生物检材中的PCR抑制物及其处理技术

DNA分型技术在刑事案件的侦破中已得到广泛应用,但不同来源的各种生物检材往往含有PCR抑制物,其对扩增反应的影响不容忽视。因此,DNA样本扩增前预处理就显得尤为重要。本文主要就PCR抑制物种类及其对PCR的抑制机制、PCR抑制物应对技术等相关研究进展进行简要综述,旨在为相关研究和应用提供参考。     

生物检材中常见除草剂的分析方法及研究进展

除草剂,是可以有效消灭或抑制杂草生长的一类化学或生物药剂.由于除草剂使用范围广、频率高,除草剂中毒时有报道.目前文献报道引起中毒的除草剂主要品种有百草枯、敌草快、草甘膦和草铵膦,其仪器分析方法主要为液相色谱-质谱法.本文综述了生物检材中常见除草剂的分析方法及应用的研究进展,总结生物检材中除草剂定性和定量分析的样品前处理...     

腐败生物检材中多种碱性滥用药物的检测

目的建立腐败生物检材中多种碱性滥用药物的提取、净化和仪器分析方法。方法用环己烷作为提取溶剂液-液萃取,同时采用Bond Elut Certify小柱、甲醇淋洗、二氯甲烷:异丙醇:氨水(78:20:2)洗脱固相萃取分离提取,GC/MS、GC/NPD定性定量分析各种生物检材中的滥用药物。结果从所送死者肝组织、胃组织、心血及胃内容、尿样、各检材中均同时检出吗啡、可待因、舒乐安定和异丙嗪成份,其中肝组织含量分别为吗啡0.094μg/g、可待因0.257μg/g、异丙嗪0.110μg/g,尿液含量分别为吗啡0.334μg/ml、可待因4.054μg/ml、异丙嗪0.066μg/ml,心血含量分别为吗啡0.036μg/ml、可待因0.106μg/g、异丙嗪0.088μg/ml。结论此方法准确、可靠、科学,可以用于法医毒物分析领域体内检材多种碱性药物的检测。     

活体指甲缝内生物检材的提取1例

1案例 谢某,女,某日被人拉上车,遭到暴力抢劫。法医在给谢某验伤时,得知谢某在挣扎过程中曾抓过嫌疑人手臂,便提取了谢某右手指甲缝内附着物送作DNA检验。经检验,在受害人指甲缝内检测到一男性基因成分,并比对此前该地区发生的一宗轮奸案及多宗抢劫案,成功锁定了案犯。     

超滤管在陈旧生物检材中的应用

目的探讨millipore超滤管滤过方法对陈旧生物检材DNA分型检验的应用价值。方法将23份陈旧血样分别剪取同样合适大小的血片3组,标为A、B、C组,磁珠法提取DNA,分别用80μL、80μL、20μL洗脱液洗脱得到模板DNA,其中A、C组模板直接扩增,B组用millipore超滤管滤过浓缩后扩增。PCR产物用AB3130x L基因分析仪检测,Gene Mapper ID V3.2软件进行自动分型。所得实验数据用SPSS软件分析处理。结果 A组没有1例样本扩出全部STR基因座,B组有18例样本扩出全部STR基因座,C组有11个样本扩出全部STR基因座。结论应用millipore超滤管滤过方法可以明显提高陈旧生物检材的DNA分型成功率。     

触摸遗留人体生物检材DNA分型检验2例

1案例资料 1．1案例1 简要案情2007年7月至2008年2月，某市发生系列爆炸案，从现场提取自制导火线、捆绑爆炸装置用的绳结、旧棉花等可能留有犯罪嫌疑人脱落上皮细胞的检材。     

生物检材中乌头碱的GC/MS分析

目的 建立GC/MS-SIM检测生物检材中乌头碱的定性方法。方法 以MSTFA作为衍生化试剂,吡啶为溶剂,于60℃反应30min,综合质谱图及保留时间定性分析。结果 经该方法测得乌头碱最小检出量为20ng(S/N≥100)。结论 GC/MS-SIM法适用于药材及生物检材中乌头碱的定性分析。     

