人体脱落上皮细胞的荧光标记STR分型

荧光标记STR分型技术在法医物证检验中已经得到广泛应用 ,但在实际工作中 ,含有微量人体脱落上皮细胞的特殊载体在很多情况下被忽略 ,关于皮肤脱落上皮细胞的DNA检验比较少。本文作者结合案例 ,对一些特殊载体上的脱落上皮细胞成功地进行了STR检验分型 ,并就检验中的相关问题进行讨论 ,旨在进一步提高办案人员对此类检材应用价值的注意。案例资料【案例 1】　 2 0 0 3年 1月在某旅社内 ,犯罪嫌疑人王某将徐某(女 ,2 7岁 )掐颈致死 ,后用打火机烧灼电视机电线再用手拉成多节 ,欲用于捆绑。鉴定人员在现场采用纱线两步擦拭法转移电视机电…     

荧光免疫标记抗体法测定血痕ABO血型

目的探讨采用荧光免疫标记抗体法测定血痕血型的可行性和优点。方法根据抗原抗体特异性结合的原理,首先对抗A、抗B单克隆抗体进行荧光标记,然后使荧光标记抗体与相应抗原(血痕)在最佳条件下结合,最后荧光显微镜镜检,判定血痕的血型。结果采用该方法测定血痕的血型结果准确、灵敏度高、操作简单、检验时间短。结论该方法可以作为一种测定血痕血型的检验方法使用。     

荧光标记检测STR复合基因座的应用

自DNA检验应用于法医鉴定以来,经过了十几年的发展,已建立了许多各种各样的方法和技术.STR分析方法虽发展时间不长,但由于其本身特有的特点,如等位基因片段短小,易于扩增,灵敏度高;基因座多,识别力强;对降解DNA能进行分析,可检验腐败陈旧生物检材;易于实现自动分析和计算机管理等,已日益成为日常DNA分析的主要、首选方法.STR分析从单个位点扩增分析到多个位点复合扩增分析,从银染到荧光检测分析,日趋自动化.反过来,检验程序的自动化进一步促进STR技术在日常案件检验中的应用.现荧光标记检测STR复合基因座技术已开始在法医DNA检验中应用并将被广泛采用.本文就其应用中的一些问题进行讨论.     

ABO基因荧光标记复合AS-PCR分型的法医学应用研究

1990～1993年,Yamamoto等[1～3]通过对ABO基因的系列分析研究,发现了各等位基因核苷酸序列差异,为从分子水平进行ABO基因分型打下了基础.以后,国内外学者先后建立了PCR-RFLP、AS-PCR、直接测序等多种ABO基因分型方法.本文根据G.Watanabe等人报道[4],通过AS-PCR方法荧光标记复合扩增ABO基因型,并对其在法医学中的应用加以研究.现报道如下:     

STR基因座荧光标记复合扩增检测及其法医学应用

目的建立荧光标记复合扩增检测4个STR基因座的方法,应用于法医学亲权鉴定与个人识别。方法用6-FAM标记D3S1754引物,HEX标记D4S2366和D12S375引物,TMR标记D1S549引物,PCR复合扩增,310基因分析仪电泳自动收集电泳结果数据,GeneScanAnalysisSoftware3.7NT计算扩增产物片段相对大小,Genotyper誖3.7NT软件进行样本基因型分型。将该方法应用于法医学亲权鉴定与个人识别。结果建立了荧光标记复合扩增检测4个STR基因座基因型的方法,具有良好的稳定性和较好的灵敏度,分型结果准确。结论研究建立的方法操作简便,分型结果稳定可靠,可用于遗传多态性研究和法医学亲权鉴定与个人识别。     

荧光标记复合扩增STR检测技术在法医学中的应用

本研究用荧光标记8个STR位点及性别位点,于同一试管同步进行扩增后,在PE377全自动测序仪于一个泳道内,成功地对各位点进行基因型分离检测.将此方法应用于30多起案件检验,均取得满意结果.     

人体脱落上皮细胞的荧光标记STR分型

荧光标记STR分型技术在法医物证检验中已经得到广泛应用，但在实际工作中，含有微量人体脱落上皮细胞的特殊载体在很多情况下被忽略，关于皮肤脱落上皮细胞的DNA检验比较少。本文作者结合案例，对一些特殊载体上的脱落上皮细胞成功地进行了STR检验分型，并就检验中的相关问题进行讨论，旨在进一步提高办案人员对此类检材应用价值的注意。     

荧光标记STR分型技术检验腐败组织基因型

探讨腐败组织荧光标记STR分型检测技术的应用价值。应用含12个STR基因座及一个性别基因座的2个荧光标记的复合扩增系统,对40例1～6周的腐败肌肉提取的DNA进行扩增,用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,PE377测序仪分析基因型。所检测样本在12个STR基因座均扩增出特异性谱带,并可判定其基因型。荧光标记STR检测技术对腐败组织分型可靠,在实际检案中具有较高的应用价值。     

