大鼠原发性脑干损伤早期脑干的免疫组织化学研究

用自制的簧片打击装置弹击大鼠枕骨结节，造成严重颅脑损伤或原发性脑干伤，取其脑干（中脑、桥脑及延髓）常规包埋、制片后作LSAB－FN染色。结果表明，在严重颅脑损伤及原发性脑干伤，可见FN沉积于血管周围间质、部分神经纤维内及一些神经细胞内，且随着损伤时间的延长，FN沉积量增加、范围增大。LSAB－FN法可用于生前原发性脑干伤与死后伤的鉴别和推断在3小时内损伤经过时间。     

顶部受力致单纯性延髓损伤出血1例

<正> 原发性脑干损伤在法医尸检中较为常见,但不伴有脑干其它部位损伤出血的单纯性延髓出血较罕见。现报告1例。     

原发性脑干损伤神经元凋亡及caspase3的表达

目的观察原发性脑干损伤（PBSI）致死者脑干神经元凋亡及caspase3的表达情况,探讨其法医学意义。方法选择法医学检案中30例确定为原发性脑干损伤致死者脑干,按伤后不同存活时间（t≤5min、5min〈t≤15min、15min〈t≤1h、1h〈t≤24h）分为4组,以5例非脑干损伤死亡者脑干为对照组;分别运用常规HE、免疫组化和TUNEL染色检测中脑、桥脑及延脑重要核团内神经元凋亡及caspase3的表达情况。结果原发性脑干损伤后15min～24h出现明显神经元细胞凋亡（23.2%～35.9%）和caspase3阳性表达（28%～54%）,并呈现随损伤时间进行性增加的趋势,与对照组有显著性差异（P〈0.01）。结论原发性脑干损伤早期即出现神经元凋亡及caspase3表达增加,并随损伤时间的延长呈进行性增加,可据此辅助诊断原发性脑干损伤死亡。     

怀疑原发性脑干损伤早期死亡脑干纤维联结蛋白的免疫组化研究

在本研究的１３个案例中，怀疑原发性脑干伤死亡的５例，明确死因的８例，其中严重闭合性颅脑损伤２例；缢死１例，失血性休克１例，电击２例，海洛因中毒２例。用ＬＳＡＢ法对１３例脑干的中脑、脑桥、延髓各部ＦＮ进行检测。结果显示５例怀疑为原发性脑干伤、２例严重颅脑损伤、２例海洛因中毒死者的脑千部位的神经元内均可见ＦＮ的异常沉积，其它各例未见ＦＮ的异常沉积。结果表明；ＬＳＡＢ－ＦＮ法是诊断原发性脑干伤早期死亡灵敏但非特异的形态学指标。     

大鼠脑干损伤早期c-fos原癌基因的原位杂交研究

目的　探讨原癌基因c-fos蛋白的表达和脑干早期损伤的关系。方法　 2 0只实验大鼠随机分为脑干损伤组和对照组 ,脑干早期损伤阶段c-fos蛋白表达采用原位杂交组化法观察。结果　对照组大鼠脑干组织未见c-fosmRNA的表达。然而 ,脑干损伤组损伤后 1 0min即可在神经元和胶质细胞观察到c-fosmRNA的表达。且在脑干损伤后 3h内 ,c-fosmRNA的表达程度出现明显的时间依存性。脑干组织死后伤c -fosmRNA的表达亦为阴性。结论　c-fos原癌基因的检测可成为诊断脑干生前损伤的一项指标。     

大鼠脑干损伤早期c-fos原癌基因的原位杂交研究

目的 探讨原癌基因ｃ－ｆｏｓ蛋白的表达和脑干早期损伤的关系。方法 ２０只实验大鼠随机分为脑干损伤组和对照组,脑干早期损伤阶段ｃ－ｆｏｓ蛋白表达采用原位杂交组化法观察。结果 对照组大鼠脑干组织未见ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的表达,然而,脑干损伤组损伤后１０ｍｉｎ即可在神经元和胶质细胞观察到ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ的表达,且在脑干损伤后３ｈ内,ｃ－ｆｏｓ原癌基因的检测可成为诊断脑干生前损伤的一项指标。     

原发性脑干损伤NF表达定量研究

目的探讨脑干神经丝蛋白的定量分析对短时间内死亡的原发性脑干损伤鉴定的法医学意义。方法14例原发性脑干损伤者的脑干标本（损伤组）和15例脑外疾病死亡者的脑干标本（对照组）,分别取中脑、脑桥及延脑组织,作NF广谱免疫组化染色,用OPTIMAS 6.0系统图像分析仪定量检测脑干的神经丝蛋白表达,所得数据进行统计学对比处理。结果中脑、脑桥、延脑的NF阳性表达率分别为75.84±23.62（对照组45.17±17.95）,65.94±14.61（对照组42.99±24.12）和83.30±26.66（对照组53.50±28.14）,损伤组与对照组的NF阳性物含量在中脑、脑桥及延脑等3个部位中均有显著差异,P〈0.001或〈0.01。结论定量分析人脑干神经丝蛋白的含量变化,超出常人数量对鉴定早期原发性脑干损伤有价值。     

