犬冠状病毒超免疫血清的制备及应用

采用犬冠状病毒(CCV)弱毒株和强毒株多次免疫健康犬,采集超免疫血清,其CCV血清中和(SN)抗体效价高达1210.试验结果表明,该超免疫血清安全、特异、无毒副作用,每只幼犬注射1.5 mL/kg体重的该血清即可使90%以上的犬获得10～15 d的被动免疫保护;对110只患CCV性肠炎病犬的临床治疗结果表明,该超免疫血清治疗效果可靠,其治愈率达94%.     

用超免疫血清防治新生仔猪大肠杆菌病

大肠杆菌病是仔猪十分易感的肠道传染病,临床上主要采用初乳抗体免疫和应用抗菌药物进行防治。本试验选用当地猪场分离的致病性大肠埃希氏菌为抗原,多次免疫当地母猪,待抗体效价达到高峰时,采血制备超免疫血清,经无菌检验和安全试中图分类号Ｓ８５８．２８收稿日期１...     

鸡六联超免疫卵黄抗体液的制备及应用

鸡新城疫、鸡传染性腔上囊炎、鸡白痢、鸡伤寒、鸡副伤寒和鸡大肠杆菌病是危害养鸡业最严重的传染病 ,常造成巨大的经济损失。笔者与甘肃省白银市、兰州市等地的一些鸡场密切配合 ,利用当地分离鉴定获得的毒株 ,试验制备了防治上述 6种疫病的超免疫卵黄抗体液 ,用于一些鸡场和专业户对这几种传染病的防治 ,显著降低了这些疫病的发病率和鸡群的死亡率。1　材料1.1　供蛋鸡　选刚开产、产蛋率高的母鸡 10 0只 ,经检测无可经卵传递的病原体 ,隔离饲养。1.2　抗原　免疫鸡所用抗原包括用白银、兰州等地分离获得的传染性腔上囊炎病毒制备的组织灭…     

鸡减蛋综合征诊断抗原与超免疫血清的研制

将鸡减蛋综合征(EDS)种毒AV-127、AV-HS-1接种鸭胚,孵育120 h后,收取尿囊液测定其血凝(HA)效价,加体积分数0.2%甲醛灭活作为诊断抗原;将病毒对鸡、兔进行3次免疫,当抗体效价达到29以上时分离血清,制备成超免疫血清.试验证明,该EDS诊断抗原和超免疫血清具有特异性强、敏感性高等特点,可用于感染鸡群的疫情调查、免疫鸡群的抗体水平监测、EDS的预防、治疗和对减蛋综合征病毒(EDSV)进行深入研究.     

用牛驴羊制备鸡新城疫和传染性腔上囊病二联超免疫血清的方法比较及临床应用效果

对牛、驴、羊用不同的新城疫( ND) 、传染性腔上囊病(IBD) 疫苗多次免疫,在ND HI 抗体和IBD AGB 抗体达到要求后采血,制备ND、IBD 二联超免疫血清。该抗血清对人工感染NDV 和IBDV 强毒的2 周龄雏鸡有较强的保护力。在现场对2 万多只鸡应用,有效率在95 % 以上。     

口蹄疫血清抗体三区分类法意义

最近McCullough,K.C等(1992)通过一系列方法检测了免疫后的动物血清抗体,进而与攻毒试验进行比较观察,同时纵观了其他学者的试验,提出了血清抗体的“三区”分类法。 对口蹄疫保护性免疫反应很大程度上取决于体液反应。当特异性抗体作用于口蹄疫病毒后就会增强吞噬作用,通过免疫系统的吞噬细胞来摧毁病毒。因此探索动物抗口蹄疫病毒的抗体反应和抗感染的关系是疫苗研究必不可少的一项内容。McC-ullough等通过一系列ELISA试验(夹心ELISA、液相ELISA、夹心竞争性ELISA、液相竞争ELISA及阻断性ELISA)和经典的中和试验逐一测定了免疫接种后的牛血清,所有这些体外免疫测     

口蹄疫标准抗元和血清的制造与检验

选用500克以上的健康海猪10～20只用继代保存的标准海猪毒以灭菌生理盐水连洗三次,再用灭菌滤纸吸干、秤重,放入消毒乳钵加无菌中性玻璃砂磨碎,用PH7.6的磷酸盐缓冲液制成10％悬浮液,置室温内浸出一小时,每隔10分钟搅拌一次;然后以每分钟3000转离心15分钟,取上清液作为感染材料,在海猪后肢两(足庻)面接种,每(足庻)面皮内注射7～8针,用量约0.2毫升;经18～24小时注射部位形成水泡,然后用生理盐水洗净、采取水泡皮,如上述再制成10％悬浮液,浸出离心,取上清液置于58℃水浴箱内灭能40     

不同浓度羊脑组织抗原对超免疫马抗狂犬病血清效价及神经变态反应的影响

８０年代初，我所就开始用羊脑组织狂犬病毒抗原超免疫马生产抗狂犬病血清。但由于使用的抗原浓度较大，超免疫马神经变态反应发生率达１０％～１５％，马匹损耗很大。为此，在保证抗原最佳免疫原性的情况下，为降低神经变态反应发生率，在基础免疫后，我们通过第１，第２...     

