陈旧骨骼及牙齿的性别检验

为分析陈旧骨骼及牙齿的性别，建立了从陈旧人骨骼和牙齿中提出DNA的方法。通过PCR技术扩增，得到X－Y染色体上的单拷贝同源基因片断（AmelogeninGene）。结果显示，从死亡后2年、4年、7年和10年的4个骨骼和牙齿样品中，均成功地获得了特异的PCR扩增片段。女性为单一的106bp条带，男性为106bp和112bp两条谱带。其快速、简单、可靠，为陈旧骨骼和牙齿的性别鉴定提供了方法。     

利用AutoMate Express~(TM)自动化法医DNA提取系统提取骨骼及牙齿DNA

目的探讨建立骨骼及牙齿DNA自动化提取的新方法。方法将33份骨骼及15份牙齿样本分别用冷冻研磨和手工处理两种方法研磨成粉,采用AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统提取DNA并定量。结果 AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统能够在3h左右完成骨骼、牙齿DNA的提取,两种方法处理的骨骼样本所得DNA质量浓度差异无统计学意义。冷冻研磨处理的骨骼和牙齿样本均获得了较好的STR分型结果,且牙齿样本所得DNA质量浓度高于手工提取所得。结论应用AutoMate ExpressTM自动化法医DNA提取系统是自动化提取骨骼、牙齿DNA的一种新方法,可应用于法医实际案件检验。     

怎样送检用于DNA分析的生物检材

<正> 随着DNA指纹技术和PCR技术在国内逐步推广与应用,愈来愈多的基层办案单位已经认识并接受了这一高科技新技术,送检各类生物学检材要求作DNA分型的日益增多。DNA指纹技术、PCR技术能够从DNA分子水平上直接检测出不同个体间差异,决定了这项技术的高度个人识别能力。但由于技术上的要求十分严格,对检材也有不同于其它常规物证检测的要求。作者在实际工作中经常见到有些送检单位因取材、包装、保存不当等原因,使检材失去了检验条件,造成不可弥补的损失。根据该项技术要求以及目前国内DNA分型实验室的条件,就送检的各类要求作DNA分析的物证及注意事项简单作以下介绍。     

亲子鉴定DNA分型亲权指数的简化计算法

PCR扩增DNA片段长度多态性位点，如AmP－FLP、PCR－STR分型技术，在亲子鉴定中应用日益增加。由于被选择应用的DNA位点均具高杂合度、高非父排除率，以及PCR技术取材广泛、灵敏度高等特点，PCR－DNA分型有。逐步取代常规血型检测的趋势。PCR－DNA分型结果表明，杂合子个体呈2条片段，纯合于及条片段，等位基因为共显性遗传，位点均具有不连续基因频率分布。所以，亲权指数计算并不复杂。本文依据单位点DNA分型特发，根据Esse。M6ller计算理论，提出一套简明亲权指数计算公式。同时对父子单亲亲子鉴定的亲权指数计算公式也作…     

微量DNA:容易忽略的生物物证

PCR技术的出现,大大提高了法医DNA分析技术的灵敏度,尤其是STR复合扩增技术的应用,不仅如同DNA指纹技术一样能够进行同一认定,而且使其灵敏度达到了纳克级以下的水平,大大提高了其解决微量、降解DNA的分析能力.Findlay等[1]成功地分析了低至单个细胞水平的模板DNA;Van Hoofstat等[2]利用DNA技术分析现场遗留指纹进行检验;Barbaro等[3]利用DNA技术对毛干进行检验;Schmerer等[4]和Burger等[5]分别用60和50个循环分析古代骨骼DNA;Van Oorschot和Jones[6]利用PCR检验,从电话话筒、钢笔、手提箱把手等提取的检材样品中得到DNA分型;Wickenheiser[7]从被盗汽车的方向盘上提取DNA进行STR分型,从而认定罪犯.以上研究报道的结果表明,现有的DNA技术能够对微量DNA进行检验.     

