伪狂犬病弱毒疫苗的研究——接种猪的细胞免疫应答

本文报道了12头130日龄伪狂犬病弱毒疫苗(PRV_(FB))接种杂交猪在2个月内细胞免疫应答的动态变化。其结果:PRV_(FB)致敏的猪外周血淋巴细胞(L.C.)对PHA的应答出现两个峰,分别出现在免疫后的7和21天;而L.C对同源抗原(PRV_(FB))的应答缓慢上升,在第21天形成唯一的峰值,直到90天,其应答能力还显著高于免疫前的水平(P<0.05)。其血清中和抗体指数在免疫后4天就达到1.9(Lg),同样在21天形成峰值,而到60天,其中和指数也显著高于免疫前水平(P<0.01)。显而易见,PRV_(FB)既能刺激机体产生中和抗体,又能产生细胞免疫,并且能够维持相当长的时间。证明PRV_(FB)是一种较好的伪狂犬病弱毒疫苗。     

猪瘟兔化弱毒疫苗对仔猪哺乳前免疫效果的研究初报

目前采用的猪瘟兔化弱毒疫苗有效好的预防效果。但是近年发现其对哺乳仔猪的免疫效果往往不够理想。为了探讨这一问题,一些单位进行了免疫程序研究和仔猪不同日龄的免疫效果试验,但结论不一。这些研究的基本出发点都是根据仔猪哺乳后,与母乳中得到猪瘟母源抗体,而母源抗体能中和疫苗抗原从而影响疫苗的免疫效果。所以,如何排除母源抗体对仔猪免疫的干扰,已成为兽医界十分关切的问题。     

法国猪伪狂犬病弱毒疫苗Alfort26株简介

法国猪伪狂犬病自1970年以来日趋严重,给国民经济造成很大损失,已引起有关部门的重视。法国兽医学者托马等,通过低温在细胞上系列传代,培育出Alfort_(26)弱毒疫苗株,已用于生产实际。 (一)Alfort(26)弱毒株的培育 作者用从患猪伪狂犬病的病猪体分离的Alfort(27)强毒株,在猪肾的PK_(15)、R·P·《D》、R·P·《T·G·》三个细胞系上低温传代而致弱的。在第一代,于含有2％氨基酸的MEM培养液中添加5％的犊牛血清。第二代培养于含有10％的犊牛血清的MEM培养液中。在传代中培养     

用多重PCR鉴别猪伪狂犬病野毒与疫苗毒的研究

根据基因库中的猪伪狂犬病病毒(PRV)各基因的序列,设计了与PRV的 gB、gD、gE基因序列互补的3对引物。对样品中的PRV DNA模板进行了多重PCR扩增及反应条件的优化,结果同时得到与设计相符合的3条特异性条带,分别为549 bp(gB)、429 bp(gD)、366 bp(gE)。用这3对引物对三基因缺失疫苗毒的样品DNA模板进行多次多重 PCR扩增,均能稳定得到与设计相符合的2条特异性条带。敏感性试验结果表明,多重 PCR可以检测到 106 pg三基因缺失疫苗毒或756 pg PRV野毒的核酸模板量。特异性试验结果表明,以正常对照细胞及猪圆环病毒和猪细小病毒DNA为模板进行多重PCR扩增,均无任何条带。     

猪传染性水泡病仔猪肾细胞培养弱毒疫苗研究

为了迅速控制和扑灭猪传染性水泡病的蔓延,保障我国养猪业的发展和出口援外的迫切需要,我们在各级党组织的领导和关怀下,在吴兴县食品公司、平湖县食品公司、嘉兴地区食品公司等兄弟单位大力协助下,自1972年5月开始,对猪水泡病仔猪肾细胞培养弱毒疫苗进行了一些研究工作。几年来,先后培养成东阳系和杭州系两株弱毒。东阳系弱毒45代(D_(45))的免疫原性,较杭州系弱毒36代(H_(36))为好;但由于冷藏设备发生故障,东阳系于1975年初丢失。现将杭州系弱毒的培育、制苗和免疫等室内外试验结果报告如下。     

