间接血凝法检测水牛伊氏锥虫病血凝抗体消长的研究

应用微量间接血凝诊断法诊断耕牛伊氏锥虫病的试验,于1978年初获成功。经疫区试用,认为是一种特异性好、敏感性强,方法简便、经济、重复性良好的诊断方法。目前已推广使用。 为了控制和消灭耕牛伊氏锥虫病,进一步探明锥虫病病牛血凝抗体消长规律和治疗以后     

间接血凝法检测母猪初乳和娩出仔猪脐带血中的猪瘟抗体

(一)方法 在母猪临产前的2～3个月,用成都药械厂生产的猪瘟弱毒冻干苗,按其使用说明书方法,进行猪瘟预防注射,待母猪产仔后采取初乳,放于冰箱中静置过夜,翌日缓缓吸出中下层乳清,经1000～1500rpm离心沉淀1～2分钟后,用巴氏吸管吸取乳脂层下乳清,再按倍比稀释后,用四川省兽医防疫检疫总站制备的猪瘟致敏绵羊红细胞进行间接血凝试验。以检测其抗体滴度;同时对娩出的乳猪,在断脐带时,采取脐带血,沉淀分离血清,进行猪瘟抗体检测。     

鸡蛋黄血凝抑制抗体的提取和测定

以往主要是根据鸡血清中血凝抑制(HI)抗体滴度的高低来确定新城疫疫苗的接种时间。但是采血捉鸡不仅耗费人力物力,而且对鸡群干扰很大,影响其产蛋量。后来有人报道,用鸡蛋代替血清,通过测定卵黄中的抗体来反映鸡群HI抗体水平,取得了一定效果。为了提取卵黄中的HI抗体,消除卵黄中其它物质对HI试验凝集图形的影响,找出卵黄提取液与血清的HI抗体几何均数(HI—GMT)的关系,以便以鸡蛋取代血清,我们在禽病学专家Yamamoto,R.的提示下,用氯仿将卵黄处理后再进行抗体测定,结果很满意。 (一)材料与方法     

用间接血凝反应检测猪瘟抗体的研究

间接血凝是一种快速、灵敏、简单、可靠的血清学方法,我国兽医界,近年来已逐步应用于畜禽传染病,寄生虫病的诊断方面。笔者于1982年对这一方法进行了探索,以用作检测猪瘟抗体,当的所用抗原,系以石门系猪瘟强毒接种健康猪,采发病典型猪的淋、脾,将其磨碎冻融,浸出液经浓缩后作为抗原,致敏绵羊红细胞以检测猪瘟抗体,曾获得成功。但因来源有限,后乃改用牛肾细胞猪瘟毒作抗原,现将其试验情总结如下。     

用反向间接血凝抑制法检测鸡传染性法氏囊病血清抗体

用反向间接血凝抑制法检测鸡传染性法氏囊病血清抗体黄建生樊晓京朱益群（江苏省启东市畜牧兽医站２２６２００）笔者利用江苏农学院畜禽病原微生物研究室提供的鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）单克隆抗体致敏的红细胞，应用反向间接血凝抑制试验（ＲＰＨＩ）检测ＩＢＤ血清抗...     

应用IHA检测实验感染伊氏锥虫山羊血清抗体的消长动态

早在1941年,印度的Kuppaswamy就通过研究认为山羊与牛都可以看作是伊氏锥虫的保虫宿主。本研究的目的是,应用间接血凝试验(IHA)来检测人工感染伊氏锥虫的山羊血液中抗体变化的规律,从而为山羊感染伊氏锥虫的血清学诊断提供必要的理论依据。     

副猪嗜血杆菌血清5型间接血凝试验和间接ELISA抗体检测方法的建立

为建立副猪嗜血杆菌(HPS)的血清学诊断方法,通过探索HPS荚膜多糖产生的最适体外培养条件,提取了HPS血清5型菌株的荚膜多糖(CPS),并以之为抗原分别建立了间接血凝试验(IHA)和间接ELISA两种抗体检测方法,对其特异性、敏感性和符合率进行了比较研究。结果表明,两种检测方法的特异性良好,但ELISA的敏感性是IHA的5~10倍,二者的阳性符合率、阴性符合率和总符合率分别为79.7%、55.2%和65.3%。用这两种方法检测了320份临床送检猪血清,IHA和ELISA的阳性率分别为40%和59%。结果证实,这两种方法适用于不同实验室条件下HPS的诊断和流行病学调查。     

