法医DNA实验室的DNA污染和防范

DNA污染是产生DNA鉴定结论错误的重要因素,法医DNA实验室要努力去解决这一问题。DNA污染有自身污染、交叉污染、PCR污染3种。法医DNA实验室要采取实验室分区、严格检验操作步骤、对试剂及消耗材料进行质量控制等方法防止发生DNA污染,采取设置对照样本、核查DNA结果、建立DNA排查数据库等方法监测和发现DNA污染。     

载体法检验微量检材DNA

目的解决微量生物检材DNA检验难题。方法采用载体法对已知微量血样DNA进行检验，再与目前高灵敏度的Chelex-100提取的DNA检验的相应结果进行比较。结果载体法针对微量血样的DNA检验。不但能得到正确的STR分型结果．同时在检验灵敏度上比Chelex-100法高出2倍以上。结论载体法可提高微量生物栓材中DNA检出率，且操作简单，在法医检案工作中具有较高应用价值。     

一核酸清洁剂在法医DNA实验室防污染上的应用

法医DNA实验室污染是导致鉴定结论错误的重要因素,DNA实验室应加强实验室管理,重点防范实验室的DNA污染,并解决污染问题。一核酸清洁剂由A、B两种组分构成,两种组分配合使用能破坏DNA结构,防止DNA在PCR中的复制。该核酸清洁剂能有效防范DNA实验室的污染,并解决实验室的污染问题,能很好的应用于法医DNA实验室质量监控管理。本文通过实验对比分析,阐明了该核酸清洁剂的作用效果。     

物证鉴定中的物证污染问题

物证污染是影响物证鉴定结果的最重要因素之一,它会损害物证鉴定结论质量甚至造成错误的鉴定结论。随着以法医DNA检验为代表的物证鉴定技术检验灵敏度的提高,物证污染出现的可能性及其造成的危害程度都显著增加。物证污染有多种形式和来源,可能发生在犯罪现场或实验室。采取适当的污染防范措施可以有效降低物证污染发生的可能性,及时监测和发现物证污染可以将污染造成的危害降到最低。     

dUTP/UNG体系研究进展及法医学应用展望

尿嘧啶-DNA糖基酶（UDG）是一种普遍存在的酶，在DNA损伤修复中起着关键作用。其亚家族I(UNG专一性识别并催化去除DNA中的尿嘧啶。UNG结合d UTP组成的d UTP/UNG防污染体系，是消除PCR产物污染的重要方法。目前法医实验室DNA检验灵敏度不断提高，但是随之而来的污染问题引起研究者的日益关注，在法医学实验室应用d UTP/UNG防污染体系在防污染上具有独特优势，但是目前尚未有相关报道。文章综述了d UTP/UNG防污染体系的技术原理及研究进展，并展望了其在DNA实验室应用的优势和可行性。     

DNA一次和二次接触转移现象试验研究

目的研究手部脱落细胞DNA能否通过握手、接触等方式发生一次转移和二次转移。方法寻找6名志愿者,在其洗手之后两两之间进行握手,然后让每一名志愿者接触已清洗的玻璃杯,最后对上述每一个玻璃杯进行DNA提取检测。结果在志愿者接触过的玻璃杯上,能够提取到因接触而发生一次转移和二次转移的基因座;同等条件下,一次转移获得的基因座数比二次转移获得的基因座数多。结论手部脱落细胞DNA能够发生接触转移现象,而且发生二次转移甚至多次转移是非常有可能的,因此在法医工作中,需要高度重视因DNA二次转移甚至多次转移而带来的污染问题。     

抗污染扩增试剂在法医物证检验中的应用

客观、准确的法医遗传检验结果是作出准确鉴定意见的基础。随着检验设备、扩增检测试剂检验灵敏度日益增加,防控实验室污染、样品污染的压力与日俱增,其中PCR扩增产物对检测结果的污染最难防控。本文测试一款抗污染扩增试剂盒NH-18A,该试剂盒包含16个常染色体STR基因座,1个性别识别基因座（Amel）和一个Y染色体插入缺失基因座（Indel）,NH-18A通过STR复合扩增可得到含有尿嘧啶碱基的DNA片段,该类型的DNA片段在50℃时可被尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG）高效水解,每次新一轮PCR扩增前增加一步50℃保温孵育可以彻底消除既往扩增产物对结果的污染威胁。经实验验证,NH-18A具有优异的抗扩增产物污染能力,且替换碱基扩增不改变DNA分型结果,检测灵敏度和DNA产物片段稳定性不降低,后续电泳分析不受影响。利用此试剂盒可以有效消除扩增产物对鉴定结果的污染。     

海上保险法律问题研究

海上保险有自身的特殊性，关涉海上船舶运输。海上船舶价值昂贵，一旦造成海损，当事人一般要承担沉重的赔偿责任，这就需要保险人来承包以分散运营风险以降低交易成本促进海上贸易繁荣。在海上污染发生时，往往造成更加广泛的受害者和更大的赔偿数额，这直接影响到污染受害第三人的利益，但责任人往往没有动力去投保，这时就需要强制责任保险来消除潜在风险的发生。     

