黄曲霉毒素检测方法简介

黄曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)是由黄曲霉和寄生曲霉产生的一种强烈致癌性物质。目前已鉴定出13种,分为两大类——B_1及其衍生物和G_1及其衍生物。B_1的衍生物包括B_2、B_2a、M_1、M_2、P_1、Q_1、四氢脱氧B_1和黄曲霉毒素醇;G_1的衍生物包括G_2、G_2a和GM_1。食品与饲料中污染的A-FT主要有B_1、B_2、G_1、G_2、M_1和M_2。由于AFT的毒性大、污染广且难以去毒,对人们的健康危害很大,因此对AFT的监测显得十分重要。自60年代初以来,建立的检测AFT的方法已达30余种,这些方法可归成三大类,即生物学方法、化学方法和免疫学方法。(一)生物学方法 有10种,主要用于定性。     

真菌毒素单克隆抗体的制备与应用

80年代以来,单克隆抗体(McAb)技术被逐渐应用于真菌毒素的监测,先后制备出黄曲霉素M_1(Nancy等,1984),黄曲霉毒素B_1(Candlish等,1985)、T-2毒素(Feuersten等,1985)、赭曲霉毒素A(Cand-lish等,1986)、玉米赤霉烯酮(Dixon等,1987)、二醋酸藨草镰刀菌烯醇(Panly等,1988)、黄曲霉毒素B_2(Hastings等,1988)及露湿漆斑     

肠毒性大肠杆菌K_(99)抗原和F_(41)抗原的纯化及特性分析

本文主要介绍了通过硫酸铵沉淀,脱氧胆酸盐处理,Spehadex G200凝胶过滤,SDS-PAGE(十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)等方法分离纯化K_(99)抗原和F_(41)抗原,并对其部分特性予以描述,还制备了特异性抗血清。     

抗细粒棘球蚴原头蚴单克隆抗体对几种抗原的识别作用观察

为了提高家畜棘球蚴病的免疫诊断水平和寻找保护性抗原,我们已建立了若干株抗细粒棘球蚴原头蚴的单克隆抗体细胞株。本文之目的是用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹术(Western blot)对上述单抗的抗原识别作用进行观察。     

从流产羔羊骨髓中分离出一株牛I型布氏菌

为考核我区经多年的布氏羊型5号菌苗气雾免疫后的效果,我们曾在酒泉、金塔、玉门、安西、敦煌等5个县(市)开展布氏菌病检菌工作,共收集牛、羊、猪可检材料1557份,其中:流产胎羔582份,在酒泉、安西检出可疑布氏菌8株。对这些可疑菌株进行了菌型鉴定和毒力测定,其结果报告如下:(一)材料与方法1.布氏菌多价诊断血清:为兰州生物制品所生产,批号:9001,效价1:3200。2.M_(104)冻干菌苗:为兰州生药厂生产。3.S_2冻干菌苗::为兰州生药厂生产。4.M_5冻干菌苗:为兰州生药厂生产。5.单因子诊断血清:ARM,系北京流行病研究所生产。6.牛型噬菌体:由北京流行病研究所生产。     

鸡γ-干扰素实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立一种检测鸡γ-干扰素的实时荧光定量RT-PCR方法,采用RT-PCR方法从ConA诱导活化的鸡脾淋巴细胞的总RNA中扩增得到鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)和鸡的28 SrRNA(Ch28 S)基因,将其分别克隆至体外转录载体后经体外转录获得了ChIFN-γ和Ch28 S的RNA,采用各自的特异性引物及Taqman探针,以Ch28 S RNA作为内参进行一步法实时荧光定量RT-PCR,检测ChIFN-γ。结果表明:ChIFN-γ和内参Ch28 S的Ct值与标准品稀释梯度在1×102~1×107拷贝/μL范围分别呈良好的线性关系,r2均大于0.99。此方法用于检测ChIFN-γ,具有简便、高效、敏感、特异的特点。     

羔羊轮状病毒高免血清对犊牛轮状病毒性腹泻的保护性试验

1985～1991年青海省西宁市廿里铺园艺场畜牧一队初生黑白花犊牛发生一种以腹泻为主要特征的疾病,随机取粪样应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法确诊病原为犊牛轮状病毒,感染率为33.33％,试用抗体效价1∶64～128的羔轮状病毒(RV)高免血清对37头药物治疗无效的腹泻犊牛进行保护性试验,结果病犊牛获得全部保护。(一)材料与方法1.材料:(1)试验材料:从该场畜牧一队采集犊牛腹泻粪便9份,-50℃保存备用。(2)羔羊RV高免血清:由青海省畜牧兽医科学院羔羊病课题组制备。     

乌鸡白凤丸治疗家畜卡他性子宫炎引起的不孕症

自1983～1986年,笔者试用乌鸡白凤丸(北京同仁堂制药厂生产,批号-5-3-820724)治疗家畜卡他性子宫内膜炎引起的不孕症35例,其中黄牛28头,马2头,驴5头。除2头牛无效外,其余全部治愈,治愈率94.28％。 乌鸡白凤丸是由乌鸡、牡蛎、鳖甲、人参、鹿角胶、黄芪、白芍、当归、香附、甘草等组成,每丸重     

