鸡传染性腔上囊病卵黄抗体制备工艺中最佳沉降脱脂条件的确定

采用沉降脱脂分离技术 ,从鸡超免疫卵黄中提取传染性腔上囊病卵黄抗体免疫球蛋白 (IgY)。通过正交试验 ,确定乙酸乙酸钠缓冲液为最佳沉降脱脂缓冲液。用 pH值为 5 .2 ,浓度为 0 .12mol L的乙酸 乙酸钠缓冲液 9倍稀释卵黄液 ,在约 30 0r min下搅拌 10min后 ,置于 4℃下沉降 34h ,沉降上清液中IgY含量占卵黄中蛋白总量的 2 5 %左右 ,脱脂率>98%,活性损失可忽略不计。     

隐孢子虫病抗体治疗的研究进展

从超免疫初乳、超免疫血清、超免疫卵黄和单克隆抗体几个方面概述了国内外隐孢子虫病抗体治疗的研究现状,并介绍了预防隐孢子虫病疫苗的研究成果,为进一步防治该病提供了参考.     

鸡滑液囊支原体卵黄抗体的制备与鉴定

为了制备高效价特异性的鸡滑液囊支原体卵黄抗体,为鸡滑液囊支原体病防治的研究探索新的方法和途径,用鸡滑液囊支原体灭活疫苗免疫健康产蛋母鸡,获取含有大量卵黄抗体的卵黄,利用水稀释法和盐析法对卵黄进行粗提,再利用超滤及透析方法进行提纯。ELISA检测免疫后不同时期血清抗体和提纯后卵黄抗体的效价,结果显示,卵黄抗体的变化趋势与血清抗体基本一致,但卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,SDS-PAGE分析结果显示,在约25 ku和65 ku处出现清晰的两条带,Western-blot结果显示,纯化后的卵黄抗体能与牛支原体抗原悬液发生特异性结合,具有良好的免疫反应性,提纯后的卵黄抗体浓度达7.2 mg/mL,最高效价达到了1∶10~4以上。结果表明,本试验制备的鸡滑液囊支原体卵黄抗体具有较强的特异性,从而为鸡滑液囊支原体的制备和卵黄抗体在鸡滑液囊支原体病上的应用奠定了一定基础。     

鸡卵黄新城疫血凝抑制抗体微量法试验

众所周知,在免疲鸡产下的卵内,含有两种抗体,一种是卵黄抗体IgG,来源于母鸡血液中;另一种是卵白抗体IgM和IgA,来源于母鸡输卵管内的分泌液。所以,在1日龄雏鸡体内,含有IgG、IgM和IgA3类抗体,统称为母源抗体。其中,血液中的母源抗体量,可以通过血清HI试验测知,也可以通过卵黄HI试验来估量。据大量试验资料证明,卵黄HI抗体量,与母鸡血清HI抗体量相一致,而稍高于1日龄雏鸡血清HI抗体量。所以,只要检测卵黄样HI抗体量,就可以了解母鸡群的免疫状态和雏鸡母源抗体水平。检测卵黄抗体的方法,有试管法和微量法两种,其中试管法所用卵黄样较多,试验液总量大,混浊度也较大,吸取卵黄样所用的吸管内壁粘附了     

蛋鸡血清与卵黄中禽流感病毒抗体的相关性

用禽流感 (AI)H9N2油乳剂灭活疫苗免疫非免疫蛋鸡 ,并于免疫后第 0、3、5、7、9、11、13、15、17、19、2 1、30d分别测定血清及卵黄中的AI血凝抑制试验 (HI)及琼脂扩散凝集试验(AGP)抗体。结果显示 ,免疫后第 7d卵黄中即可检出HI及AGP抗体 ,以后逐渐上升 ,在免疫后第 19～ 2 1d达高峰值 ,与血清的HI抗体水平接近 ,差异不显著 (P >0 .0 5 )。表明通过对鸡蛋卵黄AIV抗体检测 ,可以进行AI的疫情监测 ,但卵黄抗体检测具有一定的滞后性     

鸡传染性法氏囊病和新城疫二联高免卵黄抗体液的研制及应用

鸡传染性法氏囊病和新城疫二联高免卵黄抗体液的研制及应用申胤生，张志珍，赵永华，黄明睿，张晓平（陕西省畜牧兽医总站西安７１００１４）作者用自行研制的鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）二联高免卵黄抗体液，两年来对全省各地确诊为ＩＢＤ和ＮＤ单独感染...     

