荷斯坦乳牛乳腺和乳腺上皮细胞中Toll样受体及辅助因子编码基因的检测

参照牛TLR4、TLR2、CD14、MD-2基因序列设计了相应基因的引物。采用RT-PCR技术检测了体外培养的荷斯坦乳牛乳腺和乳腺上皮细胞中Toll样受体TLR4、TLR2及辅助因子CD14、MD-2基因。结果显示,乳腺上皮细胞中存在TLR4、TLR2、CD14和MD-2四个基因的表达,而乳腺中除MD-2未检测到外,其余3个基因均扩增成功。说明该受体及辅助因子可能参与了乳腺的先天性免疫防御。该研究为探讨乳腺的先天性免疫及乳腺上皮细胞在乳腺先天性免疫中的作用奠定了基础。     

牛嗜肝DNA病毒的研究——利用RIA和ELISA在牛奶中检出HBsAg相关抗原

分别利用人乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）放射免疫测定（ＲＩＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对某奶牛场４０份牛奶样本进行了测定，结果在样本低稀释时有５份呈现阳性或可疑。肯定了我国牛群中存在新的嗜肝ＤＮＡ病毒种。牛奶中的ＨＢｓＡｇ相关性抗原与人ＨＢｓＡｇ的交叉反应性较低，这同其它哺乳动物嗜肝ＤＮＡ病毒与人乙型肝炎病毒的低同源性相一致。     

山羊和猪的肉孢子虫种类及其实验感染终末宿主的研究

在云南省家畜肉孢子虫调查中,发现当地山羊、猪各有2种肉孢子虫感染,即山羊犬肉孢子虫(Sarcocystis capracanis)、家山羊犬肉孢子虫(S.hircicanis)、猪人肉孢子虫(S.suihominis)、米氏肉孢子虫(S.miescheriana)。描述了各虫种的形态,并通过实验感染研究了各虫种的终末宿主。     

红河州鸡衣原体病的研究——病原分离鉴定和人工感染试验

从采自发病或死亡小鸡的肝、脾、肺和腹水等病料中分离到４株衣原体。将分离物接种７日龄鸡胚卵黄囊，能致鸡胚规律性死亡；该分离株对磺胺嘧啶（ＳＤ）具有抵抗力，碘染色不着色，鉴定为鹦鹉热衣原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａｐｓｉｔａｃｉ）；毒力测定对鸡胚致死毒价为１０－１０ＥＬＤ５０／０．４ｍｌ。用该分离株对健康小雏做人工感染试验，可发生与自然病例相同的症状和病理变化。同时对分离毒株形态特征进行了电镜观察     

十例犬乳腺肿瘤病理组织p53及CD44抗体表达的解析

对通过外科手术摘除的10例疑似犬乳腺肿瘤标本按国际标准进行了病理组织学分类,并采用鼠抗人p53和CD44抗体,用免疫组织化学方法对病料组织中的p53和CD44抗原进行了检测.结果表明,10例犬乳腺肿瘤中恶性肿瘤占50%,其中乳腺浸润性导管癌占30%;良性肿瘤占30%,乳腺非肿瘤性疾病占20%.p53在恶性乳腺肿瘤组织中的表达明显高于良性乳腺肿瘤组织,差异极显著(P＜0.01).CD44在恶性乳腺肿瘤组织、良性乳腺肿瘤组织和非肿瘤组织中均有表达,三者之间CD44的表达无显著差异(P＞0.05).证实,p53在病理组织中表达的强弱可作为动物乳腺肿瘤诊断和预后的判定标准之一,而CD44的表达对于乳腺肿瘤的诊断无临床意义.     