日本血吸虫丝氨酸-苏氨酸蛋白磷酸酶基因的表达及其免疫保护试验

为研究日本血吸虫丝氨酸-苏氨酸蛋白磷酸酶(SjPP)的免疫功能,构建了原核表达重组质粒pET28a( )-SjPP,转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)进行诱导表达,并用重组蛋白进行了小鼠免疫保护试验,免疫剂量为每次20μg/只,共免疫3次。结果表明,pET28a( )-SjPP/BL21(DE3)在0.1 mmol/L IPTG诱导2 h时,每1 g菌体可产生17.8 mg以包涵体形式存在的重组蛋白;重组蛋白免疫小鼠后诱导产生了高效价的血清特异性IgG抗体,并获得了部分减虫率、肝组织减卵率和显著的粪便减卵率,具有一定的免疫保护作用。     

非洲猪瘟病毒外膜蛋白CD2v的原核表达及其免疫特性的研究

本研究参考非洲猪瘟病毒(ASFV)国内分离株SY18株的EP402R基因(编码CD2v蛋白),优化其序列,设计特异性引物扩增。将去除跨膜保留胞外区或胞内区的两种截短体克隆到原核表达载体p ET-28a中,再转化至大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞。经IPTG诱导,铁蛋白融合CD2v胞外区(CD2vN-Fe)和铁蛋白融合CD2v胞外-胞内区(CD2v-NC-Fe)均获得高效表达。以该融合蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)和间接免疫荧光(IFA)方法检测其灵敏度和特异性。结果表明:CD2vN-Fe多抗特异性较强。本研究为建立ASFV的血清学鉴别检测方法奠定了基础。     

牦牛血铜锌超氧化物歧化酶的提纯研究

本文首次以牦牛血红细胞为原料,采用乙醇-氯仿处理,丙酮沉淀和DE AE-32纤维素柱层析等分离手段提取纯化出铜锌超氧化物歧化酶。本法每升血红细胞可获得纯化的超氧化物歧化酶总活力为360000单位,比活为13000U/mg蛋白(邻苯三酚法),活力回收为64.3％。聚丙烯酰胺凝胶电泳(pH8.9,Tris-Gly缓冲液)显示清晰的两条带。     

牛病毒性腹泻病毒E_(84-170aa)~(rns)蛋白的可溶性表达及抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立一种检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体的ELISA方法,对E~(rns)蛋白一个包含2个预测抗原表位的96氨基酸蛋白编码序列,经密码子优化后进行基因合成,构建重组表达载体pET-E_(84-170aa)~(rns),转化表达菌株BL21(DE3),在28℃用0.1 mmol/L IPTG诱导重组蛋白表达。将重组E_(84-170aa)~(rns)蛋白通过Ni~(2+)-NTA树脂亲和层析方法纯化后,用Western-blot分析其抗原性。结果显示,重组E_(84-170aa)~(rns)蛋白以完全可溶形式在大肠杆菌中高效表达,经Ni~(2+)-NTA树脂纯化获得重组E_(84-170aa)~(rns)蛋白的浓度和纯度分别为1.5 mg/mL和94%。Western-blot显示,该重组蛋白对BVDV阳性血清具有很强的抗原反应性。用纯化的重组E_(84-170aa)~(rns)蛋白建立间接ELISA方法(E_(84-170aa)~(rns)-iELISA)的结果显示,所建立方法的最佳抗原包被浓度为1.0μg/mL,血清稀释度为1∶100,酶标二抗的稀释度为1∶5 000,血清D450的阴阳性临界值为0.283;该方法仅对BVDV阳性血清呈特异性反应,对1∶1 280倍稀释的阳性血清仍可检出,批内试验和批间试验的变异系数均小于10%。用该方法对487份牛血清进行BVDV抗体检测,检出128份阳性血清。本研究建立的E_(84-170aa)~(rns)-iELISA方法为BVDV抗体检测及流行病学调查提供了一种有效手段。     

原白头翁素衍生物的合成及其抑菌活性

以间硝基苯甲醛、4-甲氧基苯甲醛、3,4,5-三甲氧基苯甲醛和乙酰丙酸乙酯为原料,经过Stobbe缩合、环合两步反应合成了化合物4-(3-硝基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃、4-(4-甲氧基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃和4-(3,4,5-三甲氧基苯甲基)-5-亚甲基-2(5H)-呋喃.同时观察了合成的这3种化合物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑茵活性.结果表明,合成的这3种化合物对2种病原茵具有较好的抑菌效果.     