间接荧光抗体染色测定猪弓形体抗体的研究

试验采用兔抗猪IgG 荧光抗体(IgGFA),对弓形体虫体涂片进行IFA染色,检查了人工接种弓形体猪、现场自然感染弓形体猪和屠宰猪的血清样品共444头份。在这些样品中,检出弓形体阳性血清样品的抗体滴度在1:16～1:1024之间。 本文叙述了兔抗猪IgGFA的制备和弓形体IFA染色的操作方法,并对试验检出弓形体抗体的滴度结果和IFA诊断猪弓形体病的实用价值,做了简单的讨论。     

用间接血凝试验检测绵羊脑多头蚴病抗体的试验

用间接血凝试验检测绵羊脑多头蚴病抗体的试验剡根强（石河子大学动物科学系８３２００３）吴元昌包亚芳（新疆兵团一二一团兽医站）马文戈（新疆畜牧兽医研究所）绵羊脑多头蚴病是一种危害严重的寄生虫病，但羔羊感染后，在六钩蚴移行至脑部发育为多头蚴的２～３个月内，...     

副猪嗜血杆菌抗体间接血凝检测方法的建立及应用

将副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)血清型4、5型分离菌株经超声波破碎处理后的产物致敏醛化红细胞,建立了检测HPS抗体的间接血凝试验方法。最适反应条件为绵羊红细胞30℃醛化5 h,4、5型菌株浓缩抗原以1∶8稀释致敏红细胞。免疫猪2周后检出率达89%。对15种HPS血清型阳性血清进行检测,结果均为阳性;对猪瘟病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、猪肺炎支原体、猪链球菌、猪肺疫巴氏杆菌、Ⅰ相支气管败血波氏杆菌及胸膜肺炎放线杆菌阳性血清进行检测,结果均为阴性。敏感性为琼脂扩散试验的16倍。对1 665份猪血清进行检测,阳性率为47.1%。结果表明,该方法敏感性较高,特异性强,重复性好,可用于疫苗免疫后抗体水平的检测及副猪嗜血杆菌的流行病学调查。     

兔瘟病兔脏器红细胞凝集价和抗体消长规律的测定

(一)材料和方法 1.试验用兔: (1)健康兔:选自兔瘟非疫区,未经免疫,HI阴性的青年大耳兔,体重1.5～2kg。 (2)免疫兔:经HI测定为阴性的健康青年大耳兔,体重1.5～2kg,用兔瘟组织灭能苗1ml皮下注射免疫。 (3)人工发病兔:用以上健康兔每兔颈部皮下注射种毒0.1g为人工发病兔。 2.种毒:兔瘟人工发病,经菌检阴性,有典型病变兔的肝脏以PBS配成1:10(g/v)组织悬液,经双抗处理,作为人工发病种毒。 3.其他反应成分:     

犬细小病毒血凝抑制抗体和中和抗体的关系

对8份犬细小病毒免疫的犬血清同时进行中和(SN)抗体和血凝抑制(HI)抗体检测.结果,SN抗体和HI抗体具有正比线性关系,SN抗体近似于6倍HI抗体.其中HI抗体检测可在3 h内获得结果,操作简便,通过测定HI抗体效价即可推算出SN抗体的效价.     

伊氏锥虫 布氏锥虫和马媾疫锥虫对锥46的药敏试验

在我国,伊氏锥虫病流行 极广,达二十多个省区,对畜牧业生产危害极大。长期以来,伊氏锥虫病的治疗主要依赖为数甚少的几种药物,导致抗药虫株的产生,从而给该病的防治带来新的困难(沈杰等,1991;方元等,1992),急待高效新药产生。为了解决这一问题,上海家畜寄生虫病研究所与上海医药工业研究院合作,成功地合成、筛选了一种抗锥虫新药——雄46(T46)。确定伊氏锥虫对其的药敏性,为锥46的临床应用奠定合理的用药理论基础是十分必要的。本试验通过体内(小鼠治疗)和体外(人工培养)的方法检测了伊氏锥虫布氏锥虫和马媾疫锥虫对锥46的敏感性。     