抗非洲猪瘟病毒VP73蛋白鸡卵黄抗体的制备及鉴定

为研制非洲猪瘟的诊断试剂,将原核表达的非洲猪瘟病毒VP73融合蛋白纯化后,作为抗原免疫蛋鸡,先后用饱和硫酸铵和硫酸钠对卵黄抗体(IgY抗体)进行分离提取,制备抗非洲猪瘟病毒VP73蛋白的特异性IgY抗体。对初步提纯的IgY抗体进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定,并用间接ELISA测定IgY抗体的效价。结果显示,提纯后的IgY抗体有1条重链和1条轻链,分子质量分别约为65ku和26ku;IgY抗体可与非洲猪瘟病毒VP73蛋白发生特异性反应,在约71ku处出现特异性杂交条带;间接ELISA测定的IgY抗体效价约为1∶8 192;浓度测定结果显示,每1mL卵黄液可得到9.2mg卵黄抗体。结果表明,用表达的VP73蛋白作为免疫原制备的特异性IgY抗体具有免疫反应原性,可用于研制非洲猪瘟的诊断试剂。     

鸡蛋黄血凝抑制抗体的提取和测定

以往主要是根据鸡血清中血凝抑制(HI)抗体滴度的高低来确定新城疫疫苗的接种时间。但是采血捉鸡不仅耗费人力物力,而且对鸡群干扰很大,影响其产蛋量。后来有人报道,用鸡蛋代替血清,通过测定卵黄中的抗体来反映鸡群HI抗体水平,取得了一定效果。为了提取卵黄中的HI抗体,消除卵黄中其它物质对HI试验凝集图形的影响,找出卵黄提取液与血清的HI抗体几何均数(HI—GMT)的关系,以便以鸡蛋取代血清,我们在禽病学专家Yamamoto,R.的提示下,用氯仿将卵黄处理后再进行抗体测定,结果很满意。 (一)材料与方法     

鸡六联超免疫卵黄抗体液的制备及应用

鸡新城疫、鸡传染性腔上囊炎、鸡白痢、鸡伤寒、鸡副伤寒和鸡大肠杆菌病是危害养鸡业最严重的传染病 ,常造成巨大的经济损失。笔者与甘肃省白银市、兰州市等地的一些鸡场密切配合 ,利用当地分离鉴定获得的毒株 ,试验制备了防治上述 6种疫病的超免疫卵黄抗体液 ,用于一些鸡场和专业户对这几种传染病的防治 ,显著降低了这些疫病的发病率和鸡群的死亡率。1　材料1.1　供蛋鸡　选刚开产、产蛋率高的母鸡 10 0只 ,经检测无可经卵传递的病原体 ,隔离饲养。1.2　抗原　免疫鸡所用抗原包括用白银、兰州等地分离获得的传染性腔上囊炎病毒制备的组织灭…     

高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪冻精质量的影响

为探究高压均质(HPH)处理鸡蛋卵黄对猪精液冷冻效果的影响。选取Tris—柠檬酸—葡萄糖基础稀释液,以未处理的鸡蛋卵黄(20%EY)为对照组,添加经HPH处理后的鸡蛋卵黄(20%EY)为试验组,制成Ⅰ液和Ⅱ液,冷冻-解冻后分别对猪精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性、抗氧化指标及DNA完整率和凋亡指标进行检测。结果显示,经HPH处理能有效提高猪精子冻后质量。精液解冻后精子活力、活率、顶体完整率、质膜完整率分别为84.32%、86.71%、68.92%、59.09%,较对照组分别提高了13.7%、16.58%、6.5%、4.88%(P0.05)。与对照组相比,试验组的MDA和ROS较对照组均有所上升(P0.05),SOD较对照组有所下降(P0.05)。但冻后精子NO和NOS含量显著降低(P0.05)。试验组的精子解冻后DNA片段完整性较对照组明显提高(P0.05),凋亡率下降(P0.05)。结果表明,HPH处理鸡蛋卵黄能有效提高猪精液冷冻后质量。     

