应用电镜技术快速诊断动物病毒病

应用电镜技术快速诊断动物病毒病李成（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所１５０００１）电镜技术对诊断形态特征性强的动物病毒（如正粘和副粘病毒、正痘和副痘病毒、疱疹病毒、轮状病毒、弹状病毒、冠状病毒及腺病毒等）感染引起的动物病毒病，既快速又准确。尤其对混合感...     

免疫电镜技术在动物病毒感染诊断中的应用

光学显微镜的出现为人类打开了微观世界的大门 ,但由于受到光波波长的限制 ,其最高分辨率只能接近于 2 0 0 0ｎｍ。电子显微镜是以电子束作为光源 ,电子波长是可见波长的 10万分之一左右 ,分辨率极高。自从 1932年第一台电子显微镜在德国诞生以来 ,其分辨率已达到 1.5～ 2 .0ｎｍ ,为生命科学研究提供了一个更加有用的工具。随着电子显微镜性能的不断提高 ,生物超微结构的研究从单纯形态描述进入了成分分析 ,从静态描述进入了动态观察 ,从二维平面进入了三维立体图形的观察与重组。同时 ,免疫学技术也得到了突飞猛进的发展 ,电镜技术与免疫…     

鸭冠状病毒性肠炎的免疫电镜诊断

对经聚乙二醇(PEG)粗提后蔗糖密度梯度离心提纯的粪便中的鸭冠状病毒(D CV),用试验感染鸭高免血清进行反应,然后对反应产生的抗原—抗体复合物以磷钨酸负染,用电镜观察。此改进的免疫电镜技术,检测方法简单、快速、特异性强,是目前诊断D CV肠炎的有效方法。     

马西尼罗河病毒病的诊断方法

西尼罗河病毒病 (WestNilevirusdisease)是一种虫媒性病毒病 ,其病原为西尼罗河病毒 (WestNilevirus)。该病毒属黄病毒科的乙型脑炎病毒血清群 ,可引起人类及马、鸟类出现脑炎症状 ,马是该病毒的终宿主。近年来 ,西尼罗河病毒病频繁发生于欧洲、北美洲及中东、西亚的一些国家和地区 ,如1999年美国发现西尼罗河病毒病病例 ,当年有 2 5匹马发病 ,2 0 0 0年有 6 0匹马发病 ,2 0 0 1年增加到738匹 ,2 0 0 2年剧增至 15 2 5 7匹 ,2 0 0 3年截至 9月初有 1185匹马发病。马西尼罗河病毒病可通过赛马和旅游娱乐马广泛传播 ,对公共卫生造成严重威胁…     

马属动物血小板电镜形态观察

用电镜对马属动物血小板形态结构的研究国内未见报道,本实验用扫描电镜和透射电镜,观察了正常马属动物血小板的形态特点,从而提供了认识血小板功能的形态学基础资料。 (一)材料和方法 1.血样:为临床检查健康的马、驴、骡静脉血。 2.方法:用普通注射器抽取15ml静脉血,等分,分别迅速注入三支离心管中(每支离心管中分别加入3.8％枸橼酸钠、草酸钠、肝素抗凝)混均,1000～500转/分离心10分钟,吸取上层富含血小板血浆(PRP),加等量0.2％戊二醛液混均,静置10分钟,2500转/分离     

斑节对虾杆状病毒病检疫和病毒电镜观察

本试验采用组织压片法、常规组织切片法、快速组织切片法及电镜观察法对进口的斑节对虾(Penaems mondon)及其繁殖的后期幼体的斑节对虾杆状病毒(P.mondon-type b-aculovirus,MBV》进行诊断。结果,后期幼体MBV包涵体感染率为35％～100％,抽样样品阳性率达100％。嗜酸性的MBV包涵体存在于肝胰腺和前肠的上皮细胞核内,单个、多个、近圆形。电镜观察,其包涵体由多角体蛋白组成,呈拟晶体排列;病毒颗粒呈杆状,有披膜,自由分布于细胞核内或粘附在包涵体上,大小约为360×60nm。     

