陕西省五种猪传染病的血清学调查

20 0 1年 10月至 2 0 0 2年 7月对来自陕西省 3 8个养猪场、户的 191份猪血清分别进行了猪伪狂犬病、流行性乙型脑炎、细小病毒感染、生殖和呼吸系统综合征的乳胶凝集试验以及猪瘟正向间接血凝试验。共检出抗体阳性血清 14 1份 ,阳性率为 73 .8% ,其中检查猪伪狂犬病的 88份血清 ,阳性 66份 ,阳性率为 75 .0 % ;检查流行性乙型脑炎的 5份血清 ,阳性 2份 ,阳性率为 40 .0 % ;检查细小病毒感染的 16份血清 ,阳性 8份 ,阳性率为 5 0 .0 % ;检查猪生殖和呼吸系统综合征的 72份血清 ,阳性 63份 ,阳性率为 87.5 % ;检查猪瘟的 15份血清 ,阳性 8份 ,阳性率为 5 3 .3 %。     

甘肃省部分猪场猪衣原体血清抗体的检测

用间接血凝试验对甘肃省 7个市 (地 )的部分猪场猪群用间接血凝试验进行衣原体血清抗体检测。共检测 4 68份猪血清 ,阳性 161份 ,可疑 5 1份 ,总阳性率为 34.4 0 % ,其中武威市为66.67% ,平凉市为 5 6.2 5 %     

IHA AGP及Dot-ELISA检测猪瘟抗体的比较试验

从1990年以来,我们用血凝抑制(IHA)和琼脂扩散(AGP)试验在本省12个县(市),对猪瘟疫苗免疫猪群进行抽样检测血清抗体,结果:IHA法检测的阳性率(达保护抗体滴度)为89.26％(1869/2094);AGP法检测的阳性率(出现沉淀线)为73.84％(1284/1739)。其中黄平、惠水两县分别使用三联苗和猪瘟冻干苗,给田间猪群免疫,均用150个免疫量,免疫后2月检测抗体。两种方法共检测521头(份)血清,均为阳性的有427头(份),其阳性率为81.95％[IHA法的阳性率为86.76％(452/521);     

青海省规模化猪场母猪繁殖障碍疾病的检测

近年来青海省猪场中母猪繁殖障碍性疾病不断增加 ,各猪场普遍存在母猪不育、流产、产死胎、弱胎、木乃伊胎和弱仔猪增多的情况 ,给养猪业带来了较大的经济损失。为了给今后的综合防制工作提供科学依据 ,笔者于 2 0 0 3年在该省 2个种猪场中应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、间接血凝试验 (IHA)、血凝抑制试验 (HI)和试管凝集试验 (SAT)分别对猪瘟、猪生殖与呼吸综合征、猪伪狂犬病、猪细小病毒病、弓形虫病、衣原体病和布鲁氏菌病 7种母猪繁殖障碍疾病进行了检测。1　材料与方法1.1　被检血清　采自青海省 2个种猪场 ,共 184头份 ,其中…     

血凝试验稀释棒使用方法的改进

血凝试验中,用手捻搓稀释棒(下称捻搓法)以达到被检血清在血清盘内混匀、稀释的目的。但使用该法稀释液中易形成气泡,影响血凝效价,同时存在费工、费时等缺点。我们在试验中观察到,血清盘随同微量搅拌器托盘一起进行有节律地震动时,血清盘孔中的稀释液即产生旋转运动,随着搅拌器震动频率增加,稀释液转动速度亦随之加快的这一现象,我     

河北省家畜弓形虫病的流行病学调查

应用间接血凝试验 (IHA)对河北省家畜弓形虫病进行了检测 ,共检测猪血清 1 3 0 0份 ,其中阳性血清 4 64份 ,阳性率达 3 5 .69% ;绵羊血清 2 2 2份 ,阳性 5 7份 ,阳性率 2 5 .68% ;山羊血清 10 0份 ,阳性 10份 ,阳性率 10 .0 0 % ;牛血清 3 0份 ,阳性 8份 ,阳性率 2 6.67% ;马血清 4 3份 ,阳性 1份 ,阳性率 2 .3 3 % ;骡血清 2 8份 ,阳性 1份 ,阳性率 3 .5 7% ;驴血清 3 3份 ,阳性 2份 ,阳性率 6.0 6%     

青海省畜禽衣原体病的血清学调查

为摸清青海省畜禽衣原体病的流行情况,用正向间接血凝(IHA)试验对采自青海省26个县(市)的畜禽血清进行了衣原体抗体检测。共检测牛血清227份,阳性60份,阳性率26.4%;羊血清328份,阳性67份,阳性率20.4%;猪血清224份,阳性114份,阳性率53.3%;鸡血清153份,阳性6份,阳性率3.9%。结果表明,青海省养殖的牛、绵羊、猪、鸡普遍存在衣原体感染。     

浙江省规模化猪场猪瘟免疫状况监测

应用正向间接血凝试验分别检测了46个规模化猪场1075头母猪、9个规模化猪场198头育肥猪、4个规模化猪场72头断奶前仔猪和13个规模化猪场296头断奶后仔猪血清的猪瘟抗体效价.结果,母猪、育肥猪、断奶前仔猪和断奶后仔猪分别有149、65、3和110份血清抗体效价≤1∶8,低于临界保护线;分别有926、133、69和186份血清抗体效价≥1∶16,视为免疫合格,免疫合格率分别为86.17%、67.17%、95.83%和62.84%,检测结果表明,断奶后仔猪和育肥猪免疫效果不理想.     

