杀球灵与拉沙洛菌素的交叉抗药性试验

杀球灵与拉沙洛菌素的交叉抗药性试验甘德培汪明（中国农业大学动物医学院北京１０００９４）为了研究拉沙洛菌素和杀球灵间是否存在交叉抗药性，作者进行了本试验。１材料与方法１．１虫株柔嫩艾美球虫敏感株由本院寄生虫学教研组保存；柔嫩艾美球虫抗性株，对质量分数为...     

速丹对鸡四种球虫混合感染疗效的笼饲和田间试验

速丹Stenorol(Halofuginone)是法国罗素·优克福(Rousse Uclaf)公司生产的一种新型抗球虫药。Kantor等(1967)首次报道将速丹以3ppm的浓度混于饲料,驱杀鸡的5种艾美耳球虫(Eimeria)有高效。yvore(1974)Foure和Bemijean(1974)及yrore等(1974)用新从野外分离的虫株试验,证明这种药物对多种球虫有高效。饲料中含3ppm的速丹可保护鸡完全不受4种艾美耳球虫:堆型艾美耳球虫(Eimeria acervulina)、巨     

杀球灵等药物对兔肝球虫病的疗效试验

兔球虫病对养兔业的危害十分严重,据北京、上海、江苏和浙江等地的报道,兔群的平均感染率在90％以上,病兔的死亡率可高达60％。Fitzge-rald(1973)报道,用莫能菌素0.005％～0.02％剂量可有效地控制兔肝球虫病和肠球虫病,但对兔体增重有一定的抑制作用。Gwyther(1976)用0.004％和0.002％剂量或高剂量均能控制兔球虫病。殷佩云等(1987)报道,莫能菌素10～150ppm对斯氏艾美耳球虫有显著的预防效果,40～150ppm可完全控制肝球虫病。Peeters等(1983)报道,50ppm和75ppm盐霉素可完全控制斯氏艾美耳球虫病。殷佩云等(1988)报道,25～100ppm盐霉素对人工感染的斯氏艾美耳球虫病无显著的预防效果。据比利时杨森公司介绍(1989),杀球灵(Diclazuril)对兔球虫病有疗效。为了验证上述3种药物对兔肝球虫病的防治效果,特进行了本次对比试验。     

R64433防治鸡柔嫩艾美耳球虫病的笼饲试验

自1974年拉沙里菌素(Lasalocid)问世至1983年盐霉素(Salinomycin)研制成功,这十年间,新抗球虫药的研制速度大大减慢。近年来,随着养禽业的迅速发展,一些制药公司又开展新产品的开发,如Narasin、Toltrazuril、Mardura-micin。其中比利时杨森公司(Janssen)合成的R64433(Diclazuril),1ppm剂量,即具有广谱活性,且比较安全。目前已在南非投入市场。国内的抗球虫药物多为引进仿制,但因一些地区使用不当,致使许多药物寿命缩短,效果降低,影响生产。为开发利用新药,以适应养鸡业发展的需要,我们进行了R64433与速丹防治鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)病的疗效比较试验。     

复方敌球灵对鸡柔嫩艾美耳球虫孢子生殖及致病力的影响

复方敌球灵对鸡柔嫩艾美耳球虫孢子生殖及致病力的影响１）胡庭俊梁纪兰党萍樊斌堂刘大义（中国农业科学院中兽医研究所兰州７３００５０）鸡球虫病是一种严重危害养鸡业的寄生虫病，病原体为艾美耳属球虫。近年来，中国农业科学院中兽医研究所研制出了抗鸡球虫中药制剂敌...     

地克珠利对柔嫩艾美耳球虫SAG4表达的影响

建立地克珠利抗柔嫩艾美耳球虫感染鸡动物模型,收集获得柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子,采用PCR扩增柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子SAG4基因不含N端信号肽的编码序列,构建p ET-28a-SAG4表达质粒,转化至BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达融合蛋白,镍亲和层析柱法纯化蛋白,通过免疫BALB/c小鼠制备SAG4抗血清。用Real-time PCR检测SAG4 m RNA的表达,用Western-blot和免疫荧光技术检测SAG4蛋白的表达情况。结果显示,p ET-28a-SAG4表达的重组蛋白为可溶性蛋白,地克珠利显著降低了柔嫩艾美耳球虫第2代裂殖子SAG4基因m RNA和蛋白的表达。这提示SAG4基因可能与地克珠利抗球虫作用相关,这将为地克珠利抗球虫作用机理的阐述提供理论依据。     

