W/O型黄芩苷纳米乳的制备及质量评价

目的 制备W/O型黄芩苷纳米乳并对其质量进行评价。方法 通过优化处方工艺制得W/O型黄芩苷纳米乳,并对其外观、粒径、载药量及稳定性进行考察,采用高效液相色谱法测定纳米乳中黄芩苷的含量,检测波长为280 nm。结果 W/O型黄芩苷纳米乳为均一透明的液体,平均粒径为（63.40±1.10）nm,载药量为9.5 mg/mL。黄芩苷在12.40～310.00 μg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好,r=0.999 7。高、中、低质量浓度的黄芩苷供试品溶液平均加样回收率分别为99.88%、99.01%、100.31%,RSD均小于0.87%。黄芩苷纳米乳在常温和低温条件下贮存30 d,含量无明显变化。结论 制备的W/O型黄芩苷纳米乳质量稳定可靠,建立的高效液相色谱法操作简便、快捷、重复性好,可用于测定纳米乳中黄芩苷的含量。     

黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞缝隙连接蛋白43表达的影响

目的 研究黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell, GMC)中缝隙连接蛋白43（connexin 43，Cx43）表达的影响。方法 将体外培养的大鼠GMC分为6组：低糖组，高糖组，黄芩苷低、中、高剂量组，蛋白激酶C（protein kinase C, PKC）抑制剂组。培养72 h后，收集细胞并提取细胞总蛋白，Western-blot法检测黄芩苷对高糖环境下GMC中PKC和Cx43表达的影响，用划痕标记染料示踪技术检测黄芩苷对GMC缝隙链接通讯功能(gap junction intercellular communication，GJIC)的影响。〖JP〗结果 Western-blot结果显示，与低糖组比较，高糖组中PKC蛋白表达量显著增加（P<0.01），Cx43蛋白表达量显著减少（P<0.01）；黄芩苷呈剂量依赖性降低PKC蛋白表达水平，升高Cx43蛋白表达水平。划痕标记染料示踪实验结果显示：与低糖组比较，高糖组GMC的GJIC功能缺乏，未向邻近细胞传输；与高糖组比较，PKC抑制剂组罗氏黄荧光染料向划痕两侧邻近细胞传输的层数较黄芩苷各剂量组明显增多，黄芩苷各剂量组呈剂量依赖性地增加传递的层数。结论 黄芩苷可剂量依赖性地抑制高糖环境下GMC中PKC的异常活化，从而上调Cx43表达，恢复GJIC的功能。     

超滤法测定黄芩苷的血浆蛋白结合率

本文采用超滤法测定黄芩苷的血浆蛋白结合率。方法：采用奥泰公司C18色谱柱（250 mm×4.6mm,5μm）,甲醇-水-冰醋酸（65：35：0.1）,检测波长为276nm,流速为1.0ml/min,柱温为30℃。黄芩苷在0.5～10μg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.9996）。黄芩苷平均回收率分别为98.51%。结论：本法简便、准确,可用于测定黄芩苷的血浆蛋白结合率的研究。     

黄芩苷固体脂质纳米粒的制备及其在小鼠体内组织分布研究

目的制备黄芩苷固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticle,SLN),研究其在小鼠体内的组织分布并评价组织靶向性。方法采用乳化蒸发-低温固化法制备黄芩苷固体脂质纳米粒分散液,冷冻干燥成黄芩苷SLN冻干粉。灌胃给予黄芩苷-SLN干粉混悬液与黄芩苷混悬液,测定小鼠各组织中药物浓度,采用DAS 2.0软件拟合药物代谢动力学参数。计算靶向效率(targeting efficiency,Te)、靶向指数(targeting index,TI)和相对靶向效率(relative targeting efficiency,Rte),分析比较两种制剂在小鼠体内组织分布情况。结果小鼠灌胃黄芩苷-SLN冻干粉后,肝组织的Te最大;TI的大小顺序为脾、心、肝、脑、肾、肺,且仅脾、心的Rte为正值。结论黄芩苷-SLN肝组织分布量最大,脾组织靶向性较强,对黄芩苷临床应用具有重要意义。     