牙齿的DNA提取及STR分型研究

目的建立有效的牙齿DNA提取方法。方法使用物理及化学方法去除牙齿表面污染物,经脱钙、裂解、纯化从牙粉中提取DNA进行STR分型。结果对96例牙齿检材进行DNA检验,获得STR分型的有94例,在查找尸源的案件中发挥了重要作用。结论本方法操作简单快速,能够显著提高牙齿DNA检验的成功率。     

单核苷酸多态性与DNA芯片技术在法医学中的应用

８０年代中期,Jeffreys建立的DNA指纹技术是法医学DNA分型的里程碑。针对人类基因组小卫星VNTR位点靶序列作RFLP分析,获得高度个体特异性DNA指纹图,使法医学第一次能够作出认定同一性,认定亲生关系的鉴定结论。此为第一代法医DNA分型技术。８０年代后期,Mullis建立PCR技术,以基因组内STR位点多态性位点为靶序列作PCR扩增,利用电泳分离,分析STR位点多态性。PCR－STR分型结合了PCR高效扩增和STR位点高度多态性的特点,成功地解决了检测灵敏度问题,采用复合扩增多STR位点的办法,鉴别能力达到或接近DNA指纹水平…     

手部皮肤脱落细胞的DNA检验

一些案件中指纹和掌纹蕴藏着重要的信息,以往常常因为残缺不能满足形态学比对要求而丧失证明价值。随着DNA分析技术的进步,对汗潜指纹和掌纹中脱落细胞进行基因分型成为可能。但由于提取DNA量极少,属于低拷贝模板（low copy number,LCN）,提高分型成功率成为研究的难点和热点。     

法医DNA分型

编者按DNA(脱氧核糖核酸)是生物遗传物质.DNA分型技术在法医物证鉴定中应用日益广泛,在各类重大 刑事案件的侦破中发挥了越来越重要的作用.近10多年,是法医学发展最快的时期,DNA分型技术跨了两大步: 1985年建立的第一代分型技术--DNA指纹,实现了物证鉴定从否定到认定的历史性转变;进入90年代,PCR(聚 合酶链反应)技术问世,可以在体外完成扩增复制靶DNA片段的全过程,是生命科学一项划世纪的进展.以PCR为 基础的第二代DNA分型技术在检测灵敏度上有重大突破,解决了半个多世纪以来困扰法医的微量、陈旧、腐败检材 鉴定的难题.DNA分型的高科技,以其无可争议的认定或否定的鉴定结论,为法庭提供确凿的证据,成为打击犯罪 的有力武器.从本期起,对<法医DNA分型>进行专题讲座,将分期介绍DNA多态性基本原理,DNA分型结论的 评估,法医DNA分型技术与方法,以及DNA分析技术展望等四个部分,以飨读者. 许多涉及人体伤害、死亡的刑事案件,法医常要对现场 遗留的血痕、精斑、毛发、骨骼等人体材料作出鉴定,分析 这类物证是来自被害人或罪犯,称为个人识别或同一性鉴定. 个人识别或同一性鉴定可以通过检测血型进行判断:血型不 同,可排除同一性;血型相同,则不排除同一性.血型如同 人的一种特殊标记,每一个人有独自的血型.血型严格按照 一定的遗传规律从亲代遗传给子代,故称血型是人类的一种 遗传标记.通过对遗传标记的检测分析,人类可分成若干类 型.这种现象叫作遗传学多态性.如按ABO血型分类,就有 A、B、AB和O等4类.多态性的产生原因,是基因座上的 碱基发生了点突变,形成等位基因.在DNA分子中,含有大 量的高多态性基因座及遗传标记,应用分子生物学方法直接 检测分析DNA遗传标记的型别,实现个人识别的目的.通过 分析亲代和子代的遗传标记作亲子鉴定,可以判断父母和孩 子是否亲生关系.对遗传学多态性和遗传标记的研究,为法 医学个人识别和亲子鉴定提供了理论基础.     

