两种DNA提取法对不同色泽肋软骨STR分型成功率的比较

目的比较两种DNA提取法对不同色泽肋软骨的DNASTR分型结果的影响。方法利用Chelex-100法和酚-氯仿法,分别对30例不同色泽的腐败尸体肋软骨进行DNA提取,STR复合扩增,ABI3100型基因分析仪对扩增产物进行检测。结果用酚-氯仿法提取的30例腐败尸体肋软骨,均检测到全部STR基因座的等位基因型。用Chelex-100法提取的肋软骨中,22例(11例白色、8例淡黄色、3例黄色)检测出全部STR基因座的等位基因型;7例(3例黄色、4例黄褐色)检测出部分STR基因座的等位基因型;1例黑灰色的腐败尸体肋软骨,未检测出STR基因座的等位基因型。结论根据肋软骨的色泽,选择适宜的DNA提取方法。对于颜色较深的肋软骨,用酚-氯仿法进行DNA提取有助于提高其STR基因座的检出率。     

亲子鉴定DNA检验结果分析1例

1案例资料 1.1简要案情 2011年6月15日,本市警方发现1具高度腐败无名男性尸体,为确定尸源,提取该无名尸体肋软骨、张某(嫌疑为其子)及母亲血样进行亲缘鉴定. 1.2 DNA检验 上述3份检材均采用Chelex-100法提取DNA.分别使用Sinofiler试剂盒、GoldenEye20A试剂盒和Y-filer试剂盒进行复合扩增,扩增产物用ABI-3130遗传分析仪进行电泳分析.     

毛发DNA检验辅助认定尸源1例

1 案例资料 1．1 简要案情 2006年7月，本市某一污水沟内发现1具无名女尸（已高度腐败），提取尸体肋软骨1份送检，要求进行DNA尸源鉴定。     

男性Y染色体Amelogenin Y、DYS570及DYS576缺失1例

正1案例1.1简要案情某水域发现1具高度腐败未知名尸体,法医初步判断死者为男性,提取死者肋软骨进行DNA检测。1.2检验方法使用AutoMate Express~(TM)核酸提取系统(美国Thermo Fisher Scientific公司)及配套试剂进行DNA提取,使用Power Plex~? 21系统(美国Promega公司)和GlobalFiler~(TM) PCR扩增试剂盒(美国Thermo FisherScientific公司)进行常染色体STR复合扩增。     

PowerPlex16 HS系统直接扩增法检测肋软骨

目的检验PowerPlex16HS直接扩增系统对软骨的有效性。方法采用PowerPlex16HS复合扩增系统对10例腐败尸体的肋软骨进行直接扩增检验。结果所检验肋软骨都获得了完整遗传图谱,检测成功率为100%。结论 PowerPlex16HS系统直接扩增法能够应用于肋软骨的DNA分型检验。     

“东方之星”客轮翻沉事件中肋软骨的检测

<正>2015年6月1日晚,长江监利段"东方之星"客轮发生特大翻沉事件,遇难者达442人,受天气炎热、打捞工作复杂等影响,遇难者遗体腐败很快,心血、肌肉等常规检材已经无法提取到DNA,如何快速有效地进行DNA检验对客轮翻沉事件的尸源认定具有重要意义。肋软骨因其相对不易腐败、易于前处理等特点在腐败尸体DNA检验中成为首选生物检材[1]。笔者通过对肋软骨样品使用Global Filer誖系统经直接扩增     

高度腐败尸体的肋软骨DNA鉴定1例

<正>1 案例资料 2003年2月6日，在某村化粪池中发现一具高度腐败的尸体。取出肋软骨，用Chelex-100法提取DNA效果不佳。将其提取液用磁珠法进一步纯化，按Identifiler~(TM)Kit(ABI公司)说明书进行复合扩增     

从牙刷提取DNA检验1例

1案例2004年某日,在深圳市某地绿化带旁发现五包人体碎尸块。经各碎尸块断端拼接比对,系同一具女性尸体。由于尸体高度腐败,无法从尸表辨认死者身份。提取多处尸块软骨作DNA检测,仅躯干部肋软骨检测成功。其后根据侦查线索,疑死者为失踪人员刘某。刘某独自一人住在深圳,无亲人样本比对。提取刘某住所牙刷一支,送检与碎尸死者DNA进行同一性比对。采集牙刷上人体脱落细胞DNA的方法:从牙刷根部剪取刷毛数十根,置于Eppendorf管中,室温下用纯水浸泡4h,振荡洗涤,10000r/min离心20min,收集沉渣,如此反复三次以充分获取牙刷毛上的人体脱落细胞,…     

