猪肺炎霉形体单克隆抗体的制备与鉴定

用KM 2培养基 (含马血清 )培养猪肺炎霉形体 (Mhp)ZCF2 3株 ,对培养物高速离心 ,用PBS悬浮 ,反复冻融裂解后作为免疫原 ,腹腔注射免疫BALB/c小鼠。利用淋巴细胞杂交瘤技术获得了 5株分泌特异性抗体的单克隆抗体细胞株 ,分别命名为 11C6、14C11、11B6 1、10C11 2和12E7 1。生物学特性鉴定结果表明 ,5株腹水单克隆抗体的间接ELISA效价均在 1∶10 0 0 0左右 ;免疫球蛋白亚类均为IgG3;免疫印迹结果显示 ,5株单克隆抗体所针对的抗原表位在 90、4 0、70和6 0ku左右的蛋白分子上 ,均不与马血清蛋白反应 ,说明这些单克隆抗体均是针对Mhp蛋白的特异性单克隆抗体。     

猪霉形体肺炎的诊治

20 0 1年 7月 ,安徽省含山县某猪场暴发以喘气为特征的呼吸道传染病 ,发病率达 10 0 % ,致死率 3 3 %。根据临床症状、剖检变化及实验室检验 ,确诊为猪霉形体肺炎。1　发病情况该猪场曾于 2 0 0 1年 5月上旬先后 2次购进育肥猪 12 5头 ,2 0 0 1年 6月上旬接种猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联疫苗。 2 0 0 1年7月中旬其中一圈的 10头育肥猪出现咳嗽症状 ,继而整个猪舍的育肥猪全部发病。2　临床症状病猪食欲不振 ,日渐消瘦 ,体温升至 40℃。呼吸增快 ,呈腹式呼吸 ,有的张口呼吸。随着病情逐渐加重 ,出现痉挛性咳嗽 ,口、鼻流黏性和脓性鼻液 ,死亡猪…     

平板乳胶凝集试验快速检测猪肺炎霉形体抗体

我们在试管乳胶凝集(TLA)试验的基础上,又进行了平板乳胶凝集(PLA)试验检测猪肺炎霉形体抗体的研究。 (一)材料和方法 1.10％聚苯乙烯乳胶原液:购自上海市医学化验所。 2.菌种:猪肺炎霉形体ZC株、猪鼻霉形体、猪滑液霉形体冻干菌株均由中国兽药监察所提供。 3.抗原制备:按照本实验室方法自制。 4.血清:以下供试血清用前均经56℃水浴30分钟灭活处理。 (1)兔抗猪肺炎霉形体高免血清:按国际霉形体命名委员会推荐的方法自制。批号:     

分泌抗猪肺炎霉形体单克隆抗体杂交瘤细胞的建立

分泌抗猪肺炎霉形体单克隆抗体杂交瘤细胞的建立张顺凤，刘奎（浙江农村技术师范专科学校宁波３１５０４０）（宁波市医科所）猪气喘病是一种传染性慢性肺炎，发病率很高，对仔猪、妊娠猪、哺乳猪危害更大，是威胁养猪业的主要疫病之一，其病源是猪肺炎霉形体。笔者利用淋...     

猪肺炎霉形体膜蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

通过提取猪肺炎霉形体ATCC25095株膜蛋白,并用免疫亲和层析柱对膜蛋白进行纯化,经SDS-PAGE分析得到了分子质量分别为66、50、46、42、32和24 ku的6种膜蛋白。以纯化的膜蛋白为包被抗原,建立了检测猪肺炎霉形体抗体的间接ELISA检测方法。结果显示,纯化的抗原具有更好的重复性和敏感性,对临床检测样品的检出率高于IDX ELISA试剂盒。     

单克隆抗体阻断ELISA检测SPF猪与非SPF猪肺炎霉形体抗体的比较

单克隆抗体阻断ＥＬＩＳＡ检测ＳＰＦ猪与非ＳＰＦ猪肺炎霉形体抗体的比较严彩红刘志南（北京市ＳＰＦ猪育种管理中心１０００９５）猪霉形体肺炎是由猪肺炎霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｈｙｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）引起的一种慢性呼吸道传染病，带菌猪是主要传染源。...     

