体液法医学鉴定miRNA检测方法的建立与应用

目的建立针对体液特异性miRNA的SYBR Green检测方法,用于体液鉴定,探究法医实践中体液鉴定新方法。方法根据文献选出6条miRNAs为靶点,以合成的标准miRNA作为模板进行体系构建,再对实际样本进行验证,检测6条miRNAs在外周血、月经血、唾液、精液中的相对表达量。结果 miRNAs205在不同体液间表达差异不明显;miRNAs451、miRNAs144可明显的区分血与非血;miRNAs214可鉴定月经血;miRNAs888、miRNAs891在精液中高表达。结论建立的针对miRNAs的SYBR Green检测方法合理有效,可用于法医实践中体液鉴定。     

基于机器学习技术通过精液miRNA推断个体年龄

目的 年龄推断作为个体特征描绘关键环节之一,在法医实践中的地位愈发重要。本研究通过机器学习算法构建精液相关MicroRNAs(miRNAs)的年龄推断模型。方法 从GEO数据库筛选精液miRNAs数据集,按照年龄变化趋势对样本进行差异分析。对差异基因进行线性回归拟合并计算Pearson相关性,基于显著相关miRNAs构建深度学习、梯度提升机、分布式随机森林、广义线性模型等4种机器学习模型用于年龄推断模拟和验证。结果差异分析得到11个差异miRNAs,通过线性拟合得到5个显著相关miRNAs (hsa-miR-95-3p,hsa-miR-181c-5p,hsa-miR-203a-3p,hsa-miR-205-5p,hsa-miR-409-5p)。四种机器学习训练模型推断年龄的平均绝对误差（Mean Absolute Error,MAE）范围从2.41～4.23岁。在随机抽取的测试集中,深度学习模型表现最佳,MAE为2.27岁。结论 本研究基于机器学习算法初步验证了精液相关miRNAs在年龄推断领域的可行性,为法医实践提供有效依据。     

2对同卵双生子microRNAs表达谱差异分析

目的探索同卵双生子(monozygotic twins,MZ)间microRNAs(miRNAs)表达谱差异,寻找甄别MZ个体的新指标。方法应用miRNA芯片技术检测两对不同年龄和性别的MZ间miRNAs的表达并对其表达谱进行差异性分析,同时采用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)技术对差异表达的miRNAs进行验证。结果男性MZ对共检出74个差异表达的miRNAs(51个上调,23个下调);女性MZ对共检出220个差异表达的miRNAs(102个上调,118个下调);两对MZ间共有的差异表达miRNAs 32个(上调27个,下调4个,表达不一致的1个)。此外,挑选的4个差异表达的miRNAs经实时qRT-PCR验证,与芯片检测结果一致。结论本研究初步证实了MZ个体间存在miRNAs表达差异,有望作为甄别MZ个体的新生物学指标。     

基于microRNA表达谱初步构建PLS-DA体液识别模型

针对外周血、唾液、精液、月经血、阴道分泌物这五种法医学常见的体液样本，采用二代测序（NGS）平台检测获得microRNA(miRNA)表达谱，使用偏最小二乘判别分析（PLS-DA）建立基于这五种体液的识别模型，并探讨PLS-DA在法医体液溯源中的应用价值。经优化小分子RNA文库制备过程，采用Ion Torrent S5 XL测序系统对前述法医学五种体液样本（每种10例）进行小RNA测序，以PLS-DA构建体液识别模型，评估不同数量miRNA标记组合下预测的准确性。本研究获得法医学常见五种体液样本的miRNA表达谱，外周血与月经血中表达量前10名的miRNAs有6个重叠；唾液和阴道分泌物中表达量前10名的miRNAs有4个重叠。基于全数据集、107个和11个miRNAs构建的体液来源识别模型的准确率分别为0.95、0.94、0.89。本研究通过NGS测序分析获得了五种体液样本的miRNA组（miRNome），利用PLS-DA初步构建了体液识别模型，对于应用miRNome进行体液识别的相关研究具有参考价值。     

