用“咖啡环”法估测DNA含量

目的探讨DNA-溴化乙锭形成的"咖啡环"用于DNA含量的测定。方法将DNA与溴化乙锭混合,滴加在载玻片等载体上,蒸发后用凝胶成像系统观察、拍照,分析DNA的成环条件、环荧光强度与DNA浓度的相关性,以及"咖啡环"法评价DNA的灵敏度、适用范围等。结果 DNA-溴化乙锭溶液在载玻片、透明聚苯乙烯板等载体表面蒸发后可形成荧光环。在玻片上2μL点样时,DNA检出限可达到2ng/μL。在2ng/μL~1000ng/μL范围内,DNA浓度与环积分光密度拟合Logistic方程(R2=0.999)。结论 "咖啡环"法简单、快速,设备要求低,可用于DNA含量的高效、快速测定。     

子弹击发对弹壳接触DNA提取检验效率的影响

正在涉枪类等恐怖分子犯罪中,弹壳是最重要生物物证之一,这类生物检材的DNA提取和检验存在一定的难度。此外子弹击发的瞬间高温可能使得接触DNA破坏以及子弹击发过程的剧烈震动使得弹壳上粘附的细胞脱落,也导致弹壳接触DNA的有效提取难度加大,成为困扰广大检验人员的难点。本文拟通     

短波紫外线照射对血涂片DNA检验的影响

<正>某些现场的血手印，多采用紫外反射照相显现技术提取指纹。有学者认为，血手印经紫外线的照射，尤其是短波紫外线的近距离照射后，往往会对其DNA检测结果有不同程度的影响，有些甚至因照射无     

“4.10”爆炸案受害人的DNA分析

1案例资料2006年4月10日凌晨2时27分,山西省忻州原平市某公司职工医院1栋二层家属楼车库内发生爆炸。清理现场时发现32具尸体,其中男性16具,女性16具,年龄最大约74岁,最小出生95天。除1具尸体(小女孩)头颅缺损外,余31具尸体容貌尚可辨认,现场还清理出尸块12块。检验编号按先后发现顺序,将12块尸块依次编为1~12号检材。其中1、9号为上肢残端,4、5、6、11为下肢残端,2、3、8为躯干残块,7、10、12各为头皮1块;同时送检的还有两名失踪者母亲的血液纱布各1块,分别编为13、14号检材。DNA检验将1~12号尸块编号拍照,分别取较深层未粘灰尘的组织少…     

杀人案件中接触性DNA检验的分析

<正>1案例资料1.1简要案情2010年9月3日,韦某(男,42岁,残疾)被人发现死于家中,颈部缠有白色电线、白布,旁边有木棍1根,上附暗红色斑迹。现场卧室内凌乱,床上有被人翻动过的枕头,枕头拉链被拉开。死者家中的香烟丢失。初步分析认定该案属于入室抢劫杀人。对现场     

人体脱落细胞DNA检测1例

1案例资料 1.1简要案情 2009年9月21日,石某（女,50岁）在自家中被杀害。现场勘验提取烟头4枚、可疑血迹1处、木棍1根;另在钟表、缸盖（木质）、麦圈盖（铁质）、     

人体接触检材前处理方式对磁珠法提取DNA效果的影响

目的比较3种常见的接触检材前处理方式对磁珠法提取DNA效果的影响。方法收集烟蒂、牙刷、纱线手套各10份;分别采用95℃、70℃直接裂解和TNE、SDS、PK预消化方式进行前处理,再用磁珠法提取纯化DNA,并进行DNA定量,统计提取的接触DNA量和IPC CT值;同时用Sinofiler复合扩增系统进行STR分型检测。结果 3种方法前处理后用磁珠提取的DNA纯度均较高I,PC CT值在26.63～27.19之间。用预消化法获得的DNA量高于裂解法,而95℃裂解与70℃裂解方法提取的DNA量无显著性差异。STR扩增检测结果亦表明,采用预消化法处理的样品STR分型成功率高于裂解法9,5℃与70℃裂解方法处理的样品STR分型成功率无显著性差异。结论人体接触检材采用预消化磁珠法提取DNA,有助于提高STR检验成功率。     