应用SPA—扫描免疫电镜技术诊断鸡传染性法氏囊病

目前,免疫电镜技术已广泛用于病毒检测、病毒分型和临床诊断。为了克服免疫电镜技术存在前带效应的影响。Katz等(1980)应用金黄色葡萄球菌作为固相,成功地建立了一种固相免疫电镜技术。此法具有简便、快速、敏感等特点。我们应用此法诊断鸡传染性法氏囊病(IBL),收到了较好的效果。 (一)材料与方法 1.金黄色葡萄球菌Cowan I株:购自中国兽药监察所,固体培养基培养。在制备葡萄球菌A蛋白(SPA)菌体稳定液前,间隔12小时传1代,连传12代。     

用SPA-固相免疫电镜技术诊断犬细小病毒性肠炎

(一)材料与方法 1.被检粪样和肠内容物处理:新疆某警犬所出现呕吐、血样腹泻的病犬5只,采其粪样或病死犬肠内容物,分别编号为1、2、3、4、5号,按1/2(V/V)量加入0.01MpH7.6的PBS,充分振摇,冻融2次,再加入等量氯仿充分振荡后,3000rpm离心30分钟,吸取水相待检。 2.抗体:①西德产Magioban,该制品为含有犬瘟热、犬腺病毒肝炎、犬钩体、犬细小病毒的狗免疫球蛋白,批号为23795。②猫泛白细胞减少症阳性血清、南京农大蔡宝祥教授惠赠。     

山羊关节炎脑炎的免疫电镜观察

山羊关节炎脑炎(Caprine Arthritis En-cephatitis,简称CAE)是山羊的一种慢性传染病,其病原体为CAE病毒,属于逆转录病毒科中的慢病毒亚科,为单链的RNA病毒。我们已在国内首次从进口奶山羊分离出CAE病毒(见《中国兽医科技》1989,10,3～4页);本试验运用免疫电镜技术对CAE病毒颗粒形态结构进行了观察。     

犬瘟热病的电镜诊断

我们采用电镜技术,对兰州市一例病犬的病料进行了观察,确诊了该犬患犬瘟热病。病料的处理 选取病变小肠一段,刮取肠粘膜约1g左右置乳钵中,加少量玻璃砂,充份研磨,在低温冰箱冻融2次,用0.1mol PBS液使其成20％的悬液,充份搅匀,用2000r/min离心20分钟,取上清液,再以3500r/min离心1小时,弃去上清液,将沉淀物用1～2滴双蒸水悬浮起。并将其滴附在有Formvar膜的载网上,吸附1分钟,以1％磷钨酸负染1分钟,再用泸纸条吸干多余的水份,干燥后电镜观察、     

鸡传染性法氏囊病的电镜诊断

鸡传染性法氏囊病是国内外主要的鸡传染病之一,是一种破坏鸡中枢免疫器官——法氏囊的病毒性传鸡病。主要感染幼鸡;使法氏囊受损而产生免疫抑制现象,结果使鸡在新城疫、鸡马立克氏病等疫苗接种后不能产生良好的免疫效果。我们对疑为鸡法氏囊病的鸡病料用电子显微镜直接进行了观察。     

应用免疫电镜技术观察羊流产衣原体

本实验应用免疫电镜技术(IEM)吸附法、装饰法、吸附和装饰结合法以及沉淀法检测羊流产衣原体,并以直接法做对照。实验结果表明,这4种方法适用于检测羊流产衣原体,处理的样品在电镜下均较直接法处理的样品清晰,对于观察羊流产衣原体的形态以及对本病的诊断都有较高的实用价值。(一)材料和方法1.材料:羊流产衣原体(黄株)鸡胚卵黄囊培养物磨碎稀释经差速离心提纯,制成衣原体悬液。羊衣原体阳性血清批号8806,补体结合效价为1:256。阴性血清。上述材料均由我所羊衣原体研究课题组提供。     

电镜样品的快速包埋方法

我们认为目前所采用的超薄切片样品制备仍不够完美,如生物材料制备的整个工序竟长达3～4天,有的甚至需1周,太费时间,因而对科研急用材料的处理远不能满足要求。为了更好地为科研和生产服务,用国产环氧树脂和进口Epon 812等研制出了适用于口岸动物检疫和临床快速诊断病毒的快速包埋方法,操作过程如下:     

