比格犬甲状腺显微与超微结构的观察

应用光镜和透射电镜技术,观察了3~6月龄比格犬甲状腺的显微和超微结构。结果表明,比格犬甲状腺实质由滤泡和滤泡旁细胞构成。滤泡呈圆形或椭圆形,直径20.22~220.00μm,平均90.80μm;由单层立方上皮细胞围成,细胞高度3.04~7.11μm,平均5.18μm,电镜下可见功能状态不同的两型滤泡上皮细胞;滤泡旁细胞很多,直径4.40~8.82μm,平均6.23μm,位于滤泡之间或镶嵌于滤泡上皮细胞之间,也可聚集在一起形成滤泡样结构,胞质内含有大量的分泌颗粒,电镜下也可见两种类型的滤泡旁细胞。     

比格犬β-防御素cBD1基因的原核表达与鉴定

为获得比格犬β-防御素cBD1基因的表达产物,根据GenBank中登录的犬β-防御素基因cBD1(canis familiarisβ-defensin-like peptide 1)的序列设计引物,提取比格犬睾丸组织总RNA,利用PCR扩增cBD1基因,然后将其克隆至pET-32a(+)载体,构建原核表达质粒pET-32a-cBD1,通过PCR、酶切鉴定和测序确认,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中,并进行IPTG诱导和His-Ni-resin纯化目的蛋白。经SDS-PAGE检测,获得了约28ku的表达产物,与预期大小的β-防御素cBD1的分子质量相一致。Westernblot分析表明,表达产物与抗His标签鼠单克隆抗体发生反应,显示重组蛋白获得了表达。结果表明,成功表达的cBD1为新型抗菌制剂的研制奠定了试验基础。     

犬腺病毒1型感染普通级比格犬中Ⅰ和Ⅲ型干扰素及其受体分子表达量的比较

比较普通级比格犬感染犬腺病毒1型(CAV-1)后外周血和肝内Ⅰ型和Ⅲ型干扰素(IFN)及其受体分子的转录水平,同时评估CAV-2疫苗免疫对CAV-1感染试验的影响.对3只2月龄普通级比格犬后肢肌肉注射1057TCID50CAV-1纯化病毒,在攻毒后12 d内记录体温变化,每日采集咽拭子和肛拭子,于攻毒后第3、6、9、1...     

比格犬神经垂体肥大细胞的电镜观察

肥大细胞是一种重要的免疫细胞。近年来 ,关于免疫系统与神经系统的功能联系 ,已引起广泛关注。已有证据表明 ,免疫细胞 (包括肥大细胞、巨噬细胞和淋巴细胞等 )可以存在于或进入中枢神经系统内 ,并发挥重要的作用。目前研究表明 ,在大鼠、绵羊和刺猬等少数几种动物的中枢神经系统内已发现有肥大细胞关于犬的中枢神经系统以及与其密切相关的神经垂体内是否存在肥大细胞 ,以往未见报道。本研究应用透射电镜在实验动物比格犬 (Ｂｅａｇｌｅ)神经垂体实质中发现有少量的肥大细胞 ,并对其超微结构进行了观察。1　材料与方法3～ 6月龄健康比格犬 …     

人工感染犬埃立克体病的病理学观察

用常规病理学方法,对5只人工感染埃立克体(Ehrlichia)的比格犬进行病理解剖学和病理组织学观察.眼观所见最显著的病变是主要器官和皮下出血、淤血,脾、肝肿胀;病理组织学变化的主要特征是肝、肺和肾的血管内及肝血管周围存在浆细胞和淋巴细胞灶性增生.     

比格犬α7干扰素成熟肽基因的原核表达及表达产物活性的分析

从比格犬的脾中提取基因组DNA,采用RT-PCR方法扩增比格犬α7干扰素成熟肽基因。将纯化的PCR产物克隆至pMD19-T载体,转化入感受态细胞DH5α中,PCR检测及测序鉴定结果表明,克隆的目的基因为比格犬α7干扰素成熟肽,与GenBank中登录的犬干扰素序列(NM001006654)的同源性达到100%。在此基础上构建重组原核表达质粒pET-32a-CaIFN-α7,并转化至表达宿主BL21(DE3)中。该工程菌在37℃经IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳,结果在分子质量约38.4ku处出现了目的蛋白条带,表达产物主要以包涵体形式存在。经Bandscan软件分析,表达产物约占菌体总蛋白的48.5%。用Protein Refolding Kit对包涵体进行纯化复性,重组CaIFN-α7在犬肾细胞(MDCK)上具有较高的抗病毒活性。     