原发性脑干损伤5天后死亡1例

脑干损伤是指中脑、桥脑和延髓的损伤,又分为原发性和继发性脑干损伤,是一类特殊的脑损伤。单纯原发性脑干损伤较少见,而且脑干损伤者多在数小时内死亡。笔者曾遇一起脑干损伤较严重而存活5天的案例,现报告如下:1案情简介死者李某,男,45岁。2000年8月29日下午2时许,被他人打面部一耳光,傍晚时自觉头部不舒服,于次日晨7时许换班时,同事发现他未醒,唤他不能说话,只有用手比划,立即送医院抢救,CT检查示桥脑、中脑偏右侧见椭圆形高密度灶,边缘清晰,大小约3cm×1.5cm,病灶延续4个层面,诊断为急性闭合性重度颅脑损伤、脑干出血、脑疝。经抗炎、对…     

大鼠机械性脑干损伤早期延脑网状结构的超微病理研究

目的　探讨脑干损伤早期延脑网状结构的超微病理变化。方法　将实验大鼠分为创伤组和对照组,透射电镜观察大鼠机械性脑干损伤早期（１０ｍｉｎ,０ ．５ｈ,１ｈ ,３ｈ） 延脑网状结构的超微病理变化。结果　脑干损伤１０ｍｉｎ 即可见神经微丝（ｎｅｕｒｏｆｉｌａｍｅｎｔ, ＮＦ） 排列紊乱、疏密不均,ＮＦ 臂的缺失,髓鞘层面分离,轴膜内皱,与髓鞘间形成空隙,微血管周围基质密度降低以及线粒体肿胀等超微病变。脑干伤后存活时间延长,上述病变更为显著。本文就上述超微病变的形成机制及病理学意义进行了探讨。结论　脑干机械性损伤能够明显引起延脑网状结构的超微病理学变化,并增加个体快速死亡和免疫组化染色的易感性     

一种实用的人脑干损伤检查方法

脑干损伤是一种特殊类型的脑损伤。脑损伤并不一定致命,无论是原发性或是继发性,都必须是损害了脑干使其功能障碍才会致死。在原发性脑干损伤(包括合并大脑损伤和单纯性脑干损伤两种),特别是因头、面部受击后在短时间内死亡者,尸体解剖检验(包括心脏传导系统)脑外其它脏器无致死性病变时,若随意切取脑干组织检查,则难以获得对脑干损伤致死有诊断意义的病变。由于原发性单纯性脑干损伤多系在镜下才能见到的微型损伤,为了用最少的组织切块获得最多的损伤信息,达到最好的观察效果,需要建立一种准确的、可供常规使用的脑干损伤取材法。我们在20…     

Preliminary study on using changes in astrocytes and neurons in the brain-stem of the rat after stab wounds for determining the time of injury

The changes in astrocytes and neurons in the brain-stem of the rat after stab wounds were studied immunohistochemically. Anti-GFAP and anti-albumin antibodies were used to detect the changes of astrocytes and neurons, respectively. The results showed that in normal control group, the numbers of GFAP-positive cells differed in different areas of brain-stem, but remained similar in the same area of different rats. No albumin-positive cells could be found. The number of GFAP-positive cells in antemortem injury groups increased significantly followed by a decrease, and then a further increase. Albumin-positive cells including neurons and glial cells were found after injury in the midbrain, pons and medulla oblongata. In the postmortem injury groups, there were no significant changes in either anti-GFAP or anti-albumin immunoreactivities in any area of brain-stem compared to the control group. These results indicated that the changes in the number of GFAP-positive cells could be used to estimate the time of injury and to diagnose early brain-stem injury. The antemortem and postmortem injuries can also be differentiated by the presence of albumin-positive cells. The authors suggest that the timing and early diagnosis of injury in the brain-stem should be carried out on the basis of comprehensive analyses of changes in both neurons and glial cells.     

脑干星形细胞胶质原纤维酸性蛋白免疫组化染色的图像分析

目的探讨脑干星形细胞胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色及其图像分析在原发性脑干损伤鉴定中的应用价值。方法26例原发性脑干损伤致死者的脑干样本,分别在其中脑、脑桥及延脑相同部位取组织作GFAP免疫组化染色(LSAB法),并对GFAP阳性物最密集视野做图像分析。21例非颅脑损伤或脑部病变死亡者的脑干作对照样本,所得图像参数测量值进行统计学分析。结果(1)对照组星形细胞的GFAP阳性染色在中脑、脑桥及延脑三个部位分布不等(P<0.05),延脑>中脑>脑桥;损伤组则三个部位无显著性差异(P>0.05);(2)对照组与损伤组相比,GFAP阳性染色细胞的数量在中脑、脑桥及延脑等三个部位中差异均有显著性(P<0.01);(3)死后96h后解剖者,损伤组与对照组有显著差异;(4)伤后30min内死亡者,损伤组与对照组也有显著差异。结论人脑干星形细胞GFAP免疫组化染色的图像分析,对法医学鉴定原发性脑干损伤具有重要参考价值。     