混合斑中酸性磷酸酶及精子检出时限的研究

目的 研究探讨性生活后活体阴道内混合斑中酸性磷酸酶（ ACP）及精子的检出时限。方法 采用取材、检验三盲法对 600例阴道拭子进行 ACP及精子的常规检验。结果 ACP最长检出时限 255h,平均检出时限 52h。精子最长检出时限 132h,精子平均检出时限 29h。 ACP检出例中阳性程度在（＋＋）以上占 41.3％,精子检出例中阳性程度为每个视野 6～ 10个占 34.3％。 结论 应用混合斑中酸性磷酸酶及精子的检出时限 ,能为侦审性犯罪案件的法医学鉴定提供客观依据。     

12个mini-X-STR和Amel基因座荧光标记复合扩增体系的初步研究

目的研究建立12个mini-X-STR和Amel基因座复合扩增体系。方法选择DXS101、DXS10159、DXS10162、DXS10164、DXS6789、DXS7133、DXS7423、DXS7424、DXS8378、DXS981、GATA165B12和GA-TA31E08共12个X-STR与Amelogenin基因座,自行设计引物,分别采用FAM、HEX、Tamra、ROX四色荧光标记5′端,并进行必要的修饰,按照合适的引物浓度进行混合。对97个血痕样本进行复合扩增,并用ABI3130XL进行电泳和分型。结果所建立的荧光标记复合扩增体系能够得到清晰、明确的分型图谱,灵敏度达50pg,稳定性、重复性与平衡性较佳。结论本研究建立的12个mini-X-STR和Amel基因座荧光标记复合扩增体系统检验方法简单,灵敏度高,适合实际办案的需要。     

中国汉族人群 8个 STR位点荧光标记同步检测及其频率分布

目的 对血液等微量生物学检材进行 8个 STR多态性位点及一个性别鉴定位点的复合检测 ,并调查了 350名中国汉族无关个体上述基因位点等位基因分布情况。方法 所选位点为 vWA、 TH01、 TPOX、 CSF1PO、 D5S818、 D13S317、 D7S820、 D16S539及性别鉴定位点 Amelogenin,应用荧光染料标记引物,利用 PE－ 377 DNA片段分析仪对扩增产物进行基因分型。结果 共检出 63个等位基因及两个性别决定基因 ,总鉴别机率（ TDP）值达 99.999 999 98％,对法医学常见极微量生物学检材的检测获得成功, DNA模板需要量为 0.5～ 1.0ng,通过家系调查,证明上述位点遗传稳定,符合孟德尔遗传规律。结论 上述 8个 STR多态性位点具备了个体认定能力 ,是对微量生物学检材进行个体识别鉴定的理想方法。     

鉴定溺死的实验研究——荧光分光光度计检测肺组织浮游生物叶绿素(a)

本实验应用荧光分光光度计检测肺组织浮游生物叶绿素(a),以期通过准确的定性、定量研究来诊断溺死。实验性研究表明本法准确可靠,选择性强、灵敏度高,不受腐败及污染等因素影响,亦不存在含叶绿素(a)浮游生物生前进入并存在于人体器官的问题。同法对2例水中尸体进行了检测,结果与实验性研究相符、提示本法可应用于实际检案。     

荧光标记复合扩增毛细管电泳法在SNP分型中的应用

目的采用荧光标记复合扩增毛细管电泳法，对辽南地区汉族人群13个SNP进行等位基因频率调查，并评价其法医学应用价值。方法选择13个双等位基因SNP，应用荧光标记片段长度差异等位基因特异性复合扩增SNP分型方法，对辽南地区汉族人群进行群体调查。结果每个SNP纯合子为单一产物峰，杂合子则为长度不同的两个产物峰。不同位点扩增产物长度不同，根据产物长度和产物峰数量进行SNP分型，其结果与直接测序完全一致。同时获得辽南地区汉族人群13个SNP等位基因频率。结论采用荧光标记复合扩增毛细管电泳法进行SNP分型，方法简单实用，在法医学个人识别领域具有较高的应用。     

甲醛固定标本DNA提取及荧光标记STRs复合扩增

甲醛固定标本和石蜡包埋组织的病理切片是医院病理科和法医鉴定机构档案中重要的个人实物档案 ,是可靠的分子生物学研究材料的来源 ,同时也是医疗纠纷和一些刑事案件的重要证据。由于案情的需要 ,常需对甲醛固定标本和石蜡包埋组织及病理切片等进行个人识别和同一认定。但由于甲醛可使DNA发生降解 ,导致PCR反应的成功率降低。本文探索了应用TES、SDS、PK、尿素和DTT消化及酚 /氯仿提取DNA ,并用Chelex10 0溶解DNA ,应用灵敏度高的荧光标记STRs复合扩增 ,对甲醛固定标本和病理切片进行个人识别鉴定 ,取得了令人满意的结果。1　材…     

双面胶带法快速检出精子

在性犯罪案件中,确认精斑存在与否非常关键,而检出精子是认定精斑存在最简便、最可靠的方法,并且不需要特殊的试剂和仪器,同时也为案件以后进行DNA检验打下基础,适用于各基层实验室.作者在工作实践中,总结了一种简单实用的精子快速检出方法-双面胶带法,现介绍如下.     