口蹄疫、猪传染性水泡病的血清保护试验诊断法

(一)被检病毒液的制备:将送检病料洗净、称重、研磨,用生理盐水或磷酸盐缓冲液作1:5～1:10的悬浮液,在4℃浸出一日夜,或在室温浸出1～2小时,振(氵易皿),以3000转/分离心10分钟,其上清液即为被检的病毒液。 (二)乳鼠血清注射:用五窝2～3日龄的乳鼠,每窝10只,以一只母鼠哺乳,分别注射已知的猪水泡病及口蹄疫A、O、C、ZB型五个血清。每窝注射七只,留三只不注     

口蹄疫

(一)病的概要和发生状况 口蹄疫在家畜传染病中是感受性最高、最易传播的疫病之一。自然宿主包括牛、猪、绵羊、山羊等主要家畜在内的偶蹄动物有三十种以上,其生态是多样的。病毒主要是通过空气传播(air-borne),对宿主动物可引起全身性感染,在突然发高烧的同时,在口、蹄、乳房周围等处发生水泡性病变,可见到明显的流涎和跛行。水泡迅即破裂,广泛出现烂斑,很快转向康复。但也有因细菌继发感染使病情恶化恢复很慢的情     

口蹄疫

口蹄疫是由于口蹄疫病毒侵入动物机体引起的一种传染性很强的疫病,它遍及全世界,经常造成大流行。口蹄疫感染偶蹄兽,特别是牛、猪,也感染绵羊、山羊、骆驼等,但是不感染肉食兽、单蹄兽。鹿等野生反刍动物也发生口蹄疫,人的病例只偶尔发生。 近十几年来,由于病毒遗传学、分子生物学的飞跃发展,目前,有关口蹄疫病毒生物化学分析,遗传重组图的绘制,超微结构及其功能的研究等也都取得了很大的进展。由于篇幅所限,本文仅简单地介绍有关口蹄疫的基本知识。     

抗O型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性分析

用灭活O型口蹄疫病毒为抗原免疫BALB/c小鼠4次后,取致敏的脾B淋巴细胞和SP2/0小鼠骨髓瘤细胞进行融合,在HAT选择培养基中培养2周,经间接ELISA法筛选,最终获得了3株抗O型FMDV的阳性杂交瘤细胞株,命名为2F1、2G7和6H4。血清学试验证明该McAbs能与FMDV抗原结合,具有高度特异性。     

口蹄疫文摘

国际生物学标准化协会于1976年10月在法国里昂举行的第55次会议,专门对口蹄疫方面的研究进行了讨论。列入会议讨论的论文包括悬浮培养、油佐剂疫苗、口蹄疫病毒亚型、口蹄疫疫苗检验、联合疫苗、当前众所关心的其它问题等六个方面共计50篇,基本反映出了当代国际上口蹄疫研究的动态。现根据1977年出版的《生物学标准化进展》论文集第35卷——口蹄疫国际讨论会(Ⅱ),将其论文的英文摘要译出,以供参考。     

口蹄疫病毒非结构蛋白3A单克隆抗体的制备和鉴定

以原核表达并纯化的口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3A免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,用间接ELISA方法筛选杂交瘤细胞,有限稀释法进行亚克隆,获得3株能稳定分泌抗3A蛋白单抗的杂交瘤细胞,分别命名为3H2、4B1、7F5,并对这3株单抗进行了生物学鉴定。结果显示,单抗3H2和4B1为IgG2a亚型,7F5为IgG2b亚型。单抗7F5针对的表位与3H2和4B1两株单抗的表位不一致;这3株单抗均能够与FMDV特异性结合,且单抗4B1与所有3A相关蛋白均反应。稳定性鉴定结果表明,获得的3株杂交瘤细胞均能稳定分泌单克隆抗体。研究结果为进一步探索3A蛋白的结构和功能以及建立诊断方法奠定了基础。     

口蹄疫研究进展

口蹄疫（ＦｏｏｔａｎｄＭｏｕｔｈＤｉｓｅａｓｅ,ＦＭＤ）是致偶蹄动物的一种急性、高度接触性、发热性传染病,以传播迅速、感染率高而著称,国际兽疫局（ＯＩＥ）将其列为Ａ类传染病之首。该病病原为口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）,属于小ＲＮＡ病毒科口蹄疫病毒属。ＦＭＤ...     

