出率为９０．８２％（１８８／２０７），对健康耕牛的阴性符合率为８６．２７％（８８／１０２）。提示，直接法ＭｏＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ不仅具有操作简便、反应快速、成本低廉等优点，而且在阳性检出率和阴性符合率方面均优于常规ＥＬＩＳＡ。     

棘球蚴病研究的国际现状

棘球蚴病是世界流行的人畜共患病,自1966年国际棘球蚴病研究工作会议以来,各国学者对其进行了大量的研究,成果显著,仅就棘球绦虫研究方面的进展情况概述如下。 (一)种与株系 最早认为棘球蚴病的病原体—棘球绦虫是1个属(Echinococcus)、1个种(E.granulosus),后又提出是1个属、11个种。Nelson在肯尼亚对11个种进行了比较,认为其中有6个种是细粒棘球绦虫(E.granulosus)的同种异名。1960年,A(?)yaaa,e从棘球属中分出1个新属,定为泡球属(Alveococcus),即有争议,也有赞助。因此棘球蚴病已是棘球属和泡球属引起的两个病了。     

斑点酶联免疫吸附试验简介

斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)是以微孔滤膜为固相载体的一项新的免疫酶技术,其敏感性和特异性与放射免疫试验(RIA)或酶联免疫吸附试验(ELISA)相类似,并可弥补RIA和ELISA不可避免的一些缺陷。该法于1982年由荷兰学者Herbrink首先建立。嗣后,很快被许多国家学者吸收应用与继续研究,并发表了不少论文。迄今,对于本技术的命名尚未统一,不同学者的叫法不尽一致。Herbrink等称为抗原斑点试验(Antigen spot Test),Howker等称为免疫结合斑点试验(Dgt-immunobinding Assay),Huet等称为斑点免疫测定(Spotimmuno Detection),而Pappas等则称为斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)。笔者认为Pappas的叫法最合适,故本文称该法为Dot-ELISA。