黄连生物碱对HEK293-OATP1B3细胞转运黄芩黄酮活性的影响

目的：探究黄连生物碱对OATP1B3介导的黄芩苷、汉黄芩苷的转运的影响。方法：采用稳定转染OATP1B3的HEK293细胞，以黄芩苷和汉黄芩苷为底物，小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀作为抑制剂，进行药物转运实验，并进行含量测定，考察黄连生物碱对HEK293-OATP1B3细胞转运黄芩苷和汉黄芩苷的影响。结果：抑制剂组的黄芩苷、汉黄芩苷摄取量均低于对照组（OE组）。结论：黄连生物碱可抑制OATP1B3对黄芩苷和汉黄芩苷的转运。     

UHPLC-MS/MS同时测定黄芩清热除痹胶囊中6种活性成分

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱同时测定黄芩清热除痹胶囊中6种成分（黄芩苷、栀子苷、木犀草素、齐墩果酸、薏苡素、苦杏仁苷）含量的方法。方法 采用Phenomenex Luna Omega C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.6 μm）,以含10 mmol/L甲酸铵的0.1%甲酸水溶液（A）-0.1%甲酸的乙腈（B）为流动相,进行梯度洗脱,柱温为30 ℃,流速为0.25 mL/min,进样量5 μL,分析时间10 min。采用电喷雾离子源,以多反应监测模式在负离子条件下进行检测。结果 所测6种活性成分在测定浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 0）,精密度、稳定性和重复性良好,平均加样回收率为98.62%~103.7%,RSD≤2.70%。结论 该方法准确度高、分析速度快、检测限低、重复性高,适用于黄芩清热除痹胶囊质量控制。     

乳糜微粒流对黄芩苷纳米乳动物体内组织分布的影响研究

目的 探究乳糜微粒流对黄芩苷纳米乳大鼠体内淋巴组织的分布,初步阐明黄芩苷纳米乳具有淋巴靶向性的机制.方法 利用高效液相色谱法测定生物样品中黄芩苷浓度;大鼠分别灌胃给予黄芩苷纳米乳和黄芩苷混悬液,剂量为144.0 mg/kg;建立大鼠乳糜微粒流阻断模型,考察乳糜微粒介导的跨膜转运对黄芩苷纳米乳在淋巴组织器官分布的影响.结果 与未阻断组相比,大鼠体内乳糜微粒流的阻断,可影响黄芩苷纳米乳组大鼠体内脾、胸腺和淋巴结血药浓度-时间曲线下面积、药峰浓度等参数,但未对黄芩苷混悬剂组大鼠的体内药物代谢动力学参数产生影响.结论 黄芩苷纳米乳刺激乳糜微粒的分泌,增加药物经淋巴途径的转运量,药物富集于淋巴器官,可能是黄芩苷纳米乳靶向淋巴器官的主要机制.     

右旋布洛芬缓释片的含量测定及体外释放特性研究

目的建立右旋布洛芬缓释片的含量测定方法，并评价其体外释放特性。方法采用高效液相色谱法测定缓释片含量，采用紫外分光光度法对缓释片的体外释放特性进行研究。结果右旋布洛芬在4-100μg／ml范围内线性关系良好（r=0．9995），平均回收率为99．44％，RSD=0．94％。释放行为显示右旋布洛芬缓释片呈零级释放，药物释放被延长到12h。结论本方法准确可靠，重现性好，灵敏度高，可用于右旋布洛芬缓释片的质量控制。所研制的右旋布洛芬缓释片达到了缓慢释放药物的目的。     

汉防己甲素脂质体包封率的测定

目的:建立汉防己甲素脂质体包封率的测定方法.方法:采用葡聚糖凝胶柱分离脂质体与游离药物,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)测定脂质体中汉防己甲素的包封率.结果:葡聚糖凝胶G50可有效分离脂质体和游离药物;汉防己甲素在2～12 μg/ml时与峰面积线性关系良好,y=18 368 x-897.33,r=0.999 5.结论:HPLC法简单可行,结果准确,可用于测定汉防己甲素脂质体的包封率.     