柔嫩艾美球虫对复方抗球虫制剂抗药性的诱导

柔嫩艾美球虫(Eimeriatenella)敏感株在复方抗球虫制剂剂量递增的情况下,经过10次传代,诱导出其对复方抗球虫制剂的抗药性;经过8次传代,诱导出柔嫩艾美球虫抗氯嗪苯乙氰株对复方抗球虫制剂的抗药性。与单一用药相比,柔嫩艾美球虫对复方抗球虫制剂的抗药性产生较慢,复方抗球虫制剂控制柔嫩艾美球虫敏感株的效果比控制抗氯嗪苯乙氰株的效果要好。     

莫能霉素对斯氏艾美耳球虫内生发育的抑制试验

Fitzgerald(1973)和Gwyther(1976)都报道过莫能霉素(Monensin)能控制兔的球虫病;殷佩云等(1986)用10～150ppm的莫能霉素试验预防该病,获得显著效果。本试验的目的在于进一步观察该药对斯氏艾美耳球虫的确切疗效,及本药对该球虫内生发育各阶段的抑制作用。 (一)材料与方法 1.试验动物:无球虫寄生的健康大耳白兔,40～60日龄,共40只。 2.试验药物:莫能霉素(含量95～98％),由北京农业大学微生物教研组提供。 3.试验方法:试验分两组,每组20只兔。两组同时人工感染斯氏艾美耳球虫。一组从     

中药复方禽球灵抗鸡柔嫩艾美球虫的效果

采用人工感染发病方法 ,观察了中药复方禽球灵抗鸡柔嫩艾美球虫的效果。结果表明 ,10 g/kg禽球灵对柔嫩艾美球虫的感染有较好的预防效果。抗球虫指数 (ACI)达 15 1.4 8,血便分数较感染不给药组降低了 4 8.2 2 % ,料肉比较感染不给药组降低了 2 6 .2 9%。     

19种抗球虫药和抗疟药配合应用的药效试验

测定了１９种抗球虫药和抗疟药及其部分药物配合应用的药效，其中青蒿素、蒿甲醚、奎宁和氯喹在鸡胚中无抗球虫作用；乙胺嘧啶和乙氧乙胺苯甲酯在高浓度时对柔嫩艾美耳球虫有较弱的抗球虫活性；其余１３种药物在鸡胚中均表现良好的抗球虫活性；还进行了数种抗球虫药在鸡胚中的配合应用。试验结果表明，利用柔嫩艾美耳球虫子孢子感染鸡胚进行抗球虫药效测定，具有灵敏度和准确性高、节省时间和试验材料等优点，尤其适用大规模药物筛选     

柔嫩艾美耳球虫感染鸡的盲肠上皮间淋巴细胞表达白介素17的动态变化

以1×104个柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子化卵囊感染10日龄AA肉鸡,于感染后第24、48及72小时分离鸡盲肠上皮间淋巴细胞(IELs)。提取鸡盲肠IELs总RNA,用实时荧光定量PCR方法检测IL-17的表达动态;然后用FITC标记的抗鸡CD4单抗和PE标记的抗小鼠IL-17单抗作为抗体对盲肠IELs进行荧光抗体染色,再进行流式细胞术分析,检测了表达IL-17的CD4+盲肠IELs在柔嫩艾美耳球虫感染后的动态变化。实时荧光定量PCR结果表明,鸡在感染柔嫩艾美耳球虫后能够显著上调IL-17mR-NA的表达水平,流式细胞分析结果表明,在球虫感染后表达IL-17的CD4+细胞数量显著上升。这些结果表明,IL-17参与了宿主抵抗球虫感染的反应。     

三个柔嫩艾美球虫虫株线粒体cox 1基因部分序列的比较分析

为研究柔嫩艾美球虫不同毒力株的线粒体细胞色素c氧化酶第1亚基(cox1)基因与球虫种群之间的遗传关系,应用聚合酶链反应扩增柔嫩艾美球虫3个不同毒力株的cox1序列,并与GenBank上登录的鸡柔嫩艾美球虫、巨型艾美球虫、毒害艾美球虫和堆形艾美球虫虫株的相应序列进行比对分析.结果显示,每个虫株都获得659 bp的cox1部分有效序列(pcox1).柔嫩艾美球虫不同虫株的pcox1序列完全相同,但与其他种的艾美球虫相应的pcox1序列有不同程度的差异.表明柔嫩艾美球虫的cox1序列可作为艾美球虫不同种虫株之间遗传变异研究的标记.     

