人体死后体内氰菊酯及其代谢产物分布检测1例

1案例资料1.1简要案情池某,女。2011年11月6日死亡,因死因不明怀疑被人投毒。提取心血未检出毒物成分,后解剖提取肾、心、子宫、肝、脑、肺等脏器,要求进行毒物分析检验。1.2毒物分析检验主要仪器与试剂美国ABI公司API2000 LCMS/MS;岛津LC-20A型高效液相色谱仪;甲氰菊酯、3-苯氧基苯甲酸（3-phenoxybenzoic acid,3-PBA）和甲     

用基质分散固相萃取法用于人血中有机磷农药检测

目的建立基质分散固相萃取方法用于检测人体血液中有机磷农药。方法利用C18、PSA和石墨化碳为吸附剂,采用基质分散固相萃取与GC/MS法相结合检测人体血液中甲胺磷、敌敌畏、甲拌磷、乐果、叔丁硫磷、甲基对硫磷、马拉硫磷等8种有机磷农药。结果 8种有机磷农药分离效果良好,回收率在71.46%～96.09%之间,检出限在0.26～4.52ng之间。结论基质分散固相萃取方法提取血中有机磷农药操作简单、快速准确。     

离子色谱法检测全血中的亚硝酸盐及其代谢产物

目的建立全血中亚硝酸盐的离子色谱分析方法。方法将0.5mL全血和1mL水混合,用乙腈沉淀血液中的蛋白质后依次过C18柱、Ag柱和Na柱,用于去除其中的有机物和氯离子后进行离子色谱检测,并对蛋白沉淀溶剂、前处理柱等最佳实验条件进行考察。结果采用本文方法对空白添加全血进行检测,在色谱图上亚硝酸根离子及其氧化产物硝酸根离子的保留时间分别为10.02min、19.21min。选择乙腈作为蛋白沉淀剂,C18柱去除有机物,Ag柱去除氯离子,Na柱去除银离子。全血中亚硝酸根离子的检出限为0.05μg/mL,亚硝酸根和硝酸根的总回收率为95.9%~117.3%。结论本文方法简便,回收率好,灵敏度高,适用于中毒者血液中亚硝酸盐的检测。     

甲氰菊酯在家兔体内的死后分布研究

目的建立甲氰菊酯家兔灌胃染毒致死模型和生物检材中甲氰菊酯的气相色谱和气相色谱-质谱联用检测方法,研究甲氰菊酯在家兔体内的死后分布规律。方法家兔6只,甲氰菊酯经口灌胃染毒,死亡后迅速解剖,取心血、外周血、肝等组织,气相色谱和气相色谱-质谱联用法检测甲氰菊酯含量;部分组织经甲醛固定,HE染色,光镜观察其病理改变。结果家兔染毒后2～3h出现中毒表现,染毒后4.5～8h死亡。气相色谱和气相色谱-质谱联用法均检测到甲氰菊酯。甲氰菊酯在家兔体内死后分布为胃壁（458.92±32.82）μg/g、肾（46.47±6.30）μg/g、肝（35.79±20.11）μg/g、大脑（28.77±10.52）μg/g、心（26.49±4.10）μg/g、脾（22.23±5.37）μg/g、胆汁（10.87±1.42）μg/mL、肺（10.32±0.78）μg/g、周围血（8.14±1.12）μg/mL和心血（8.20±1.83）μg/mL。结论甲氰菊酯的灌胃染毒致死模型、气相色谱和气相色谱-质谱联用检测方法及死后分布规律可应用于甲氰菊酯中毒死亡案件的法医学鉴定及法医毒物动力学研究。     

GPC-GC/MS法测定人血中的丙泊酚

目的采用GPC-GC/MS法测定人血中的丙泊酚。方法以百里香酚为内标,人血中的丙泊酚用乙醚提取,离心后取上层有机层水浴挥干,残留物经丙酮/环己烷(3/7)复溶后用GPC-GC/MS检测。结果人血中丙泊酚在0.005~2.0μg/m L浓度范围内线性良好,线性方程y=0.961 8x+0.003 3,r2=0.994 2,日内、日间精密度均小于17%,提取回收率88.2%~101.5%。结论该方法操作简单、灵敏度高,其准确度、精密度及回收率均可达到人血中丙泊酚测定的要求,适用于法医毒物分析。     