重特大安全生产事故中的DNA检验1例

1案例资料1.1简要案情2008年9月8日,某公司尾矿库发生特大溃坝事故,造成277人遇难。时值夏末秋初,尸体在被掩埋数天至两个多月被挖出,呈高度腐败,有的仅为尸体块,事故处理需要对尸体及尸块进行身源识别。1.2检材提取对较新鲜的尸体提取心脏血液、血痕;腐败尸体或尸块提取深层肌肉组织;腐败严重者则提取骨骼(肋软骨、耳骨、鼻骨等方便、易保存的骨骼)。检材提取时注意采用各项措施避免交叉污染[1],检材分装并按规范保存。1.3 DNA检验方案重特大事故中,死亡人数较多,人员情况比较复杂,进行身源鉴定应针对不同特定情况采用不同方案,本案例主要采用的检验方法为:Identifiler复合扩增试剂盒通过对尸体和亲属15个常染色体基因座和AMEL基因座的检验,大多数尸体身源得到确认,或对尸块进行识别鉴定。Yfiler复合扩增试剂盒部分检材可根据需要,在常染色体基因座鉴定的基础上,利用Y染色体基因座具有的优势,通过对兄弟、爷孙、叔侄等父系遗传关系的认定确定身源。线粒体DNA(m tDNA)测序m tDNA呈母系遗传,部分检材可进行m tDNA测序检验,通过姐妹、兄妹等母系亲缘关系确认,并结合其他遗传标记的检测进行尸体身源确认...     

蛋白酶K-Chelex100法提取肋软骨DNA技术的优化

目的优化蛋白酶K的用量和消化时间,用于提取肋软骨DNA。方法 30份肋软骨样本各取大小为0.2cm×0.3cm×0.4cm的软骨块5份,分别编为A～E组。采用不同蛋白酶K用量和消化时间的Chelex100方法,提取5组各30份软骨块DNA,进行DNA定量、采用Sinofiler试剂盒扩增后进行电泳检测,采用非参数检验法比较检验成功率。结果 A～E组样本中采用加入2μL蛋白酶K并消化30min的D组方法成功率最高(96.7%),组间差异具有统计学意义。结论采用蛋白酶K-Chelex100方法,选择加入2μL蛋白酶K,消化30min可有效提高肋软骨DNA分型检验成功率。     

高度腐败尸体指印的提取

目前对无名尸体尸源认定的方法主要有尸体相貌、DNA分析、指纹等等。当命案现场中的无名尸体高度腐败时，尸体面容完全改变，相貌辨认条件丧失；同时，高度腐败尸体细胞中的DNA已经高度降解，DNA测序大多难以得到准确结果。对于这类案件，可以通过尸体指纹与生前所留指印的同一认定来进行尸源认定，如何成功的提取高度腐败尸体的指纹是能否通过指纹进行尸源认定的关键。笔者就实际工作中所遇到的案例介绍一种教科书上未提及的高度腐败尸体指纹提取方法。     

二次消化结合磁珠法提取腐败组织DNA

目的 研究二次消化结合磁珠法对3种腐败组织DNA的提取效果.方法 采用二次消化结合磁珠法对用常规磁珠法提取DNA失败的91例高度腐败尸体的软骨、指(趾)甲、关节囊组织提取DNA,QuantifilerTM试剂盒进行DNA定量,用SinofilerTM或MinifilerTM试剂盒进行STR检测分型. 结果 91例高度腐...     

指甲DNA的STR分型研究

目的 研究尸体所处环境、指甲DNA提取部位及提取方法对STR分型的影响。方法 对案件中不同条件腐败尸体指甲,使用不同部位、不同体系和时间消化,酚-氯仿法提取指甲核DNA,进行PCR扩增及STR分型。结果 提取指甲甲体、甲根部位均可获得STR分型。结论 指甲是法医检案中一类具有实用价值的检材。     

不同前处理方法提取牙齿DNA的比较

目的对三种不同前处理方法提取的牙齿DNA浓度进行比较,建立一种操作简便、经济适用、浓度较高的牙齿DNA提取的前处理方法。方法选择源自7具尸体的共21颗磨牙,每具尸体的3颗磨牙随机按牙屑法、球磨法、液氮研磨法进行前处理,并分别称取50 mg,采用Auto Mate Express~(TM)法医DNA提取系统提取DNA,对三种方法提取的DNA浓度和STR分型结果进行比较。结果牙屑法、球磨法和液氮研磨法提取的DNA质量浓度分别为0.055 6~1.989 1、0.036 6~1.175 6和0.037 8~1.249 0 ng/μL,牙屑法提取的DNA质量浓度较高(P0.05),且STR分型成功率高。结论牙屑法结合Auto Mate Express~(TM)法医DNA提取系统是提取牙齿DNA的一种切实可行的方法,可应用于法医学鉴定实践中。     