白翅浮鸥三种亚型禽流感病毒卵黄抗体的调查分析

为了解大庆龙凤湿地优势物种白翅浮鸥对禽流感病毒的天然被动免疫状况,于2010年春季采集白翅浮鸥巢卵144枚,采用血凝抑制试验检测了H1、H5、H9三种亚型禽流感病毒的卵黄抗体。结果表明,龙凤湿地白翅浮鸥种群H1、H5、H9三种亚型禽流感病毒卵黄抗体的阳性率分别为100%、38.89%和52.78%,平均卵黄抗体效价分别为6.19、3.76和3.81(lb)。表明白翅浮鸥繁殖个体对H1、H5、H9三种亚型禽流感病毒的感染或接触比较频繁,提示有必要进一步对其种群的病毒携带情况进行调查研究。     

运用卵黄检测鸡减蛋综合征抗体

运用卵黄检测鸡减蛋综合征抗体陈明勇万永红陆建培（中国农业大学动物医学院北京１０００９４）鸡减蛋综合征是导致产蛋鸡产蛋率下降的一种病毒性传染病。减蛋综合征病毒属于禽腺病毒属，主要感染产蛋鸡群，表现为群发性的产蛋量减少，产软壳蛋、畸形蛋，蛋质低劣等。目前...     

珠江三角洲及其附近地区鸭肝炎流行动态调查

调查了珠江三角洲地区近20个县、市鸭肝炎(DH)的流行情况、临床表现、病理变化和免疫防制现状.从本调查的结果可见,该地区DH多发区的雏鸭以7～21日龄发病最多,最早的2～3日龄,最迟的在樱桃谷鸭及其改良品种可见于35日龄,在番鸭可见于60～70日龄,个别番鸭在200日龄还有零星发病.3～14日龄发病的雏鸭死亡率在60%～95%,15～35日龄发病的死亡率在15%～40%,35～70日龄发病的死亡率在5%～15%,更大日龄发病的死亡率在5%以下.根据防治效果,许多用标准DHV-Ⅰ型弱毒疫苗免疫的鸭群,或在发病初期注射标准DHV-Ⅰ型超免疫卵黄抗体的鸭群,其疫情还不能控制,往往需在发病初期用本地病鸭分离的DHV作疫苗,进而制备超免疫卵黄抗体及时治疗,才能将鸭群的死亡率控制在2%～8%.提示该地区原来流行的DHV-Ⅰ型野毒株有可能发生抗原毒力变异或已传入DHV-Ⅱ型或DHV-Ⅲ型.     

应用酶联免疫吸附试验检测鸡毒霉形体卵黄抗体

应用酶联免疫吸附试验检测鸡毒霉形体卵黄抗体郭建华陈明勇陈德威（中国农业大学实验动物所北京１０００９４）血清平板凝集试验（ＳＰＡ）、血凝抑制试验（ＨＩ）及酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）已用于鸡毒霉形体（ＭＧ）血清抗体的检测，但这些方法都需要采集血清，使...     