“6.8”特大爆炸案现场重建中的DNA分析

1简要案情2005年6月8日凌晨2时45分,河北省沙河市某铁矿矿工宿舍发生爆炸,造成9人失踪,8人受伤送医院治疗,医院抢救无效死亡1人。现场原有南房4间,东房3间,南房东侧第一间存放雷管和导火索,南房东侧第二间存放炸药,其余房间为矿工宿舍。炸坑位于南房东侧第二间位置,呈球形,直径10m,深1.7m。其余房屋仅遗留有地基。抛出物范围约为150m×200m。炸坑西侧96m处有一“红旗”牌挂锁锁体,锁体东侧50cm处有能打开挂锁的钥匙。根据现场地形和抛出物的数量,将现场分为10个区域,分别标为A、B、C、D、E、F、G、H、I、J。用格子定位法,标示尸块在现场…     

改良IPEP法用于痕量DNA检测的实验研究

目的探讨改良扩增前引物延伸(IPEP)法对痕量DNA样本STR检测分型的效果。方法用改良IPEP法对痕量样品DNA进行全基因组扩增(WGA),扩增产物用实时荧光定量PCR技术定量、用AmpFLSTR~ Indentifiler~试剂盒作基因型检测。结果该方法可增加模板DNA约200~1100倍。基因组DNA不低于0.025ng时,可获得15个STR基因座和Amelogenin性别基因座的分型结果。基因组DNA0.01~0.025ng时,可获得9个以上基因座的分型结果。结论改良IPEP法可有效提高痕量DNA样本STR分型检验的灵敏度,有较好的实用价值。     

法庭科学DNA数据库的建设与应用

<正> 法庭科学DNA数据库建设是一项庞大而复杂的系统工程,其重要意义和必要性在世界各国已经达成共识,成为国际法庭科学界一项紧迫而又长期的工作任务。自80年代末起,许多国家就开始着手DNA数据库建设的规划和准备工作,经过十几年的努力,目前英、美等发达国家已经建成相     

混合血样品检测的克隆测序法研究

<正> 在法医生物物证检验的DNA分析中,经常会遇到多个个体的混合血样的检测,如受害人与犯罪嫌疑人的混合血,受害人阴道上皮细胞与犯罪嫌疑人精子细胞或男性上皮细胞的混合斑等。对这类检材     

应用磁珠法提取陈旧骨骼DNA

目的探讨采用磁珠法提取陈旧骨骼DNA的可行性。方法取经土埋或室外暴露下存放1~5年不等的10根长骨,经水洗、刮净,钻取骨密质骨粉3g,应用EQ1000磁珠试剂盒提取DNA,经复合扩增,ABI 3130XL基因分析仪电泳分离,进行STR分型检测。结果 10根长骨均获得完整的STR分型,电泳图谱基线干净,除个别大片段基因座外,等位基因荧光信号分布均衡性较好。结论采用磁珠法提取陈旧骨骼的DNA,能满足分型要求,可在实际检案中选用。     

建立法医DNA数据库的初步探讨

<正> 本研究在国外成功建库的基础上,经几年的摸索,逐渐形成了一套建立DNA数据库的思路,并初步建立了北京地区法医DNA数据库,与同仁探讨。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 样本 取自本中心1998年至今受理的未破案件现场遗留物中与被害人STR分型结果不同的样本     

Chelex法和两种磁珠法提取接触DNA效果的比较

目的比较Chelex法、DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法对接触DNA的提取效果。方法将稀释为10ng、100ng的标准品DNA,分别采用Chelex法、DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法处理;对30例烟蒂和30例牙刷分别采用Chelex法、DNA IQ磁珠法和EQ国产磁珠法提取DNA,然后进行PCR定量和STR检测。结果Chelex法对DNA的提取无损失,DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法对DNA的提取均有不同程度的损失;烟蒂、牙刷等检材采用Chelex法提取的接触DNA量和IPC CT值显著高于IQ磁珠法、EQ国产磁珠法,但STR检验成功率却低于IQ磁珠法、EQ国产磁珠法。2种磁珠法提取的DNA量、IPC CT值和STR检验成功率无显著性差异。结论污染轻、杂质少的接触DNA检材,用Chelex法提取最为方便快捷;IQ磁珠法、EQ国产磁珠法更适合污染接触DNA检材的提取及自动化操作。     

