用特异兔抗人精蛋白抗体间接ELISA法检测人精斑

本文报告利用抗人精血清进一步精制而得的特异兔抗人精蛋白抗体进行间接ELISA试验检测人精斑的方法。经用61例各种常见体液斑检材及多人不同浓度的精液、唾液、乳汁、血液等体液稀释液进行测试,结果正确检出精斑的准确率达100％。对混合多人精液稀释液的最高检出稀释度为1/10000,非精斑检材均不出现阳性反应。该法的特异性完全适合精斑确证检验鉴定的需要,其灵敏度明显高于传统的精斑确证检验方法。本法操作简单,无需特殊仪器设备,使用的抗体来源方便,便于应用。     

从口腔擦拭物斑痕中检出人精斑两例

案例1:1989年3月30日夜,某县11岁女孩陈××被人杀死在住处床上,下半身裸体。尸体检验时提取了被害人的阴道内及阴道外口擦拭物共8份,口腔擦拭物1份,其它检材从略。实验室检验,8份阴道内及阴道外口擦拭物浸液对抗人精血清沉淀试验均呈阴性反应,而口腔擦拭物浸液与抗人精血清重叠后仅两分钟便出现白色沉淀环,且愈来愈清晰,15min后白环变宽,并逐渐模糊,40min后消失。参加试验的已知人精斑、人唾液斑、人血痕等对照样本结果均完全正确。经多人次反复     

用酶标抗人精液单克隆抗体A_(10)C_6建立ELISA斑点法快速鉴定人精(液)斑

作者用过氧化物酶标记自己研制的抗人精液单克隆抗体A10C6建立了简便快速鉴定人精斑的ELISA斑点法，直接通过酶标抗体上的酶催化底物显示颜色变化，来判断结果，阳性呈灰色斑点，阴性为无色。其结果只对人精斑浸出液显示阳性斑点，对人的其他组织器官及体液均呈阴性，对动物精斑也无交叉反应，精斑浸出液稀释到1：3200倍仍呈阳性结果。     

单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞的研制及应用

<正> 本文报道根据反向间接血凝(RPHA)原理,用单克隆抗A、抗B、抗H抗体分别在合适的pH值醋酸盐缓冲液中,致敏醛化人“O”型红细胞,制得单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞。用来检验人体液斑的ABH血型物质。单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞对相应分泌型人唾液的凝集效价为8192倍、4096倍     

检验A、B、H血型物质指示红细胞的研制

采用单克隆抗Ａ、抗Ｂ、抗Ｈ抗体致敏人Ｏ型红细胞 ,所获得的检验人体液 (斑 )的Ａ、Ｂ、Ｈ指示红细胞 ,为检验人体液斑迹的ＡＢＯ血型提供了一种新的试剂。在制备过程中 ,抗体载体的选定、致敏所需抗体的浓度和致敏环境的酸碱度都直接影响指示红细胞的凝集效价。经过反复实验探索 ,选择出了理想的条件。1　材料与方法1 1　人Ｏ型红细胞的醛化取多人份混合的人Ｏ型红细胞 ,用生理盐水充分洗涤后 ,将压积红细胞用 4℃预冷 ,含 0 5%戊二醛的ＰＢＳ缓冲液稀释成 10 %的悬液 ,作用 30ｍｉｎ后 ,2 0 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 2 0ｍｉｎ ,弃上清液 ;将压…     

ELISA检测精浆特异蛋白P_(30)鉴定人精斑

<正> 1978年美国Sensabaugh分离出精浆特异蛋白P30,并成功的制备出相应的抗P30血清。1987年我国也研制出抗人精浆特异蛋白P30血清,并应用该种抗血清建立了几种琼脂扩散和电泳方法鉴定人精斑。由于人精液中P30含量不高,平均为1.52±0.676mg/ml,鉴定微量精斑存在困难。为了更有效的提高方法的灵敏度。我们建立了鉴定微量人精斑的ELISA固相P30抗体法,现报告如下。     

人类A、B抗原单克隆抗体的研制和初步应用

作者用人类A、B型红细胞及A、B型分泌型唾液免疫8周龄的BALB/C小鼠,用经免疫的脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,用血凝法筛选出分泌抗A抗体和抗B抗体的细胞株各3株。经一年多的传代,仍然能稳定地分泌抗A、抗B抗体,抗体特异性专一,培养上清液效价能达到2048倍,并初步应用于血液及体液(斑)的检验。     