Chelex法和两种磁珠法提取接触DNA效果的比较

目的比较Chelex法、DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法对接触DNA的提取效果。方法将稀释为10ng、100ng的标准品DNA,分别采用Chelex法、DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法处理;对30例烟蒂和30例牙刷分别采用Chelex法、DNA IQ磁珠法和EQ国产磁珠法提取DNA,然后进行PCR定量和STR检测。结果Chelex法对DNA的提取无损失,DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法对DNA的提取均有不同程度的损失;烟蒂、牙刷等检材采用Chelex法提取的接触DNA量和IPC CT值显著高于IQ磁珠法、EQ国产磁珠法,但STR检验成功率却低于IQ磁珠法、EQ国产磁珠法。2种磁珠法提取的DNA量、IPC CT值和STR检验成功率无显著性差异。结论污染轻、杂质少的接触DNA检材,用Chelex法提取最为方便快捷;IQ磁珠法、EQ国产磁珠法更适合污染接触DNA检材的提取及自动化操作。     

环氧乙烷消杀DNA污染效果初探

目的初探环氧乙烷消杀DNA污染的效果。方法收集98例分别含有唾液、皮屑、汗斑、毛发、血斑、肋软骨的法医物证样本,分两组进行环氧乙烷灭菌6h和8h,提取DNA后扩增,使用3130XL或3500XL测序仪检测进行STR分型。结果 EO 6h组44例样本中有2例口腔拭子检出阳性结果,EO 8h组54例样本中有1例毛发检出阳性结果,阳性样本STR图谱表明仅有少量DNA残留,其余生物样本未检测到STR图谱。结论环氧乙烷能有效消杀DNA污染,可适用于DNA检验耗材的灭菌。     

政府信息公开典型案例

2005年11月13日，中国石油吉林石化公司双苯厂发生连环爆炸，当地环保部门声称并未污染松花江水体。但事实上，污染团于一周后已迫近哈尔滨，哈尔滨城内出现“地震”之类的传言，市民恐慌情绪开始滋生。面对迫在眉睫的危机，当地政府于11月21日发布公告，决定全市停水4天，理由是“要对市政供水管网进行检修”。     

硅珠法在纯化污染检材中的应用

目的改进硅珠法在纯化污染DNA样本中的应用方法。方法对硅珠法中的具体步骤进行改进,直接纯化、浓缩Chelex法获得的不纯DNA,采用IdentifilerTM试剂盒进行复合扩增,产物经ABI3100测序仪分型检测。结果纯化后的DNA获得了满意的DNA分型。结论硅珠法能够有效地去除DNA样本中的污染物,直接用于纯化Chelex-100法提取的DNA。     

法医DNA实验室污染问题分析与对策

法医物证学;DNA污染;防控措施     

DNA数据库样本数据分析中常见问题探讨

随着DNA软件的升级换代，DNA数据库数据处理起来更方便快捷，也可减少人为疏忽的发生。本文意在浅析数据库样本数据分析中常见问题的解决方法，以供同行在实践中借鉴。     

焦磷酸测序在法医学中的应用及其评价

利用高灵敏度、全自动化的方法对微量和痕量样本的DNA分型一直是法医学工作的重点与难点。焦磷酸测序技术具有实时监测、高通量、无需胶检测和荧光标记、定量性能好、结果准确和可自动化的优势。本文就焦磷酸测序化学反应测序的原理、流程及其在法医学SNP分型、建立标准化分型体系、大规模人群数据库建设及与其他常用分型技术的比较做一综述。     

腐败餐厨油污纸屑上DNA检验1例

接触类生物检材因其DNA含量少、污染严重、PCR抑制物多、DNA检验成功率低一直是法医DNA检验的难点之一 [1,2].特别是餐厨纸屑等非常规接触类生物检材,在气温较高,气候潮湿的环境极易腐败.本文通过对腐败餐厨油污纸屑的DNA检验,得到一男性常染色体和Y染色体DNA结果,经数据比对分析,锁定犯罪嫌疑人,成功助破尘封2...     

微量DNA的短串联重复序列分型可行性

目的了解微量DNA分型的法医学应用的可行性。方法一系列浓度的DNA模板用PowerPlexTM16System试剂盒扩增,并用ABI377DNA测序仪进行短串联重复序列(STR)的分型。结果当模板量小于250pg时,部分位点发生了等位基因漏扩,并出现非特异带、杂合子扩增不平衡等干扰分型的杂峰。结论上述这些不正常的现象可能会导致分型错误。在对微量检材的DNA检验结果进行判型时一定要小心谨慎,全面考虑。     

焦磷酸测序在法医学中的应用及其评价

利用高灵敏度、全自动化的方法对微量和痕量样本的DNA分型一直是法医学工作的重点与难点.焦磷酸测序技术具有实时监测、高通量、无需胶检测和荧光标记、定量性能好、结果准确和可自动化的优势.本文就焦磷酸测序化学反应测序的原理、流程及其在法医学SNP分型、建立标准化分型体系、大规模人群数据库建设及与其他常用分型技术的比较做一综述.     

焦磷酸测序在法医学中的应用及其评价

利用高灵敏度、全自动化的方法对微量和痕量样本的DNA分型一直是法医学工作的重点与难点.焦磷酸测序技术具有实时监测、高通量、无需胶检测和荧光标记、定量性能好、结果准确和可自动化的优势.本文就焦磷酸测序化学反应测序的原理、流程及其在法医学SNP分型、建立标准化分型体系、大规模人群数据库建设及与其他常用分型技术的比较做一综述.     

焦磷酸测序在法医学中的应用及其评价

利用高灵敏度、全自动化的方法对微量和痕量样本的DNA分型一直是法医学工作的重点与难点.焦磷酸测序技术具有实时监测、高通量、无需胶检测和荧光标记、定量性能好、结果准确和可自动化的优势.本文就焦磷酸测序化学反应测序的原理、流程及其在法医学SNP分型、建立标准化分型体系、大规模人群数据库建设及与其他常用分型技术的比较做一综述.