解淀粉芽胞杆菌固态发酵黄芪培养基的研究

为筛选优化解淀粉芽胞杆菌固态发酵黄芪培养基,用于生产发酵黄芪制品,以黄芪黄酮质量分数为指标,采用单因素试验对菌株适宜发酵培养基成分进行筛选;采用二次正交旋转组合试验设计及响应面法,优化黄芪固态发酵培养基。结果显示,在筛选成分中最适发酵培养基成分为黄芪、黄豆粉和碳酸钙。用其分别替代基础培养基中的相应营养物质,然后接种解淀粉芽胞杆菌,置37℃以150 r/min振荡培养24 h,其固态发酵物中黄芪黄酮质量分数分别为2.84、2.78和2.75 mg/g。优化的固态发酵培养基为:黄芪粉300 g/L、黄豆粉100 g/L、碳酸钙2 g/L、水598 m L/L,37℃发酵培养24 h,固态发酵物中的黄芪黄酮质量分数达3.21mg/g。结果表明,优化的黄芪固态发酵培养基适宜解淀粉芽胞杆菌生长,易于黄芪黄酮释放,筛选培养基原材料符合固态发酵产业化生产条件。     

以吐温-80取代血液试制猪丹毒氢氧化铝苗的试验

根据兄弟厂在生产猪丹毒弱毒菌苗中加吐温—80增菌的报道,我们从1982年即开始进行了在培养基中加吐温—80取代血液试制猪丹毒氢氧化铝苗(以下简称猪丹毒铝苗)的试验研究。通过9批17组的小量试验和用反应缸大批试产3批,均获得满意结果。不仅培养菌数比常规苗增多2倍,而且对小动物的效检总保护率亦比常规加血菌提高20％。对本动物保护100％。     

藏猪源益生芽胞杆菌的筛选鉴定及部分益生特性的研究

从藏猪粪便中分离筛选出具有良好益生潜力的益生芽胞杆菌,为藏猪源益生菌的开发奠定基础。先将健康藏猪粪便滤液于90℃水浴处理10 m in以杀死样品中的非芽胞杆菌,涂布于培养基后挑取单菌落纯化并扩大培养,再进行拮抗试验筛选能抑制常见病原菌的芽孢杆菌。综合形态学、生理生化特征及16S r D N A序列分析对筛选菌株进行鉴定,通过菌株耐受性试验、产水解酶试验、抗生素敏感试验等对菌株生物学特性进行研究。结果显示,筛选到3株对常见病原菌具有一定抑制作用的芽胞杆菌,其中,解淀粉芽胞杆菌SW U N-TP23在不利环境中具有较强的稳定性,可代谢产生纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶,菌体内不含抗常用兽用抗生素的耐药基因。结果表明,分离筛选到的解淀粉芽胞杆菌SWUN-TP23有良好的潜在益生能力,具有进一步开发研究的价值。     

马匹注射无毒炭疽芽胞苗反应致病的试验观察报告

我省畜牧兽医工作坚持贯彻“预防为主”的方针,开展了春季防疫预防注射工作,有效地控制了牲畜传染病的流行,促进了畜牧业的发展。但近来省农业局收到黔西、织金等一些县反映,在春防工作中出现有的马匹在注射无毒炭疽芽胞苗后发生不良反应,造成马匹致病,甚至死亡的情况,引起了各级领导的重视。省农业局根据黔西等县出现的问题和要求,最近组织了省内有关单位的技术人员共同组成试验组。并邀请甘肃省兽医药品厂的同志前来协助。根据黔西县兽医站历年来掌握马匹在注射无毒炭疽芽胞苗后反应死亡的情况,经黔西县     

猪水泡病全鼠制苗试验

在引进上海龙华Ⅳ系鼠化弱毒制成乳鼠去胃肠苗的基础上,为了简化制苗工序,以利大量生产的需要,进行了全鼠制苗的试验。我们通过对继代乳鼠胃肠含毒价测定,全鼠苗与去胃肠苗的毒价、杂菌、安全性比较,区域试验以及注射生猪349000余头等工作,证明全鼠苗具有工序简便、效果好、利于推广、产量高的优点,提高产量30％。现将试验情况分述如下。     