甘南牧区藏系绵羊寄生蠕虫的种类调查和感染季节动态研究

剖检甘南州的藏系绵羊６０只，共检获寄生蠕虫１２科１７属２３种，寄生蠕虫的优势属为奥斯特线虫、细颈线虫和同盘吸虫。在一年内每个月剖检５只绵羊，检查胃肠道寄生线虫的成虫和第四期幼虫，证明当地寄生线虫的优势属为奥斯特线虫、细颈线虫、马歇尔线虫。其中奥斯特线虫幼虫的寄生高峰期是８～１０月，９月份为最高峰，成虫的寄生高峰期是７～９月，７月份为最高峰；细颈线虫幼虫几乎全年持续感染，高峰期在１０月至次年５月，１月为最高峰，成虫全年都寄生，高峰期在１２月至次年１月，１月份为最高峰；马歇尔线虫全年寄生都比较低，幼虫在９月份较高，成虫在１月份较高。     

不同浓度脂多糖刺激奶牛乳腺上皮细胞对NF-κB及LAP表达的影响

为了观察不同浓度脂多糖对奶牛乳腺上皮细胞NF-κB及LAP基因表达的影响,设置不同浓度(0、50、100、200、400和800ng/mL)的脂多糖(LPS)刺激奶牛乳腺上皮细胞,分别于刺激2、4、8、16、24、48和72h后提取细胞总RNA,经反转录反应后,运用荧光定量PCR方法检测NF-κB P65亚单位和LAP的表达水平。结果,与空白对照组相比,脂多糖浓度达到400ng/mL并培养72h后,奶牛乳腺上皮细胞NF-κB P65亚单位和LAP的表达量最高,且与对照组有极显著差异(P<0.01)。结果表明,在脂多糖诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性效应中,NF-κB的表达活性增强,调控着防御基因LAP表达,呈现一定的剂量和时间效应关系。     

湖南省牛的隐孢子虫病调查及小鼠感染试验

对湖南省８个县（市）的２９６头奶牛、１７７头水牛及１２头黄牛进行了隐孢子虫病的调查。发现６个县（市）的牛有隐孢子虫的感染。奶牛感染率为５．３％～２８．８％，其中某牧场１岁以下犊牛的感染率（４６．７％）高于１岁以上午（２３．９％），３、４月龄犊牛的感染率（分别为１００％和６０％）高于４月龄以上的犊牛；水牛感染率为６．６％～４０％；黄牛中未发现隐孢子虫感染。以牛粪中分离出的隐孢子虫卵囊人工感染小鼠成功，从而证实牛的隐孢子虫在同一宿主纲内不具有宿主特异性。     

TNC、PREX1、THBS1和SERPINE1的mRNA在犬乳腺肿瘤中表达水平的差异性分析

为了探讨腱糖蛋白C(TNC)、磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸依赖的Rac交换因子1(PREX1)、血小板凝血酶蛋白1(THBS1)和纤溶酶原激活物抑制因子1(SERPINE1)的mRNA在犬乳腺肿瘤中的表达水平及其对犬乳腺肿瘤的影响,采用荧光定量PCR技术对临床收集的24例犬乳腺肿瘤组织及其癌旁组织中TNC、PREX1...     

日龄和感染量对柔嫩艾美球虫感染鸡组织病理学变化的影响

采用组织切片技术,观察了用不同剂量柔嫩艾美球虫(E.tenella)YL株孢子化卵囊感染的同一日龄雏鸡和用同一剂量柔嫩艾美球虫YL株孢子化卵囊感染的不同日龄雏鸡的组织病理学变化,并对不同组别的卵囊和配子体数量进行了统计。结果显示,不同剂量组中,1×105卵囊感染组配子体和卵囊的产量明显高于1×103和1×104卵囊感染组,其组织病理学变化也明显,但在感染后第9~11 d,1×103和1×104感染组卵囊数较1×105组多;同一剂量(每只鸡1×103卵囊)感染时11日龄雏鸡的组织病理学变化明显,说明鸡的日龄越大卵囊产量越高。     

人工感染艾美球虫对兔血液学数值的动态研究

将20只健康兔随机分成试验组和对照组,每组10只,试验组每只兔按100 g体重经口灌服混合孢子化卵囊5×104个,对感染前后兔红细胞总数、白细胞总数、白细胞分类计数及T淋巴细胞阳转率的动态变化进行了测定.结果试验组兔红细胞总数、淋巴细胞百分率及T淋巴细胞阳转率分别于感染后5～20 d、5～30 d和10～30 d均显著低于对照组(P＜0.05),30 d时的红细胞总数比对照组增加55.93%;白细胞总数和嗜中性白细胞百分率分别在感染后10～30 d和20～30 d显著升高;嗜酸性白细胞、嗜碱性白细胞及单核细胞无明显变化.由此表明,使用致死剂量的球虫卵囊感染兔,其致死的部分原因是因机体失血过多、抵抗力和免疫力下降所致.     

