动物病毒的分子生物学研究进展

动物病毒学是发展极为迅速的学科之一,不仅在有关病毒的基本理论方面,而且在病毒研究的实际应用方面,都有了突飞猛进的发展。 (一)动物病毒基础理论和实验技术的研究 1935年Stanley获得了结晶的烟草花叶病毒,翌年Bawden发现这种病毒存在核糖核酸,这就奠定了病毒分子生物学研究的基础。此后五十多年来,分子病毒学已成为病毒学研究中最为活跃的领域之一,并且取得了巨大进展。     

蜱细胞培养技术

蜱细胞培养技术郭中敏，玛丽亚木，努素甫·艾力，谭立新（指导老师：郭固）（新疆畜牧科学院兽医研究所乌鲁木齐８３００００）蜱细胞培养是一相当年轻的组织培养技术。Ｗｅｙｅｒ（１９５２）首次报道了关于培养散状扇头蜱组织的结果，但真正蜱细胞培养研究的报告是由Ｒ...     

鸡新城疫病毒的表面结构及其感染基础

在病毒学工作中经常会遇到病毒的感染范围问题,即不同的病毒对动物或细胞有不同的易感力,且同一病毒的株之间也有不同的感染程度,从而出现了毒株间有不同毒力之分。这种毒力的差异或变化,对生产实践或理论研究都有十分重要的意义。由于鸡新城疫病毒(NDV)常被认为是研究病毒学问题的良好模型,所以本文试从其     

羊衣原体性流产的研究——衣原体的电子显微镜观察

1950年Stamp首次报道了羊衣原体性流产之后,并在光学显微镜下观察了羊流产衣原体的发育形态。本文作者通过流行病学调查、病原分离鉴定及血清学检查等项研究,于1980年认定在我国甘肃、内蒙古和青海等省(区)的一些主要养羊地区,存在着羊衣原体性流产。由感染衣原体的FL细胞培养物制片和鸡胚卵黄囊膜涂片,在光学显微镜和电子显微镜下,     

犬细小病毒SH14株的分离鉴定及其VP2基因的序列分析

为分离犬细小病毒(canine parvovirus,CPV),用疑似犬CPV感染的病犬肠组织研磨液接种猫肾细胞(CRFK),进行病毒分离,并利用常规病毒学和分子生物学方法以及动物回归试验鉴定分离的病毒,并对其VP2基因序列进行测定及分析。结果显示,该病毒能在CRFK细胞上良好生长并产生细胞变圆、脱落等特征性细胞病变;细胞培养物能扩增出CPV的特异性基因组;对病毒的VP2基因序列和推导的氨基酸序列进行分析,结果表明,本研究的分离毒株属于New CPV-2a型,与CPV SH-2/2011株的亲缘关系最近,其核苷酸同源性和氨基酸同源性分别为99.83%和100%。上述结果表明,成功分离到1株New CPV-2a型犬细小病毒,将其暂命名为SH14株。本研究结果为进一步研究我国犬细小病毒的进化和变异,以及疫苗的研制奠定了物质基础。     

使用细胞培养单层分离猪流行性腹泻病毒

1971年,在英国的猪群中首次发现猪流行性腹泻(PED),直至1978年,英国和比利时才证实,引起PED的病原体为冠状病毒PED和猪传染性胃肠炎(TGE)是由不同血清型的冠状病毒引起危害以消化器官为主的两个类似的猪的传染病。因此,单靠临床症状和组织病理学检查来作出鉴别诊断是比较困难的,必须借助于血清学和病原学的检验。但是,由于在细胞培养物中使用胎牛血清会起到抑制冠状病毒吸收进入细胞膜受体的作用,使PED病毒在细胞培养物中生长繁殖受阻,从而对PED病毒的应用研究带来了一定的困难。据报道,     