炭疽疫区土壤病原的监测及消毒

炭疽是由炭疽杆菌引起人畜共患的急性、热性、败血性传染病。炭疽死畜一旦被剖杀就会造成场地污染 ,炭疽杆菌暴露于空气后形成芽胞 ,在土壤中能存活数十年 ,成为威胁人畜健康的疫源地。广西壮族自治区河池市地处桂西北大石山区、云贵边陲 ,属亚热带季风气候 ,阳光充足 ,雨量充沛 ,年平均气温16 .9～ 2 1.5℃ ,适宜炭疽杆菌生长繁殖。 195 3年以来河池市不断有炭疽发生 ,全市有炭疽疫点数百个 ,感染猪、马、牛、羊 ,死亡数千头 (匹、只 ) ,感染数百人 ,并有数十人死亡 ,该病给本市人畜带来了严重危害。河池市是炭疽老疫区 ,由于山区群众文化…     

犬源枯草芽胞杆菌的分离鉴定及生物学特性分析

从犬用微生态制剂研制角度出发,采集健康幼犬粪样进行热处理,使用营养琼脂培养基分离出革兰阳性,类似芽胞杆菌菌株1株。之后,从形态学、生理生化特性及分子生物学分析进行菌种鉴定,最后确定为枯草芽胞杆菌,编号为YW1。通过耐酸、抑菌及药敏试验证实菌株YW1具有较好的耐酸特性及较高的抑菌能力与安全性,说明枯草芽胞杆菌YW1具有临床开发的潜能。本研究为后续进一步研究其在犬微生态制剂中的应用奠定了基础,也为开发具有抑菌活性的菌株提供了参考。     

MEM对副鸡嗜血杆菌的增菌作用

鸡传染性鼻炎(IC),是由副鸡嗜血杆菌(Haemophius paragallinarum,简称Hpg)引起的一种呼吸道传染病。该病主要影响母鸡产蛋、小鸡生长发育和肉鸡的肉质。为防制本病,我们正在进行IC灭活苗的研制。在培养Hpg时,使用了鸡血清鸡肉汤培养基和半合成培养基,结果发现,这两种培养基长菌数量均有限。为便于工厂化生产和降低培养基成本,笔者于半合成培养基中加入不同浓度的Eagle氏最低要素营养液(MEM),作增菌试验,取得较好效果。     

实验动物毛发状芽胞杆菌病

1917年,日本Waltzing小鼠爆发了一次致命的腹泻,在病鼠脏器坏死组织边缘的活细胞中发现革兰氏阴性芽胞杆菌,Tyzzer命名该菌为毛发状芽胞杆菌(Bacillus Piliformis),文献上也称为Tyzzer氏菌,并确定其病原。由此菌引起的实验动物感染,称为Tyzzer氏病。综述作者1972年夏季在医用同位素和防腐剂急性毒性试验时,在我国昆明种小鼠中先后二次发现本病的发生,由病理学检查证实,并于1976年作了报告,称为毛发状芽胞杆菌病(参见黄念君等:药品与生物制品,2:139～143,1976)。 毛发状芽胞杆菌是实验动物的一种急性致死性流行性腹泻疾病,全球性分布,在小鼠中比较常见,传播广泛,常常干扰实验工作的进行,影响实验结果,如肿瘤移植、化学物质致癌试验、甲状腺切除的免疫     

中草药消毒剂百泉一号的杀菌效果观察

对用紫草、地肤子、黄柏等中草药制备的消毒剂百泉一号的杀菌效果进行了试验观察。结果表明 ,百泉一号消毒剂对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、枯草芽胞杆菌具有较好的杀菌作用 ,而且稳定性较好 ,有机物对其杀菌效果影响不明显。     

