车前子黄酮的响应面法优化微波提取及其对鸡抗氧化能力的影响

本试验旨在单因素试验的基础上,考察乙醇体积分数、料液比、微波处理时间对车前子黄酮提取率的影响,利用响应面法确定微波提取车前子黄酮的最佳工艺,并研究微波提取的车前子黄酮对环磷酰胺(cyclophosphamide,CY)诱导鸡氧化应激的影响。选用100只1日龄白羽种蛋鸡公雏,随机分为5组(每组20只),即空白组、CY组(环磷酰胺+生理盐水)组、高剂量组(环磷酰胺+60 mg/mL车前子黄酮)、中剂量组(环磷酰胺+40 mg/mL车前子黄酮)和低剂量组(环磷酰胺+20 mg/mL车前子黄酮),比较不同水平车前子黄酮对氧化应激鸡抗氧化能力的影响。结果显示,车前子黄酮最佳提取条件是乙醇体积分数为64.80%、料液比为1∶21.58、微波处理时间为7.08 min,该条件下黄酮的提取率为11.40 mg/g。动物试验结果表明,车前子黄酮可显著提高氧化应激鸡血清的总抗氧化能力,提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性,并可以降低血清中丙二醛的浓度。结果表明,采用响应面法对车前子黄酮提取条件进行优化合理可行,车前子黄酮可在一定程度上提高鸡机体的抗氧化能力。     

响应曲面法优化硒太子参多糖纳米微球的制备工艺

本试验旨在研究响应曲面法优化硒太子参多糖纳米微球的制备工艺。在单因素试验的基础上,采用响应曲面法考察有机相(O)和内水相(W)之比、PLGA的浓度、泊洛沙姆(F68)浓度对硒太子参多糖纳米微球包封率的影响。结果表明,硒太子参多糖纳米微球的最佳制备工艺如下:O∶W为4.83,PLGA浓度为45.07 mg/m L,F68浓度为0.39%,此时硒太子参多糖纳米微球的包封率为92.46%,平均粒径为133.3 nm,zeta电位为-28.08 m V。扫描电镜结果显示,SRPP-PLGA-NPs粒径均匀,表面光滑圆整,粒子之间界限清晰,无黏连现象,具有较好的稳定性。结论表明,采用响应面法对太子参多糖纳米微球的制备工艺的条件进行优化合理可行。     

基于响应曲面法优化硒化猴头菇多糖纳米微粒的制备工艺及其对脾淋巴细胞的影响

本试验旨在利用响应曲面法优化硒化猴头菇多糖纳米微粒的制备工艺条件,研究其对脾淋巴细胞免疫活性的影响。在单因素试验的基础上,采用响应曲面法研究有机相（O）和内水相（W1）之比、外水相（W2）和初乳（PE）之比以及PLGA浓度对硒化猴头菇多糖纳米微粒包封率的影响,并通过透射电镜以及粒径与Zeta电位的表征,检测模拟最优工艺条件制备硒化猴头菇多糖纳米微粒,并通过鸡脾淋巴细胞增殖和细胞因子IFN-γ、IL-4分泌量的检测,探究其免疫效果。结果显示,硒化猴头菇多糖纳米微粒的最佳制备工艺：有机相和内水相之比为4.66,外水相与初乳之比为7.23,PLGA浓度为21.19 mg/m L,在此条件下硒化猴头菇多糖纳米微粒包封率的实测值为（90.21±0.01）%,接近于预测值91.48%。纳米微粒的粒径小,表面光滑,粒子间有明显的界限,无黏连现象。硒化猴头菇多糖纳米微粒浓度为0.49μg/m L时,与硒化猴头菇多糖相比,更能促进鸡脾淋巴细胞增殖（P<0.05）。浓度为0.25μg/m L～0.98μg/m L时,与硒化猴头菇多糖相比,硒化猴头菇多糖纳米微粒更能促进鸡脾淋巴细胞分泌IFN-γ(P&...     

