青蒿琥酯在黄牛体内的药物动力学及代谢研究

黄牛5头,单剂量(10mg/kg)静注青蒿琥酯后,以薄层扫描法检测青蒿琥酯酸及其活性代谢产物双氢青蒿素在血中的浓度。结果表明:青蒿琥酯血药时程符合二室开放模型。主要药代参数为:消除半衰期(T_(1/2β))29.05分钟,分布半衰期(T_(1/2α))2.38分钟,中央室分布容积(V_1)0.103L/kg,总体分布容积(V_B)0.926L/kg,药时曲线下面积(AUC)464mg/L·分钟。青蒿琥酯在黄牛体内可迅速转变为双氢青蒿素,给药后约4分钟双氢青蒿素浓度达到高峰(T_p),其值为约6μg/ml,药时曲线下面积(AUC)为146mg/L·分钟。     

青蒿琥酯的活性代谢物双氢青蒿素在牛体内的药代动力学研究

奶牛3头单剂量(5mg/kg)静脉注射青蒿琥酯(AS)后,以薄层扫描法检测其活性代谢物双氢青蒿素(DHA)在血中的浓度,结果表明:DHA血药时程符合具有一级形成的二室开放模型,形成半衰期(T_(1/2kf))为0.80分钟,分布半衰期(T_(1/2α))为2.27分钟,消除半衰期(T_(2/1kβ))为33.19分钟,曲线下面积(AUC)为82.086mg/L·分钟,达峰时间(Tp)为3.03分钟,峰浓度(Cmax)为3.351μg/ml。     

青蒿浸膏对昆明小鼠和Wistar大鼠的急性毒性试验

青蒿浸膏为青蒿素提取过程中的初提物,它可以提高动物生长性能和机体免疫力,有抗鸡球虫、杀灭纤毛虫等功效,在畜牧养殖上有广泛的应用前景,然而其毒性大小尚未见报道。本试验采用Bliss法设计,分别对昆明小鼠和Wistar大鼠单次灌胃青蒿浸膏(青蒿素的质量分数为170 g/kg±10 g/kg),测定它对昆明小鼠和Wistar大鼠的半数致死量(LD50)及其95%可信限,分别观察7 d内昆明小鼠和Wistar大鼠的毒性反应和死亡情况,对昆明小鼠和Wistar大鼠分别进行大体解剖和组织病理学检查。结果,各剂量组小鼠均未出现明显的中毒症状,自由活动正常,饮食饮水正常,且无死亡个体;各剂量组雌、雄小鼠的体重也没有显著变化。与小鼠不同,大鼠毒性症状随青蒿浸膏的剂量增加而逐渐加重,4120 mg/kg剂量组仅见自发活动减少;6 460mg/kg和8 080 mg/kg组可见少量个体震颤、强制性-阵挛性抽搐,死亡等症状;10 100 mg/kg剂量组小鼠可见震颤、强制性-阵挛性抽搐、角弓反张、死亡等症状。Wistar大鼠的LD50为7 360 mg/kg,95%的可信限为6 256.38~8 658.82 mg/kg。上述试验结果表明,青蒿浸膏属于无毒物质。     

鸡肝微粒体细胞色素P450酶系检测方法的建立

为建立鸡肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系活性的测定方法,应用超速离心法提取了12只60日龄依莎公鸡的肝微粒体,采用Bradford法测定肝微粒体蛋白含量,紫外分光光度法测定CYP450酶系活性。结果显示,肝微粒体蛋白含量为11.32 mg/g±1.43 mg/g,CYP450含量为0.71 nmol/mg±0.08 nmol/mg,NADPH细-胞色素C还原酶活性为3.01 nmol/(min.mg)±0.26 nmol/(min.mg),AND活性为2.36 nmol/(min.mg)±0.18 nmol/(min.mg),ERND活性为1.21 nmol/(min.mg)±0.11 nmol/(min.mg),AH活性为0.25 nmol/(min.mg)±0.03nmol/(min.mg)。结果表明,建立的鸡肝微粒体CYP450酶系的检测方法灵敏可靠,重复性较好。     