利用Y-STR检验侦破杀人抛尸案1例

1 案例 1.1案情 某年7月22日8:00许,某县公安局110指挥中心接到群众报警,称某县一桥下水中发现一具被床单包裹并捆绑的男尸.尸体已高度腐败,取肋软骨备检.在层层包裹的床单夹层中,发现一小片卫生纸,经仔细观察发现纸上留有某种斑迹,遂对该斑迹进行血斑和精斑预试验,结果精斑预试验呈阳性.提取该精斑得到一男性DNA,和死者基因型不同,这为破案又找到一个新的突破口,必须在查找尸源的同时查找精斑的身源.     

3种提取高度腐败检材DNA的方法比较

本文对3种DNA提取方法在高度腐败检材DNA提取中的应用进行了比较,供法医学实践参考。1材料与方法1.1材料3份检材均为尸体肋软骨,其中1号为死后在水里浸泡18天解剖,酒精固定2年的检材,2号检材为死后15天解剖,酒精固定1年的检材,3号检材为死后10天解剖,后酒精固定1月的检材。1.2 DNA提取Chelex-100法[1]3份检材各500mg剪粹,分别加入200μl 5%Chelex-100,10μl PK(10mg/m l),10μlDTT(39mmol/m l二硫苏糖醇),37℃水浴过夜,100℃加热10m in,剧烈震荡,10 000 r/m in离心10m in,上清备用。有机法[2]3份检材各500mg剪粹,分别加入400μl TES…     

腐败尸体不同组织的DNA扩增效果

<正> 在法医实际检案工作中,经常需对腐败尸体进行DNA鉴定。提取腐败尸体组织进行DNA检验所需的检材,不同检验技术要求不尽相同。为提高腐败检材检出效率,本文作者对从高度腐败尸体上提取的软骨、指甲、肌肉、头皮、血液等进行DNA的提取、荧光标记STR复合扩增技术进行扩增分型,并比较分析了扩增效果,现报道如下。     

大鼠死后肋软骨细胞核DNA含量随死亡时间的变化

目的研究大鼠死后肋软骨细胞核DNA含量与晚期死亡时间的相关性。方法应用改良的Feu lgen法结合计算机图像分析技术对死后大鼠35d内肋软骨细胞核DNA含量变化进行观测分析。结果死后1~28d,细胞核染色逐渐变淡,至35d时已观察不到,死后肋软骨细胞核DNA含量与死亡时间呈直线相关。结论大鼠肋软骨细胞核DNA含量随死亡时间延长呈线性规律下降。     

X-STR联合常染色体STR用于亲缘关系鉴定1例

1 案例1．1简要案情某年7月27日夜,某乡镇家庭作坊失火。消防救援后,发现3例烧焦炭化的尸体,2例疑似为姐妹,1例疑似为姐姐的儿子．提取各尸体肋软骨和姐妹的父亲鲁某血样要求进行亲缘关系鉴定比对。1．2检验按行业标准GA／T383—2002中Chelex 100法提取基因组DNA,分别用AGCU、X-12、AGCUEx22、AGCU 21＋1（无锡中德美联生物公司）和Identifiler、Sinofiler试剂盒（美国AB公司）,采用10μL体系按照试剂盒说明书进行PCR扩增,扩增产物在3130遗传分析仪（美国AB公司）上毛细管电泳检测,用Gen—eMapperlDv3．2软件进行基因分析。     

1例土埋2年半尸体的指甲DNA检验

在日常检案中,DNA检验人员通常根据尸体的腐败程度来决定提取那种检材以及采取何种方法得到足够的遗传信息。据高俊薇等[1]报道,当检验腐败尸体的心血、肌肉等组织无法得到STR分型结果时,拔取其指甲进行STR分型往往能得到满意的效果。指甲检验成功率与保存环境有关,土埋1个月以上尸体的指甲DNA经有机法提取成功率不高。本例在处理一起土埋2年半、完全白骨化的尸体时,以指甲作为检验对象,分别以有机法、硅珠法和磁珠法对经Chelex-100提取后的模板DNA进行纯化浓缩,并对其效果进行比较。一、样本来源2005年7月中旬,在距本市某内陆河入海…