山东省山羊“猝死症”病原和防治方法的研究——肺炎克雷伯氏菌和凝结芽胞菌的致病性和免疫原性试验

用从山东省菏泽地区的山羊“猝死症”病料中分离出的肺炎克雷伯氏菌和凝结芽胞菌做致病性试验证明，肺炎克雷伯氏菌对小鼠的致死量约为１．７亿个活菌，对山羊的致死量约为１７０亿个活菌；凝结芽胞菌对小鼠的致死量为０．５５亿个活菌，对山羊的致死量为１６５亿个活菌。免疫试验表明，肺炎克雷伯氏菌和凝结芽胞菌对小鼠和山羊均有较好的免疫原性。用肺炎克雷伯氏菌和凝结芽胞菌制成的混合苗以５ｍｌ和８ｍｌ的剂量免疫山羊，２１ｄ后用以上２种菌的致死量攻击，均获得完全保护     

蜡质芽胞杆菌悬浮剂治疗仔猪下痢的试验

蜡质芽胞杆菌悬浮剂治疗仔猪下痢的试验曹国文姜永康邓世明唐建安黄萍（四川省养猪研究所荣昌６３２４６０）李建明李光伟（长征制药有限公司新都农用抗生素厂蜡质芽胞杆菌ＦＳ株是从麦、稻植物体微生物区系中分离筛选出的具有促生长、抗病、增产功能的农用益生菌，可在农...     

微生态制剂—XA1503菌粉的研制和应用

从5株不同的蜡状芽胞杆菌中筛选出XA1503菌株,并与市售“止痢灵”菌种DM423蜡状芽胞杆菌进行了毒性和安全性试验的比较,证明XA1503菌株是一株十分安全无害的菌。用XA1503菌株制成的菌粉,经实验室和临床试验结果表明,它是一种有效的微生态制剂,用于畜禽肠道疾病的预防和治疗,特别是仔猪、犊牛、羔羊、仔犬的腹泻、鸡白痢有明显效果。     

芽胞杆菌的分离鉴定

为了确定实验室筛选的6株芽胞杆菌(Bacillus spp.)的种名,利用形态学、DNA促旋酶A亚单位基因(DNA Gyrase Subunit A,gyr A)和DNA促旋酶B亚单位基因(DNA Gyrase Subunit B,gyr B)序列的单基因系统发育分析和PCR相结合的方法进行鉴定。结果表明,6株芽胞杆菌的单菌落生长特征相似,革兰染色呈阳性,具有芽胞;以gyr A和gyr B基因构建的单基因系统发育树显示6株菌均与贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis)归于同一分支,自展值(Bootstrap)较高;特异性PCR结果也证实它们均为贝莱斯芽胞杆菌阳性。结论,实验室分离的6株芽胞杆菌均属于贝莱斯芽胞杆菌,这为它们的深入研究奠定了基础。     

分泌型表达EDA-EmIMP1的重组枯草芽胞杆菌的构建及其免疫原性研究

枯草芽胞杆菌有着异源蛋白表达系统,纤维连接蛋白外域A(EDA)是一种能够提高相关蛋白的抗原性的佐剂,为了增强巨型艾美耳球虫的免疫相关蛋白1(IMP1)的抗原性,笔者对枯草芽胞杆菌分泌表达载体作为EDA分子佐剂重组亚单位疫苗的递呈载体的功能进行了研究,构建质粒pHT43-EDA-EmIMP1和pHT43-EmIMP1,将获得的重组质粒转化到枯草芽胞杆菌感受态中。将该重组菌对鸡饲喂,进行免疫学试验并做免疫效果评价。结果显示,该重组枯草芽胞杆菌可以成功表达目的蛋白,蛋白大小为70 ku。ELISA检测EDA组的效价最高,其滴度在3 200左右;三免EDA组的IFN-γ浓度显著高于其他组(P0.05);三免EDA组和EmIMP1组的IL-12/70浓度显著高于PBS组(P0.05);CD4+T细胞群的检测显示,EDA组的CD4+T细胞群比例显著高于枯草芽胞杆菌组和PBS组(P0.05);EDA组、枯草芽胞杆菌组和EmIMP1组的卵囊排出量都显著低于攻虫组(P0.05);病变计分可以看出,EDA组对肠道保护效果显著优于除空白组外的其他组(P0.05)。以上各项免疫学指标表明,枯草芽胞杆菌分泌型表达载体作为EmIMP1的抗原递呈载体可以有效提高免疫原性,其中EDA佐剂组的免疫效果最好。     

