酶标记免疫吸附试验(续)

(七)酶结合物 通过化学或免疫学方法使酶与蛋白质或小分子有机化合物(半抗原)结合,称为酶的交联或酶标记,结合的产物称酶结合物。理想的结合是既保持酶和抗体的生物学活性,又有较高的酶分子结合比率。目前酶标记抗体的方法有戊二醛法和高碘酸钠法。这里只介绍高碘酸钠法(Nakane等,1974)。     

酶标记免疫吸附试验

酶标记技术是在标记抗体(荧光标记、同位素标记)试验和组织化学基础上发展起来的一种新技术。1966年Nakane和Avra-meas等首先应用酶标记的抗体和细胞抗原发生反应,再用细胞化学染色法显示出病毒抗原在细胞内的位置。其后,Miles和Hales首先在免疫测定中用酶代替同位素。直到1971年Van Weeman和Schuurs,以及En-gvall和Perlman才分别详细地介绍了酶免     

斑点酶联免疫吸附试验简介

斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)是以微孔滤膜为固相载体的一项新的免疫酶技术,其敏感性和特异性与放射免疫试验(RIA)或酶联免疫吸附试验(ELISA)相类似,并可弥补RIA和ELISA不可避免的一些缺陷。该法于1982年由荷兰学者Herbrink首先建立。嗣后,很快被许多国家学者吸收应用与继续研究,并发表了不少论文。迄今,对于本技术的命名尚未统一,不同学者的叫法不尽一致。Herbrink等称为抗原斑点试验(Antigen spot Test),Howker等称为免疫结合斑点试验(Dgt-immunobinding Assay),Huet等称为斑点免疫测定(Spotimmuno Detection),而Pappas等则称为斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)。笔者认为Pappas的叫法最合适,故本文称该法为Dot-ELISA。     

点酶联免疫吸附试验方法简介

近年来,国外对酶标记免疫技术(ELISA)的研究有新的进展,陆续报道了点酶联免疫吸附试验(DOT一ELISA)在人医及兽医中的应用。DOT—E LISA以硝酸纤维素薄膜做固相载体,代替了聚苯乙烯微量反应板,从而克服了ELISA方法中包被好的酶标板保存运送不便及检测需仪器等缺点,其在1cm~2大的薄膜上可测1份样品,操作简便类似pH试纸。若制备成试剂盒极易推广应用。本文根据文献资料和笔者的实践,对该方法作一介绍。     

应用酶联免疫吸附试验检测猪旋毛虫病

根据1982年商业部下达的任务,中南五省猪旋毛虫病研究协作组进行了猪旋毛虫病生前诊断方法的研究。南阳肉联厂应用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法,并与虫体检查方法(镜检法、消化法)对照检测,表明ElISA间接法检测猪旋毛虫病具有微量、特异、灵敏、快速等优点,是当前诊断猪旋毛虫病的一     

直接法单克隆抗体酶联免疫吸附试验和常规酶联免疫吸附试验诊断耕牛日本血吸虫病的比较

比较了直接法单克隆抗体酶联免疫吸附试验（ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）和常规酶联免疫吸附试验诊断耕牛日本血吸虫病方面的差异，实验结果表明，直接法ＭｃＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ对实验感染耕牛的阳性检出率为１００％（３２／３２），对安徽省自然感染耕牛（粪孵阳性）的阳性检出率为９３．９０％（４１８／４４５），对健康耕牛的阴性符合率为９８．５０％（６６／６７）；而常规ＥＬＩＳＡ对实验感染耕牛的阳性检出率为９５．３５％（４１／４３），对安徽省同一地区的自然感染耕牛的阳性检出率为９０．８２％（１８８／２０７），对健康耕牛的阴性符合率为８６．２７％（８８／１０２）。提示，直接法ＭｏＡｂ－Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ不仅具有操作简便、反应快速、成本低廉等优点，而且在阳性检出率和阴性符合率方面均优于常规ＥＬＩＳＡ。     

用酶联免疫吸附试验检测黄曲霉毒素

用酶联免疫吸附试验检测黄曲霉毒素＠陆建华＠倪正平＠黄飞＠张启南＠李文广＠陈建国￥江苏省启东肝癌防治研究所用酶联免疫吸附试验检测黄曲霉毒素陆建华倪正平黄飞张启南李文广陈建国（江苏省启东肝癌防治研究所２２６２００）笔者采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测江苏...     