鸡柔嫩艾美球虫DNA疫苗pcDNA4.0(c)-pEtK2-IL-2对其他球虫的交叉保护力

将柔嫩艾美球虫DNA疫苗pcDNA4.0(c)-pEtK2-IL-2以50μg分别对14日龄和21日龄雏鸡进行胸部肌肉注射免疫,28日龄对各未免疫组与免疫组鸡分别口服接种柔嫩艾美球虫、巨型艾美球虫、堆形艾美球虫和毒害艾美球虫孢子化卵囊,36日龄剖杀,分析比较免疫保护效果.结果显示,柔嫩艾美球虫攻毒免疫试验组与柔嫩艾美球虫攻毒未免疫对照组比较,增重、盲肠病变记分、OPG值差异显著(P＜0.05),免疫保护效果明显,抗球虫指数(ACI)达186.50;而巨型艾美球虫、堆形艾美球虫和毒害艾美球虫攻毒免疫试验组的ACI分别为147.85、142.71和153.82,增重、盲肠病变记分、OPG值和ACI与相应的攻毒未免疫对照组比较,均有不同程度改善,免疫保护效果不明显.表明,该DNA疫苗对柔嫩艾美球虫的攻击具有完全免疫保护作用,而对巨型艾美球虫、堆形艾美球虫、毒害艾美球虫的攻击具有部分交叉保护力.     

用柔嫩艾美耳球虫感染鸡胚测定和评价抗球虫药的效力

用柔嫩艾美耳球虫感染鸡胚测定和评价抗球虫药的效力１）张勤赵洪明２）张晋江３）李华风４）张华莹（河北省畜牧兽医研究所保定０７１０００）由于球虫对药物极易产生抗药性，所以大多数抗球虫药的使用期限都较短，这样就需要不断地研制新的抗球虫药。在抗球虫药的研究中...     

5种离子载体类抗球虫药对常见鸡球虫的作用比较

比较了5种离子载体类抗球虫药拉沙里菌素(Lasalocid)、盐霉素(Salinomycin)、马杜拉霉素(Maduramicin)、那拉霉素(Narasin)和莫能菌素(Monensin)对广东一些鸡场常见的柔嫩艾美球虫(Eimeria tenella)、巨型艾美球虫(E.maxima)、堆型艾美球虫(E.acervulina)和毒害艾美球虫(E.necatrix)不同感染量的作用效果.结果,拉沙里菌素(90 mg/kg)、盐霉素(60 mg/kg)、马杜拉霉素(50 mg/kg)、那拉霉素(70 mg/kg)、莫能菌素(100 mg/kg)拌料饲喂组和感染不用药组对毒害艾美球虫的抗球虫指数(ACI)分别为194.0、184.6、181.9、173.3、167.2和125.7;对巨型艾美球虫的ACI分别为199.5、149.3、152.0、172.9、141.2和99.1;对堆型艾美球虫的ACI分别为165.1、173.1、150.1、156.8、149.4和105.2;对柔嫩艾美球虫的ACI分别为165.2、75.1、85.0、137.6、83.1和102.6.即拉沙里菌素对柔嫩艾美球虫、毒害艾美球虫和巨型艾美球虫的效果比其它4种药要好,拉沙里菌素对堆型艾美球虫的效果比盐霉素低,但比马杜拉霉素、莫能菌素、那拉霉素高.     