HPLC—MS／MS快速检测人血及尿中二甘醇1例

1 案例资料 1．1 简要案情 2006年5月底，某病人住院期间曾使用齐齐哈尔第二制药有限公司生产的“亮菌甲素注射液”治疗肝病，后出现肾功能急性衰竭症状，经透析抢救无效死亡。因怀疑肾功能急性衰竭系注射该药物引起，而要求对死亡的病人的血及尿进行检测。     

氟乙酰胺代谢产物氟离子检测芯片的研究

目的研制含氟毒物的检测芯片,实现氟乙酰胺等含氟毒物的快速电化学检测。方法利用氟离子选择电极制备含氟毒物的检测芯片,对芯片各项性能进行测试;建立氟乙酰胺染毒动物模型,使用制备的氟离子芯片检测染毒致死大白兔体内氟离子浓度。结果血液添加标准检测氟离子其线性响应范围为1～10-6mol/L,相关系数为0.9994,平均斜率接近理论斜率,检测限为5×10-7mol/L。染毒组大耳白兔血中氟离子含量较对照组高5～6倍（P〈0.01）,肝、肾、脑组织中氟离子含量较对照组高2～4倍（P〈0.01）。结论此含氟毒物的检测芯片检测氟离子快速、简便、灵敏,可应用于氟乙酰胺等含氟毒物中毒案件的初筛。     

血液中硫化氢的LC-MS/MS法检验

目的 建立一种用于测定血液中硫化氢的方法,并将其应用于实际案例中。方法 取0.2 mL血液样品,并加入0.8 mL饱和硼砂溶液进行稀释。在试管中取1 mL含有0.1%甲酸的乙腈溶液,依次加入0.1 mL稀释液和0.1m L 1%三嗪水溶液。混合均匀后,静置30 min。之后,通过离心和膜过滤,样品供LC-MS/MS分析。结果 在10～2 000 ng/mL浓度范围内,硫化氢呈良好的线性关系,R²为0.998 5。检出限为5 ng/mL,定量下限为10 ng/mL。在3例硫化氢中毒案例中,检测出3名死者血液中存在硫离子,浓度在0.17～0.56μg/m L之间。结论 本研究首次建立了用于测定血液中硫化氢的LC-MS/MS方法,可满足硫化氢中毒案件的检测需求。     

UPLC-MS/MS检测生物样本中西地那非及其代谢产物

本文旨在建立血液和尿液中西地那非及3种主要代谢产物（N-去甲基西地那非、去乙烷西地那非和哌嗪-N-去烷基西地那非）的超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS/MS）分析方法,并通过动物实验收集其血液和尿液作为待测样本对该方法加以验证。取血液或尿液200μL,以西地那非-d8为内标,加800μL乙腈沉淀蛋白。选用Waters BEH C18(2.1 mm×100 mm×1.7μm)色谱柱,流动相以0.01%甲酸水（2 mmol/L甲酸铵）为A相,乙腈为B相,梯度洗脱分离。质谱仪采用电喷雾离子源,正离子模式进行分析。该方法在血液和尿液中西地那非及3种主要代谢产物的检出限均可达到2 ng/mL;血添加样品中西地那非及其3种主要代谢物在5～1 000 ng/mL之间线性关系均良好（r≥0.997）;尿添加样品中西地那非、N-去甲基西地那非和去乙烷西地那非在5～5 000 ng/mL之间线性关系良好（r≥0.997）,哌嗪-N-去烷基西地那非在5～1 000ng/mL之间线性关系良好（r=0.999）;血液和尿液中西地那非、N-去甲基西地那非、去乙烷西地那非和哌嗪-N-去烷基西地那非的提取回收率...     

GC／MS法检验血液中双甲脒及其代谢产物

目的建立血液中双甲脒及其代谢产物单甲脒的气质联用定量检测方法。方法采用液-液萃取前处理,考察了不同的提取溶剂和pH值对检测结果的影响,优化了萃取条件。结果在最优条件下,该方法对双甲脒和单甲脒的检出限分别为2ng/mL和3ng／mL,两种目标物在20～2000ng／mL范围内线性关系良好（砰分别为0．9997和0．9992）,血液中双甲脒和单甲脒的回收率为8l％～90％。结论该方法具有良好的灵敏度、重现性、稳定性和专属性,可用于法庭科学与临床学的毒物分析。     

