十二指肠贾第虫γ贾第素和δ贾第素基因疫苗的构建及其免疫保护力的评价

为了评估贾第虫γ贾第素(γ-giardin)和δ贾第素(δ-giardin)的免疫原性及免疫保护力,构建了截短型真核表达质粒pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin,并将这3种质粒肌肉注射到BALB/c小鼠体内,通过血清抗体测定、脾淋巴细胞增殖试验、淋巴细胞检测、细胞因子测定和攻虫试验评价疫苗的免疫保护力。结果显示,接种了这3种真核表达质粒的小鼠产生了特异性的体液和细胞反应,与对照组相比,Ig G和Ig G2a抗体水平显著提高,并且CD3~+CD4~+CD8~-和CD3~+CD8~+CD4~-T细胞百分比显著提高, pcDNA3.1-γ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin免疫组的细胞因子IL-4和IFN-γ水平显著提高, pcDNA3.1-δ-giardin免疫组的IFN-γ水平显著提高。攻虫试验结果显示,接种pcDNA3.1-γ-giardin、pcDNA3.1-δ-giardin和pcDNA3.1-γ-δ-giardin基因疫苗的小鼠的减虫率分别为39.1%、26.1%和18.3%,单一DNA(γ-giardin或δ-giardin)质粒和多基因DNA(γ-δ-giardin)质粒均可以诱导小鼠产生一定的免疫保护力。     

玉米赤霉烯酮免疫检测技术研究——分泌抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用F-2-BSA人工抗原免疫Balb/c鼠,通过淋巴细胞杂交瘤技术,建立6株分泌抗F-2毒素的McAb杂交瘤细胞株。用间接ELISA法测定,细胞上清液抗体滴度为2084~×(4H_8)、256~×(6H_9、4H_3、2H_5、2C_8)、16~×(3F_(10));腹水抗体滴度为10~(-9)(4H_3、4H_8),10~(-8)(2H_5)、10~(-7)(6H_9)、10~(-6)(2C_8)、10~(-5)(3F_(10))。用竞争间接ELISA法测定6株McAb对F-2毒素的敏感度为0.8～0.3ng/ml。该抗体与同系物(玉米赤霉烯醇)交叉反应率为9.0％～1.3％。6株McAb均属IgG类。细胞体外传代培养和冻存复苏后,分泌抗体稳定。纯化抗体在37℃保存12天稳定。     

东盟国家的财政收支

..网..,,..,.‘.~一一~内~,~,...勺..........................曰......脚曰文莱印度尼西亚马来西亚场卜律宾沂加坡泰国 一~一一一~~~.-~~.,...................................~-.-~财政枚入(百万美元) 1984年(实际数字3,066,(一1。健羹元)一卜艺双梦,(10亿美元) 8,1 93,028(]。亿美元)1朋,年(预计数字)缺8。88(10亿美元 4 .58(10亿关元) 4 .97(10亿美元)6,277.7 个人所得税所占% 公司所得税所占% 关税、货物税所占财政支出(百万美元) 1984年(实际数字) 0 一缺题l缺3。39 .458。315。419。9了 8。624.5 5 .312。610。776。61985年(预计数…     

口蹄疫O型弱毒疫苗毒价(病毒滴度)与免疫关系试验

本试验之目的在于明确疫苗的毒价与产生免疫之关系。当大量生产疫苗时毒价达到多少才能出厂(合格),既降低成本又能安全有免疫力,所以做此初步试验。 一、疫苗(为本所实验室制造): (一)6501批氢氧化铝苗:1965年9月14日制造,保存近8个月。含10％OMⅡF_(131)R_1毒。注射前对乳鼠毒价为:10~(-4)～4/4;10~(-5)～2/4;10~(-6)～0/4;10~(-7)～0/4,最小致死量为10~(-5.5)。     

几种二甲苯胺噻唑类似物的合成及其镇痛、催眠作用的比较

为了寻找便于国内生产和临床应用的兽用镇麻新药,我们在合成隆膨(Rompun)的基础上进一步改变结构,合成了几种二甲苯胺噻唑类似物。 我们在本刊1977年第2期曾报道了2-(2·6-二甲苯胺基)-5·6-二氢-4H-1·3-噻嗪(简称2·6-二甲苯胺噻嗪)和2-(2·6-二甲苯胺基)-5-二氢-4H-1·3-噻唑(简称2·6-二甲苯胺噻唑)的合成方法及初步药理作用。并初步讨论了化学结构与药理作用的关系,验证了苯环上     

2005年西亚非洲中文文献题录(三)

美国全球霸权计划中的欧洲与中东[埃及]萨米尔·阿明;官进胜摘译国外理论动态2005(6)23~28从九一一事件看美国-伊斯兰“文明冲突”的宗教内核张志洲国际论坛2005(4)7~11美国-伊斯兰世界关系与价值观安维华中东研究2005(1)25~30伊战后国际恐怖主义的发展态势及反恐对象陈静郑州大学学报(哲社科版)2005(3)39~42中东主要伊斯兰极端组织现状唐志超国际资料信息2005(7)18~27中东非政府组织与现代中东社会建构阎文虎中东研究2005(2)66~73试述阿拉伯地区妇女地位的变化吴琼、管金玲中华女子学院学报2005(5)51~54贝都因人:阿拉伯世界的精神贵族王猛…     