陈旧骨骼的核DNA检验

在发达国家，对无名尸骨进行个人识别时，通常的方法是比较骨骼与死者生前的身体特征或医疗记录[1]，但在发展中国家，由于。医疗记录往往不甚完备，这种方法较难以实施。此外，如果对已埋葬数十年的尸骨进行鉴定，则更需要依靠其他技术方法。运用PCR技术进行DNA检验是解决这种难题的途径之一。陈旧骨骼的DNA降解严重，从中提取的核DNA一般小于1000bp[2]，为此，进行PCR分析时宜选择扩增片段较短的基因位点。在本文中，作者报道了一种可靠的用于陈旧骨胳DNA提取、扩增和基因分型的方法。材料和方法一、样本取长骨、椎骨作为实验检材…     

2种陈旧骨骼、牙齿DNA纯化方法的比较

目的比较有机法+QIAquick纯化法和DNA IQ磁珠法对陈旧骨骼和牙齿DNA的纯化效果。方法选择10份陈旧骨骼和12份牙齿样本,进行消化后分别采用有机法+QIAquick纯化法和DNA IQ磁珠法进行提取纯化,进行DNA定量后用SinofilerTM试剂盒进行检测。结果 2种方法纯化的骨骼、牙齿DNA的IPC CT值无显著差异。有机法+QIAquick纯化法纯化的骨骼、牙齿DNA平均浓度分别为0.180ng/μL±0.068ng/μL和0.132ng/μL±0.027ng/μL,所有样品均获得全部基因分型。DNA IQ磁珠法纯化的DNA平均浓度分别为0.038ng/μL±0.028ng/μL和0.036ng/μL±0.007ng/μL,有5份骨骼和6份牙齿样本仅获得部分基因分型或未能分型。结论有机法+QIAquick纯化法对陈旧骨骼、牙齿DNA的纯化效果优于DNA IQ磁珠法。     

PCR-STR分型技术在尿样DNA分型中的应用

目的：对尿样的DNA分型进行研究。方法：10份尿样随机收集于无关个体,同时采集血液样本做DNA分型对照,用PCR－STD分型技术对尿样DNA进行FIBRA和D18S535基因座分型。结果：10份尿样10ml、1ml及0．2ml体积均获得准确的分型结果,且与同一个体的血样DNA分型结果完全相同;室温储存4天及4℃及4周的尿样均分型成功。结论：PCR－STR分型技术对尿样DNA分型是一种有效的方法,在尿样的个人识别中具有极高的实用价值。     

陈旧骨骼DNA提取方法的应用研究

在法医实践中,DNA检验已成为个体识别鉴定的常规技术。现场提取的检材中,骨组织具有耐腐败特性,当其他检材完全腐败后,骨组织仍能够作为DNA检验的重要材料。但陈旧尸骨骨组织中DNA含量少且高度降解,给提取DNA带来一定难度。本文采用较高温度脱钙,在磷酸盐缓冲液条件下经SDS-PK、GuSCN消化裂解骨细胞,含DNA的裂解产物经硅珠纯化,从1~16年的陈旧骨骼中提取到高质量DNA模板用于STR分型,成功率为95.5%。现将方法报告如下:1材料与方法1.1材料骨骼样本89根,来源于送检案件。其中完整长骨78根,断骨和骨片11根。现场条件有泥土掩埋、水…     

法医DNA分型 第一讲 DNA多态性基本原理

DNA (脱氧核糖核酸 )是生物遗传物质。DNA分型技术在法医物证鉴定中应用日益广泛 ,在各类重大刑事案件的侦破中发挥了越来越重要的作用。近 10多年 ,是法医学发展最快的时期 ,DNA分型技术跨了两大步 :1985年建立的第一代分型技术———DNA指纹 ,实现了物证鉴定从否定到认定的历史性转变 ;进入 90年代 ,PCR (聚合酶链反应 )技术问世 ,可以在体外完成扩增复制靶DNA片段的全过程 ,是生命科学一项划世纪的进展。以PCR为基础的第二代DNA分型技术在检测灵敏度上有重大突破 ,解决了半个多世纪以来困扰法医的微量、陈旧、腐败检材鉴定的难题。DNA分型的高科技 ,以其无可争议的认定或否定的鉴定结论 ,为法庭提供确凿的证据 ,成为打击犯罪的有力武器。从本期起 ,对《法医DNA分型》进行专题讲座 ,将分期介绍DNA多态性基本原理 ,DNA分型结论的评估 ,法医DNA分型技术与方法 ,以及DNA分析技术展望等四个部分 ,以飨读者     

