单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞的研制及应用

<正> 本文报道根据反向间接血凝(RPHA)原理,用单克隆抗A、抗B、抗H抗体分别在合适的pH值醋酸盐缓冲液中,致敏醛化人“O”型红细胞,制得单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞。用来检验人体液斑的ABH血型物质。单克隆抗A、抗B、抗H指示红细胞对相应分泌型人唾液的凝集效价为8192倍、4096倍     

抗人N单克隆抗体的制备及其特性的研究

用ON型人红细胞免疫BALB/c小鼠脾细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得分泌IgM类抗人N单克隆抗体杂交瘤细胞株(ON_1D_3)。其培养上清液抗体效价为128～256,诱生小鼠腹水的抗体效价为8192;与Panel A红细胞反应呈抗N特异性;检测273名成人红细胞,只特异性凝集N(?)MN型人红细胞,不凝集M型红细胞。与猴等9种动物红细胞无交叉反应;酶修饰试验结果表明,ON_1D_3识别的抗原决定簇是唾液酸依赖性的。     

鳝鱼抗H血清的制备

我国鳝鱼血清中含有效价高、特异性好的抗H凝集素[1]，但以往从鳝鱼血清中获取抗H凝集素，由于从创口采血，很难做到无菌操作；在挤压鳝鱼体取血时，难免将鳝鱼体表分泌的粘液混入血液中。因此，制备的鳝鱼血清将受到不同程度的污染，且保存时间较短；混入的粘性物质干扰红细胞的凝集反应，使其应用受限。本研究经多种方法筛选，采用微孔滤膜过滤技术，将粗制鳝鱼抗H血清中的细菌和杂质清除，提高了血清的质量。同时改进血清方法，提高血清产量，为血型检验提供新的试剂。材料和方法一、材料1．鳝鱼来源市售个体较大、较重，活动能力较强…     

抗人红细胞凝集素血清的应用研究

本文通过吸收抑制试验证明了抗人血红蛋白沉淀素血清中存在的那种能凝集人类红细胞的凝集素,实际上就是用人的红细胞免疫家兔而产生的抗人红细胞凝集素.为考察抗人红细胞凝集素血清对血痕种属的鉴识能力,本文用此抗血清作解离试验,对不同稀释度的新鲜人血痕、室内存放的久暂不一的人血痕和15种动物血痕进行了检测.得到的结果是,新鲜人血痕稀释至1/1000仍呈阳性;500例室内存放的人血痕中,存放时间在11年以下的448例全部能够准确测出;存放12-16年的52例人血痕中,有33例能够测出,余19例呈阴性;15种动物血痕全部呈阴性.     

用浓缩唾液制备抗A、抗B血清的吸收精制方法

<正> 用浓缩1/2容量的ASe和BSe人唾液,采用多用途、多部位,并逐渐增大剂量的方法免疫大耳白兔,每4次为一个免疫程,可制备出1024倍以上的抗A、抗B血清.但所得抗血清除有抗A、抗B凝集素外,还含有大量与各型红细胞发生凝集的非特异性凝集素.经反复试验,先用人血粉吸收,然后用少量唾液吸收,可以除去非特异性凝集素,制备出特异性好的抗A、抗B血清,具体方法如下.     

分泌抗人红细胞膜单克隆抗体细胞株的建立

以人的红细胞膜为抗原，采用选择性免疫抑制的程序，免疫BALB／C小鼠。经免疫的小鼠脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，用血凝法筛选出3株分泌抗人红细胞膜种属特异性单克隆抗体的杂交瘤，即M1A7C4．M3A5B7和M3D9F1。连续传代2个月及复苏冻存半年的杂交瘤，仍能稳定地分泌抗人红细胞膜单克隆抗体。初步鉴定证明：该抗体具有稳定的种属特异性，可鉴别人与其它动物，特别是猴的红细胞，不与己知的血型特异性成分交叉，可凝集成人及脐带血的红细胞。     