新生仔猪的伪狂犬病

万宝山镇农户张某在庭院修建简易塑料大棚双列式猪舍３间，进行自繁自养，积累了丰富养猪经验。１９９９年４月２５日１头母猪产仔１０头，２ｄ内有８头发病并陆续死亡。主诉：在接产擦粘液时，仔猪反应敏感、活泼、尖叫，哺乳时也不安静，２０ｈ后有２头发病，表现运步强拘、盲目走动，继之四肢发抖、卧地不起，迅速衰竭死亡，病程３～４ｈ。隔离于温室草筐的另外６头病仔猪发育匀称但呈现明显的衰竭症状，周身冰凉、肌肉颤抖、叫声嘶哑，手触之颤抖增强、无力挣扎。据张某说：４月初有２窝新生仔猪也发生类似情况全部死亡，自初春以来产仔…     

鸡IB弱毒疫苗对鸡ND弱毒疫苗免疫干扰的试验观察

鸡ＩＢ弱毒疫苗对鸡ＮＤ弱毒疫苗免疫干扰的试验观察郑厚旌邓纪英１）张健林陈桂霞（河南农业大学牧医工程学院郑州４５０００２）据报道，应用鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）与新城疫病毒（ＮＤＶ）分别先后接种ＳＰＦ鸡胚，两种病毒之间存在干扰现象，被干扰的ＮＤＶ毒...     

犬瘟热灭活疫苗与弱毒疫苗免疫效果的研究

为对犬瘟热病毒(CDV)灭活疫苗的免疫效果进行研究,本试验使用2%的二乙烯亚胺(BEI)常温下灭活CDV-L弱毒株28 h,经检测,该条件下CDV病毒灭活完全。将灭活病毒分别与氢氧化铝佐剂和脂肪乳佐剂以9∶1混合制成佐剂灭活疫苗。将制备的上述佐剂灭活疫苗和CDV-L弱毒活疫苗分别接种SPF级试验大鼠,分别于接种前第1周、接种后第1周、第2周、第1月、第2月、第6月、第9月这几个时间点采集大鼠血清,通过间接ELISA和血清中和法测定抗体效价。结果显示,制备的佐剂灭活疫苗间接ELISA抗体效价最高达1.026 6和1.056 2,血清中和效价最高达4 197和3 762,免疫时效长约9个月,弱毒活疫苗间接ELISA抗体效价最高为0.176 3,血清中和效价最高为1 877,免疫时效约为6个月。BEI灭活疫苗的抗体效价及免疫时效均高于弱毒活疫苗。     

初生仔猪伪狂犬病的诊断

20 0 1年 4— 5月 ,郑州郊区某猪场发生以初生仔猪出现呕吐、腹泻、神经症状和高致死率为特征的急性传染病 ,根据发病情况、临床症状、剖检变化和实验室检验 ,确诊为猪伪狂犬病。1　发病情况自 2 0 0 1年 3月开始 ,该猪场出现妊娠母猪产死胎现象。随后 ,怀孕母猪流产、产死胎及干尸化胎的数量逐渐增多 ,初生仔猪也开始发病、死亡。 4— 5月份的发病统计资料显示 ,15日龄内发病仔猪几乎全部死亡 ,断奶仔猪的死亡率为 10 .0 %—2 0 .0 %。截止送检时尚有 3 6头仔猪发病 ,其中 3 0头在 1周内死亡 ,病死率达 83 .3 %。曾用磺胺类药物和其他抗生…     

不同日龄仔猪注射猪瘟疫苗后攻毒效果观察

以往,我们对仔猪曾先后采用40～65日龄、20～60日龄的程序进行猪瘟疫苗免疫注射,但仔猪在哺乳期因患猪瘟死亡的仍间有发生。在3日龄和8日龄死亡的仔猪均可见较典型的猪瘟病变。为了解不同日龄哺乳仔猪在免疫注射后对猪瘟强毒的抵抗能力,以企探索较理想的仔猪免疫日龄,而进行了本试验。     

猪瘟兔化弱毒冻干苗对初生仔猪的免疫效果观察

1983年,通山县种畜场因从外地引进猪致使哺乳仔猪发生猪瘟,虽采取紧急预防接种、加强免疫注射,仍然控制不了疫情,死亡仔猪186头。后采用初生仔猪哺乳前就接种猪瘟兔化弱毒苗(简称初免,以下相同)的方法,在较短时间内,就控制了疫情。为了进一步验证其免疫效果,从1983年秋到1985年底,我们使用这种初免的方法,先后在通山县种畜场、咸宁地区种畜场接种了205窝2009头初生仔猪。实践证明,初生仔猪哺乳前接种猪瘟兔化弱毒疫苗是行之有效的免疫方法。     