大白鼠脑干损伤后脑组织中GFAP免疫组化改变的初步研究

采取针刺法造成实验大白鼠脑干损伤，用免疫组织化学ＬＳＡＢ法检测大脑、中脑、桥脑及延髓等不同部位脑组织中胶质原纤维酸性蛋白（ＧＦＡＰ）的改变。结果发现，生前损伤３０ｍｉｎ，大脑顶部灰质及中脑腹例中央部的ＧＦＡＰ阳性星形胶质细胞数目增多；生前损伤６０ｍｉｎ，除大脑顶部灰质及中脑腹侧中央部外．大脑脑室角周边部、桥脑背侧中央部、延髓腹侧及背侧中央部的ＧＦＡＰ阳性星形胶质细胞数目亦增多。而死后损伤者，ＧＦＡＰ阳性星形胶质细胞数目不增多。说明ＧＦＡＰ阳性星形胶质细胞数目的改变可区别脑组织的生前损伤和死后改变，并可作为脑干损伤早期的诊断指标。     

人脑挫伤后bFGF和COX2免疫组化染色观察

目的　观察人脑损伤后bFGF和COX2的动态变化规律 ,建立推断脑挫伤经过时间新方法。方法　应用免疫组织化学染色和图像分析技术 ,对 3 5例重度颅脑损伤案例的脑挫伤灶周边区bFGF和COX2的表达进行观察检测。结果　bFGF阳性细胞在即刻死亡组表达强度最大 ,伤后 12h急剧下降 (P <0 0 1) ,以后逐渐缓慢下降 ;COX2阳性细胞表达于伤后 12h急剧升高 (P <0 0 1) ,伤后 1d达峰值 ,以后逐渐下降 ,在伤后 11d消失。结论　bFGF和COX2的免疫组织化学染色可作为推断人脑挫伤经过时间的参考指标。     

曲马多中毒死亡后GABAA受体α1和GABAB受体1亚型在延髓孤束核和疑核中的表达

目的 观察曲马多中毒死亡后人脑延髓孤束核和疑核中γ-氨基丁酸(gamma-amino butyric acid,GABA)A受体α1亚型(GABAAα1)和B受体1亚型(GABAB1)的表达变化,探讨曲马多中毒死亡的机制.方法 应用免疫组织化学方法,观察比较曲马多中毒死亡人脑与非中毒原因死亡人脑延髓孤束核和疑核的GAB...     

体外培养大鼠大脑皮质星形胶质细胞损伤后bFGF的表达

目的观察体外培养星形胶质细胞损伤后碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth fac-tor,bFGF）的表达变化,进一步了解脑损伤修复的分子机制,以期为法医病理学鉴定提供更多的依据。方法取出生后24h内SD大鼠大脑皮质进行星形胶质细胞体外分离培养和纯化,将其随机分为对照组,损伤后30min和1、3、6、12、24h及3、7d组,应用ABC法检测不同时间段bFGF表达的差异。结果体外培养星形胶质细胞的纯度达95%以上。对照组有少量的bFGF蛋白表达。机械性损伤后1～3h,bFGF反应强度开始有变化,6～12h明显增强,24h达高峰,3d以后开始下降。结论机械性划痕损伤后bFGF表达与在体动物实验模型一样具有时序性变化规律,仅表达时间提前,说明损伤后bFGF表达可为脑损伤时间的推断依据之一;体外培养细胞损伤模型对组织细胞损伤的分子机制研究具有一定意义。     

38例单纯型脑干损伤法医学尸检的回顾性研究

目的报道38例原发性单纯型脑干损伤致死案例法医学尸检所见的脑干损伤、致伤方式和致伤物等特点,并探讨在法医学鉴定中的意义。方法从208例脑干损伤死亡法医学尸检案例中,挑选出38例符合单纯型脑干损伤的案例,分析单纯型脑干损伤发生的案情、损伤的部位和类型等特点。结果38例中男性占绝大多数,农民明显多于其它人员;大多发生于纠纷斗殴中;头部拳击伤18例(47.4%);头皮挫伤19例(50.0%);头皮挫裂创9例(23.7%);未见头皮损伤7例(18.4%);受伤当时昏迷并很快死亡者34例(89.5%);其损伤为局灶性挫伤出血,有32例(84.2%)肉眼未能辨认出,镜检见小灶性出血:其中,桥脑18例(47.4%)、延脑10例(26.3%)、中脑4例(10.5%)、桥脑和延脑均有出血6例(15.8%)。结论原发性单纯型脑干损伤不仅存在,而且能致人死亡;应引起同行的重视。