几种二甲苯胺噻唑类似物的合成及其镇痛、催眠作用的比较

为了寻找便于国内生产和临床应用的兽用镇麻新药,我们在合成隆膨(Rompun)的基础上进一步改变结构,合成了几种二甲苯胺噻唑类似物。 我们在本刊1977年第2期曾报道了2-(2·6-二甲苯胺基)-5·6-二氢-4H-1·3-噻嗪(简称2·6-二甲苯胺噻嗪)和2-(2·6-二甲苯胺基)-5-二氢-4H-1·3-噻唑(简称2·6-二甲苯胺噻唑)的合成方法及初步药理作用。并初步讨论了化学结构与药理作用的关系,验证了苯环上     

2005年西亚非洲中文文献题录(三)

美国全球霸权计划中的欧洲与中东[埃及]萨米尔·阿明;官进胜摘译国外理论动态2005(6)23~28从九一一事件看美国-伊斯兰“文明冲突”的宗教内核张志洲国际论坛2005(4)7~11美国-伊斯兰世界关系与价值观安维华中东研究2005(1)25~30伊战后国际恐怖主义的发展态势及反恐对象陈静郑州大学学报(哲社科版)2005(3)39~42中东主要伊斯兰极端组织现状唐志超国际资料信息2005(7)18~27中东非政府组织与现代中东社会建构阎文虎中东研究2005(2)66~73试述阿拉伯地区妇女地位的变化吴琼、管金玲中华女子学院学报2005(5)51~54贝都因人:阿拉伯世界的精神贵族王猛…     

小RNA病毒蛋白的系统命名法——L_(434)法则

小RNA病毒(Picornavirus)蛋白是根据病毒在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳上的电泳图谱而命名(Summers et al,1965)。这种方法不仅在不同病毒中相应病毒蛋白产生出不同的名称,如病毒聚合酶在脊髓灰质炎(Polio)病毒、口蹄疫病毒(FMDV)和脑心肌炎(EMC)病毒中分别被称     

山羊关节炎-脑炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立检测山羊关节炎-脑炎病毒(CAEV)血清抗体的间接ELISA方法,采用PCR方法扩增山羊关节炎-脑炎病毒CA蛋白编码基因序列,然后克隆至原核表达载体pET-28a(+),诱导含有重组载体pET-28a(+)-CA的大肠杆菌BL21(DE3)表达重组蛋白rHis-CA。采用Ni柱亲和层析方法纯化重组蛋白rHisCA,并以纯化的rHis-CA为包被抗原建立检测山羊关节炎-脑炎血清抗体的间接ELISA方法。结果表明重组蛋白rHis-CA以包涵体形式表达,具有良好的反应原性。所建立的rHis-CA间接ELISA方法的最适抗原包被质量浓度和血清稀释度分别为0.4 μg/mL和1∶100,血清阴阳性的D_(450)临界值为0.45。该方法仅与山羊关节炎-脑炎病毒阳性血清发生特异性反应,不与山羊痘病毒、蓝舌病病毒和口蹄疫病毒阳性血清发生交叉反应。对来自陕西地区的48份山羊血清进行CAEV抗体检测,rHis-CA ELISA和琼脂凝胶免疫扩散试验的阳性检出率分别为35.41%(17/48)和31.25%(15/48)。对来自天津地区2个山羊场的240份山羊血清样本进行CAEV抗体检测,rHis-CA ELISA方法和琼脂凝胶免疫扩散试验的检测结果均为阴性。     

2002年西亚非洲中文论文题录(二)

扩大共识 ,促进合作———对江主席出访中东和北非国家的思考和理解 /陈建民 / /国际政治研究 -2 0 0 2 ,(3 ) -3 1 -3 4第三世界的“第三条道路”/秦　宣 / /中共中央党校学报 -2 0 0 2 ,6(2 ) -83 -88阿拉伯复兴社会党及其理论与实践 /王新刚 / /西北大学学报 -2 0 0 2 ,3 2 (3 ) -1 3 4-1 3 8论阿拉伯妇女人力资源的开发 /伍庆玲 / /中东研究 -2 0 0 2 ,(1 ) -75 -80被遗忘的民族———库德族 /胡　升 / /中阿文经 -2 0 0 2 ,(1 5 8) -1 0 -1 8库尔德人 :西亚“游牧”的政治力量 /谢国党 / /今日民族 -2 0 0 2 ,(6) -2 0 -2 …     

我会会长王介南教授著《郑和下西洋》(英汉对照)出版

<正>我会会长王介南教授著《郑和下西洋》(英汉对照,"中外文化交流故事丛书"之一)已由北京五洲传播出版社2010年1月出版。该书主要内容:1405-1433年,在欧洲大航海时代到来的半个多世纪之前,中国明代航海家郑和(1371-1433)历时28年先后7次率领庞大的     

猪囊尾蚴排泄分泌蛋白的抗原性分析

猪囊尾蚴排泄分泌蛋白的制备国内外都曾有过报道,但对用作诊断抗原的猪囊尾蚴排泄分泌蛋白的抗原性的研究较少。我们应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫电泳(IE)对猪囊尾蚴排泄分泌蛋白进行了分析,并用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)评价了其抗原性。(一)材料与方法1.材料:(1)粗制囊液抗原:从新鲜囊尾蚴中抽取,3500r/min离心30分钟,保留上清液,低温存放。(2)排泄分泌抗原:48、96、105、204小时的囊尾蚴孵育液:48、96、105的头节孵育液,均