应用酶联免疫吸附试验诊断弓形虫病

1984～1986年,本课题协作组在广西、北京、福建、安徽、黑龙江、浙江等省市的6个单位进行了弓形虫病酶联免疫吸附试验诊断方法的研究,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)。 葡萄球菌A蛋白—酶联免疫吸附试验(SPA—ELISA)固相免疫酶底物珠试验(DASS),玻片虫体过氧化物酶联免疫吸附试验(TSHE),玻片虫体—葡萄球菌A蛋白酶联吸附试验(TSSH)5种酶联试验方法,现汇总报告如下。     

酶联免疫吸附试验诊断猪旋毛虫病的扩大试验研究

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断实验感染猪旋毛虫病的方法建立之后,在改进抗原制备方法,完善操作程序,提高检测效果的同时,对人工感染的101头猪血清及采自旋毛虫流行区和非流行区的3012头屠宰猪血清进行了血清抗体检测,并对流行区991份血清相对应的猪膈肌肉样进行了压片检查和消化对比试验,取得了满意的结果。     

酶联免疫吸附试验对猪瘟抗体的监测

猪瘟 (CSF)是危害养猪业最严重的传染病之一 ,自 2 0世纪 5 0年代末我国应用猪瘟兔化弱毒(CSFV)疫苗免疫预防以来 ,有效地控制了其大面积的暴发流行。但近年来温和型、非典型性CSF的发生和免疫失败 ,仍然相当普遍 ,且仔猪的感染呈上升趋势 ,已成为猪病防制中最棘手的问题之一。因此 ,为了查清甘肃省规模养猪场CSF强毒感染状况及检验CSF疫苗的免疫效果 ,笔者应省内某 4个较大规模养猪场的要求 ,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自上述 4个猪场的 5 93份猪血清进行了检测。1　材料和方法1.1　诊断试剂　CSF强毒、弱毒单克隆纯化酶联…     

免疫酶标记抗体诊断猪瘟试验

免疫酶标记抗体(直接法,以下简称酶标法)法诊断猪瘟和兔体交互免疫试验相比,具有省时、经济、不需特殊仪器等优点。但此种诊断方法是否有很高的特异性,且不受所接种疫苗的影响,能否适应在基层推广应用?为此,做了如下试验。     

应用斑点酶联免疫吸附试验检测猪瘟病毒抗体的试验

本实验室曾研究报道了应用HRP-SPA-ELISA检测猪瘟病毒抗体的方法[见曾医大学学报7(4),391～396,1987],在此基础上,我们进一步探索适于基层兽医单位推广应用的血清学手段,建立了斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测猪瘟病毒抗体的方法。试验结果表明,该法敏感性高、特异性强,与兔体中和试验及HRP-SPA-EIISA呈极其显著的正相关。     

酶联免疫吸附试验诊断猪囊虫病的研究

酶联免疫吸附试验(ELISA)在兽医实验诊断和研究中的应用日趋广泛,而用于猪囊虫病的试验方法及条件进行了研究,探讨了其理化性质和免疫特性,并初步解决了抗原纯化问题。随后,通过474例已知血清的试验,对大样本的检出率及细颈囊尾蚴的交叉反应问题进行了研究。在此基础上又进行了现场应用试验,并且探讨了以全血代替血清简化操作步骤的可能性。现报告如下。     