单克隆抗M、抗N抗体的研制及初步应用

用人血型糖蛋白 A 和人红细胞分别免疫 BALB/C 小鼠。用被免疫的 BALB/C 小鼠脾细胞与 SP2/0骨髓瘤细胞融合,在37℃、5%二氧化碳培养箱中孵育10～15天,然后用 OM 和 ON 型指示红细胞分别检测培养上清液的凝集情况,筛选出能分泌高特异性和高效价抗 M 和抗 N 抗体的细胞株,并建立了 GM_4H3、GM_4H_4、N_2A_3和 N_2D_(10)细胞株。这些细胞株可持续分泌免疫球蛋白 G 类抗 M、抗 N 抗体。应用这些抗体,通过血凝法、解离法和 ELISA 斑点法,可进行血及血痕的 MN 分型。在血型检验中,优于多克隆抗 M、抗N 血清。     

检验A、B、H血型物质指示红细胞的研制

采用单克隆抗Ａ、抗Ｂ、抗Ｈ抗体致敏人Ｏ型红细胞 ,所获得的检验人体液 (斑 )的Ａ、Ｂ、Ｈ指示红细胞 ,为检验人体液斑迹的ＡＢＯ血型提供了一种新的试剂。在制备过程中 ,抗体载体的选定、致敏所需抗体的浓度和致敏环境的酸碱度都直接影响指示红细胞的凝集效价。经过反复实验探索 ,选择出了理想的条件。1　材料与方法1 1　人Ｏ型红细胞的醛化取多人份混合的人Ｏ型红细胞 ,用生理盐水充分洗涤后 ,将压积红细胞用 4℃预冷 ,含 0 5%戊二醛的ＰＢＳ缓冲液稀释成 10 %的悬液 ,作用 30ｍｉｎ后 ,2 0 0 0ｒ/ｍｉｎ离心 2 0ｍｉｎ ,弃上清液 ;将压…     

Lewis血型与ABH血型物质

<正> 1946年Mourant发现能凝集约22％白种人红细胞的一种新抗体,称之为抗Le~a抗体。1948年Andresen发现与抗Le~a显示对立关系的另一种新抗体,称之为抗Le~b抗体。根据人的红细胞与这两种抗体有无发生凝集可以     

单克隆抗M、抗N抗体的制备和应用

<正> 把用生理盐水洗涤5次的新鲜人ON型红细胞和纯化的血型糖蛋白A分别免疫BALB/C小鼠,用免疫的脾细胞同SPZ/O骨髓瘤细胞进行融合。37℃培养10～15天后,用ON型和OM型红细胞检测每个培养孔里培养基上清的凝集情况,建立了分泌高特异性和高效价的抗M和     

特异性抗人白蛋白血清制备

用乙基乙酰胺修饰的人血清白蛋白吸收免抗人白蛋白血清,可制威特异性极高的抗人白蛋白血清。用该血清和三氯化铬、人血清白蛋白包被的O型红细胞作指示细胞,做凝集抑制试验,能区别人血(斑)和包括灵长类在内的各种动物血(斑)。     

成人肾脏ABO组织血型1-4型糖链H物质的分布

目的观察1型H、2型H及3/4型H糖链在成人肾组织中的分布及其与分泌状态的关系。方法 应用抗ABO抗体及3种糖链特异的单克隆抗H抗体的免疫组织化学方法,检查分泌型与非分泌型个体肾组织中相应抗原物质的分布。结果 在分泌型和非分泌型人的肾远曲小管均表达2型H和3/4型H物质,1型H和3/4型H物质只在分泌型人肾集合管表达,在非分泌型人中不表达。另外集合管的2型H物质的表达与分泌状态无关。结论 人肾组织有ABH物质的表达,不同肾组织细胞表达的H物质结构差异与AB0型分泌状态有关。     

利用人唾液做基础吸收精制抗N血清

本文介绍先采用人唾液对粗制抗N血清做基础吸收后,再通过红细胞抗原进行精制的一种新方法。精制的抗N血清具有效价高、特异性好的特点,且减少了因用人红细胞重复吸收而引起的溶血反应。     