甘肃省庆阳地区肝片吸虫中间宿主的感染及种类调查

用从甘南绵羊和合水山羊胆囊中收集的肝片吸虫虫卵孵化出毛蚴,实验感染采自合水的各种淡水螺,并用从阳性螺收集的囊蚴感染家兔,确证小土蜗(Galba pervia)和梯状土蜗(G.laticallosiformis)为该地区肝片吸虫的中间宿主。     

产单核细胞李氏杆菌突变株的感染动力学研究

以BALB/c小鼠为实验动物模型,对actA基因和plcB基因双缺失的产单核细胞李氏杆菌(LM)yzuLM1-2菌株进行感染动力学研究。分别用减毒突变株yzuLM1-2和野生型菌株yzuLM4给BALB/c小鼠静脉注射或灌服,并对脏器中LM的分布动态进行测定。结果显示,在显著高于野生型菌株感染剂量的条件下注射或灌服接种后,减毒突变株组小鼠肝和脾中的LM数量迅速下降,被清除的速度显著快于野生型菌株组。溶血素(LLO)抗体的测定结果显示,减毒突变株菌能和野生型菌同样激发较高水平的抗体。小鼠免疫保护试验结果显示,减毒突变株免疫组对同种血清型LM的攻击具有较好的免疫保护力,可达100%。结果表明,yzuLM1-2突变株侵袭力下降,致病力降低,能激发较高水平的抗体产生,可以作为预防动物李氏杆菌病的候选疫苗菌株,并为用作运送外源保护性抗原的载体提供了材料。     

东北虎感染猫泛白细胞减少症的研究——综合诊断

本文根据武汉动物园3只7月龄同窝幼虎相继发生以高热、腹泻、呕吐和白细胞减少为特征的临床症状,经过流行病学调查、病理剖检、血凝试验、人工感染试验,初步确诊东北幼虎患的是猫泛白细胞减少症。     

硒和维生素E与柔嫩艾美球虫感染的关系

选择 1日龄蛋用公鸡 72只 ,随机分为 6组 ,每组 12只。第Ⅰ～Ⅳ组鸡从 1日龄起在日粮中分别添加维生素E 5 6 .3、5 7.4、5 9.6、6 1.8mg/kg和硒 0 .93、1.0 3、1.2 3、1.4 3mg/kg ,第Ⅴ组为感染无添加剂组 ,第Ⅵ组为不感染无添加剂组 ,饲喂基础日粮 (含维生素E 4 8mg/kg和硒 0 .6mg/kg) 。至 2 1日龄时 ,第Ⅰ～Ⅴ组鸡口服接种柔嫩艾美球虫孢子化卵囊 ,1× 10 5个 /只 ,接种后观察感染鸡的状况。结果 ,第Ⅰ～Ⅵ组鸡平均增重分别为 2 2 .0、2 3.8、35 .2、39.2、8.9和 4 7.5 g ;病变值为 2 8、2 4、2 4、2 5、30和 0 ;1g粪便的卵囊数分别为 0 .17× 10 6 、0 .12× 10 6 、0 .0 9× 10 6 、0 .11× 10 6 、0 .2 1× 10 6 和 0个。提示 ,在日粮中添加维生素E和硒能提高鸡体的免疫力 ,增强鸡对球虫的抵抗力。     