免疫吸附去除猪瘟免疫血清中非相关抗体

当用聚乙二醇沉淀法从猪瘟兔化弱毒牛睾丸细胞培养物上清液制备部分纯化抗原,进行猪瘟免疫检测时,因免疫血清中存在抗牛睾丸细胞和抗牛血清成分的抗体,会产生非相关性反应而 干扰对抗病毒特异性抗体的检测。在血清稀释液中加入牛睾丸细胞培养物抗原可有效地抑制这种非相关抗体引起的反应,保证猪瘟免疫抗体检测的特异性。     

切流式超滤技术及其在病毒学研究中的应用

切流式超滤技术及其在病毒学研究中的应用王永录张永光方玉珍蒋守田（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）超滤（ｕｌｔｒａｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）是借助于超滤膜或其他超滤装置对生物大分子物质进行分离、纯化及浓缩的一种技术。这一技术以物理方法对大分子物质...     

免疫荧光间接法对马鼻疽诊断的研究

免疫荧光技术自1941年Coons等创立以来,不断地发展和改进,已作为一项新的诊断方法在免疫学、细菌学、病毒学等基础理论研究及临床快速诊断方面得到广泛应用,并起到重要作用。以往,国内外对鼻疽病马的诊断多采用鼻疽菌素点眼和补体结合反应试验。近几年来,我所又建立了微量间接血凝、乳胶凝集、酶联免疫吸附试验(ELISA)以及对流免疫电泳等比较敏感的检测技术。为了探讨免疫荧光技术在鼻疽病马诊断上的应用价值,进行了本试验的研究,并且与常规的CFT及ELISA等方法进行了比较。     

应用单克隆抗体ELISA抑制法检测细胞培养中的猪瘟兔化弱毒

应用2种针对不同抗原决定簇的抗猪瘟兔化弱毒单克隆抗体建立了检测细胞培养中猪瘟兔化弱毒的ELISA抑制试验。对20份不同批次的猪瘟兔化弱毒牛睾丸细胞培养物的测定结果表明,该法可较准确地反映病毒在细胞培养中的产量;将病毒培养物置4℃、25℃和37℃3天、超声裂解、冻融3次和6次等不同方法处理对试验结果无显著影响(P>0.05);通过与兔体接种试验比较,探讨分析了猪瘟兔化弱毒疫苗生产工艺中的问题。     

酶标免疫电镜技术在牛白血病病毒形态学研究中的应用

迄今,国内外对于牛白血病病毒的酶标免疫电镜观察尚无报道。我们首先将该项技术应用到对牛白血病病毒的形态学研究上,从而进一步明确了此病毒在宿主细胞内的分布、抗原定位以及该病毒粒子的形态特征。 (一)材料 1.牛白血病病毒感染的羊胎肺细胞(FLL)初期培养物;2.羊抗牛白血病病毒血清。以上两种原材料均由牛白血病防制课题组提供。3.健康羊胎肺细胞培养物,由魏仁山先生提供。4.冻干酶联葡萄球菌A蛋白纯品,由上海生物制品研究所购入。     

假病毒技术在猪病原研究中的应用

假病毒作为一种安全和便捷的研究工具,在病毒学尤其是在高致病性病毒基础研究和疫病防控研究中发挥着重要作用。本文通过介绍假病毒的定义和特性、分类和构建、常见的包装系统和报告基因,并重点阐述了假病毒在猪病原研究中的应用,旨在为假病毒的发展与猪重要疫病的防控研究提供技术参考。     

全国分子病毒学技术交流会在京闭幕全国病毒学学术大会将在津召开

由中国微生物学会病毒学专业委员会主办的全国分子病毒学技术交流会已于1985年10月8～11日在北京军事医学科学院微生物流行病研究所召开。出席全议的代表来自全国45个科研、教学、医疗及卫生防疫单位共80人,另有旁听音60O多人。其中高级科技人员26人,中级科技工作者42人,研究生12人;年龄最大者69岁,最小的21岁。说明我国已初步形成一支队事分子病毒学的科技队伍。     