应用胶体金免疫电镜技术检测犬传染性肝炎病毒

用胶体金免疫电镜技术检测了犬传染性肝炎病毒(ICHV),证明此方法可作为快速鉴定动物病毒的常规方法。     

犬瘟热病毒SD(14)7株对比格犬的致病性研究

对3~4月龄比格犬经肌肉注射方式接种犬瘟热病毒(CDV)SD(14)7株1 mL(病毒含量为106.0 TCID50/mL),并进行体温、淋巴细胞数、眼鼻直肠排毒和组织病毒含量及分布等指标检测,评价变异株SD(14)7对比格犬的致病水平。结果显示,CDV感染后第2天比格犬出现CDV感染的典型特征,如眼和鼻分泌物增多,淋巴细胞明显减少,然而动物的体温变化无明显的“双相热”特征。CDV定量检测结果显示,比格犬攻毒后第10天开始通过眼鼻和直肠向外界排毒,CDV在脾中含量最高。病理剖检可见脾有坏死、肺炎症出血等,病理组织HE和免疫组织化学检测发现脾有严重的充血,淋巴细胞中有CDV抗原,证实该毒株主要感染淋巴组织和器官。此外,比格犬大脑部分神经细胞严重肿胀,在脑中可检测到CDV,表明SD(14)7株具有一定的神经嗜性。本试验结果为进一步鉴定犬瘟热病毒感染比格犬的毒力因子和免疫原性以及疫苗免疫效果的评价奠定了基础。     

鹅胸腺细胞自然凋亡的电镜观察

应用透射电镜观察表明,鹅胸腺细胞发生凋亡时,细胞经历一系列的形态变化.其中,细胞核的变化最为明显,表现为染色质凝集、边集,呈现为新月形、C字形、花瓣状、圆环状或圆斑状.部分凋亡胸腺细胞可见线粒体轻度增生现象.至凋亡后期,胸腺细胞由其膜性结构分隔、包裹形成凋亡小体;最后,凋亡小体或凋亡细胞被巨噬细胞吞噬、清除.     

应用免疫金电镜技术检测犬的两种副粘病毒免疫球蛋白

应用免疫金电镜技术检测犬瘟热病毒(CDV)和犬副流感病毒(CPIV)免疫球蛋白(Ig).结果证明驴所产生的Ig与CDV、CPIV具有较强的特异性反应.     

人工感染PRRSV仔猪肺和子宫细胞凋亡的电镜观察

应用透射电子显微镜对仔猪感染猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后不同时期肺和子宫凋亡细胞的超微形态结构进行了观察。结果表明,PRRSV可诱导宿主肺和子宫发生典型的细胞凋亡,表现为细胞的超微形态结构随着病毒感染进程出现不同的特征性变化,早期(感染后第8 h至第3 d)凋亡细胞多表现为细胞体积缩小,细胞质密度增强,染色质浓缩,核仁解体,内质网扩张;中期(感染后第5 d至第9 d)凋亡细胞体积显著缩小,细胞膜突起,线粒体增多,有凋亡小体形成;晚期(感染后第10 d以后)凋亡细胞形态多表现为凋亡小体降解和消失,少数凋亡细胞在凋亡晚期表现为坏死细胞。肺细胞凋亡主要发生于肺巨噬细胞和肺泡上皮细胞,子宫细胞凋亡主要发生于子宫内膜细胞和内膜腺细胞。     

厚尾扭头线虫和鹅裂口线虫扫描电镜观察

对厚尾扭头线虫雌虫和鹅裂口线虫雌虫进行了扫描电镜观察与比较 ,其中厚尾扭头线虫雌虫是首次进行扫描电镜观察。结果 ,厚尾扭头线虫雌虫口囊边缘具有 4个乳突 ,从口囊底部伸出的角质齿呈棱形的利刃状 ;鹅裂口线虫雌虫口囊边缘无明显的乳突 ,但有阴门盖     

绵羊肺泡毛细血管的扫描电镜观察

运用血管铸型和扫描电镜技术对绵羊肺实质内微血管的构筑特征进行了观察,旨在揭示绵羊肺泡毛细血管的分布特征,为哺乳动物肺微血管的研究积累资料,并为牦牛肺微血管的进一步研究奠定基础。观察结果显示,低倍镜下,在截面上可见肺实质内的微血管网均呈大小不等的蜂窝状结构,肺泡囊和肺泡的轮廓清晰可见;高倍镜下肺泡毛细血管网呈网络状,视野内大部分肺泡毛细血管网伸展良好。经与文献中有关动物肺泡毛细血管的研究结果相比较,本试验中绵羊肺泡毛细血管的构筑特征与新生牦牛、双峰驼相近,而与人、犬、猴、兔、鼠等动物差别较大。     

转移因子纳米脂质体的制备及其体内吸收情况的观察

采用逆相蒸发法制备转移因子脂质体(TFL),以包封率为优化指标,正交试验优选最佳配方;电镜下观察TFL形态,紫外法检测包封率和渗透率;并用电镜观察用药后小白鼠小肠的吸收情况。结果,确定的最佳制备工艺为:卵磷脂与胆固醇的摩尔比为2∶1,转移因子(TF)浓度为6 mg/mL,吐温-80为1 mL,有机相与水相的体积比为4∶1。电镜下大部分TFL粒径小于100 nm,分布均匀,包封率高达49.5%,4.5个月后的渗透率为52.4%。采用优选工艺制备的转移因子纳米脂质体具有一定的稳定性,而且小肠内吸收良好。     