用母猪抗血清预防仔猪伪狂犬病

用母猪抗血清预防仔猪伪狂犬病高跃（浙江省丽水地区农业局３２３００５）滕井修（日本千叶县东叶家畜诊疗所）１９９２年笔者在日本千叶县东叶家畜诊疗所研修期间，利用淘汰母猪制备抗血清进行仔猪伪狂犬病的预防效果试验，获得了满意效果。１材料与方法１．１猪伪狂犬病...     

仔猪伪狂犬病的诊断与防制

伪狂犬病 (ＰＲ )是由α疱疹病毒引起多种动物的一种急性传染病 ,猪是该病毒的重要贮存宿主和传染源。据资料统计 ,到1995年广东省已有 2 8个场确诊存在ＰＲ ,且有蔓延的趋势。1998年 2月 ,汕头市某规模化猪场发生以初生仔猪大批死亡、部分母猪流产或产死胎的疫病 ,经本站诊断为ＰＲ ,用ＰＲ弱毒疫苗紧急接种 ,并实施综合防制措施 ,使疫情很快得到控制和平息。1　发病情况某猪场饲养种母猪 3 0 0多头 ,年出栏肥猪 80 0 0多头 ,是一个自繁自养的工厂化猪场。疫情发生前未曾注射过ＰＲ疫苗。1998年 2月 ,该场 10多窝 1— 10日龄初生仔猪突然发…     

鸡毒霉形体弱毒疫苗的研究——鸡毒霉形体弱毒F株免疫效力测定

以点眼的方法,用鸡毒霉形体F株的培养物对1、3和20日龄鸡进行了免疫接种试验,经过致病性株R株的攻击,根据气囊损伤保护率计算,免疫接种鸡可获得85％以上的保护,在攻击后14天内,免疫接种鸡比对照鸡体重增加明显。免疫力持续至少7个半月以上。F株的冻干培养物仍保持着良好的免疫作用。试验结果表明:鸡毒霉形体F株是个优良的疫苗株,可用于生产鸡毒霉形体活疫苗。     

猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究

用从广州地区流行性腹泻病猪分离并适应到Ｖｅｒｏ等传代细胞的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）Ｇ１强毒株，通过Ｖｅｒｏ、ｐＫ１５、ＳＴ细胞株的连续传代，证明第７２代毒已被致弱。用８３代毒（Ｐ８３）对吃初乳前的小猪以８～１０ｍｌ剂量口服连续传５代，每代都从接种猪小肠取样接种细胞进行培养鉴定，并于增殖后作为次代接种材料，结果５代毒均未引起小猪发病，证实该代次毒株的安全、稳定，达到了常规弱毒疫苗株要求的标准。用Ｐ８３制成弱毒疫苗，对２２头８～１０日龄小猪进行免疾效力试验，１４头口服免疫，８头颈肌注射免疫，剂量均为２ｍｌ／头。免疫后２１ｄ以最小发病量（即原毒液的１：１２稀释液）及原毒液的２倍、４倍和８倍的稀释液经口进行强毒攻击，对照组１２头也以相对剂量同时攻击。结果免疫组仅口服免疫、经大于最小强毒攻击量６倍剂量攻击组中１头（１／２）有一过性轻微腹泻，发病不到２４ｈ即恢复。对照组的１２头中有１０头典型发病，严重腹泻，并有寒颤等症状，病程长达３～６ｄ，７ｄ后腹泻症状消失，但体况明显削瘦。试验证明Ｐ８３制备的弱毒疫苗的总免疫效力达９４．６％，表明Ｐ８３已具备弱毒疫苗株的要求。     