检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响

目的 研究检材采集与保存方式对DNA提取效率的影响。方法 使用生物检材采集与保存套管棉签、尖头棉签和普通医用棉签采集血样,分别放置于生物检材采集与保存套管或纸质物证袋中保存1周。剪取全部血样于96孔板中,用磁珠法结合自动化工作站提取DNA,以ABI7500型荧光定量PCR仪定量。结果 生物检材采集与保存套管采集保存的血样所提取的DNA浓度平均为(2.54±0.63)ng/μL,而尖头棉签、普通医用棉签采集并分别用纸袋保存的血样提取的DNA浓度平均为(2.06±0.44)ng/μL和(0.93±0.59)ng/μL。结论 生物检材采集与保存套管较之于尖头棉签或普通医用棉签采集、纸袋保存方式,其获得的DNA浓度显著提高,DNA提取率高。     

生物检材采集与保存套管的应用

目的探讨生物检材采集与保存套管在法医学中的应用价值。方法在不同温、湿度环境下，观察悬空放置在生物检材采集与保存套管、有孔与外界相通的套管及密闭管内的湿润棉签的干燥时间30次；分别用生物检材采集与保存套管和医用棉签采集纸袋保存口腔细胞、血液、皮肤脱落细胞样本各20例，磁珠法提取DNA并进行DNA定量；用生物检材采集与保存套管采集口腔脱落细胞和血样进行DNA直接扩增。结果在温度4～30℃、相对湿度21％～90％的环境下，湿润棉签在套管内的平均干燥时间为7．89h，有孔管内的为23．30h，密闭管内观察15天仍不干燥，出现霉斑。生物检材用套管采集保存比医用棉签采集纸袋保存方式获得的DNA量显著提高，平均高达0．968倍；用套管采集口腔细胞和血样进行直接扩增，操作简单方便，成功率高。结论生物检材采集与保存套管具有快速干燥、对检材无损耗和浓缩等优点，可提高检材DNA的提取效率，且适合直接扩增。     

犯罪现场生物检材真伪的分析

随着DNA检验技术的日趋成熟和广泛应用，其在案件侦破中的作用越来越显著，但潜在的隐患也日渐显现，一方面由于DNA检验技术灵敏度的提高，许多微量DNA检材都能得到成功分型；另一方面在不断提高生物检材检验水平的同时，犯罪分子也在时刻注意这些进展，利用生物检材伪装现场、     

运用分子生物学方法鉴定生物检材种属的研究进展

生物检材的种属鉴定在法医、海关和食品行业中均有较多应用。当前,用于鉴定种属的分子生物学方法发展迅猛。本文结合文献,从用于种属鉴定的目的基因及筛选标准、主要分子生物学方法、鉴定存在的主要问题等方面进行综述,并结合Real-time PCR和SNP技术对未来种属鉴定的发展方向进行了预测。     

微量生物检材DNA检验的研究

在日常检案中经常遇到微量的生物检材 ,由于重视不够 ,提取不当 ,检验效果不甚理想。为了充分发挥微量生物检材的作用 ,更好的为侦察破案服务 ,笔者对部分微量生物检材进行了PCR STR检验研究 ,并取得了一定效果。现报道如下 :1　方法和结果实验样品　均由非本实验室的志愿者提供 ,一次性牙刷 10个 ,日常用牙刷 4个 ,头皮屑 2人分 ,一次性纸杯 10个 ,面部擦拭斑迹 5份 ,梳子 2把。另取杀人案件现场嫌疑人遗留的衣服领子 1个 ,盗窃案件现场提取的犯罪嫌疑人饮酒用的瓷碗 1个。试剂与仪器采用 970 0扩增仪 (ABI公司 )及ABI 377测序仪 ,Pr…     

生物检材中杀鼠药检验的研究进展

综述了近十几年来生物检材中常见杀鼠药检验的研究成果,分析讨论了在杀鼠药检验中TLC、GC、HPLC等方法的特点及适用范围.     

特殊检材的DNA检验3例

法医物证鉴定中,较常见的生物学检材有现场血痕、精斑、毛发、牙齿、香烟过滤嘴及在抵抗中遗留在当事人指甲缝中的生物成分DNA[1].但在实际工作中,发现提取的生物检材复杂多样,对于一些疑难检材在DNA提取方面便成为难点,而这些特殊检材的成功分析往往对案件的定性和侦破起着至关重要的作用.现将3个案例中4份特殊检材的DNA检验报道如下.     