唾液中H及H2血型物质的定量研究

用抗H1E3（H1及H2特异性）及抗H224（H2特异性）抗体，以时间决定性荧光免疫测定法对129例个体唾液中的H及H2血型物质进行定量检测。证明在分泌型唾液中含有大量H物质，其主体是H1物质，H2物质的含量为H物质的1／10～1／20。在非分泌型唾液中检出少量H1物而无H2物质，表明H2物质的检出与否可作为区分分泌型与非分泌型的标准，推测唾液中H物质含量的差别，由Se．H基因编码的两种α（1→2）岩藻糖基转移酶活性差异所决定。     

免疫抗A、抗B、抗H沉淀素血清的制备

本文介绍了用浓缩的分泌型人唾液免疫鸡,经吸收精制获得鸡抗A、抗B、抗H沉淀素血清的方法。用本法制备的抗血清,对相应血型人唾液的特异性沉淀价可达1:512倍以上,对非相应血型者的分泌液不出现非特异性沉淀反应。应用该血清进行环状沉淀试验、单向琼脂扩散试验等免疫学试验,可简便、准确地鉴定人唾液斑、精液斑等分泌液斑的ABO血型。     

乙醚洗脱法制备高效价抗A、抗B血清

ABO 血型检验中通常采用效价在1:128～1:256的标准血清与检材中的抗原物质吸附。以此用“吸收法”、“热解离法”检验血型。但遇到抗原物质较弱的检材(如毛发、非分泌型的分泌物)时则需用高效价血清来检验。笔者采用 Rubin 乙醚洗脱法获得了高效价血清。1 材料与方法1.1 红细胞膜碎片的制备取已知 A、B 型的多份健康人全血,用生理盐水洗3次。将 A、B 型红细胞分别置于塑料试管     

抗人A型红细胞单克隆抗体的研制及初步应用

本研究在用人A型红细胞悬液免疫BaIb/C小鼠脾细胞与同系小鼠的骨髓瘤细胞融合屡次失败的情况下,改用实体瘤分离出的骨髓瘤细胞进行融合,终获成功。融合后筛选出分泌盐水凝集抗体的杂交瘤细胞株:3B_2、2H_2、8C_3细胞株。这些杂交瘤细胞可持续分泌抗A单克隆IgM类抗体。     

H.265:网络视频的福音

<正>H.265又称为HEVC,高效率视频编码,是ITU-T H.264/MPEG-4 AVC标准的继任者。第一版的HEVC/H.265视频压缩标准在2013年4月13日被接受为国际电信联盟(ITU-T)的正式标准。历经四年时间,H.265究竟发展如何?与H.264相比H.265优势显著H.265沿用了H.264的混合视频编码框架,但     

H-抗原缺乏分泌型个体FUT1及FUT2等位基因的分子基础

一例H-缺乏分泌型个体被发现。其血清学表现为：红细胞上无A、B、H抗原；唾液中有B、H抗原分泌；血清中检出了抗A抗体。推测其为类孟买OHmB型。在该个体FUT1等位基因编码区上发现两处单碱基突变（T460C、G1042A）。这两个点变异，将导致两个氨基酸的置换（Y154H、E348K）。同时也破坏了限制性内切酶RsaⅠ和AvaⅠ的作用部位。用PCR－RFLP法可检出此两种变异。用PCR－RFLP法证实，该个体为T460C、G1042A变异的纯合子。在136例随机个体中未能查出上述变异。将该FUT1基因转染COS－7细胞未能检出α2－FUT活性及证实H抗原的表达。该个体的FUT2基因与野生型一致。     

抗Le~a和抗Le~b血清的研制

利用进口抗Le~a、Le~b血清筛选OLe(a+b-)和OLe(a-b+)型人,测定其唾液中Le~a和Le~b型物质含量,择其型物质含量高者唾液,用家兔和山羊免疫,合格后采全血,分离血清,用O、A、B型红细胞吸收、除去种属及α和β等凝集素。再用O型Le非相应型红细胞吸收,精制出含不完全抗体的抗Le~a和抗Le~b血清。该血清对Le相应型红细胞均产生明显凝集反应,而不发生非特异的交叉凝集反应。经过盲测鉴定,17份红细胞的Lewis型测定完全准确。制备的抗Le~a和抗Le~b血清在效价和特异性方面达到了引进的同种血清水平,填补了我国抗Le~a、抗Le~b血清制造的空白。