黄芩苷诱导人乳腺癌细胞株MDA-MB-231凋亡作用的研究

目的:探讨植物雌激素结构类似物黄芩苷诱导人乳腺癌雌激素受体阴性细胞株MDA-MB-231(ER-)凋亡的作用.方法:MTT法测定不同剂量黄芩苷对MDA-MB-231细胞株增殖的抑制作用;透射电镜检测细胞凋亡及黄芩苷的作用;流式细胞术分析黄芩苷对MDA-MB-231细胞周期变化的影响;RT-PCR技术分析黄芩苷对MDA-MB-231细胞bcl-2、bax mRNA水平表达的影响.结果:在一定剂量范围内,黄芩苷对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用呈时效、量效关系,IC50为151 μmol/L;透射电镜结果显示黄芩苷作用细胞48 h后出现明显的凋亡现象,流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率随着黄芩苷的浓度增加而增大,并阻滞细胞于G2/M期;RT-PCR结果表明,黄芩苷作用细胞后bax mRNA水平的表达增加而bcl-2的表达降低. 结论:黄芩苷可以抑制MDA-MB-231细胞的增殖,诱导细胞凋亡的发生,可能是通过调节bcl-2、bax的表达和干涉细胞周期而发挥诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的作用.     

RP-HPLC法测定小柴胡颗粒中黄芩苷含量

目的 :以RP HPLC测定小柴胡颗粒中黄芩苷含量。方法 :黄芩苷以超声法直接用甲醇提取。色谱条件为 :AlltimaC18色谱柱 ( 2 50mm× 4 .6mm ,5μm ) ;流动相为甲醇 水 磷酸 ( 60∶4 0∶0 .2 ) ;柱温室温 ;检测波长 2 80nm。结果 :黄芩苷在 0 .0 6～ 0 .60 μg线性关系良好 ,平均加样回收率为 10 0 .2 3% ,RSD =1.70 % (n =5)。结论 :本法快速、准确、重现性好 ,可用于本制剂质量控制。     

青藤碱微乳的体外释放度考察

目的 制备青藤碱微乳,并考察微乳的体外释放度.方法 采用桨法,对青藤碱微乳进行体外释放实验研究.结果 微乳在24 h内缓慢释放,前6 h累积释放度对时间的平方根符合 Higuichi方程.结论 青藤碱微乳体外释放性能良好,有一定的缓释作用.     

胆瘀通颗粒质量控制方法的研究

目的:建立胆瘀通颗粒的质量控制方法。方法:采用TLC法对本品的茵陈、柴胡、黄芩、大黄进行定性鉴别;采用HPLC法测定黄芩苷的含量。结果:薄层斑点清晰,阴性对照无干扰;黄芩苷的量在0.2～1.0μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为99.6%,RSD为0.99%(n=5)。结论:所建立的定性定量方法专属性强,重复性好,可以作为胆瘀通颗粒的质量控制。     

高效液相色谱法测定毛支清口服液中黄芩苷含量

目的 建立毛支清口服液中黄芩苷含量的测定方法.方法 选用Venusil MP C18分析柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇-水-磷酸(60∶40∶0.2)为流动相,检测波长为280 nm,流速为1.0 ml/min.结果 黄芩苷进样量为0.5～3.0 μg时与峰面积具有良好的线性关系,回归方程为:Y=3....     

正交设计优选黄芩栀子合煎工艺

目的 正交设计优选黄芩栀子合煎工艺。方法 采用正交试验法，考察加水量、煎煮时间、煎煮次数对黄芩、栀子合煎液中栀子苷含量、黄芩苷含量及干膏得率的影响。结果 优选出的最佳提取工艺为：加8倍量水，提取3次，每次0.5 h。结论 所优选的工艺稳定、合理、可行，可为合理开发含有黄芩、栀子药对的复方制剂提供理论依据。     

新藤黄酸温敏原位凝胶剂的设计与研究

目的 制备注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂。方法 运用星点设计-效应面优化法确定注射用新藤黄酸温敏原位凝胶剂的最佳处方,并采用高效液相法对其体外释放进行含量测定。结果 最佳处方为0.2%新藤黄酸+18.26%泊洛沙姆407（F127）+7.4%泊洛沙姆188（F68）+0.5%苯甲醇,胶凝温度为35.4 ℃。新藤黄酸温敏原位凝胶的体外释放方程为 Y=0.983 5X+4.028, R=0.999 3, 符合零级释药。结论 星点设计-效应面优化法能很好地优化该制剂处方,优化后处方的体外释药稳定,达到预期要求。     

黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察高糖环境下黄芩苷对肾小球系膜细胞株HBZY- 1增殖和凋亡的影响。方法 采用MTT法观察高糖环境下3种接种浓度的肾小球系膜细胞株HBZY- 1的生长情况，确定该细胞的最佳接种浓度和用药时间点，继而采用MTT法检测黄芩苷对肾小球系膜细胞增殖的影响；运用倒置荧光显微镜观察黄芩苷对肾小球系膜细胞形态的影响；采用流式细胞仪检测不同浓度黄芩苷对肾小球系膜细胞凋亡的影响。结果 高糖环境下，肾小球系膜细胞的最佳接种浓度是2×103/mL，最佳用药时间是细胞培养48 h后。随着浓度升高，黄芩苷抑制HBZY- 1细胞增殖的作用增强。流式细胞仪检测结果显示，高糖环境下，肾小球系膜细胞总凋亡率随着黄芩苷作用剂量的增大而升高，黄芩苷浓度为6.25 μmol/L时，HBZY- 1细胞的总凋亡率与模型对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；当黄芩苷浓度增至12.5 μmol/L时，HBZY- 1细胞的总凋亡率开始显著大于模型对照组（P<0.05）。结论 黄芩苷能够抑制高糖环境下肾小球系膜细胞株HBZY- 1的增殖，在一定浓度范围内呈现明显的量效关系。     

高效液相色谱法测定复方鱼腥草颗粒中黄芩苷和黄芩素含量

目的 建立同时测定复方鱼腥草颗粒中黄芩苷和黄芩素含量的方法。方法 采用高效液相色谱法，以Thermo-C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）为色谱柱，以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相，进行梯度洗脱，流速为1.0 mL/min，进样量为10 μL，检测波长为274 nm，柱温为25 ℃。结果 可在30 min内完成对黄芩苷和黄芩素的色谱分析，测得的黄芩苷的线性范围为0.069～0.34 mg/mL，r=0.999 8，平均回收率为99.5%（RSD=3.33%）；黄芩素的线性范围为0.005～0.025 mg/mL，r=0.999 4，平均回收率为102.7%（RSD=2.44%）。结论 所建立的高效液相色谱法方便快捷、准确、简便、重复性好，可用于复方鱼腥草颗粒的质量控制。     

HPLC法测定复方鱼腥草软胶囊中黄芩苷的含量

复方鱼腥草软胶囊是由鱼腥草、黄芩、板蓝根、连翘、金银花等药物组成.具有清热解毒之功效,主要用于外感风热引起的咽喉疼痛、急性咽炎、扁桃腺炎等有风热症候者.本胶囊系根据<中华人民共和国药典>2000年版一部收载"复方鱼腥草片"改变剂型而来,原产品质量标准中未制订含量测定项,笔者采用HPLC法测定胶囊中黄芩有效成分黄芩苷的含量,试验结果表明:本法灵敏、准确、专属性强、重现性好,可作为复方鱼腥草软胶囊质量控制方法.现将研究内容报告如下.     

酶水解对亳菊总黄酮中黄酮苷元的影响

目的 体外研究烘干过程中酶对亳菊总黄酮成分的影响,为亳菊产地加工和炮制工艺提供前期研究基础。方法 模拟亳菊烘干过程,采用β-D-葡萄糖苷酶酶解亳菊总黄酮,以金合欢素、芹菜素、木犀草素3种黄酮苷元含量为指标,分析酶解反应对3种黄酮苷元含量变化的影响。结果 酶解反应后,亳菊总黄酮中木犀草素、芹菜素、金合欢素3种黄酮苷元的含量升高。结论 β-D葡萄糖苷酶可酶解亳菊中黄酮类成分,使其中黄酮苷元含量升高,β-葡萄糖苷酶水解亳菊总黄酮是烘干过程中黄酮苷元含量升高的原因之一。