猪霉形体肺炎的诊断和药敏试验

1992年11月20日,一养猪专业户从外地购进36头架子猪,体重30～40kg。饲养11天后相继发病,诊断为猪霉形体肺炎(MPS)。通过药敏试验,经2个疗程14天的治疗,除6头仅接受1～3天治疗因体弱病重和并发其他病菌感染而引起死亡外,其余30头猪只全部得到控制和恢复健康。     

猪肺炎霉形体膜制备方法对膜活性影响的研究

以猪肺炎霉形体为材料 ,分别采用反复冻融、低渗裂解、超声破碎等方法进行破膜试验。从膜蛋白收获率、标志酶活性、膜毒性等方面加以分析 ,以探索获取膜制剂的最佳条件。结果表明 ,采用低渗冻融超声相结合的膜制备方法使膜蛋白的收获率达 3 0 %左右 ;ATPase活力及膜毒性良好     

猪肺炎霉形体细胞膜蛋白毒性及其电泳分析

猪肺炎霉形体细胞膜蛋白毒性及其电泳分析张淑改聂向庭张映刘桂林（山西农业大学动物医学系太谷０３０８０１）猪喘气病是一种慢性接触性传染病，严重危害养猪业的发展。猪肺炎霉形体是此病的主要病原，其质膜同病原性霉形体的致病性相关，而对质膜上致病因素的分析，国外...     

猪肺炎霉形体168弱毒株的回归试验

将猪肺炎霉形体168无细胞培养弱毒株F340经健康小梅山猪连续传5代,每代观察11-16 d,临床无气喘和咳嗽症状,剖检无胰样小叶性肺炎病变,表明该菌株的稳定性和安全性良好;同时采集各传代猪的肺组织,用病肺块组织接种法分离培养猪肺炎霉形体,经72 h培养,其培养液呈微混浊,无沉淀,pH降至6.6,镜检见类圆球形菌体.     

猪霉形体肺炎与猪瘟混合感染的诊断

1986年元月10日～2月19日,我省某种猪场爆发疫病,有1/3的猪只发病,死亡43头。现将对本病的诊断情况报告如下。 (一)发病经过及临床表现 该种猪场有猪357头(种猪67头,哺乳仔猪202头,肥育猪88头),于1985年10月20日接种了猪瘟疫苗、猪肺疫,猪丹毒菌苗,同年12月中旬对断乳以上的猪只全部又进行了一次猪瘟疫苗接种。1986年元月10日,1头产后3日的母猪出现咳嗽症状。此后,进入产仔舍的临产母猪和哺乳母猪亦发生咳嗽。有3头产仔母猪还伴有喘气症     

猪肺炎霉形体热休克蛋白Hsp70单克隆抗体的制备及鉴定

以肺炎霉体体(Mhp)Yin-1株为模板,利用所合成的引物扩增了伴侣蛋白DnaK(热休克蛋白Hsp70)C末端基因,将得到的目的片段分别克隆至表达载体pET-28a和pGEX-6P-1中,原核表达获得了重组蛋白6P-1-DnakC和28a-DnakC,经Western-blot分析,均能被Mhp抗血清识别.以28a-DnakC作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法,以6P-1-DnakC为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠.筛选和鉴定了2株分泌抗DnaK的杂交瘤细胞株,命名为1AD10、2AF11.Western-blotting结果表明,这2株单抗与Mhp发生特异性反应而不与其他相关霉形体发生反应.抗体亚类鉴定结果显示,1AD10、2AF111分别为IgG2b和IgG2a亚类,且轻链均为κ链.相加ELISA试验表明,2株单抗能识别不同的抗原表位.     