口蹄疫病毒前导蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

前导蛋白(L~(pro))是口蹄疫病毒(FMDV)编码的重要毒力因子,在拮抗宿主抗病毒反应中发挥多种功能。为了获得抗L~(pro)的抗体以研究L~(pro)的功能,本研究将L基因克隆到pET-28a(+)原核表达质粒中,构建了重组表达质粒pET-28a-L,转化至大肠杆菌BL21中进行重组蛋白的诱导表达,所获得重组His-L~(pro)主要以包涵体形式存在,利用Ni-NTA柱纯化获得了高纯度的His-L~(pro),将His-重组L~(pro)与弗氏佐剂混合乳化后免疫新西兰大白兔,制备了高效价的L~(pro)兔多克隆抗体血清。通过免疫荧光试验(IFA)、免疫印迹试验(WB)检测L~(pro)兔多克隆抗体血清的反应原性。结果显示,该多抗血清能够特异性识别FMDV感染BHK21细胞后表达的L~(pro),表明本研究制备的L~(pro)多抗血清具有很好的反应原性,为深入研究L~(pro)功能及其拮抗宿主天然免疫的作用机理奠定了基础。     

兔瘟高免血清的制备

(一)家兔选择 由卫生部兰州生物制品研究所动物室购得健康肥壮、3～4月龄以上、未经任何免疫的青紫蓝兔2只。 (二)兔瘟疫苗 系成都生物药品厂生产的“兔病毒性出血症组织灭活苗”(即兔瘟苗),批号8616(在有效期内),置4～8℃冰箱备用。 (三)基础免疫 于健康复查合格供试兔颈部皮下注射兔瘟苗3ml(3头份剂量)。注射后1～2天,兔表现轻度不安,呼吸稍增快,耳静脉充血明显可见,体温升高0.5～0.8℃,     

抗O型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

以高浓缩的O型口蹄疫病毒(FMDV)灭活疫苗为抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,以重组表达的O型重组VP1蛋白(O-r VP1)为筛选抗原,利用杂交瘤技术获得1株可稳定分泌抗O型FMDV VP1蛋白抗体的杂交瘤细胞株1C7,染色体数高于任一亲本细胞的染色体数目;腹水的抗体效价为1︰105,质量浓度为4.7 mg/m L。1C7单克隆抗体为IgG2b亚型,相对亲和力常数为1.5 mol/L,能够与O型FMDV特异性地结合,且仅与结构蛋白VP1反应。稳定性鉴定结果表明1C7株能稳定分泌抗体。阻断ELISA试验表明1C7单克隆抗体能够被O型FMDV免疫阳性血清特异性地阻断。本研究为进一步建立O型FMDV抗体的阻断ELISA及胶体金免疫层析快速检测方法奠定了基础。     

Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

为了获得Asia1型口蹄疫病毒非结构蛋白3B的单克隆抗体,以含Asia1型FMDV/JS/05毒株3B基因的pCAGGS-3B质粒为模板,扩增3B蛋白基因,并克隆至pET-30a(+)载体,进行原核表达及纯化。分别以Asia1型口蹄疫病毒、纯化的3B蛋白为抗原,免疫4~6周龄的雌性BALB/c小鼠,经过4次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞按5∶1~10∶1进行细胞融合,用本实验室建立的间接ELISA对融合后的细胞进行筛选,并进行4次有限稀释筛选出的阳性细胞扩大培养后,注射小鼠腹腔,制备腹水。对制备的腹水进行类别鉴定、反应原性和效价鉴定。结果表明,获得1株能稳定分泌抗Asia1型口蹄疫病毒3B蛋白的细胞株,其抗体类别为IgM,腹水效价为1∶12 800,通过Western-blot和间接免疫荧光试验,确定其能识别口蹄疫病毒3B蛋白。     

口蹄疫的新疫苗

法国《国际兽疫局学报》1969年第71卷第3～6期报导几种新的口蹄疫疫苗,安全有效,免疫力强。摘要如下: 口蹄疫A_(22)型病毒死疫苗 据报导,使用这种疫苗可保护家畜免遭口蹄疫的侵害,在疫区则可制止疫病蔓延,使疫