低温乙醇法和盐析法提取牛、羊血清γ-球蛋白的比较试验

γ-球蛋白主要是存在于动物血液里,具有抗菌、抗病毒、中和毒素、刺激动物生长等作用。近年来,国内外的兽医科研工作者,非常注意提取和利用动物血液中的生物活性物质,其中也包括γ-球蛋白的提取和利用。 关于从动物血液里提取γ-球蛋白的方法,国内外多采用盐析法。我们试用低温乙醇法在生产条件下,对牛、牛血清γ-球蛋白作了提取试验,并与盐析法作了对比,其结果报道如下。     

类弹性蛋白多肽融合犬β干扰素的表达纯化和抗病毒活性及体外半衰期的研究

为了研制长效犬β干扰素(Ca IFNb)基因工程产品,用聚合酶链反应从犬基因组DNA扩增Ca IFNb成熟肽编码序列,插入类弹性蛋白多肽(ELP)融合表达载体,将重组载体转化大肠杆菌BLR(DE3),用IPTG诱导Ca IFNb-ELP表达,利用ELP介导的温度敏感可逆相变循环(ITC)进行纯化,用50%细胞病变抑制试验检测干扰素活性,用50%小鼠血浆孵育法检测体外半衰期,并与融合组氨酸标签的His-Ca IFNb进行比较。结果显示,在≤28℃条件下,90%Ca IFNb-ELP为可溶性表达,His-Ca IFNb以不溶性包涵体表达;在优化条件下进行1轮ITC,获得的Ca IFNb-ELP的纯度为96%,显著高于以包涵体纯化的His-Ca IFNb的纯度(85%);Ca IFNb-ELP的抗病毒活性为1×105 U/mg,比His-Ca IFNb的抗病毒活性高10倍;Ca IFNb-ELP的体外半衰期24 h,显著长于His-Ca IFNb的体外半衰期(12 h)。结果表明,Ca IFNb-ELP具有表达水平高、纯化简单和体外半衰期较长等优点,有望作为长效干扰素开发利用。     

鸡传染性法氏囊病蜂胶灭活苗的研究──蛋鸡耐受试验及免疫持续期和疫苗保存期试验

鸡传染性法氏囊病蜂胶灭活苗的研究──蛋鸡耐受试验及免疫持续期和疫苗保存期试验柳纪省，方玉萍，王超英（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）我们用自己分离的鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）强毒株Ｌｚ株和Ｔｓ株制备的ＩＢＤ蜂胶灭活苗对鸡进行了安全性及免疫效...     

马骡疝痛血糖升高的原因及机理研究──静脉糖耐量试验和有关糖代谢激素的测定

对３８例疝痛病畜检测了血浆促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）和皮质醇，结果表明，病畜血浆ＡＣＴＨ和皮质醇明显升高（Ｐ＜０．０１），同时血糖亦明显升高（Ｐ＜０．０１）；输液使ＡＣＴＨ和皮质醇降低（Ｐ＜０．０１），血糖亦随之降低（Ｐ＜０．０５）。对１５例病畜进行静脉糖耐量试验（ＩＶＧＴＴ）及其与血浆胰岛素和胰升糖素的应答反应试验，结果病畜胰岛素和胰升糖素明显升高（Ｐ＜０．０１），血糖亦明显升高（Ｐ＜０．０１）；输糖后血糖清除时间延长约１８０分钟，血浆胰岛素和胰升糖素清除时间延长。从而认为，疝痛病畜血糖升高是胰升糖素清除时间延长、ＡＣＴＨ分泌增加、脱水和组织利用葡萄糖受阻所致。     

弓形虫单克隆抗体试剂的研究——应用RIHA及IHA法对弓形虫感染兔、羊循环抗原和抗体的检测

应用抗弓形虫单克隆体(McAb)致敏绵羊红细胞建立的反向间接血凝诊断法(RIHA)和间接血凝诊断方法(IHA),对人工感染弓形虫的兔、羊血清进行了循环抗原(CAg)和抗体(Ab)检测。结果表明,弓形虫弱毒(QHO)株和强毒(RH)株感染的兔和羊血清,用RIHA检出CAg的时间在感染后1～2天,平均4天;IHA检出Ab的时间在感染后8～16天,平均12天。用毒力不同的弓形虫感染后,CAg检出时间有一定差异:QHO株感染的兔平均5.3天,羊平均6.25天;RH株感染的兔平均2.3天,羊为1天。兔、羊CAg的阳性检出率均为100％。兔、羊血清CAg于感染后23～66天先后消失,而Ab滴度长期维持在一定高度(1:64～1:4096)。证明RIHA方法对不同毒力弓形虫感染的动物血清CAg可以达到早期诊断的目的。为弓形虫病急性期和早期现症感染提供了可靠的诊断方法和手段。