MMP-11多克隆抗体的制备及其法医学意义

目的制备兔抗人基质金属蛋白酶-11(MMP-11)多克隆抗体,建立用MMP-11抗体检测月经血的可行方法,探讨其法医学意义。方法将用基因工程制备的人MMP-11融合蛋白免疫新西兰白兔,饱和硫酸铵法进行抗体纯化。运用蛋白印迹法检测月经血痕、外周血痕、阴道液斑、精液斑、唾液斑和尿液斑,盲测验证该方法的可靠性。结果高效价的兔抗人MMP-11多克隆抗体检测月经血MMP-11蛋白的阳性率为90.48%(93/105),而外周血痕、精液斑、唾液斑、尿液斑和阴道液斑均未检出MMP-11。结论用自制的抗MMP-11多克隆抗体所建立的蛋白印迹法检测月经血中的MMP-11特异性好,灵敏有效,可用于月经血及外周血的鉴别。     

人血、人精斑快速检验试剂盒的研制及应用

1 人Hb快速检验试剂盒1.1 实验原理本试剂盒采用ELISA双抗体夹心法检测人Hb确证人血.用人Hb单克隆酶标抗体第二抗体.用抗人Hb血清包被微孔板制成固相抗体第一抗体.检测时将检材浸泡液一滴加入微孔中,室温反应10分钟后,倒掉微孔中的液体,用自来水冲洗两次甩干后,加入人Hb单克隆酶标抗体一滴,室温反应10分钟后,倒掉微孔中的液体,用自来水冲洗3次甩干,然后在微孔中加入显色液A、B各一滴,室温避光保存10分钟后观察结果,加入显色液后,阳性为蓝色,阴性不变色.1.2 试剂盒组成(1)微孔板48孔(12孔4条),用上海司法部刑事科学技术研究所生产的抗人Hb血清稀释包被,2℃～8℃干燥保存,有效期内保持稳定.     

矛盾分泌型精斑检验1例

1案情摘要1995年6月某日晚九时许，周某报称被人强奸．从周某被强奸时所穿的短裤上检出人精斑，笔者用中和法（凝集抑制试验）在斑速处检出B血型物质，确定为B血型精斑，而重大嫌疑人赵某血样呈AB型，似被排除作案可能．然而在对其唾液进行ABO血型检验时，意外发现其唾液中仅检出B型物质，未检出AH物质，与体液ABH物质分泌规律不符，表现为矛盾分泌型．其血型物质与精斑检材中血型物质一致，故不能排除其作案可能．案件经全面调查，最后确认赵某即为本强奸案的犯罪分子，且赵某对作案经过供认不讳．2讨论通常根据体液（唾液、精液等）…     

用ELISA检测精液及精斑中精子抗原的研究

本实验应用单克隆抗人精子抗体和酶标记羊抗人精子抗体,采用ELISA方法确定精子抗原成份的存在。对10份新鲜精液,15份精斑进行了验测,其结果阳性率为100%。新鲜精液(精子数约10,000万个/ml)稀释100万倍,精斑浸出液稀释50万倍,均可出现阳性。对唾液斑、尿斑、乳汁斑、阴道斑、汗斑及输精管结扎的精液均为阴性。实验结果表明,本法检验精子抗原具有灵敏度高,特异性好的优点。     

检验人血斑和人精斑免疫扩散杯的应用

司法部司法鉴定科学技术研究所已试制成功了用于鉴别人或动物血斑的“抗人血红蛋白琼脂凝胶扩散杯”和用于鉴别混合斑中有无人精液成份的“抗人精液琼脂凝胶扩散杯”.并于1987年元月14日通过了鉴定.应邀参加鉴定的有著名法医物证学专家孔禄卿教授、郭景元教授、张其英教授、李延吉高级法医师、赵桐茂副所长、杨振修副主任等.经专家们审议一致认为这两种琼脂凝胶扩散杯均具有以下优点:     

应用斑点ELISA快速进行体液(斑)的血型测定

<正> 在法医学上体液(斑)的血型测定一般常规应用中和试验、吸收试验、解离试验及混合凝集反应。这些试验既耗时,又需较高的技术,且要新鲜标准红细胞指示结果。本实验系应用我们自己提纯标酶的抗-A,-B与抗-H单克隆抗体A,利用斑点ELISA来进行体液(斑)的血型测定。通过颜色变化直接判断血型。     