病毒病诊断新技术——聚合酶链反应

对病毒病的诊断主要依靠从病料中直接检出病毒或间接检出抗病毒抗体的方法,其包括:病毒的分离培养、电子显微镜观察和免疫学方法。近年来,人们应用核酸杂交技术直接检测病毒,即用标记核酸探针和靶病毒基因互补结合,通过检测标记物以达到诊断的目的,用该法检测时至少需要10~4～10~5个靶基因拷贝。由于有些病毒在数量很少的情况下可使宿主发病;有些病毒在感染早期病毒数量甚微,又无免疫     

应用电镜技术对某些动物病毒的快速检出

目前,动物病毒病越来越多,无论对人或对畜禽都构成了较大的危害。为了迅速扑灭这些疾病,首先要确定某种感染症的病原。确定病原,通常是采取生物学试验以及病原分离等方法,但这需要较长时间,花费很多人力、物力。因此,探讨快速诊断方法,是诊断学中的重要课题。一般来说,快速诊断是比较困难的,尤其对新发生的和未知病因的传染性疾病更难确诊。因为病原不清,查找书刊上的资料,也往往不     

动物红细胞免疫功能的研究进展

20世纪 5 0年代 ,Nelson[1] 首次发现红细胞具有免疫黏附功能 ,黏附的复合物更易被白细胞吞噬。6 0年代有关研究证实 ,人类红细胞所具有的免疫黏附功能是通过补体C3b受体实现的。 70年代在人红细胞上分离纯化了Ⅰ型补体C3受体 (CR1) ,其总数的 95 %以上都在红细胞膜上。Siegel等[2 ] 在前人研究的基础上提出了红细胞免疫系统 (RCIS)的新概念 ,随后红细胞免疫功能的研究发展迅速。现已证实 ,红细胞具有黏附、杀伤抗原 ,清除免疫复合物 ,参与机体免疫调控的作用 ,而且其自身存在完整的自我调控系统 ,是完整机体免疫系统中的重要组成部分。…     

浅谈微量元素与动物免疫

近20年来免疫学的进展和通过单一营养成份的实验研究,证实动物机体免疫反应是一系列复杂的网络调节,受营养等因素的影响,其中包括微量元素。本文拟就铁、锌、铜等微量元素对动物免疫功能影响作一综述。(一)铁与动物免疫的关系 铁是最早证明为动物必需微量元素之一。动物体中的铁由两部分组成,一部分是必需的铁,以白蛋白、肌红蛋白和细胞酶类形式出现;另一部分是以铁蛋白和含铁血黄     

动物针灸免疫研究现状

近年来,免疫学已成为生物学和医学的最重要的基础学科之一。由于现代免疫学的飞速发展,新的免疫学分支不断涌现。针灸在免疫方面的研究,不仅在人体上,同时在动物机体上进行了大量的实验研究。实验证明,针灸对机体特异性和非特异性免疫均能产生影响。更令人感兴趣的是现代免疫学理论和祖国医学理论关于抗病机理方面,有不少一致的地方。这就是探讨兽医针灸治病机理,对于沟通中西兽医理论,开拓临床新领域,提供了理论根据。本文仅就国内多年来发表的有动物针灸免疫研究资料综述如后。     

应用胶体金免疫电镜技术检测犬传染性肝炎病毒

用胶体金免疫电镜技术检测了犬传染性肝炎病毒(ICHV),证明此方法可作为快速鉴定动物病毒的常规方法。     

鹅副粘病毒病的诊断与防制

自1997年以来,在我县及周围地区的鹅群相继发生一种以消化道病变为特征的疫病,发病率和死亡率均很高,造成了很大的经济损失。经过调查研究,在弄清其流行病学特征的基础上,初步确诊为副粘病毒所引起的一种新的鹅病毒性传染病,经使收稿日期:1999-11-17作者简介:王中发(1945),男,浙江省武义县人,高级兽医师。用研制的油乳剂灭活苗进行防制,取得了显著效果。1　发病情况各种日龄的鹅均易感,发病率为10?%,死亡率为10P%,病程14ｄ;10日龄左右的雏鹅感染后100%发病,95%死亡。患鹅病初拉白色稀粪,腿无力,不愿行走,站立不稳,常浮于水面漂流,少食或…