鸡胚成纤维细胞培养鸭瘟病毒的试验

将鸭瘟病毒强毒(DPV34)经12日龄鸭胚连续传2代,收获的尿囊液DPV34F2作为细胞培养的病毒接种于鸡胚成纤维细胞,连续传代5次.结果,从第2代开始,接种DPV的鸡胚成纤维细胞出现细胞病变,随着代次的增加,细胞病变愈加明显.经电镜观察,第5代细胞培养物中有典型的DPV病毒粒子;将第5代培养物接种鸭胚,出现典型鸭瘟病变;用PCR方法检测培养物,也出现DPV的特征DNA带.     

动物病毒的形态结构和分类

病毒学是以研究疾病病理学开始的。当十九世纪末叶,许多传染病的微生物病原已经明确,但病理学者发现还有一些人和家畜常见传染病的病原体既不是细菌,也不是原生动物。直到1898年,莱夫勒和弗罗施证实口蹄疫的病理材料,通过能截留最小的细菌的滤过器后,仍能将该病传染给另一动物。从此以后,这类疾病就被假定为“超显微镜滤过性病毒”,后叫“滤过性病毒”,即现在所说的“病毒”引起。滤过性等,现已不再成为病毒的重要特点。     

H5N1和H9N2亚型禽流感病毒型特异性抗原捕捉ELISA检测方法的建立

采用禽流感病毒多克隆抗体及型特异性单克隆抗体,研究建立了型特异性抗原捕捉ELISA检测方法,用于检测H5N1和H9N2亚型禽流感病毒。优化了反应条件,确定了包被抗体、检测抗体及酶结合物的最佳工作浓度,对该方法的敏感性、特异性、重复性及稳定性进行了分析,并与病毒分离鉴定的结果进行了比较。结果表明,该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于临床样品及鸡胚、细胞培养物中禽流感病毒的检测。     

畜禽病毒病诊断和免疫预防的现况与展望

随着生物化学和生物物理学等科学的发展以及新的研究手段的建立,包括新的仪器设备、试剂和方法,病毒学在近年来的研究进展极为迅速。其标志,一是开始向分子病毒学的深度发展。就多数病毒科、属来讲,不仅知道了它们的化学组成以及各该成分在病毒颗粒中的存在部位及其功能,且对结构比较简单的病毒,例如口蹄疫病毒和流感病毒等也已弄清楚     

轮状病毒弱毒疫苗田间效力试验

1981年,我们在乌兰县从剖检3～7日龄下痢羔羊采集肠道及其内容物,进行细胞培养分离,获得了引起初生羔羊腹泻的轮状病毒,后经犊牛肾初代细胞培养高代次低温致弱,获得了轮状病毒弱毒株,用于制备弱毒疫苗。1988～1989年,用该疫苗在乌兰县赛什克乡进行田间效力试验,取得了较好效果。(-)材料     

猪传染性胃肠炎病毒重组M蛋白免疫血清在病原检测中的应用

以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组M蛋白免疫新西兰兔,制备免疫血清,用间接ELISA测得免疫血清效价达1∶14 000。通过间接ELISA进行病原检测,表明制备的免疫血清与全病毒具有较好的特异性。用免疫血清进行病原间接免疫荧光检测,TGEV感染的细胞培养物中多数细胞在其胞浆和细胞膜上出现黄绿色闪亮荧光,且荧光强度强,而未接种病毒的细胞培养物未见有黄绿色闪亮荧光,表明用所制备的抗TGEV重组M蛋白的免疫血清进行病原间接免疫荧光检测具有较高的特异性,为TGEV准确快速诊断与鉴别奠定了基础。     

病毒电镜负染色条件试验

近年来,电镜负染色技术广泛应用于病毒学研究,对于观察病毒的形态结构和病毒性疾病的临床诊断有重要意义。为改善负染色方法制备样品的稳定性,提高成像效果,我们在应用电镜负染色法观察病毒的过程中对影响负染色效果的诸因素进行了试验。