固相萃取/LC-MS/MS测定血液中的白藜芦醇

目的建立血液中白藜芦醇的固相萃取/LC-MS/MS方法。方法自制固相萃取柱,在长约13cm的酸性滴定管中,底部填入约0.02g玻璃棉,依次加入柱填料PSA 0.15g,Florisil 0.3g,Silica 0.45g。对样本进行固相萃取,采用LC-MS/MS方法进行检测,运用保留时间和多反应监测(MRM)方式对血液中白藜芦醇进行定性定量分析。结果回收率为95.66%～98.58%,最低检测限(LOD)为1.79μg/mL,线性范围2.5～20μg/mL;相关系数为0.9997。结论本文所建方法,适用于血液中白藜芦醇的检测。     

LC-MS／MS法测定人血浆中盐酸洛哌丁胺

目的建立人血浆中盐酸洛哌丁胺的液相色谱-质谱联用测定法（LC-MS／MS）。方法血浆样品中盐酸洛哌丁胺与盐酸小檗碱（内标）经甲醇液．液提取后,采用ZORBAXSB—C18色谱柱（2．1mm×150mm×5μm）,柱温35℃,流动相为乙腈：0．1％甲酸（60：40,V／V）,流速为0．4mL／min,进样量10μL。电喷雾离子源（ESI）,正离子检测,以多反应监测（MRM）方式进行定量分析,用于监测的离子为m／z477→266（盐酸洛哌丁胺）和m／z366→292（内标）。结果盐酸洛哌丁胺的检测下限为0．2ng／mL（S／N=3）,在浓度0．5～500ng／mL范围内线性良好（r=0．9982）,低、中、高浓度（1ng／mL、20ng／mL、400ng／mL）的平均回收率分别为84．6％,88．5％和90．2％,日内与日问RSD分别小于6％与7％。结论LC—MS／MS法可用于盐酸洛哌丁胺的定性定量分析。     

ASE-GPC/GC/MS方法检验血中20种常见毒物

目的建立血样中20种常见毒物的ASE-GPC/GC/MS检验方法。方法血样采用快速溶剂萃取,GPC/GC/MS检验。结果 20种常见毒物平均回收率为85.3%~99.1%,检出限为0.02μg/mL~0.03μg/mL。结论该方法可满足实际检案的需求。     

体液中氟乙酰胺SPE-GC/MS检测

目的　利用GC/MS与固相萃取 (SPE)技术相结合 ,开发血和尿样中氟乙酰胺鼠药的GC/MS定量分析新方法 ,并用于实际案例检测。方法　选择乙酰胺为内标 ,通过比较不同固相柱的萃取效率和不同条件对回收率的影响 ,优化用于血和尿样中氟乙酰胺萃取的固相柱和提取条件 ,利用氟乙酰胺与乙酰胺质谱图的分子离子峰面积之比与氟乙酰胺浓度的定量关系 ,建立血和尿样中氟乙酰胺鼠药的GC/MS定量分析新方法。结果　用硅胶柱萃取 ,峰面积之比与氟乙酰胺浓度在 5 0～ 90 μg/ml范围呈线性关系 ,检测限为 1 0 μg/ml。血样中氟乙酰胺检测的平均回收率达 91 6% ,标准偏差小于 7 3 %。结论　此法对实际样品的测定证明可满足氟乙酰胺鼠药中毒的定性定量要求。     

GC/MS,MS/MS在毒物及其代谢物分析中的应用

当今,制药工业的飞速发展,大批新药,特别是止痛药、麻醉药、新型农药和加工剂型的问世、发展与广泛应用,加之管理不善,控制不严,使中毒案件有逐年增多之势.法庭科学要求毒物工作者提供快速、准确的毒物及其代谢物的鉴定方法.常用的TLC、UV、HPLC、IR、GC等分析方法,固然有许多优点,但就应用范围,检测灵敏度和对未知物结构定性、定量分析均不如MS法.GC/MS仪作为复杂有机混合物快速、灵敏、可靠的鉴定技术在法庭科学鉴定中已获得越来越广泛的应用.早在70年代初,美国法医毒物学家首先将它用于毒物分析.经过二十几年的发展,已形成有机质谱应用的重要分支——法庭科学质谱.这期间,高效毛细管色/质(HRGC/MS)技术、电离技术、离子传输技     