PCR技术在法医学鉴定中的应用

近年来国内法医研究人员已先后将DNA遗传指纹图技术、单位点VNTR以及PCR－VNTR、PCR－ASO、PCR－STR、MVR－PCR。PCR．SSCP’等技术应用于法医学鉴定，使法庭科学对犯罪生物物证的个人识别能力的研究有了突破性进展，取得了令人瞩目的成就。笔者根据现有实验室条件和实际办案工作的需要，对DIS80、ApOB、HUMACTBPZ、HUMTH01等位点进行分析研究，除进行必要的基因频率调查、家系遗传性分析外，通过对天津地区60余起案件的检验，重点研究实际检案中的问题。材料和方法一、实验主要仪器、试剂卫．DNA热循环仪：（PCT…     

法医DNA分析技术的现状与最新进展

本世纪法医学最引人注目的成就就是将DNA分析技术应用于法医的个人识别和亲子鉴定。1985年，Jeffreys[1]将DNA指纹技术用于检验案件，标志着法医分子遗传学这一新领域的创建。它的出现使法医学中许多难题得以解决，近两年来，世界上众多的分子遗传学家和法医学家不断将最新出现的各种DNA分析技术应用于法医学，使得法医DNA分析技术不断得以改进，各种方法的优缺点得以相互补充，极大提高了DNA检验水平。目前，这一技术正朝着做足、高识别能力、简便的方向发展。本文就日前DNA分析技术的种类、方法、优缺点等作以简公、归纳，着重介…     

硬组织中D1S80位点基因型分析

用PCR技术分析硬组织中DIS80位点基因型及其DNA含量。当DNA部分降解时．此法仍然可行。证实了在同一个体，骨-血液及牙齿-血液DIS80位点的AmP－FLP的一致性。可应用于微量硬组织个人识别及骨化遗骸身源鉴定。     

两种提取骨骼、牙齿DNA的方法

目的建立提取骨骼、牙齿DNA的新方法。方法收集380例骨骼、牙齿检材,其中347份为常规骨骼、牙齿(常规组),33份为陈旧骨骼、牙齿(疑难组)。常规组检材以Handy-Eco仪器、疑难组则用冷冻研磨仪研磨成粉,以Kingfisher自动化系统提取DNA,用Identifiler Plus进行STR分型检测。结果用HandyEco Kingfisher法(H-K法)成功提取345例常规骨骼、牙齿检材的DNA,成功率99.42%;用Freeze-mill Kingfisher法(FM-K法)成功获取32例疑难骨骼、牙齿检材的DNA,成功率96.97%。结论采用H-K法和FM-K法对骨骼和牙齿DNA的检验成功率较高,可选择应用于工作实践中。     

当前法医DNA研究热点

自80年代后期DNA技术应用于法科学以来,国内外有许多实验室都在法医DNA技术的研究上投入大量精力,由最初的RFLP（DNA指纹技术）拓展到了VNTR·PCR、STR－PCR、MVR－PCR、线粒体DNA测序技术及其他PCR相关技术,并将这些技术应用于办案实践。法医DNA技术在近几年进入了一个平台期,没有大的突破性研究进展,但仍存在着一些有待探索的课题。王法医DNA质量保证体系t‘〕法医DNA质量保证体系属于软科学研究领域。由于DNA检验结论能够认定或否定嫌疑人,是破案的重要甚至唯一的证据,也因为DNA检验复杂、难度大。环节多,…     

DNA技术在法医学上的应用

<正> 1985年,英国某地连续发生数起强奸案没能侦破,但调查发现这些案件的作案特点非常相似。后来又一名妇女遭强奸时,其阴道内容物精斑被送往Leicester大学遗传学研究人员Jeffreys等人做“DNA指纹”检验,并将所有涉嫌对象的血样做同样检验,发现其中一嫌疑人的“DNA指纹”与被害人阴道内精斑的“DNA指纹”完全相同,从而认定了罪犯,侦破了此案。此乃利用“DNA指纹”进行法医学个体识别的开端。