粪肠球菌抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

利用超声波裂解法制备粪肠球菌的裂解物作为抗原包被酶标反应板,通过棋盘滴定方法筛选最佳反应条件,成功地建立了检测致羔羊脑炎粪肠球菌抗体的间接ELISA.在此间接ELISA中,抗原最佳包被浓度为37.57μg/mL,被检血清的最佳稀释度为1100.建立的间接ELISA的灵敏度是微量凝集反应的25～100倍.交叉试验、阻断试验、重复性试验表明,该方法具有重复性好、特异性强、操作简便快速等特点.确立的检测ELISA效价的回归方程lg[1/ET]=1.275 2.730 D405mm,可用于抗体定量测定.利用此方法检测了来自未免疫绵羊场的50份成年绵羊的血清和50份羔羊的血清;结果,2份成年绵羊的血清为阳性,其他样品均为阴性.     

禽流感病毒NS1抗体间接阻断ELISA检测方法的建立

以禽流感病毒(AIV)重组NS1蛋白作为检测抗原,兔抗NS1血清为阻断抗体,建立了检测AIVNS1抗体的间接阻断ELISA方法.经筛选确定,抗原的最佳包被浓度为0.6 tμg/mL,阻断抗体的最佳稀释度为1:10 000,待检血清最佳稀释度为1:10.用该方法对42份AIV感染禽类血清样本和50份用AIV灭活疫苗免疫的禽类血清样本进行检测,结果显示,该方法的敏感性为95.2%,特异性为90.0%.交叉反应试验证明,该方法与新城疫等8种其他禽病阳性血清不发生交叉反应.临床检测结果显示,185份AIV灭活疫苗免疫禽血清样本的阴性率为89.2%,20份基因工程疫苗免疫禽血清样本的阴性率为95.0%,42份健康非免疫禽血清样本的阴性率为100%.表明,建立的间接阻断ELISA方法可用于区分AIV自然感染禽和疫苗免疫禽.     

牡丹江地区出入境人员弓形虫病的血清学调查

采集经牡丹江国际旅行卫生保健中心健康体检的出入境人员血清样品 3 2 8份 ,用间接血凝 (IHA)试验检测弓形虫抗体。结果 ,检出弓形虫抗体阳性血清 2 0份 ,阳性率为 6.1%。     

广西部分种猪场猪瘟抗体监测和免疫效果分析

猪瘟是严重威胁养猪业发展的重要疫病之一 ,多年来 ,广西壮族自治区各级兽医业务部门一直把猪瘟的免疫作为全区畜禽疫病防制的重点 ,使该地区猪瘟的暴发流行基本得到控制。但零星发生的猪瘟特别是免疫种猪的隐性感染带毒现象仍然存在 ,给养猪业造成严重的经济损失。为摸清广西种猪场猪瘟免疫的确切效果 ,笔者在 1999～ 2 0 0 0年对全区内部分种猪场进行了猪瘟抗体监测。1　材料与方法1.1　血清样品　为采自全区 2 8个种猪场猪瘟免疫期内的猪血清 ,共 10 65份 ,其中种母猪 482份、后备母猪 2 0 6份、种公猪 84份、断奶仔猪 2 93份。1.2　诊断…     

荆州地区家禽衣原体病的调查

1988～1989年,我们采用间接血凝和间接补反法对荆州地区的鸡、鸭、鹅的衣原体病进行了血清学调查;并对阳性的鸡、鸭、鹅的病原追踪和分离。 (一)血清学调查1.血清:来源于12个县市鸡、鸭、鹅,随机采样供检。2.抗原及阳性、阴性血清:间接血凝(IHA)和间接补反(ICF)的抗原及阳性、阴性血清均由湖北省畜牧兽医研究所提供;溶血素、冻干补体由成都生物药械厂提供;绵羊红细胞由本站供给。3.操作方法:间接血凝反应:操作按《畜禽衣原体病间接红细胞凝集反应技术操作规程》进行。判定标准:被检血清效价≥1:64(廿)为阳性,     