GC/MS衍生化法检测血中4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺

目的建立人体全血中4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺的衍生化GC/MS分析方法。方法血液样品经去离子水稀释4倍,8000r/min高速离心20min后,加入Na H2PO4缓冲溶液(p H值为6.0)2m L,混匀。将上述混合液加入用甲醇、Na H2PO4缓冲溶液(p H值为6.0)活化的Bond Elut Centify?固相萃取柱后,依次采用1.0M乙酸溶液、去离子水、甲醇、二氯甲烷/异丙醇/氨水(78/20/2,V/V/V)混合洗脱液进行提取、分离、净化处理,40℃空气流下挥干,三氟乙酸酐衍生化,GC/MS检测4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺和4-苯基丁胺衍生物。采用标准品衍生化产物的标准质谱图定性分析,选择m/z 242(4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺)、m/z 91(4-苯基丁胺)作为定量离子进行定量分析。结果血液中4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺的最低检出限为6ng/m L,在0.02~10μg/m L浓度范围内,线性关系良好(=0.9993),日内精密度和日间精密度均小于10%,平均提取回收率约为69%。结论该方法操作简便、灵敏度高,适用于全血中4-溴-2,5-二甲氧基苯乙胺检测。     

生物样品中去痛片4种成分及其8种代谢物的GC-MS/MS法检测

目的建立固相支撑液液萃取(supported liquid-liquid extraction,SLE),GC-MS/MS法同时测定生物样品中去痛片4种成分及其8种代谢物的方法,为去痛片相关案件的法医学鉴定提供依据。方法采用SLE萃取,GC-MS/MS检测,MRM记录方式,利用保留时间和离子对比例定性,内标法和工作曲线法定量,建立血液和组织中去痛片及其代谢物的GC-MS/MS检测方法。结果经SLE萃取,GC-MS/MS法同时检测大鼠血和组织中去痛片及其代谢物,萃取率为37.57%~95.87%,检测线性范围为0.12μg/m L~16.00μg/m L,相关系数(r)为0.989 6~0.999 7,LOD为0.23ng/m L~14.48ng/m L,检测准确度为79.63%~122.90%,日内和日间精密度分别为0.99%~7.43%和2.19%~10.6%。结论 SLE萃取、GC-MS/MS法可检测生物样品中去痛片成分及其代谢物,具有快速、简便、准确度和精密度高的特点,可应用于去痛片相关案件的法医学鉴定。     

琥珀胆碱及其代谢物琥珀单胆碱的检验

目的建立液质联用分析琥珀胆碱和琥珀单胆碱的检验方法。方法通过动物实验,采集死前血液与死后心脏血;通过优化色谱-质谱分析条件以及进样顺序,实现了空白干扰物与代谢物的有效分离。结果首次检验了中毒死亡检材中的琥珀单胆碱,并分析琥珀胆碱与琥珀单胆碱的丰度比例以及通过实际案例推断体内琥珀单胆碱的来源。结论提出了必须将琥珀单胆碱列入琥珀胆碱中毒案件的毒物检验目标,可以大大提高生物检材阳性检出率。     

GC/MS、GC/NPD法检测血液中氯胺酮

目的利用GC/MS、GC/NPD与固相萃取（SPE）技术相结合,建立血液中氯胺酮的定性定量分析方法。方法选择4-苯基丁胺为内标,采用Bond-Elut Certify固相柱萃取、二氯甲烷：异丙醇：氨水（78∶20∶2,v/v/v）洗脱的固相萃取分离技术,比较不同pH体系、洗脱溶剂对回收率的影响,建立血液中氯胺酮的GC/MS、GC/NPD定性定量分析方法。结果以GC/NPD分析氯胺酮在6.0～5000ng/mL范围内线性关系良好,GC/MS-Scan定性检测限为20.0ng/mL。方法平均回收率达96.9%,标准偏差小于5%。结论此方法可满足氯胺酮毒品滥用者血液定性定量分析。     

腐败组织中杀虫双检验1例

1案例资料1.1简要案情2007年10月26日,某山林的水沟内发现1具白骨化尸体,仅胃、肝残存少许腐败组织。1.2毒物分析检验检材处理取绞碎后胃、肝组织各约30g,用无水硫酸钠脱水,加入苯15mL,置于具塞三角烧瓶中超声提取20min,震荡20min,用活性炭过滤。重复上述操作,分别用酸液调至pH=2及用碱液调至pH=10,合并提取液,溶剂自然挥干,用1mL无水乙醇溶解,