羊霉形体肺炎的防治

华池县九窑口羊场位于子午岭地带的山庄乡 ,地处丘陵沟壑区 ,林草茂密 ,气候寒冷 ,以阴湿寒冷为特征 ,是羊霉形体肺炎感染发病的重点疫区。羊场建于 1989年 ,到 1994年的 6ａ间 ,羊霉形体肺炎发病累计 1146只 ,年均发病率为 3 3 .6%,死亡 3 3 6只 ,死亡率为 2 9.3 %。　　据 1994年对该羊场附近的 10个养羊户羊霉形体肺炎的发病情况调查结果 :共养羊 85 5只 ,发病羊 2 97只 ,发病率为3 4 .7%;死亡 88只 ,病死率为 2 9.6%。本病在当地流行多年 ,对当地养羊业危害十分严重。1　发病因素1.1　季节性　羊感染本病无严格的季节性 ,冬春枯草季节由…     

羊肺炎霉形体病调查

1992年在西北某地区的3个县10个牧场,对2160余只羊进行了羊肺炎霉形体病的调查,血清样品673份,检出阳性101份,阳性率为16％;并从发病地区羊群采集的2例山羊和1份鼻拭子病料中分离到3株霉形体。经系统鉴定和人工感染试验确诊为羊肺炎霉形体(M.ovipneumonia)。     

霉形体肺炎病猪与临床健康猪生长激素分泌的比较

霉形体肺炎病猪与临床健康猪生长激素分泌的比较姜礼胜１）陈伟华陈杰（南京农业大学动物医学院２１００９５）猪霉形体肺炎在哺乳仔猪和幼龄猪群发病率最高，怀孕后期及哺乳母猪次之，其他各类成年猪则以慢性和隐性感染为主。猪感染后逐渐消瘦，生长发育迟缓。有关本病发...     

抗菌新药与疫苗对猪霉形体肺炎的防治效果研究

用氟甲砜霉素等3种抗菌新药及猪霉形体肺炎疫苗对猪肺炎的临床使用方法与防治效果进行了比较.试验结果表明,氟甲砜霉素、普乐健、复方中草药及猪霉形体肺炎疫苗等均能提高试验猪的增重与饲料转化率;普乐健、复方中草药还能显著减轻病猪的症状与病理变化,其防治效果明显优于其他试验组药物.     

绵羊肺炎霉形体病的治疗

关于本病的治疗,国 内外学者均认为枝原净 (Tiamulin)对肺炎病 变的康复具有良好的作用。但该药不仅药源困难,而且其价格昂贵,故难以应用于生产。为寻找一种安全、有效、药源广泛、价格低廉的药物控制本病流行、保障养羊业健康发展,作者对60例以抗霉灵等五种药物,进行了治疗试验,现将结果报告如下。     

绵羊肺炎霉形体的培养与保存

绵羊肺炎霉形体的培养与保存谢琴何存利王东陈祝三余桂芳（宁夏农林科学院畜牧兽医研究所银川７５０００２）霉形体是一种很小的原核生物，无细胞壁，可在人工培养基上生长并形成小菌落。霉形体因为生长速度慢，生长条件苛刻而难以培养，这对防治这类疾病的研究造成困难。...     

霉形体及霉形体病研究进展

霉形体 (Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ)是软皮体纲 (Ｍｏｌｌｉｃｕｔｅｓ)霉形体目(Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｔａｌｅｓ)中的一类原核微生物[1] 。霉形体及霉形体病的研究 ,始于 1898年Ｎｏｃａｒｄ从牛传染性胸膜肺炎病灶中分离出该种病原体 ,至今已愈百年 ,但早期由于诸多因素 ,这方面的研究进展缓慢。 1962年Ｃｈａｎｏｃｋ及Ｈａｙｆｌｉｃｋ在人工培养基上分离肺炎霉形体获成功后 ,霉形体的研究得以迅速发展。资料报道 ,截至 2 0 0 0年分离出的霉形体达 160种 ,遍布世界各地[2 ,3 ] ,对人类及牛、羊、猪、鸡等的危害较大。同时实验动物及细胞培…     

羊肺炎霉形体细胞蛋白多肽分析

羊肺炎霉形体细胞蛋白多肽分析包惠芳邓光明逯忠新梁桂香（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）羊肺炎霉形体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｏｖｉｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）自Ｍａｃｋｅｙ等（１９６３）和Ｌｉｖｉｎｇｓｔｏｎ等（１９７９）先后从患胸膜肺炎的绵羊和山羊...