采用特异性探针药物法对双峰驼CYP1A酶体外活性的测定

为探究双峰驼CYP1A酶体外活性及其对外源性药物代谢的影响,首先采用差速离心法制备双峰驼肝微粒体,并优化其体外孵育体系,然后采用高效液相色谱紫外检测法测定双峰驼肝微粒体孵育体系中CYP1A酶特异性底物非那西丁的代谢产物对乙酰氨基酚的动态含量,并借助Origin Pro8.6软件计算CYP1A酶的动力学参数。结果表明,双峰驼肝微粒体具有良好的酶活性,其蛋白质含量为1.652mg/g±0.341mg/g。经优化后孵育体系的最适宜底物的质量浓度为200μg/mL,最佳肝微粒体的质量浓度为4.95mg/mL,最适宜孵育时间为30min。双峰驼CYP1A酶体外孵育体系的最大反应速度为0.224 6nmol/(min·mg)±0.041 8nmol/(min·mg),米氏常数为5.577 9μmol/L±0.634 2μmol/L,内在代谢清除率为0.080 4(mL·min)/mg±0.023 1(mL·min)/mg。结果表明,本试验通过借助特异性探针药物动力学特征的研究,成功检测了双峰驼CYP1A酶的体外代谢活性。     

喹烯酮在猪体内的药代动力学研究

按本实验室建立的方法,对喹烯酮在猪体内的代谢进行了观察.试验猪6头,按单剂量14C标记的喹烯酮0.4065 mg/kg体重(比活度24.6 μci/mg)静脉注射,30 d后按31.15 mg/kg体重(比活度5.187μci/mg)口服给药,用液体闪烁谱仪进行测定.结果喹烯酮以原药的形式代谢排泄,静脉注射给药符合二室开放模型,T1/2α=0.1899 h,T1/2β=4.5528 h,Kel=0.8654/h,AUC=0.00925 mg/L·h;口服给药符合一级吸收一室开放模型,T1/2Ka=0.4678 h,T1/2K=3.7445 h,Tp=1.3367 h,Cmax=0.000713 μg/mL,AUC=0.00303 mg/L·h.提示喹烯酮口服给药后,其吸收较快,消除相对也较快,生物利用度低.     

沃尼妙林在猪体内的生物利用度及药代动力学研究

选用体重20kg左右的大×长二元健康阉公猪8头,按双周期、双交叉试验设计,进行静脉注射及内服沃尼妙林(10.5mg/kg)的药代动力学研究。采用液相色谱-串联质谱法测定猪血浆中沃尼妙林的浓度,用3P97药代动力学程序处理血浆药物浓度-时间数据。结果,健康猪静脉注射给药的药时数据适合一级吸收二室模型,主要药代动力学参数为:t1/2α=0.21h±0.07h,t1/2β=3.09h±1.09h,Vd=3.64L/kg±0.43L/kg,CLB=0.83L/(kg·h)±0.29L/(kg·h),AUC=12.93mg/L·h±4.57mg/L·h。健康猪内服给药的药时数据适合一级吸收一室开放模型,主要药代动力学参数为:t1/2ka=0.76h±0.05h,t1/2kel=2.19h±0.31h,tmax=1.70h±0.04h,Cmax=1.35μg/mL±0.06μg/mL,AUC=7.34mg/L·h±0.52mg/L·h,F=56.62%±3.75%。结果表明,沃尼妙林在健康猪体内的药代动力学特征是:内服吸收迅速,血药浓度达峰时间短,药物峰浓度高,绝对生物利用度较高,但有效血药浓度维持时间短,药物消除较快。     

刚地弓形虫速殖子分离纯化方法的优化

为减少弓形虫假包囊和宿主细胞对试验的干扰,对弓形虫的速殖子进行了分离纯化。将弓形虫RH株虫体复苏后,接种于小鼠腹腔进行培养,72h后收集腹液,腹液经27G注射器针头抽吸后进行不同组合的非连续密度梯度(1.031×106 mg/L、1.056×106 mg/L、1.077×106 mg/L、1.123×106 mg/L Percoll)离心纯化。通过显微镜观察以及细胞计数等方法比较各组合的纯化效果。结果显示,经注射器针头帮助假包囊破裂后,使用非连续密度梯度离心,以密度为1.056×106 mg/L、1.077×106 mg/L Percoll不连续梯度3 000r/min离心30min,可以将速殖子和假包囊进行较高纯度的分离纯化。本研究为纯化高纯度的弓形虫速殖子提供了一种方法。     

马杜霉素对蛋仔鸡急性毒效应的研究

将马杜霉素按2.5、7.5、22.5、67.5和202.5 mg/kg体重5个剂量组,给55～65日龄蛋仔鸡一次经嗉囊给药,24 h内观察其急性毒效应和测定急性致死量.结果显示随剂量的递增而毒性增强,临床表现出轻度、中度、重度中毒和死亡的毒效应;病理变化为实质器官充血、淤血、出血、水肿、变性和心肌萎缩,主要脏器系数及其含水量均有改变;机体严重脱水,体重骤减.其毒性上限指标为LD0=22.5 mg/kg、MLD=67.5 mg/kg、LD100=202.5 mg/kg体重.     