感染新型鸭肝炎病毒雏鸭的SOD活性和MDA含量变化

用新型鸭肝炎病毒人工感染雏鸭 ,对感染雏鸭血液、肝、脑中超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量进行了检测。结果显示 :血清和肝组织中MDA含量在感染后第 2 4h极显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,脑组织中MDA含量无显著变化。血清中SOD活性第 2 4h极显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,第 96h极显著低于对照组 (P <0 .0 1) ;肝组织SOD活性于感染后第 2 4h显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;脑组织中SOD活性无显著变化。提示 :自由基参与了新型鸭肝炎的发生、发展过程。     

鸡衣原体病的调查研究——病原学与人工感染试验

本研究从患有纤维素性心包炎、气囊炎、肝周炎、腹膜炎和脾肿大的病死鸡中分离到3株衣原体(JLC-3、JLC-5和JLC-6株)。该分离物接种7日龄鸡胚卵黄囊能致鸟胚在96～120小时内规律性死亡。剖检死亡鸡胚可见明显的病变,卵黄囊膜涂片镜检能观察到大量原生小体;交叉补体结合试验证明,该分离物能与标准衣原体补体结合试验抗原和阳性血清发生交叉反应,具有抗原相关性;对磺胺嘧啶的具有抵抗力;碘染不着色;对鸡胚的致死毒价为10~(11)ELD50/0.4ml;静脉途径接种小鼠后产生毒素,在24～48小时内致死小鼠; 经提纯后在电镜下能观察到衣原体的原生小体和始体。以上结果表明所分离到的衣原体为鹦鹉热衣原体(Chlamydia ps-ittaci)。将该分离物分别以腹腔、滴鼻、口腔途径接种7日龄雏鸡,并接种生理盐水作为对照,结果腹腔和滴鼻途径接种能复制出与自然发病相同的病例。     

水牛原生殖细胞核移植的研究

以水牛原生殖细胞(PGCs)为核供体,成熟水牛卵母细胞为受体,采用电融合法和胞质内直接注核法对水牛PGCs的核移植进行了研究.从水牛胎儿的生殖嵴或生殖腺分离得到PGCs,在胎儿成纤维细胞饲养层上传代培养后,进行核移植.结果显示,当采用电融合法时,PGCs核移植的融合率、分裂率、囊胚率和总囊胚率均显著高于胎儿成纤维细胞(P＜0.05);当采用直接注核法进行核移植时,PGCs的核移植囊胚率显著高于胎儿成纤维细胞(P＜0.05),但分裂率差异不显著(P＞0.05).结果表明,水牛PGCs细胞是理想的核移植供体细胞.     

鸡大肝和大脾病的组织病理学研究

对大肝和大脾（ＢＬＳ）病自然感染病鸡和２组人工发病鸡进行了组织病理学观察，结果表明，肝和脾是ＢＬＳ病的主要靶器官，组织病理学特征表现为肝和脾组织变性、坏死以及大量淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞呈围管性、结节状或弥漫性增生。人工接种病例显示，ＢＬＳ病的动态发展过程中肝细胞从颗粒变性、脂肪变性发展为坏死。在疾病的不同阶段出现不同的细胞增生，初期以淋巴细胞、浆细胞增生为主，中期以巨噬细胞增生为主，稍后又出现以淋巴细胞为主的增生反应，最后细胞增生停止。脾在细胞增生方面与肝一致。     

双峰驼水代谢与血液中葡萄糖和脂类含量的关系

冬、夏两季对双峰驼进行了禁水１５ｄ试验，于禁水前后及暴饮后检测其血浆中葡萄糖及血清中脂类含量的变化。结果表明，冬季血糖呈曲线变化；血脂含量于禁水后极显著升高，第１５ｄ时血清总脂、总胆固醇、甘油三酯分别上升了６１％，４９．５％和２６４％，暴饮后迅速下降，４～７ｄ恢复到正常水平。夏季血糖、总脂、总胆固醇正常值均显著低于冬季；禁水３ｄ后恰逢阴雨连绵，使禁水不完全，此时血糖含量升高；血清总脂、总胆固醇含量第６ｄ升至最高峰，随后逐渐下降，第１５ｄ时几乎接近正常水平。证明双峰驼在缺水时，可迅速调整血糖含量及体内脂肪代谢，及时供给机体代谢水及所需能量