干粉培养基的研制

干粉培养基在英、美、日诸发达国家已商品化。我国在五十年代,上海生物制品所就有生产。目前国内生产干粉培养基采用较高温度烘干后再球磨的方法,不仅质量不稳定,产量也有限。我们采用较大型喷粉干燥塔喷雾干燥方法克服了上述弱点。本厂1985年对于粉培养基生产进行初步探索,1987年研制成三大系例干粉培养基:①基础营养干粉培养基:营养肉汤、营养琼脂、厌气肉肝汤,用于病原微生物的检测;②药品、食品卫生检验用培养基:硫乙醇酸盐(广谱)、葡萄糖蛋白胨,用于真菌的检验;③病原微生物鉴别诊断培养基:SS干粉培养基。     

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗保护剂的研究

自1988年我厂对冻干疫苗保护剂和冻干产品生产工艺进行了研究。以猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗为主进行了保护剂的筛选试验,找出一种保护剂配制方法、冻干曲线和时间及营养血清的配制等新工艺。用这种方法生产的猪瘟细胞的毒冻干苗在37℃环境中可保存10天,在22～25℃条件下可保存35天,0～4℃条件下可保护22个月,达到了国外同类苗的水平。     

猪小肠集合淋巴结菌群的特点及其鉴定

为对猪小肠集合淋巴结黏膜处的菌群构成进行鉴定和分析,采集20头自然饲喂猪的小肠集合淋巴结回肠黏膜段,对细菌进行分离培养并通过16SrDNA测序鉴定菌种。结果发现,从猪小肠集合淋巴结中共分离到43株细菌,其中,大肠杆菌的检出率最高,为90.00%;枯草芽胞杆菌次之,为35.00%;蜡样芽胞杆菌为15.00%,地衣芽胞杆菌、巴氏杆菌均为10.00%,短小芽胞杆菌等为5.00%。而其他肠黏膜处的菌群则有所不同,回肠黏膜段共分离到8株细菌,分别为大肠杆菌(71.43%)、克雷伯菌(42.85%)、猪链球菌(28.57%)、奇异变形杆菌(14.28%)、嗜水气单胞菌(14.28%)等。此外,地衣芽胞杆菌仅在小肠集合淋巴结中被检出,检出率为14.28%。结果表明,大肠杆菌是猪小肠集合淋巴结黏膜处的优势菌群,枯草芽胞杆菌在猪小肠集合淋巴结黏膜大量存在,地衣芽胞杆菌仅存在于猪小肠集合淋巴结黏膜中,三者可作为靶向小肠集合淋巴结细菌活载体口服疫苗的载体。     

布氏菌苗生产新工艺

英国卫桥中央兽医研究所已于1965年放弃用固体培养生产19号苗的方法,而全部采用深层连续通气培养方法进行生产。其工艺过程包括五个步骤:1、种子培养。选取菌落后,作两次液体扩大繁殖;2、生产培养。培养基的开始量为5立升,接种约30％的种子,在37℃温度     

以23号培养基制造猪肺疫氢氧化铝菌苗的研究

马丁肉汤是生产猪肺疫氢氧化铝菌苗常用的培养基,其生产工艺繁琐,成本高;所用的牛肉、猪胃必须健康新鲜,否则产品质量难以保证。为此,我们自1971年以来,开展了代用品培养基取代马丁汤制造猪肺疫菌苗的研究,历时十余年,试以酵母粉、蛋白胨为主要材料的培养基制造其菌苗,收到可喜的成效。1983年中国兽医药品监察所以(83)监字145号文通告,该培养基经试产证实和监定,完全符合试验结果,被例入《兽医生物药品制造及检验规程》,1982年亦曾荣获中国兽医药械公司技术改进二等奖。