印楝油对兔疥螨幼虫的体外杀螨活性

将兔疥螨幼虫置于聚苯乙烯小平皿中,分别加入不同浓度的印楝油液体石蜡溶液,以天然除虫菊酯和阿维菌素为阳性对照,蒸馏水和液体石蜡为阴性对照,观察记录不同时间段的螨虫死亡数,以死亡率、半数致死时间(LT50)和半数致死浓度(LC50)为指标评价了印楝油对兔疥螨幼虫的离体杀螨活性。结果显示,未稀释的印楝油能在25 min内杀死所有幼螨,其杀螨活性显著强于500 g/L的天然除虫菊酯(825 min,P<0.01),而与25 g/L的阿维菌素无显著差异(19 min,P>0.05);500、250和125 mL/L印楝油对兔疥螨幼虫的LT50分别为1、2、5 h;24 h的LC50和LC95分别为2.908和12.018 mL/L。结果证实,印楝油对兔疥螨幼虫具有较好的离体杀螨活性。     

阿司匹林丁香酚酯颗粒剂的研制及质量评价

优选阿司匹林丁香酚酯颗粒的成型工艺,建立含量测定方法并进行质量评价。采用单因素试验及正交设计试验,以综合评分为考察指标,确定颗粒剂最佳处方,建立有效成分含量测定方法,并对颗粒剂进行质量评价。结果显示,颗粒剂的最佳处方为：以15 g阿司匹林丁香酚酯计,蔗糖为5 g,甘露醇为5 g,交联羧甲基纤维素钠为1.31 g;建立的含量测定方法准确度高,精密度良好,阿司匹林丁香酚酯在1.0～80μg/m L浓度范围内线性良好,样品平均回收率为98.23%;3批小试样品具有较好的成型性和流动性,阿司匹林丁香酚酯在60 min时溶出度达85%以上。结果表明,本研究制备的阿司匹林丁香酚酯颗粒剂性状符合要求、稳定性良好、质量可控。     

地昔尼尔乳剂的制备及其HPLC测定方法的建立

为制备地昔尼尔乳剂并建立其质量浓度的测定方法,以稳定常数和离心稳定性作为乳剂稳定性评价指标,采用单因素试验和正交设计试验法考察处方因素和工艺因素对乳剂稳定性的影响,以筛选出乳剂的最优处方和制备工艺;采用高效液相色谱法(HPLC)测定乳剂的药物质量浓度。结果显示,地昔尼尔乳剂的最优处方为地昔尼尔50g/L、乳化剂70mL/L、油相125mL/L、助乳化剂160mL/L、稳定剂为3.5g/L;地昔尼尔乳剂的制备方法为乳化温度50℃,20 000r/min高速搅拌10min。建立的HPLC色谱条件为色谱柱X Bridge C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈与水(6mL/L三乙胺+2mL/L甲酸)的体积比为10∶90,流速0.8mL/min,柱温30℃,紫外检测波长267nm,进样体积20μL。在10~100μg/mL的质量浓度范围内,峰面积与药物浓度呈良好线性关系(r2=0.999 9,n=7),回归方程为y=148.01x+91.629。精密度试验相对标准偏差均小于2%,在80%、100%和120%3个添加水平时,平均回收率为98.36%,精密度、回收率均符合要求。定量限和检测限分别为10ng/mL和20ng/mL,测得3批地昔尼尔乳剂的平均质量浓度为49.29mg/mL,为标示量的98.57%。结果表明,该处方合理、制备工艺可靠,所建立的高效液相色谱法可用于地昔尼尔乳剂的检测。     

头孢喹诺在野猪体内的药代动力学研究

将头孢喹诺按2 mg/kg剂量给5头健康野猪耳缘静脉注射。采用反相高效液相色谱法测定了血浆中头孢喹诺的药物浓度,用药代动力学程序软件WinNonlin5.2处理血浆中药物浓度-时间数据。结果表明,静脉注射给药后,猪血浆中头孢喹诺的药-时数据符合二室开放模型,其主要药代动力学参数:t1/2α=0.22h±0.05 h,t1/2β=1.65 h±0.46 h,CL=0.29 L/(h.kg)±0.061 L/(h.kg),AUC=7.2 h.mg/L±1.49h.mg/L,Vss=0.59 L/kg±0.66 L/kg,MRT=2.16 h±0.65 h。上述数据与家猪的药代动力学数据之间差异不显著(P0.05)。     