羊脑多头蚴的超微结构观察

为观察羊脑多头蚴的超微结构,寻找自然感染羊脑多头蚴的病羊,采集多头带绦虫续绦期幼虫,固定于25mL/L戊二醛中,分别取其头节、囊壁、颈部区,超薄切片后进行透射电镜观察。结果表明,羊脑多头蚴的囊壁结构具有微毛,远离头节的囊壁微毛与头节附近颈部区囊壁的微毛分布情况不同;囊壁可明显分为皮层、间质层、实质区;在实质区可观察到皮层细胞、实质细胞、成石灰小体细胞、焰细胞、成肌细胞以及排泄系统结构;头节中可观察到很发达的肌纤维结构,头节内部有类似于囊壁的皮层结构,并可见粗大微毛,细胞种类明显少于囊壁实质区,含颗粒的囊泡结构明显增多。证明羊脑多头蚴囊壁的结构和细胞种类与其他绦虫相似,但有比较发达的排泄系统;头节外表面无皮层结构,仅有呈环状围绕的纤维和囊泡结构。     

藏药对脑缺血大鼠海马CA3区锥体细胞超微结构的影响

采用夹闭大鼠双侧颈总动脉制作全脑缺血再灌流损伤动物模型,对比观察藏药五根散治疗前、后对其海马CA3区锥体细胞超微结构改变的影响.结果,未治疗组大鼠海马CA3区锥体细胞出现核膜内陷,核染色质分布不均且集聚成块状向核膜边集,胞质水肿,细胞器减少,粗面内质网扩张,核糖体脱失,线粒体膜轮廓不清,嵴断裂或空泡化,而治疗组大鼠海马CA3区锥体细胞超微结构大致正常.表明脑缺血后血供恢复期海马CA3区锥体细胞发生明显的超微结构改变,藏药五根散治疗可使海马病变向正常逆转,为藏药五根散防治脑血管病引起认知功能障碍后遗症提供了形态学依据.     

乳腺炎大鼠肾组织中P物质的表达与肥大细胞的形态学观察

应用组织化学和免疫组织化学方法对正常及攻毒不同时相组大鼠肾组织肥大细胞的数量、活性、分布范型、组织化学性质的动态变化及P物质的表达水平进行了研究。结果显示,攻毒后第6 h炎性细胞开始浸染肾小管基膜、肾小囊壁层及肾小球,12 h后浸染程度开始减少,第24 h出现最低值,而后又开始增多,至第72 h浸染达到高峰。且此间质内血管出现轻微的裂隙。同时不同时相肾组织的肥大细胞及其脱颗粒数量和P物质的表达水平均与炎性细胞浸染变化相吻合,攻毒后第6、12、48、72 h的炎性细胞、肥大细胞及其脱颗粒数量均显著高于攻毒前(P<0.05),且在攻毒后第72 h均达到最高值;P物质的表达与肥大细胞相关联。证实,肥大细胞和P物质参与了乳腺炎所致肾组织损伤与肾功能衰竭的病理过程。     

绵羊睾丸原代细胞培养及接种羊痘弱毒后的病变观察

研究了在相同培养条件下不同培养液、不同血清和不同细胞密度对绵羊睾丸细胞生长的影响 ,并对该细胞接种羊痘弱毒后的病变情况进行了观察。结果 ,3种培养液对绵羊睾丸细胞生长的支持作用表现为MEM液 >199液 >乳汉液 ,但差异不显著 ;用犊牛血清的最适细胞密度为8.0× 10 5～ 1.0× 10 6 /mL ,用成年牛血清的最适细胞密度为 1.0× 10 6 /mL ,用绵羊血清的最适细胞密度为 8.0× 10 5/mL ;原代培养生长良好的细胞接种羊痘弱毒后出现了明显的细胞病变     

海南（开鸟）消化系统的组织学观察

通过常规石蜡包埋切片、HE染色,观察2只雄性海南(开鸟)消化系统的组织结构.结果显示,其消化管具一般的4层结构,但缺乏黏膜肌层.食管有粗大的皱襞,肌层发达,无食管腺.嗉囊不明显,肌胃退化,与腺胃构成一囊状的胃.小肠绒毛较长,有分支现象,未见中央乳糜管结构.肠腺的黏液细胞为圆形,细胞核位于细胞中央;无十二指肠腺.肝、胰的结构与其他鸟类相似.海南(开鸟)消化器官的特点可能与其食性有关.     

幼龄牦牛甲状腺的显微结构和超微结构观察

利用光镜和电镜技术对幼龄牦牛甲状腺的组织形态结构特征进行了观察.光镜下,幼龄牦牛的甲状腺主要由不同大小的腺泡构成;小腺泡上皮细胞呈立方状或矮柱状,腺泡腔内含有较多的周边胶体空泡;大腺泡上皮细胞呈低立方状或扁平状,周边胶体空泡少.电镜下,小腺泡上皮细胞胞核大,呈圆形或卵圆形,胞质内富含线粒体、粗面内质网、高尔基复合体、溶酶体、胶质小滴和分泌颗粒等细胞器;大腺泡上皮细胞胞核小,呈扁椭圆形,胞质内细胞器不发达.表明,小腺泡上皮细胞较大腺泡上皮细胞具有更高的活性.在幼龄牦牛甲状腺中未发现腺泡旁细胞.