酶联免疫吸附试验诊断羊肝片吸虫病的区域试验

酶联免疫吸附试验(ELISA)是七十年代以后发展起来的诊断技术,国内外学者陆续发表了该方法用于寄生虫病诊断的研究报告。国外对肝片吸虫病诊断进行了一些研究(Zimmerman, G.L.等,1985;Farrell,C.J.等,1981),一致认为该方法对诊断牛、羊肝片吸虫病具有敏感性强、特异性高、操作简便,用分光光度计判读结果,适合于此病的早期诊断等优点。我们在实验室建立此种方法的基础上,对甘肃、四川、吉林省部分地区的羊只,用ELISA进行了区域试验,现将试验结果报告如下:     

圆斑-酶联免疫吸附试验诊断囊虫病

囊虫病是严重危害人体健康和畜牧业生产的重要人畜共患寄生虫病之一。我们应用圆斑-酶联免疫吸附试验,(Dot-ELISA),以酶联葡萄球菌A蛋白作为第二抗体诊断囊虫病,效果很好,现将试验结果报告如下。 (一) 材料和方法     

应用酶联免疫吸附试验诊断猪旋毛虫病的研究

旋毛虫病是一种人畜共患的主要寄生虫病。病原为毛形科的一种线虫(Trichinella spiralis, Owen, 1835),成虫寄生于宿主的小肠,幼虫寄生于横纹肌内,引起人和多种动物的旋毛虫病(Trichinosis)。由于病原传播的极其复杂性,故这一疾病至今尚未能有效的控制,在世界各地仍然普遍流行。据文献报道,该病现已在欧、美、亚、非四大洲的70多种哺乳动物中流行。我国自1881年从福建厦门的猪肉中发现旋毛虫以来,嗣后陆续在云南、西藏、吉林、黑龙江和河南(1982)、广西(1983)、湖北(1984)等省都发现了人的旋毛虫病,发病死亡率高达10％以上。猪的旋毛虫病更为严重。如河南某地区猪旋毛虫感染率逐年上升,流行面积在扩大,已有12个县(市)发生本病,其中感染率最高达50％。     

应用酶联免疫吸附试验检查牛羊布氏杆菌病

为了将酶联免疫吸附试验(ELISA)更有效地应用于牛、羊布氏杆菌病的诊断,我们对该方法所用的抗原、酶标抗体、检测程养基,37℃培养72小时。将耶氏09接种于普通琼脂培养基,于25℃培养36小时。用灭菌生理盐水将三种培养物洗下,于60℃水浴中1小时杀死。用胰酶消化法提取可溶性成分,定量分装,     

应用酶联免疫吸附试验检测马传贫血清抗体

我们应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和琼脂扩散沉淀试验(ID)对马传贫非疫区健康马,人工和自然感染马,免疫马的血清进行了对比检查,结果报告如下。 (一)材料 1.抗原:由哈尔滨兽医研究所提供的马传贫弱毒细胞培养物纯化冻干抗原,每瓶1.5mg。 2.酶结合物:由哈尔滨兽医研究所提供的辣根过氧化物酶标记的羊抗马Ig冻干物,每瓶15μg。     

鸡病毒性关节炎酶联免疫吸附试验的建立及应用

鸡病毒性关节炎酶联免疫吸附试验的建立及应用单松华，胡永强，谢爱织，刘学忠，徐文军，肖文清（上海动植物检疫局２０００３２）鸡病毒性关节炎是由呼肠孤病毒引起的鸡的传染病，主要侵害关节滑膜、腱、腱鞘和心肌等。目前国内外常用的检测病毒性关节炎抗体的方法是琼脂...     

用酶联免疫吸附试验诊断羊肝片吸虫病的研究

酶联免疫吸附试验是六十年代后期提出,七十年代得到较全面发展的新的诊断技术,已被广泛地应用于传染病和寄生虫病方面,收到良好的效果。近年来,国外用于检测实验动物和牛羊肝片吸虫感染,能达到早期诊断的目的,而且适用于预测化药治疗的效果。国内肝片吸虫病流行严重,但缺少早期诊断方法。为此,我们于1984年试用酶联免疫吸附试验诊断羊肝片吸虫病,现已明确本法检测实验感染羊对肝片吸虫抗原的抗体应答。