精子富集柱分离技术的研究

目的在传统差异裂解法基础上,研究建立新的混合斑检材中精子分离技术。方法根据精细胞的结构特点,研制精子富集柱。取混合斑检材经第一步消化后的混合液,加入精子富集柱中离心,使DNA等小分子物质透过,而精细胞被特异性黏附和拦截在富集层中。采用本文技术和常规裂解方法对12份混合斑检材中精子进行分离,分离后精子DNA采用Identifiler试剂盒进行PCR扩增和电泳检测。结果混合斑检材经精子富集柱分离后均获得单一男性精子的STR分型结果,而12份检材用常规裂解方法分离,其中有6份检材女性成分去除不完全或未能检出精子STR基因型。结论本研究建立的精子富集柱分离技术适用于常见混合斑检材中精子的分离,特别适合对含有大量女性混合物而精子量较少检材的分离提取。     

五色荧光标记20个基因座复合扩增体系及法医学应用

目的建立20个基因座五色荧光标记复合扩增检测体系,并评价其法医学应用价值。方法收集368份无关人血样及55份实际案例样本(包括血斑、体液斑、组织及毛发),采用五色荧光素标记技术,对Amelogenin和19个STR基因座(D19S433、D5S818、D21S11、D18S51、D6S1043、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、vWA、D8S1179、TPOX、Penta E、TH01、D12S391、D2S1338和FGA)进行基因型检测,并考察方法的一致性、灵敏度、种属特异性及检材适用性。结果本文五色荧光标记复合扩增检测体系可对所选20个基因座分型,结果稳定准确,且均衡性良好、无杂峰;群体调查显示累积个人识别率和累积非父排除率分别是0.999 999 999 999 999 999 999和0.999 999 99;灵敏度达125pg,种属特异性高,实际案例检材分型成功率高。结论本文五色荧光标记复合扩增检测体系各项指标可达到当前商品化试剂盒的检测水平,具有重要的法医学应用价值。     

荧光标记复合扩增检测4个STR基因座多态性

目的建立荧光标记复合扩增D1S2142,D13S1492,D14S306,D15S659基因座检测分型方法,并对成都汉族群体4个基因座的遗传多态性进行调查。方法用6-FAM标记D1S2142和D15S659引物,HEX、TMR分别标记D14S306和D13S1492引物,PCR复合扩增,310基因分析仪电泳自动收集电泳结果数据,GeneScan Analysis Software3.7NT软件计算扩增产物片段相对大小,Genotyper(3.7NT软件进行样本基因型分型,建立了荧光标记复合扩增检测4个STR基因座基因型的方法,对145名成都汉族无关个体样本进行分型。结果荧光标记复合扩增D1S2142,D13S1492,D14S306,D15S659基因座,每个STR基因座都获得了清晰的基因型分型结果。145份样本,4个STR基因座分别检出10,14,7,12个等位基因和22,54,21,39种基因型,其基因型分布均符合Hardy-W e inberg平衡。4个基因座在成都汉族群体的杂合度分别依次为0.7793,0.8345,0.7793和0.8345;多态信息含量分别依次为:0.7656,0.8730,0.7470和0.8312。累计非父排除率为0.9783,累计个人识别机率为0.9999 917。结论荧光标记复合扩增D1S2142,D13S1492,D14S306,D15S659基因座,可实现对每个基因座准确分型;成都汉族群体该4个基因座的遗传学数据,可为群体遗传学和法医学研究与应用提供基础资料。     

荧光标记STR分型进行烟蒂的个人识别

<正> 荧光标记STR复合扩增技术在法医物证中的成功应用,极大地拓展了法医物证检验范围,使微量生物检材个体认定成为可能[1]。本文作者结合典型案例,对烟蒂上的人体成分进行STR检验分析,并就其优点及注意事项等进行讨论,旨在进一步提高这类检材在法医学中的应用价值。1 案例资料 案例1 1999年7月5日,孔某(男、47岁)被杀。现场勘查发现:在死者床头柜上的烟灰缸内有黄色和白色过滤嘴的烟蒂2个。取烟蒂外层的纸片,用     

灰尘鞋印直显与荧光显现研究

本文根据邻菲(口罗)啉在弱酸条件下与Fe~(2 )反应生成稳定的桔红色给合物的原理,对遗留在各种纸张、本色木、地板砖.地板革等承受客体上的灰尘鞋印进行显现,获得较佳效果.对微弱或潜在灰尘鞋印,用上述方法处理后,再用荧光粉末刷涂,用多波段光源显现效果更佳.