吉他霉素在猪体内的药代动力学特征及残留检测方法的研究

对7头健康猪按随机交叉设计经单剂量(2.5×104U/kg)内服吉他霉素原药及其微囊制剂进行了药代动力学试验。血浆样品经磷酸氢二钾溶液碱化、无水乙醚提取后,采用HPLC法测定血药浓度。结果表明,药时数据均符合一级吸收二室开放模型,主要药代动力学参数为:原药t1/2ka=0.23h±0.05h,t1/2β=6.43h±2.38h,tmax=0.65h±0.17h,Cmax=6.97μg/mL±1.40μg/mL,AUC=19.98mg/(L.h)±8.16mg/(L.h);微囊制剂t1/2ka=0.55h±0.16h,t1/2β=10.63h±3.73h,tmax=1.25h±0.23h,Cmax=7.97μg/mL±1.63μg/mL,AUC=36.24mg/(L.h)±6.15mg/(L.h)。吉他霉素原药在猪体内吸收较快,但其微囊制剂分布更广泛并消除较缓慢。对猪肌肉、肝和肾等添加吉他霉素标样后均采用0.2%偏磷酸-甲醇萃取后过SCX小柱用甲醇抽提吹干,脂肪加标样采用正己烷除脂后用甲醇反萃取减压蒸干。采用HPLC法测定组织浓度。结果,各组织在0.05～6.4μg/g范围内线性关系良好(r0.999),吉他霉素在各组织中回收率均大于65.38%,批内及批间变异系数分别小于5.56%和4.60%,检测限为0.05μg/g。结果表明,此方法重复性好、灵敏度高,可用于猪组织中吉他霉素残留的检测。     

达康灭毒灵消毒性能的试验观察

为了解达康灭毒灵的消毒效果、稳定性、腐蚀性与毒性 ,进行了悬液法定量杀菌 (毒 )试验、热稳定性试验、金属腐蚀性试验以及动物毒性试验。结果 ,在室温 (2 0℃左右 )下 ,以其含有效氯 10 0mg/L溶液对悬液中金黄色葡萄球菌作用 2 0min ,对口蹄疫病毒 (OY80MF15鼠化毒 )作用2 0min ,杀灭率均达 10 0 % ;其粉剂于 5 4℃密封存放 14d ,有效氯含量下降率为 2 .1% ;含有效氯2 5 0 0mg/L的达康灭毒灵溶液对铝、碳钢、铜、不锈钢的腐蚀速率分别为 1.2 4 2、1.35 6、0 .4 6 4和 0mm/a ;其水溶液经口服途径对成年小鼠的LD50 为 2 5 48mg/kg ,经皮下途径对乳鼠的LD50 为1186mg/kg,对兔皮肤刺激反应积分为 0。试验表明 ,达康灭毒灵具有良好的杀灭微生物效果与稳定性 ,毒性小 ,浓度较大时对金属有一定的腐蚀性     

阿散酸在猪体内的药动学与生物利用度研究

选用体重25 kg左右的长×大二元杂健康猪8头,按双周期双交叉试验设计,进行静脉注射与内服阿散酸(10 mg/kg)的药动学研究。采用高效液相色谱法测定猪血浆中阿散酸的浓度,用统计矩原理处理血浆药物浓度-时间数据。结果显示:健康猪静脉注射阿散酸后的主要药动学参数为β=0.55 h-1±0.01h-1,t1/2β=1.26h±0.03 h,Vz=0.30L/kg±0.01 L/kg,Vdss=0.29 L/kg±0.01 L/kg,CL=0.17 L/(kg.h)±0.01 L/(kg.h),MRT=1.75 h±0.07 h,AUC=60.44μg/mL.h±0.01μg/mL.h;内服给药的主要药动学参数为β=0.39 h-1±0.02 h-1,t1/2β=1.79 h±0.09 h,tmax=1.81 h±0.09 h,Cmax=3.43μg/mL±0.53μg/mL,MRT=3.95 h±0.13 h,AUC=15.12μg/mL.h±0.01μg/mL.h,F=24.5%±3.4%。研究结果表明,阿散酸在健康猪体内的药动学特征为内服吸收迅速,血药浓度达峰时间短,但药物峰浓度低,绝对生物利用度低,消除快...     