西藏部分地区牦牛球虫感染情况的调查

为了调查西藏部分地区牦牛球虫感染情况和流行现状,采用饱和蔗糖溶液漂浮法对从西藏林芝、山南和日喀则地区内放牧牦牛群随机采集的239份新鲜粪便样品进行球虫检测。结果显示:3个地区牦牛的艾美耳球虫总感染率为43.93%(105/239),共检测出11种艾美耳球虫,分别为邱氏艾美耳球虫25.94%(62/239)、椭圆艾美耳球虫15.48%(37/239)、柱状艾美耳球虫11.30%(27/239)、阿拉巴艾美耳球虫10.88%(26/239)、亚球形艾美耳球虫7.95%(19/239)、牛艾美耳球虫7.53%(18/239)、加拿大艾美耳球虫5.86%(14/239)、皮利他艾美耳球虫5.44%(13/239)、奥博艾美耳球虫3.35%(8/239)、拨克郎艾美耳球虫1.26%(3/239)和巴西艾美耳球虫1.26%(3/239),其中邱氏艾美耳球虫和椭圆艾美耳球虫为优势虫种。此外,牦牛球虫单感染率为18.41%(44/239),混合感染率为25.52%(61/239),其中以2种球虫的混合感染率最高,感染率为11.30%,混合感染3、4、5、6和7种球虫的感染率分别为9.21%、0、3.35%、0.84%和0.84%。调查结果表明:西藏部分地区牦牛球虫病流行较为严重,应加强本病的综合防控。     

磺胺氯吡嗪(Сулъфахлорпира3ин)对兔球虫病的治疗效力

端士的西贝——捷吉牧场建议把叫作的磺胺氯吡嗪,用于治疗禽病和预防由阿赛艾美耳球虫(Eimeria acervulima)、巨艾美耳球虫(E.maxima)、波氏艾美耳球虫(E.brunetti)、鸡艾美耳球虫(E.tenella)和E.necatrix所引起的球虫病。本药是一种含有30％磺胺氯吡嗪钠盐的白色粉末,易溶于水。1克药溶解在1立升水中,使用3天,在必要时,间隔3天再重复一个疗程。     

鸡球虫田间混合种和柔嫩艾美球虫单一种的抗药性试验

用上海某鸡场分离的球虫田间混合种及从其中分离纯化的 4株柔嫩艾美球虫 (Eimeriatenella)单一种对常用抗球虫药的抗药性进行检测。发现该球虫田间种对氯羟吡啶 (clopidol)、马杜拉霉素 (maduramicin)、莫能菌素 (monensin)、氨丙啉 (amprolium) 4种抗球虫药已产生完全抗药性 ,对氯苯胍 (robenidine)轻度抗药 ,对地克珠利 (diclazuril)无抗药性。 4株柔嫩艾美球虫单一种对氯羟吡啶、马杜拉霉素、莫能菌素、氨丙啉的抗药谱与该球虫田间混合种基本一致     

鸡柔嫩艾美耳球虫哈尔滨株3-1E基因的重组表达及其表达产物的免疫保护性

应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫哈尔滨株子孢子表面抗原3-1E基因,再克隆至质粒载体pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-3-1E,采用EcoR I+Hind III双酶切法及PCR扩增鉴定正确后,将3-1E基因cDNA目的片段亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒pET-32a-3-1E,用EcoR I+Hind III双酶切法及DNA测序证明cDNA序列完全正确.表达蛋白的SDS-PAGE分析表明,表达产物与预期大小(36.47 ku)一致,为可溶性表达.对诱导时间以及IPTG浓度的优化结果表明,当诱导6 h且IPTG浓度在0.8 mmol/L时表达量最大.Western-blot分析表明,表达的蛋白可被感染柔嫩艾美耳球虫鸡的阳性血清特异性识别.将重组3-1E蛋白纯化后分为肌注蛋白组和肌注蛋白加弗氏完全佐剂组免疫AA鸡,通过计算抗球虫指数检测其保护力.结果显示,肌注重组蛋白组与肌注重组蛋白加弗氏完全佐剂组均能刺激鸡体产生一定的免疫反应,对柔嫩艾美耳球虫感染产生有力的保护,其中后者优于前者,表明该重组3-1E蛋白具有研制成亚单位疫苗的潜力.     

磁场对家兔球虫卵囊发育的影响

国内外不少研究人员对不同的气候条件、不同的温度、湿度、不同的理化因素处理给予球虫卵囊的影响做了大量试验,但磁场对球虫卵囊的作用尚未见报道。本试验初步探讨了恒磁场对于家兔球虫卵囊发育的影响。 (一)材料与方法 1.兔球虫卵囊:取自本所兔球虫病课题组第86-5-26号试验兔大肠内容物,以饱和盐水漂浮法富集卵囊显微镜下检查,含有四类球虫,即中型艾美耳球虫、小型艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫、新兔艾美耳球虫。