鸡球虫三价弱毒疫苗对鸡的免疫效果研究

将100只3日龄罗曼雏鸡随机分成空白对照组、攻虫对照组、Ⅰ组(1个免疫剂量)、Ⅱ组(2个免疫剂量)和Ⅲ组(0.5个免疫剂量)共5个试验组,每组20只鸡,对研制的鸡球虫三价弱毒疫苗的安全性和免疫效果进行初步评价。结果,各组的相对增重率依次为100.0%、86.8%、81.8%、89.2%和89.7%;攻虫后第10 d剖检所有鸡,各组肠道病变记分依次为0、2.7、2.2、2.3和2.6;免疫期间,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的OPG值依次为5.7×106、6.7×106和7.3×106;攻虫期间,攻虫对照组的OPG值为12.3×106,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的OPG值依次为7.2×106、8.5×106和9.0×106。攻虫后各组的死亡率依次为0、5%、0、10%和0;各组的抗球虫指数依次为200.0、115.8、135.8、140.2和143.7。结果表明,该三价弱毒疫苗抗柔嫩艾美球虫的效果并不理想,还需要进一步改进和完善。     

新生仔猪接种猪瘟兔化弱毒疫苗抗体效价的测定

我们对新生仔猪在吮吸母猪初乳之前、后,给予接种猪瘟兔化弱毒疫苗,待60日龄后测定其抗猪瘟中和抗体效价,以观察母源抗体对仔猪免疫的干扰。 (一)材料和方法 1.试验猪:选自本省渭源县莲峰乡农户饲养的健康杂种母猪7头于分娩前一个月免疫注射猪瘟兔化弱毒疫苗(每猪1头份量)。然后,将其所产仔猪共65头供试验用。随机分为7个组, (1)哺乳前免疫组(简称A组):给刚出生的仔猪颈部肌肉注射猪瘟兔化弱毒疫苗。产     

狂犬病 犬肠炎 犬瘟热 犬腺病毒病 犬副流感五联弱毒冻干疫苗的研究

从国外引进的犬瘟热病毒（ＣＤＶ）、犬细小病毒（ＣＰＶ）、犬腺病毒－２型（ＣＡＶ２）和犬副流感病毒（ＣＰＩＶ）四联弱毒样品中，分离筛选出增殖性良好的ＣＰＶ－ＸＮ１，ＣＡＶ２－ＸＮ３和ＣＰＩＶ－ＸＮ４株。另外还通过离体异种细胞交叉传代，获得的ＣＤＶ－ＸＮ１１２弱毒株；从狂犬病毒（ＲＶ－ＥＲＡ）株疫苗样品中筛选出ＥＲＡ８３６株。经试验证明这５株病毒在５代以内可作为制苗用种毒。采用静置和旋转培养法高滴度扩增这５株弱毒，必要时还采用低温培养和物理浓缩法进一步提高病毒滴度。５株弱毒细胞培养物与保护剂按适当比例混匀，制成犬五联弱毒疫苗，给８周龄以上的血清抗体阴性犬每只注射２ｍｌ，在１５ｄ内产生针对犬六大疫病的坚强免疫力，免疫期不低于９个月；—２０℃保存期不低于２４个月，２～８℃保存不低于９个月，室温（１８～２２℃）保存不低于６０ｄ，各种弱毒的滴度无明显降低，保护率达１００％。给５０００多只幼犬分别于２月和３月龄时各注射１个剂量（２ｍｌ）五联苗，９个月内进行追踪观测未发现不良反应。５００余只免疫犬的血清学监测证明本联苗免疫力确实。     

鸡毒霉形体弱毒疫苗的研究——鸡毒霉形体弱毒F株对鸡的致病性测定

用鸡毒霉形体F株新鲜培养物经点眼途径分别感染1、3和20日龄北京白鸡,以测定其对鸡的致病性。其中有部分鸡在感染F株的同时,感染前或感染后接种新城疫Ⅱ系苗或LaSota株疫苗以及鸡传染性支气管炎H_(120)株疫苗。试验结果表明:F株对各日龄鸡感染都不引起气囊病理损伤,不影响体增重;从感染鸡至少在感染后30日仍能分离到霉形体;接种新城疫疫苗和鸡传染性支气管炎疫苗不增强F株的致病作用。而感染鸡毒霉形体NB_(72)株的部分鸡出现气囊损伤。结果显示F株对鸡不致病。     

新生仔猪伪狂犬病的诊断与防制

新生仔猪伪狂犬病的诊断与防制李学伍陈焕春１）杨艳艳方六荣１）吴斌１）周复春１）索绪峰１）（河南省农业科学院畜牧兽医研究所郑州４５０００２）１９９５年３～７月，湖北省某地养猪场的５０窝仔猪共５１１头，整窝发病、死亡，发病率和死亡率均为１００％，而产仔母...