动物病毒的分子生物学研究进展

动物病毒学是发展极为迅速的学科之一,不仅在有关病毒的基本理论方面,而且在病毒研究的实际应用方面,都有了突飞猛进的发展。 (一)动物病毒基础理论和实验技术的研究 1935年Stanley获得了结晶的烟草花叶病毒,翌年Bawden发现这种病毒存在核糖核酸,这就奠定了病毒分子生物学研究的基础。此后五十多年来,分子病毒学已成为病毒学研究中最为活跃的领域之一,并且取得了巨大进展。     

三种单股环状DNA基因组动物病毒简介

病毒通常分为动物病毒、植物病毒、细菌病毒即噬菌体三大群;按核酸类型分为双股RNA病毒、单股RNA病毒、双股DNA病毒、单股DNA病毒。如动物病毒群中的细小病毒科(Parvoviridae)是已知最小的动物病毒,基因组为单股线性DNA;植物病毒群中的双粒病毒组(Geminivirus),基因组为单股环状DNA;细菌病毒群中的微病毒科(Micro-viridae)和丝杆病毒科(Inoviridae),基因组为单股环状DNA,但在动物病毒群中还没有单股环状DNA病毒。近年来随着病毒学的发展,新的病毒逐渐被人们发现和认识,在鸡上分离到鸡贫血因     

几种畜禽的病毒持续感染

一、病毒持续感染 多年以来,病毒学研究者和临床医师主要注意急性发热病毒性传染病,例如脊髓灰质炎、流行性感冒、天花和麻疹等,它们潜伏期短、常继以急性症状,终于痊愈,推测病毒从体内消除。这类重要病毒感染由于疫苗接种,现渐渐扑灭;人们注意力则转移到病毒在宿主体内持续几个月甚至数年的传染病,常不管体内是否已产生抗体。这种持续感染虽然不引起严重急性疾病,但是由于它们长期存在,在免疫抑制患者中的活化,以及伴有慢性免疫性疾病或肿瘤,具有重大的现实意义。     

某些未分类病毒所引起的疾病

近年来,在兽医病毒学方面由于广泛应用电镜观察和现代免疫学方法,取得了显著进展。在引起动物腹泻的病毒研究中,先后发现了主要定殖于消化道的冠状病毒(含抗原不同能分别引起猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻的病毒)、轮状病毒、萼状病毒和星状病毒,以及定殖于消化道和别的器官的粘膜病病毒、腺病毒、肠道病毒和细小病毒。据S.B.Mohanty氏等的意见,因为有的是新分离的病毒,有的缺乏易感实验动物或实验手段,有的是作过分类但后来又否定了等原因,目前尚未分类或分类不合适的病毒有星状病毒(Astro Virus)、博尔纳病毒(Borna Virus)、痒病病原因子(Scrapic agent)、马尔堡病毒(Marburg Virus)和传染性腔上囊病病毒(Infectious bursal disease Virus/IBDV)。这些病毒有的已在国内发现如IBDV),有的尚待进一步探索,现分别叙述于下。     

鸡新城疫病毒的表面结构及其感染基础

在病毒学工作中经常会遇到病毒的感染范围问题,即不同的病毒对动物或细胞有不同的易感力,且同一病毒的株之间也有不同的感染程度,从而出现了毒株间有不同毒力之分。这种毒力的差异或变化,对生产实践或理论研究都有十分重要的意义。由于鸡新城疫病毒(NDV)常被认为是研究病毒学问题的良好模型,所以本文试从其     

干扰现象和干扰素

1935年,首先由Hoskins描写了动物病毒的干扰现象,他报告了黄热病病毒的嗜神经株能保护猴子免受同一病毒的嗜内脏株的致死作用。1937年Findlay和MacCallum发现对猴子只有轻度致病性的Rift山谷热病毒能保护动物免受免疫学上无关的黄热病病毒感染。以后随着病毒学研究的逐渐深入,不断发现病毒之间的干扰现象,特别是发现了干扰素,更引起了各方面学者的兴趣。由于应用干扰现象在医学上有可能获得防治重要病毒感染的新的实际手段,因而在流行病学者和临床医师中所引起的注意特别广泛。     

猪水疱病

近八年中,在意大利、英国、法国、奥地利、波兰等国家和香港地区,发生一种由肠病毒引起的猪接触性传染病,临床表现为口蹄疫综合症的症状。开始出现时,临床上都诊断为口蹄疫,但血清学和病毒学检查结果,均未证明病料中有口蹄疫病毒。英国佩布来特动物病毒研究所以及其他如意大利、美国的有关实验室查明,这种新病的病原系猪的肠病毒。1973年1月,国际兽疫局和欧洲防治口蹄疫委员会组织召开了有本病国家的代表会议,会议建议称     