猪瘟病毒血清抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立快速、准确的猪瘟病毒(CSFV)血清抗体检测方法,根据Gen Bank上猪瘟兔化弱毒全基因序列,设计1对引物,扩增E2蛋白主要抗原区基因片段;然后,将其克隆入载体p ET-28a(+),采用大肠杆菌Rosetta(DE3)表达出含E2蛋白主要抗原区的重组蛋白。以纯化的截短E2蛋白为包被抗原,优化间接ELISA反应条件,建立了检测CSFV血清抗体的间接ELISA。经过优化,确定最佳抗原包被浓度为8 g/m L,待检血清稀释倍数为1∶160,酶标二抗稀释倍数为1∶2000。该方法的阳性临界值为0.37,阴性临界值为0.32。批内变异系数在1.58%~3.33%之间,批间变异系数在2.67%~5.35%之间,说明该方法重复性良好。特异性检验中,该方法与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪流行性腹泻病毒、猪流感病毒、传染性胃肠炎病毒、乙型脑炎病毒、伪狂犬病病毒、猪细小病毒阳性血清均没有交叉反应。用该方法与IDEXX CSFV抗体检测试剂盒对1 101份临床猪血清样品进行符合性检测,结果,该方法的敏感性、特异性、符合率分别为89.07%(603/677)、77.59%(329/424)和84.65%(932/1101)。上述结果表明,该方法可用于临床CSFV血清抗体的检测,为CSFV血清抗体检测试剂盒的研制奠定了基础。     

副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

采用超声裂解的副猪嗜血杆菌菌体上清作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法.通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度80μg/mL;37℃作用2 h后4℃过夜包被,待检血清的稀释度为1:320,抗原抗体反应时间为1 h,酶标二抗稀释度为1:15 000,作用时间为1 h,底物显色时间为15 min.待检血清S/N值≥2.5时判为阳性,S/N值<2.5时判为阴性.特异性、重复性和敏感性试验以及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法的特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,可用于副猪嗜血杆菌的检疫和流行病学调查.     

间接血凝法检测母猪初乳和娩出仔猪脐带血中的猪瘟抗体

(一)方法 在母猪临产前的2～3个月,用成都药械厂生产的猪瘟弱毒冻干苗,按其使用说明书方法,进行猪瘟预防注射,待母猪产仔后采取初乳,放于冰箱中静置过夜,翌日缓缓吸出中下层乳清,经1000～1500rpm离心沉淀1～2分钟后,用巴氏吸管吸取乳脂层下乳清,再按倍比稀释后,用四川省兽医防疫检疫总站制备的猪瘟致敏绵羊红细胞进行间接血凝试验。以检测其抗体滴度;同时对娩出的乳猪,在断脐带时,采取脐带血,沉淀分离血清,进行猪瘟抗体检测。     

甘肃省河西地区14县(市区)猪瘟实验考核

为了更好地开展猪瘟预防工作,我们于1990～1992年采用免疫荧光抗体技术检查疑似猪瘟病料中的病原,用PPA-ELISA法检测血清免疫抗体的方法,对甘肃省河西地区14县(市)区猪瘟防治效果进行了实验考核。     

用间接ELISA法检测鸡痘病毒抗体的研究

建立了检测鸡痘病毒抗体的间接ELISA方法 ,用该法检测 2 0份人工感染鸡血清样品 ,抗体阳性率为 10 0 % ,康复期鸡群血清抗体阳性率为 4 3% ,人工接种弱毒疫苗 6 5d和 170d鸡群血清抗体的阳性率分别为 6 0 %、70 %。经反复试验 ,确定了诊断抗原的制备方法和间接ELISA检测鸡痘抗体的最佳反应条件 ,即抗原包被浓度 10 .8μg/孔 ,待测血清最佳稀释度为 1∶10 0。     

陕甘宁青四省(区)人及畜禽弓形虫病的血清学调查

采用中国农科院兰州兽研所提供的间接血凝诊断液和试验方法,对我区驻陕甘宁青四省区28个单位共4340份人畜(禽)血清进行了弓形虫抗体检测,检出阳性283份,阳性检出率为6.52％。其中检测人血清973份,检出阳性38份占3.91％;检测猪血清916份,检出阳性240份占26.20％,检测马(骡)血清1108份,检出阳性1份占0.09％;检测牛血清570份,检出阳性2份占0.35％,检测羊血清647份,检出阳性1份占0.15％;检测兔血清81份,检出阳性1份占1.23％;检测犬血清11份、鸡血清34份,均未检出阳性。     

副猪嗜血杆菌抗体间接血凝检测方法的建立及应用

将副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)血清型4、5型分离菌株经超声波破碎处理后的产物致敏醛化红细胞,建立了检测HPS抗体的间接血凝试验方法。最适反应条件为绵羊红细胞30℃醛化5 h,4、5型菌株浓缩抗原以1∶8稀释致敏红细胞。免疫猪2周后检出率达89%。对15种HPS血清型阳性血清进行检测,结果均为阳性;对猪瘟病毒、口蹄疫病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒、猪肺炎支原体、猪链球菌、猪肺疫巴氏杆菌、Ⅰ相支气管败血波氏杆菌及胸膜肺炎放线杆菌阳性血清进行检测,结果均为阴性。敏感性为琼脂扩散试验的16倍。对1 665份猪血清进行检测,阳性率为47.1%。结果表明,该方法敏感性较高,特异性强,重复性好,可用于疫苗免疫后抗体水平的检测及副猪嗜血杆菌的流行病学调查。