巧用DNA差异裂解法破案3例

1案例案例12006年8月11日8时，在某山头发现一具男性尸体。经查死者为出租车司机李某，死者上身着灰色衬衫，下身穿黑色长西裤，胸部被锐器刺伤致心脏破裂失血过多休克死亡。技术员在现场附近地面提取到染满血迹的衬衣、牛仔裤、蓝色三角内裤各一条，将该衣服进行检验。DNA检验结果：衣裤及蓝色内裤上血迹经检验均为死者李某的基因分型，两件外衣的衣领及袖口等部位斑迹均未得到基因分型结果。在血染的内裤上发现可疑精斑一处，     

果核微量生物物证DNA检材提取方法的考量

正近年来,犯罪现场物证呈现多样化、微量化的发展趋势。微量物证具有体积小、隐蔽性强、不易察觉、不易毁灭等特点~([1])。目前微量物证DNA检验工作的瓶颈主要在接触性DNA检材的发现和提取上,接触性DNA类生物检材因其DNA含量少、PCR抑制物多、DNA检验成功率低而成为法医DNA检验的重点和难点~([2])。本文结合实际工作中的3起案例,对果核上微量生物物证DNA的提取方法     

两种DNA提取法对签字笔上脱落细胞STR分型比较

目的比较Chelex-100法和硅珠法两种DNA提取法,在签字笔上附着微量脱落上皮细胞分型中的应用效果。方法 17名志愿者每人使用14支签字笔,每支笔每天使用20min,为期1个月,平均分为两组,分别保存1、3、5、7、14、21和28d,同时运用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取签字笔上遗留微量脱落细胞中的DNA,用Identifiler复合扩增系统在AB I 3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型,同时采集上述17名志愿者口腔拭子作为对照。结果以基因座检出个数为指标,使用后签字笔保存1、3、5、7、14、21和28d后,采用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取DNA并进行分型检出的基因座个数相比差异均有统计学意义(P0.01);口腔拭子保存1、3、5、7、14、21和28d后,采用Chelex-100法和硅珠法两种方法提取DNA并进行分型检出的基因座个数相比差异均无统计学意义(P0.05)。结论对于微量检材,应用硅珠法提取的DNA分型效果明显优于Chelex-100法,具有较高的应用价值,而在检材量比较多时区别不明显。     

泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响

目的 研究泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响。方法 泥浆悬液和稀释血混合,制成混有灰尘、泥土的生物样本以模拟现场生物物证,分别用加热裂解和胍盐化学裂解的方式进行细胞裂解,硅珠法提取DNA后用Identifiler Plus试剂盒进行PCR扩增及毛细管电泳检测,并对电泳结果进行比较;用泥浆悬液代替硅珠提取稀释血DNA,反向验证泥土中二氧化硅对硅珠法提取现场生物物证DNA的影响。结果 混有泥浆悬液的4μL、20μL稀释血加热裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 969.7±376.9 RFU、9 706.7±349.8 RFU;混有泥浆悬液的4μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后无法获得完整STR分型;混有泥浆悬液的20μL稀释血胍盐化学裂解,提取扩增后得到完整STR分型,平均峰高1 899.8±801.3 RFU;泥浆悬液代替硅珠提取20μL稀释血得到完整STR分型。结论 泥土中的二氧化硅在胍盐存在条件下会与DNA结合,导致硅珠法提取现场生物物证DNA的回收效率降低。     

1例强奸案件的DNA鉴定分析

1案例某日,某女报案称其酒醉后先后被人强奸。随即提取被害人的内裤、被害人及嫌疑人A和B的血样。同时提取了嫌疑人A和B的短裤。     

DHPLC检测人体线粒体DNA异质性研究

目的建立筛选线粒体DNA异质性的DHPLC方法;检测线粒体DNA高变区的异质性频率。方法选取尸体18例,分别提取血、心、肝、脾、肺、肾、胰腺、脑、肌肉、皮肤、肋骨、指甲及毛发的mtDNA,用DHPLC筛选异质型样本,并用直接测序法进行验证。结果9例个体存在异质性,肌肉组织出现的异质性频率最高。结论正确认识线粒体DNA异质性对于法医学应用领域具有指导意义。