马(骡)体内伊氏锥虫循环抗原与抗体的相互关系研究

本文利用抗伊氏锥虫表膜抗原的单克隆抗体ELISA双抗体夹心法,对健康、人工接虫及先用伊氏锥虫弱毒株免疫后用强毒株攻击马(骡)血清的循环抗原(CAg)进行了追踪检测,同时用常规ELISA法检测了相应的循环抗体(CAb),结果为:CAg与CAb不全呈平行关系;部分免疫马(骡)首次攻虫前CAg即可呈现阳性,CAb为阴性;免疫马(骡)攻虫后大多经1～3个CAg高峰而后健活,CAg逐渐转阴,CAb则上升较慢,上升后则一直维持在较高水平:人工接虫马(骡)接虫后经1～2个CAg高峰而死,濒死前4/5动物CAg呈现阳性,而CAb在濒死前只有1/5呈现阳性;人工接虫马(骡)的CAg水平高于免疫马(骡),二次攻虫后的CAg水平高于首次。     

酶标记双抗原夹心法检测黄牛的腹腔指状丝虫抗体

国外丝虫病的酶标记检测方法从1975年Bartlett等用于盘尾丝虫和各种动物丝虫的检测。国内1985年有用ELISA法检测人工感染羊脑脊髓丝虫病(牛腹腔丝虫感染期幼虫对羊的侵袭病)的抗体的报道。本试验主要用辣根过氧化物酶(HRP)标记牛腹腔指状丝虫的大分子抗原,用双抗原夹心法检测牛腹腔指状丝虫的自然感染黄牛血清抗体。结果达到80％的阳性检出率,明显高于免疫双扩散试验的检出率。 (一)丝虫和血清来源     

酶连接免疫吸附试验的标准化和弓形体抗体的测定

讨论了酶连接免疫吸附试验的标准化以及适用于该系统的机械装置。着重强调了抗原适宜载体的重要。     

用间接ELISA法检测鸡痘病毒抗体的研究

建立了检测鸡痘病毒抗体的间接ELISA方法 ,用该法检测 2 0份人工感染鸡血清样品 ,抗体阳性率为 10 0 % ,康复期鸡群血清抗体阳性率为 4 3% ,人工接种弱毒疫苗 6 5d和 170d鸡群血清抗体的阳性率分别为 6 0 %、70 %。经反复试验 ,确定了诊断抗原的制备方法和间接ELISA检测鸡痘抗体的最佳反应条件 ,即抗原包被浓度 10 .8μg/孔 ,待测血清最佳稀释度为 1∶10 0。     

用补体结合和萤光抗体标记法实验室诊断猪水泡病

对猪的一种水泡性疾病的起因予以迅速鉴定是人们所希望的,这将可以尽快履行或撤销适用于或者口蹄疫(FMD)或者猪水泡病(SVD)的控制措施。补体结合实验(CFT)已应用于这两种疾病的诊断,但是用上皮样品直接试验如欲成功,病毒抗原必须大量存在。常常需要将材料在组织培养上继代,这可能延迟诊断达一天或更长一些。     

应用间接酶联免疫吸附试验检测猪生殖和呼吸综合征病毒抗体的研究

应用间接酶联免疫吸附试验检测猪生殖和呼吸综合征病毒抗体的研究查红波陈西钊张鹤晓１）蒋金书赵继勋蒋进（中国农业大学动物医学院北京１０００９４）自１９８７年在美国发现猪生殖和呼吸综合征（ＰＲＲＳ）以来，世界各地均有报道。迄今检测ＰＲＲＳ抗体的方法有间接免...     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

建立了辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记兔抗鸡ＩｇＧ检测鸡传染性支气管炎（ＩＢ）抗体的间接ＥＬＩＳＡ法，其抗原包被浓度为４ｍｇ／Ｌ，待检血清与酶结合物的最佳稀释度各为１８０，酶结合物、抗原抗体的作用时间分别为６０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，封闭液的浓度和作用时间分别为１％和６０ｍｉｎ，ＯＤ值大于０．２８７的判为阳性。用此法检测经ＩＢＶ灭活苗免疫鸡所产蛋孵出的雏鸡的母源抗体，ＯＤ值的Ｐ／Ｎ值为６．０，１５ｄ后降至２．０以下。检测１１日龄经ＩＢＶＨ１２０弱毒苗免疫雏鸡的抗体，其Ｐ／Ｎ值于免疫后第１８ｄ达峰值（３．７）。调查的５４群发病鸡，其抗体阳性率为１００％，Ｐ／Ｎ值为４．０～７．５