放射免疫测定方法——Ⅰ.放射免疫测定的基本原理及标准曲线的制作

许多生物体液中的活性物质含量很低,各种生殖激素含量一般都在10~(-9)～10~(-12)克/毫升水平,而各种常规的化学测定方法只能测到10~(-3)～10~(-6)克/毫升水平。1960年以前,要测定这些微量生物活性物质只能采用生物学测定法,即根据特异器官对被测成分的生物学效应的大小来判断被测物的水平。这种方法除对实验动物需要严格选择外,方法本身也很复杂、费时,特异性差,难以准确定量。 1959年,Yalow和Berson利用胰岛素抗体与放射性同位素标记的胰岛素试剂进行血液中胰岛素测定,成功地建立了胰岛素放射免疫测定法,奠定了放射免疫测定法(Radioimmunoassay,简称RIA)的基础。RIA是将具有极高灵敏度的放射性同位素示踪技术与高度特异性的免疫化学技术结合而建立起来的新的分析方法,灵敏度高、特异性强、精碗度高、重现性好,最低可测量达10~(-9)～10~(-12)克/毫升,甚至可达     

肥胖对致死性肺炎小鼠血液白细胞数量和四种细胞因子质量浓度以及免疫器官指数的影响

为探讨肥胖对致死性肺炎全身性免疫反应的影响,将高脂诱导的肥胖小鼠分为Ⅰ、Ⅱ组,非肥胖小鼠分为Ⅲ、Ⅳ组,Ⅰ、Ⅲ组滴鼻40 L大肠杆菌菌液(4×10~(10) CFU),Ⅱ、Ⅳ组滴鼻40 L生理盐水,检测感染前(第0小时)及感染后第2、6、12、24、48、72、96小时各组小鼠血液白细胞数、血清细胞因子质量浓度及免疫器官指数。结果显示,高脂饲喂8周后,肥胖组小鼠体重,血液WBC、GRA、MID数量,血清TNF-α、IL-6、RETN质量浓度均显著高于非肥胖组(P0.05),脾脏和胸腺的质量及指数显著低于非肥胖组(P0.05)。感染后,Ⅰ、Ⅲ组血液WBC、GRA、LYM、MID数量在感染后第2小时略降低,后逐渐升高后又降低,在第48小时达到最小值;与Ⅲ组比较,Ⅰ组的WBC数量在第0~6小时,GRA数量在第0~12小时,MID数量在第0、6小时均显著升高(P0.05),LYM数量在感染后第48小时显著降低(P0.05);Ⅰ、Ⅲ组的TNF-α、IL-6、IL-10、RETN质量浓度迅速升高,且维持在较高水平至第48小时;Ⅰ组的TNF-α质量浓度在第0~6、24小时,IL-6质量浓度在第0~6、96小时,IL-10质量浓度在第2~12、48~96小时及RETN质量浓度在第0~2、24~48小时显著高于Ⅲ组(P0.05);Ⅰ组的体重在感染后第2~96小时,胸腺质量在第6~96小时及胸腺指数在第12、72~96小时显著低于Ⅱ组(P0.05),脾质量和脾指数在感染后第2~96小时显著高于Ⅱ组(P0.05),Ⅰ组的体重在第0~96小时,脾质量在第2~12、48~96小时,脾指数在第2、12、48小时及胸腺质量在第24小时显著高于Ⅲ组(P0.05)。上述结果表明,肥胖能通过影响机体脾脏及胸腺的生长发育、白细胞及细胞因子含量,进而影响肺部感染引起的炎症反应强度和免疫调节能力,导致致死性肺炎肥胖小鼠的死亡率增高。     

吉氏巴贝斯虫人工感染对犬免疫功能的影响

通过静脉接种试验犬建立人工感染吉氏巴贝斯虫试验模型,利用MTT法检测外周血淋巴细胞(PMBC)的增殖能力,利用流式细胞术分析外周血中CD3~+、CD4~+、CD8~+T淋巴细胞亚群的分布,利用Real-time PCR检测外周血中IL-6、IL-17、TNF-α、IFN-γmRNA的转录水平。结果显示,与对照组相比,感染吉氏巴贝斯虫后犬PMBC的增殖能力显著下降(P0.05),外周血中CD3~+、CD4~+T淋巴细胞占比降低显著(P0.05),CD8~+T淋巴细胞占比下降不显著(P0.05)。与对照组犬相比,IL-6、TNF-α、IFN-γmRNA转录水平显著下调(P0.05)。结果表明,吉氏巴贝斯虫感染对犬免疫机能具有明显的抑制作用。     

抗山羊IgMμ链单克隆抗体的制备及鉴定

将构建的山羊IgMμ链的原核表达重组质粒pET30a-IgMμ转化至大肠杆菌BL21中,诱导表达获得重组蛋白His-IgMμ;以Ni-NTA亲和层析法纯化His-IgMμ重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、抗体筛选和细胞克隆等杂交瘤细胞技术,筛选能稳定分泌抗山羊IgMμ链单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用小鼠腹腔诱生腹水的方法制备出抗IgMμ链单抗,并鉴定单抗的生物学特性。结果,成功构建了重组表达载体pET30a-IgMμ,诱导表达、纯化得到了目的蛋白;获得了4株能稳定分泌抗山羊IgMμ链单克隆抗体的杂交瘤细胞株,4株单抗腹水的效价均达到了1×10~(-4)以上,其中1D8、5D1和6G10株单抗亚型为IgG1,9H8株的亚型为IgG 2a,轻链均为κ;1D8、5D1、6G10和9H8的亲和力平衡解离常数KD分别为1.87×10~(-11)、8.46×10~(-7)、4.26×10~(-9)和4.07×10~(-10);经Western-blot鉴定,单克隆抗体6G10能特异性识别原核表达的HisIgMμ蛋白。上述研究结果表明,本研究获得了4株高亲和力和效价的抗山羊IgMμ链特异性单克隆抗体,这为山羊感染性疾病的早期诊断、预报预警和防控提供了基础条件。