混合斑中精斑ABO血型的检验

<正> 1988年,壹岐裕志等报告了用吸附抗α_2-SGP 血清的硝化纤维素膜(NCF)检验混合斑中的精斑 ABO 血型,但耗时。本文作者通过对此方法的改进,采用常彩琴等研制的抗人精特异蛋白血清(anti-human seminalpeculiar protein,ASPP),采用蛋清粘片热解离法检验混合斑中精斑 ABO 血型,耗时短,效果好。现介绍如下。     

分泌抗人精子单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定

建立两株分泌抗人精子单克隆抗体的杂交瘤细胞株G_8与E_(10),采用洗涤人精子免疫Balb/c小鼠,取免疫脾与Balb/c小鼠的Sp2/0骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞诱生腹水的方法。Elisa,IIF或酶标抗体免疫组化法结果发现,G_8与E_(10)单抗与人精子(射出精子、睾丸、副睾管及输精管中的精子)及睾丸各级生殖细胞均发生反应;与人甲状腺上皮细胞、肾小管上皮细胞、胰腺导管上皮细胞以及胰岛均发生不同程度的交叉反应,与其他33种人体正常组织、9种人体液与分泌液、8种不同种族的动物精子均不发生交叉反应,说明在一般情况下这两种抗体可用于鉴定人类的精液斑以及精液与阴道分泌液的混合斑。两种单抗与人精子的顶体部、赤道部、后核帽、颈部及中段结合,证明精子特异性表面抗原分布于这几个区域。两种抗体均属IgG_1,G_8与E_(10)抗体的效价分别为1:512与1:1024。     

抗人精特异性单克隆抗体的制备及初步鉴定

用正常人精液免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP_2/O融合,得到6株分泌抗人精液单抗的杂交瘤。对其中一株命名为A_(10)C_6的杂交瘤特性,用免疫双扩散鉴定为IgG_1亚类,免疫组化证实它主要作用于人精子,ELISA(双抗体夹心法)证实它只与人精液起反应,而对牛、猪精液,人乳及A、B、O红细胞表面抗原物不起反应,证明它具有较高的特异性,有一定的应用价值。     

三条带模式与稀有等位基因共存样品DNA检验1例

1案例资料 1.1简要案情 2009年12月14日,伊某报案称被人强奸,现场提取受害人伊某的外裤一条,同时提取嫌疑人王某的血样、唾液斑各一份。经初步检验,在受害人的裤子上发现白色可疑斑迹一处,经酸性磷酸酶试验及抗人精PSA金标试剂条检验,结果均为阴性,该斑迹经涂片染色在高倍显微镜下未检见精子,     

应用血膜热解离法检测体液斑ABO血型

血膜热解离法检验体液斑中的ABO型物质，具有操作简单、检验时间短、灵敏、特异性高等优点，而且与中和法相比具有节省检材的特点，在实际检验中取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1.已知血型的人唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱布各1（）份（从医院提取）；2抗A、抗B血清（淮北市公安局血清室提供）；3‘）型血痕纱布（采耳血涂在白绷带纱布上，室温保存，最长为1年）。二、实验方法（一）血膜热解离法检测体液斑ABt）血型l取ZCC长唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱线加入本理盐水3滴浸泡半小时或充分搅拌，取二满分别满于载被片两侧…     

自制与商业化抗人精液蛋白P30金标试剂条的法医学应用比较

目的　检测比较自制和商业销售的抗人精液蛋白P30 金标试剂条 ,探讨它们法医学应用的可靠性。方法　以人精液和人前列腺特异蛋白检测效价及灵敏度 ,以人阴道分泌物、人血清、人唾液和人初乳检测特异性 ,以保存不同年限的陈旧人精斑和斑痕类检材测定检验实际检材的能力。结果　自制抗人精液蛋白P30 金标试剂条效价及灵敏度与商业销售的试剂条中较好的基本相当 ,特异性则相当或好于商业试剂条 ,对非特异性测定均为阴性 ,而商业化试剂条则多有非特异性反应。结论　使用商业金标试剂条 ,要确定其是否合乎法医学检验标准与要求。     

轮奸案中生物检材的提取1例

1案例 某日凌晨，刘某被两男子轮奸。现场提取受害人刘某的血液一份，内裤一条，长筒袜一只；嫌疑人朱某、王某的血液各一份。经初步检验，在长筒袜上未检出人精斑，在内裤前裤腰部、裆部及裆部后侧均检出人精斑，镜检找到精子。对三个部位的检材进行ABO血型检验，裆部后侧为A型，前裤腰部为AB型，裆部为AB型。受害人刘某的血型为O型，嫌疑人朱某血型为A型，嫌疑人王某血型为AB型。