犬细小病毒SH14株的分离鉴定及其VP2基因的序列分析

为分离犬细小病毒(canine parvovirus,CPV),用疑似犬CPV感染的病犬肠组织研磨液接种猫肾细胞(CRFK),进行病毒分离,并利用常规病毒学和分子生物学方法以及动物回归试验鉴定分离的病毒,并对其VP2基因序列进行测定及分析。结果显示,该病毒能在CRFK细胞上良好生长并产生细胞变圆、脱落等特征性细胞病变;细胞培养物能扩增出CPV的特异性基因组;对病毒的VP2基因序列和推导的氨基酸序列进行分析,结果表明,本研究的分离毒株属于New CPV-2a型,与CPV SH-2/2011株的亲缘关系最近,其核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为99.83%和100%。上述结果表明,成功分离到1株New CPV-2a型犬细小病毒,将其暂命名为SH14株。本研究结果为进一步研究我国犬细小病毒的进化和变异,以及疫苗的研制奠定了物质基础。     

兽医上的病毒疫苗

病毒疫苗或者含有活病毒(活苗),或者含有用各种方法灭能的病毒或病毒产品(灭能苗)。附表总括了用于预防动物病毒疾病的主要疫苗。本文只涉及在动物病毒疾病中以疫苗进行主动免疫的应用方面。关于其生物学原理和各别疫苗的论述,请参阅免疫学、病毒学和传染病学的专书。世界卫生组织第325号技术报告(1966)专门评述了用于人的病毒和立克     

尼帕病毒病及其病原的研究进展

概述了尼帕病毒病在国外的流行状况、尼帕病毒(Nipah virus,NiV)的变异及我国的研究现状,着重阐述了近年来在其基础病毒学、诊断技术及防治方面的研究进展,主要包括病毒蛋白的功能及其相互作用、受体的发现、动物模型、荧光PCR及ELISA诊断技术、抑制NiV感染及治疗等方面的研究成果,为该病的深入研究提供了参考。     

病毒电镜负染色条件试验

近年来,电镜负染色技术广泛应用于病毒学研究,对于观察病毒的形态结构和病毒性疾病的临床诊断有重要意义。为改善负染色方法制备样品的稳定性,提高成像效果,我们在应用电镜负染色法观察病毒的过程中对影响负染色效果的诸因素进行了试验。     

假病毒技术在猪病原研究中的应用

假病毒作为一种安全和便捷的研究工具,在病毒学尤其是在高致病性病毒基础研究和疫病防控研究中发挥着重要作用。本文通过介绍假病毒的定义和特性、分类和构建、常见的包装系统和报告基因,并重点阐述了假病毒在猪病原研究中的应用,旨在为假病毒的发展与猪重要疫病的防控研究提供技术参考。     

狂犬病病毒致病机制的研究进展

在介绍细胞因子在抵抗狂犬病病毒感染的基础上,从狂犬病病毒入侵宿主细胞的机制,狂犬病病毒的5个结构蛋白N、P、M、G、L在狂犬病病毒致病性中的作用以及细胞凋亡在该病毒致病性中的作用等方面综述了狂犬病病毒与宿主的相互作用,旨在为狂犬病的防制和疫苗研制提供新的思路。     

免疫荧光间接法对马鼻疽诊断的研究

免疫荧光技术自1941年Coons等创立以来,不断地发展和改进,已作为一项新的诊断方法在免疫学、细菌学、病毒学等基础理论研究及临床快速诊断方面得到广泛应用,并起到重要作用。以往,国内外对鼻疽病马的诊断多采用鼻疽菌素点眼和补体结合反应试验。近几年来,我所又建立了微量间接血凝、乳胶凝集、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及对流免疫电泳等比较敏感的检测技术。为了探讨免疫荧光技术在鼻疽病马诊断上的应用价值,进行了本试验的研究,并且与常规的CFT及ELISA等方法进行了比较。     

猪生殖与呼吸综合征病毒5′非翻译区序列的反向遗传操作

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,利用突变PCR获得在病毒基因组5′非编码区(5′UTR)和ORF1起始密码子之间插入NdeⅠ的全长克隆pTLNd4,并以此为基础将5′UTR替换为欧洲株的5′UTR,获得全长克隆pTLV8。以体外转录的RNA转染MARC-145细胞。结果显示,pTLNd4产生了细胞病变(CPE),而pTLV8未产生。通过RT-PCR和Northern blot试验,分别对这2株突变病毒的基因组RNA复制和亚基因组mRNA转录水平进行了分析,同时还对pTLNd4进行了病毒学试验。证实,它们与亲本病毒无论从分子生物学水平或病毒学水平都无明显差异;pTLV8虽未产生CPE,但在病毒传代细胞中检测到了基因组RNA,说明替换不同基因型5′UTR的突变病毒虽然丧失了复制能力和感染性,但仍然能够提供病毒RNA合成所需要的顺式调控因子。     