鸡传染性喉气管炎病毒的荧光抗体检测

建立了一种鸡传染性喉气管炎 (ILT)的荧光抗体检测技术 ,用荧光素标记ILT兔源超免疫血清抗体 ,对 15份人工感染ILT病鸡、5份ND病鸡和 10份健康鸡的气管分泌物进行了检测 ,并对该技术做了特异性和敏感性测定。结果显示 ,人工感染ILT病鸡的阳性检出率高达10 0 % ,ND病鸡和健康鸡的阳性检出率均为 0 ;该ILT兔源超免疫血清荧光抗体检测技术特异性强、敏感性高     

卵黄抗体液口服治疗鸡传染性法氏囊病

卵黄抗体液口服治疗鸡传染性法氏囊病司福存李久庆（山东省滕州市畜牧兽医技术服务中心２７７５００）作者用卵黄抗体液口服治疗鸡传染性法氏囊病，经临床试验并与注射法相比较，效果与注射法相同，但口服法比注射法省工、省时、使用方便，且避免了应激反应。１材料与方法...     

抗鸡传染性腔上囊病和新城疫二联超免卵黄抗体的研制和应用

抗鸡传染性腔上囊病和新城疫二联超免卵黄抗体的研制和应用＠肖鸿展＠刘国财￥甘肃省白银市畜牧兽医中心＠滕振文￥甘肃农业大学＠张文惠￥兰州医学院抗鸡传染性腔上囊病和新城疫二联超免卵黄抗体的研制和应用肖鸿展刘国财（甘肃省白银市畜牧兽医中心７３０９００）滕振文（甘肃...     

口蹄疫超免疫血清的制备

超免疫血清 (ｈｙｐｅｒｉｍｍｕｎｅｓｅｒｕｍ )是一种含有高效价特异性抗体的动物血清。口蹄疫 (ＦＭＤ)超免疫血清是采用口蹄疫病毒(ＦＭＤＶ)佐剂抗原作免疫原 ,通过逐次增大抗原含量多次免疫豚鼠 ,使豚鼠不断产生免疫应答 ,从而获得抗ＦＭＤＶ的高效价特异性抗体血清。该血清主要用于ＦＭＤ的中和试验、补体结合试验 ,也可用来生产诊断制剂 ,用于ＦＭＤＶ型的鉴定及易感动物的被动免疫。　　我们通过试验 ,以ＦＭＤＶ和弗氏不完全佐剂制备抗原结合物免疫豚鼠 ,定期采血 ,用补体结合试验监测抗体水平 ,使ＦＭＤ超免疫血清效价达到 1∶1…     

抗贝氏隐孢子虫卵黄抗体的制备与鉴定

为分析抗贝氏隐孢子虫的免疫机制,本研究将纯化的贝氏隐孢子虫卵囊经处理后制备成免疫抗原,经鸡翅下及大腿内侧肌肉多点注射免疫6次150日龄产蛋海兰鸡,每次免疫间隔为15~20 d,以制备特异性抗贝氏隐孢子虫(Cryptosporidium baileyi)卵黄免疫球蛋白(IgY)。结果显示,初次免疫后第120天,IgY效价达到1∶25 600,经免疫荧光法鉴定可识别贝氏隐孢子虫卵囊。用间接ELISA和间接免疫荧光试验比较测定IgY抗体对贝氏隐孢子虫、牛安氏隐孢子虫、猪等孢球虫及猪弓形虫的抗原发现,得到的IgY抗体能特异性识别贝氏隐孢子虫。间接ELISA法测定不同温度、不同pH下IgY的活性发现,制备的IgY抗体具有较好的热稳定性和一定的耐酸、耐碱性。以上结果表明,贝氏隐孢子虫卵囊抗原免疫蛋鸡可制备高质量的特异性IgY抗体,这为进一步应用抗隐孢子虫特异性IgY抗体治疗与诊断隐孢子虫病奠定基础。     

甘南地区无卵黄腺绦虫种类调查

甘南地区无卵黄腺绦虫种类调查袁正朴吴国学（执笔）郭淑珍王文飙（甘肃省甘南州畜牧兽医研究所合作７４７００甘肃省甘南地区羊无卵黄腺绦虫感染率较高，不同年龄羊均可感染，因此给畜牧业的发展造成了较大危害。鉴于该地区尚无有关无卵黄腺绦虫分类调查的报道，特进行了...