两种包装方式对小体积生物检材DNA检验的影响

目的探讨一种适用于小体积生物物证检材的包装方式。方法选择M4型螺丝钉作为研究对象,经去污消毒处理,通过手握方式转移人体脱落细胞到其表面,对螺丝钉采用两种不同的包装方式(滤纸包裹和悬空固定),经KingFisher Flex自动提取工作站进行DNA提取,从基因座等位基因检出情况、STR分型谱带峰高、均衡性等方面比较两种包装方式对螺丝钉上DNA检出率的影响。结果悬空固定包装螺丝钉实验组获得的STR分型谱带峰高、均衡性等方面均优于滤纸包裹包装实验组,其在基因座检出数量、分型完全相同样本数及有效分型样本数方面也多于滤纸包裹包装实验组。结论为降低微量生物检材DNA二次转移造成的损耗,提高小体积生物检材DNA的检出率,建议对小体积生物检材采用悬空固定方式进行物证包装。     

铁锹柄分段转移接触性生物检材DNA检验1例

1案例资料 1．1简要案情 2007年11月13日晚，高某（男）被他人打死。尸体上遗留有带血迹的铁锹1把，铁锹头及锹柄下部粘有大量血迹。现场勘查分析，该铁锹应为作案工具。通过分析犯罪分子在作案时未带手套，铁锹柄上可能遗留有其接触性生物检材。     

扩增12S rRNA基因鉴定生物检材种属

目的建立一种能够在同一反应条件下鉴定多个具体物种．又满足简单、快速、特异、灵敏、准确等实用要求的种属鉴定方法。方法从GenBank中获取人、鸡、鸭、鹅、猪、兔、鼠、绵羊、水牛、狗、山羊等11个物种的12SrRNA基因序列．设计一对针对上述11个物种的通用引物和分别针对人、鸡和鸭的特异引物,同时扩增各物种12SrRNA基因。以通用引物扩增片段为内部对照．以特异引物扩增片段用于人、鸡和鸭的种属鉴定,并分别对人、鸡、鸭单一检材以及人和鸡、人和鸭、鸡和鸭等二元混合DNA进行鉴定。结果通用引物扩增,各物种均有400bp左右的扩增片段：特异引物只对各自目标种属有扩增产物,片段大小：人163bp、鸡286bp、鸭374bp;测序结果与GenBank既有序列比对,Identities分值：人100％、鸡99％、鸭100％;通用引物扩增人、鸡和鸭检材的灵敏度为2．5Pg;特异引物扩增灵敏度人为2．5pg,鸡、鸭均为200Pg;混合DNA中任一种DNA的含量只要高于检测灵敏度即可被准确检出．不受另一种DNA量的干扰：盲测结果准确。结论本方法可以利用同一种PCR反应条件鉴定多个物种的种属。     

浅议生物检材的来源及与犯罪的关系

确定生物检材的来源与犯罪活动之间的关系是提升DNA鉴定证据证明力的重要环节。本文从生物检材来源的分类、排除等方面阐述了确定生物检材的来源在提升证据价值、理解证据的证明力强度、提高办案质量等方面的重要作用。     

生物检材中天然气主要成份的分析

近年来 ,天然气使用在城市很普遍 ,中毒死亡的案件时有发生。本文研究建立了用简易顶空—GC/MS法对中毒血液及部分组织 (肺、脑等 )中天然气主要成份甲烷等进行简便易行的分离、鉴定。经动物实验验证及中毒案件应用证明 ,操作方法简单、快速、灵敏、准确。1　材料与方法1 1　仪器1 1 1　顶空装置　 2 2ml反应瓶 ,橡胶垫 ,铝制封口及封口器 (均由NationalScientific公司提供 )。1 1 2　HP GCD气 质联用仪　PlotQ弹性石英毛细管柱 (30m× 0 32mm ,0 32 μm) ,柱温 :5 0℃ (1min)2℃ /min 5 2℃ 10℃ /min 2 0 0℃ ,传输线温度 :2 0 0…     

6种特殊生物检材的DNA提取

在许多案件中会遇到一些特殊生物检材，如鼻涕、经联苯胺染色的血痕、甲醇固定后经伊红美蓝染色的涂片、牙刷、汗斑及软骨等，如何充分挖掘这些特殊生物检材的证据作用，将对侦破工作和定罪量刑有重要意义。但是实际上，许多特殊生物检材在提取DNA时有一定困难，导致实验结果差。作者在实际检案中遇到了上述６种特殊生物检材时，用文献犤１犦建立的DNA提取方法，成功地提取了DNA并分型，报道如下。１案例简介案例１２００１年１月，河北省张某被头罩面罩的歹徒持刀入室抢劫杀害。送检检材为被害人张某血样、犯罪嫌疑人田某血样及罪犯弃…