猪生殖与呼吸综合征病毒5''''非翻译区序列的反向遗传操作

以猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)北美株感染性克隆pCBC2为平台进行反向遗传操作,利用突变PCR获得在病毒基因组5'非编码区(5'UTR)和ORF1起始密码子之间插入Nde Ⅰ的全长克隆pTLNd4,并以此为基础将5'UTR替换为欧洲株的5'UTR,获得全长克隆pTLV8.以体外转录的RNA转染MARC-145细胞.结果显示,pTLNd4产生了细胞病变(CPE),而pTLV8未产生.通过RT-PCR和Northern blot试验,分别对这2株突变病毒的基因组RNA复制和亚基因组mRNA转录水平进行了分析,同时还对pTLNd4进行了病毒学试验.证实,它们与亲本病毒无论从分子生物学水平或病毒学水平都无明显差异;pTLV8虽未产生CPE,但在病毒传代细胞中检测到了基因组RNA,说明替换不同基因型5'UTR的突变病毒虽然丧失了复制能力和感染性,但仍然能够提供病毒RNA合成所需要的顺式调控因子.     

对口蹄疫病毒亚单位蛋白分布模式图的讨论

随着X线衍射技术在病毒学研究上的应用,对口蹄疫病毒的结构已认识得比较清楚,有关其亚单位蛋白分布问题在理论上已完全统一。然而笔者在查阅资料过程中发现国内外的书刊中所展示的口蹄疫病毒亚单位蛋白分布模式图未能确切地表达其基本理论。为此,特提出讨论,并绘制出笔者认为正确的病毒模式图。     

一株猪源1型呼肠孤病毒的分离及鉴定

为了研究猪呼肠孤病毒的分子生物学特性,通过在细胞培养液中添加胰酶的方法,从仔猪腹泻粪样中分离、纯化并鉴定了1株能在Vero细胞上稳定产生细胞病变,以细胞颗粒增多、肿胀、漂落等细胞病变为主要特征的猪源1型呼肠孤病毒SHR-A株。根据呼肠孤病毒的理化特性,对病毒进行初步纯化,然后进行电镜观察、核酸提取、RNA电泳、RT-PCR、各病毒基因扩增和克隆测序等常规病毒学鉴定。SHR-A株S1基因的同源性分析和核苷酸系统发育进化树分析表明,该病毒与哺乳动物呼肠孤病毒血清1型的同源性较高,而与血清2型和3型的同源性较低,因此初步判断该SHR-A株为血清1型,为国内首次报道从猪体内分离到血清1型的呼肠孤病毒。进一步分析发现,SHR-A的S1基因全长为1 465bp,其3′-UTR为3型,其余部分则为1型,说明其S1基因是1型和3型的嵌合体,此结果表明,哺乳动物呼肠孤病毒作为RNA病毒,基因重组可能是其除基因突变和基因重排以外的第3种病毒变异进化的重要方式。     

山羊关节炎脑炎病毒的分离与鉴定

山羊关节炎脑炎(Caprine Athritis Encephalitis)以下简称为CAE是80年代初新发现确定的一种山羊慢性传染病,从病毒学上讲是归属于逆转录病毒科的慢病毒亚科,病毒为单链RNA。据国外文献介绍欧、美、亚、澳洲的十几个国家均有本病流行和发生。德国、瑞士、日本也有相似的疾病报道。1980年Rawford等分离出病毒后才正式确定为山羊关节炎脑炎综合征。由于对此病目前尚无有效的治疗和防治办法,所以给奶山羊的养殖业带来很大的经济损失。奉农业部(1987)农(牧检)第389号文指示,我们对从英国进口羊及其后代进行CAE普查和病毒分离,1988年2月首次从血清学上确诊陕西某农场1982年从英国进口的萨能奶山羊中有CAE存在,随后将CAE病毒分离出来,并进行了初步鉴定,病毒株暂命名为“SH-1毒株”。     

动物病毒病的免疫电镜诊断方法

应用电子显微镜(电镜)技术进行病毒病的诊断,是当今病毒学诊断方法中不可缺少的手段,仅管起用时间不长,但是随着电镜制样方法的改进,尤其免疫电镜技术的应用,已越来越引起人们的注意。由于病毒体积很小,超过了光学显微镜分辨率的极限范围,所以要想直接观察到病毒粒子,只有借助于高