地昔尼尔乳剂在猪体内的药动学研究

为建立高效液相色谱法(HPLC)测定猪血浆中地昔尼尔质量浓度的方法,探讨地昔尼尔乳剂在猪体内的药动学特征,将50g/kg地昔尼尔乳剂以45mg/kg的单剂量为6头健康猪给药(背正中线浇泼),血浆经乙腈提取,采用HPLC测定了血液中地昔尼尔浓度。本试验条件下,地昔尼尔在0.05～20μg/mL内线性良好,r2=0.999,最低检测限为0.01μg/mL;其药时数据符合一级吸收二室模型,主要药动学参数为:t1/2ka=9.836h±0.198h,t1/2α=13.649h±0.124h,t1/2β=20.745h±1.187h,tmax=17.576h±0.216h,Cmax=9.129μg/mL±0.313μg/mL,AUC=450.010μg/mL.h±2.993μg/mL.h。结果表明,该测定方法专属、准确、灵敏,适用于地昔尼尔的药动学研究;地昔尼尔乳剂经皮给药后,在猪体内的吸收、消除速率较慢,达峰浓度高。     

苯噁唑与狄普诺啡合剂对眠乃宁麻醉大鼠催醒剂量的确定

以大鼠为试验动物 ,腹腔内注射二甲苯胺噻嗪与双氢埃托啡合剂 (xylazine DHE)麻醉 3 0min时 ,再以腹腔内注射苯唑与狄普诺啡合剂 (Rx7810 94 M5 0 5 0 ) ,通过序贯法测定Rx7810 94 M5 0 5 0对xylazine DHE麻醉大鼠的催醒半数有效量 (ED50 )值 ,根据ED50 值确定Rx7810 94 M5 0 5 0对大鼠的催醒剂量 ,以此剂量测定大鼠给药后的翻正反射恢复阳性率和痛阈。结果 ,Rx7810 94 M5 0 5 0对xylazine DHE麻醉大鼠的催醒ED50 值为 9.93 5mg/kg ,催醒剂量为 15 .0 0 0mg/kg ,翻正反射恢复阳性率为 94.74% ;Rx7810 94 M5 0 5 0组在 5min与生理盐水组比较差异显著 (P <0 .0 5 ) ,10～ 60min与Rx7810 94、M5 0 5 0和生理盐水组有显著差异 (P <0 .0 5 )。     

硫酸阿米卡星在德国牧羊犬体内的比较药代动力学研究

将9只健康成年德国牧羊犬随机分成3组,按随机正交试验设计,经静脉注射、肌肉注射和皮下注射硫酸阿米卡星注射液(10 mg/kg),以比较不同给药途径在德国牧羊犬体内的药代动力学特征。血浆样品经三氯乙酸提取后,采用LC-MS/MS法测定血药浓度,使用药代动力学程序3p97软件对药-时数据进行处理。结果显示,静脉注射硫酸阿米卡星的药-时数据符合二室开放模型,主要药代动力学参数为:t1/2α=0.121 h,t1/2β=1.612 h,Vc=0.095 L/kg,CLs=0.080 L/(kg.h),AUC=129.2μg/mL.h。肌肉注射和皮下注射硫酸阿米卡星的药-时数据均符合一级吸收二室模型,主要药代动力学参数分别为:t1/2α=0.486 h和0.636 h,t1/2β=1.404 h和1.782 h,tmax=0.785 h和0.894 h,Cmax=44.59μg/mL和31.42μg/mL,AUC=117.0μg/mL.h和105.1μg/mL.h,F=91.32%和81.02%。结果表明,静脉注射分布迅速且广泛,消除较快;肌肉注射和皮下注射吸收迅速完全,消除均迅速,生物利用度高;肌肉注射较皮下注射达峰时间短、峰浓度高和生物利用度高。     

兽药黄连解毒散中黄芩苷和盐酸小檗碱含量的HPLC法测定

采用Eclipse XDB-C18键合硅胶柱(4.6 mm×150mm,5μm)为色谱柱,柱温30℃,流动相为乙腈-2mL/L磷酸水溶液(25∶75),流速为1 mL/min;检测波长:黄芩苷278 nm,盐酸小檗碱347 nm;进样量10μL。结果,黄芩苷、小檗碱的进样量分别在0.464～1.16μg(r=0.999 8,n=7)、0.194 4～0.486μg(r=0.9999,n=7)范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.91%和98.69%,RSD分别为1.42%(n=9)和0.85%(n=9)。结果表明,建立的高效液相色谱法快速、准确,重现性和精密度均良好,可为兽药黄连解毒散的质量控制和评价提供技术支撑。