论党规的“法”属性——基于新法律多元主义的考察

在讨论党规是不是“法”之前,首先要回答法的概念这个前提性问题,即什么样的规范体才能称作“法”。从新法律多元主义立场出发,判断一种规范体是否构成“法”的基本标准,包括体系合法性、形式合法性、实质合法性、运行合法性等四方面。其中,体系合法性是指“法”规范体在数量、结构、密度等方面所应具备的基本品质,包括规模性、严谨性、完备性、统一性等。形式合法性是指“法”规范体在外观、形式、效力等方面所应达到的基本品质,包括普遍性、规范性、易懂性、公开性、稳定性、可操作性等。实质合法性是指“法”规范体在价值目标、实体理念等方面所应具有的基本品质,包括正当程序、权力制约、权利保障、公平正义等。运行合法性是指“法”规范体在运行机制、操作过程、实际效果等方面所应达到的基本品质,包括机构专职性、运行程序性、人员专业性、公共强制性、实效性等。党规体系符合上述四方面基本标准,具有明显的“法”属性,是最接近于国法体系的法规范体。     

法讯

11月10日,最高人民法院发布《关于审理洗钱等刑事案件具体应用法律若干问题的解释》。明确规定,通过典当、租赁、买卖、投资等方式,协助转移、转换犯罪所得及其收益等6种行为构成犯罪。     

提升农村市场化效应与改革商法制度的思考

市场化建设的效应状况如何,与商事法制改革创新的力度有着必然的、直接的联系。与建设社会主义新农村有关的农村市场中的农民、农户和农村经济组织的“入市”资格的商事主体问题,农村中的土地开发利用、山林等自然资源产品经营、招商引资的拓展、劳动力资本的运营等等诸多的商事客体与内容问题,以及商事法律行为规范等问题,都需要从更新法制观念、改革法律制度、科学运用法律等问题上做出一番努力。     

一起聚众斗殴案引发的法律思考

[基本案情]2005年12月初,唐某、赵某、陈某、周某将齐某、吕某、曹某砍伤。同月26日晚,齐某、吕某、曹某得知唐某等人在游戏室之后,纠集王某、毛某、蒋某、莫某以报复唐某、赵某、陈某、周某为目的,携带齐某、吕某、曹某准备的刀具坐出租车到唐某等人所在的游戏室,由莫持刀守住门口,齐、吕、曹、王、毛、蒋持刀冲入游戏机厅,向唐、赵、陈、周等人乱砍,致使赵、陈、周被砍成轻伤。[分歧意见]本案中齐某等人的行为应如何认定存在以下分歧意见:第一种意见认为,齐某等人的行为应以故意伤害定罪论处。第二种意见认为,齐某等人的行为应以寻衅滋事…     

表见代理制度的司法适用

近年来涉建设工程买卖、租赁、借贷等商事纠纷呈高发态势,这类纠纷大多发生于施工挂靠、转包、违法分包等不规范经营行为的背景下,一些挂靠建筑单位的项目经理等实际施工人以单位名义对外从事买卖、租赁、借贷等行为,经常引发债务纠纷。所涉债务应由     

监狱制度体系构建的立法思考

监狱制度体系构建是一个复杂的系统动态过程,它不仅仅是立法、司法、执法、守法、法律监督等层次和环节的整合,也是体制、机制、制度、理念等形式的重要体现。从立法角度讲,只有从理性、价值、技术、层次等逻辑面,对监狱制度体系构建的蕴涵理念、基本取向、体例构成、效力体现等作出较深入的探索和明确回答,才能真正构建具有我国特色的监狱制度体系。     

MicroRNA分析技术在同卵双生子甄别中的可行性分析

同卵双生子具有相同的基因组DNA序列,因而无法使用常规的DNA分型方法如短串联重复序列即STR分析对其作鉴别区分。故破获涉及同卵双生子的案件有非常大的挑战性,因此在法医物证学领域迫切需要新的技术方法来应对并解决这一难题。随着表观遗传学的发展,转录组学成为法医学研究的新切入点。MicroRNA(miRNA)作为一类内源性的非编码小RNA分子,在机体中参与调节多种生理学过程,是转录组学研究的重要对象。研究表明,miRNA具有高保守性、分子量小、表达时序性及组织特异性强等特点,表现出法医物证应用方面的巨大潜力。本文综合分析了miRNA检测技术在同卵双生子甄别中的应用可行性,并综述了近年来miRNA在同卵双生子甄别上的研究进展。     

Detection of microRNAs in DNA Extractions for Forensic Biological Source Identification

Molecular‐based approaches for biological source identification are of great interest in the forensic community because of a lack of sensitivity and specificity in current methods. MicroRNAs (miRNAs) have been considered due to their robust nature and tissue specificity; however, analysis requires a separate RNA extraction, requiring an additional step in the forensic analysis workflow. The purpose of this study was to evaluate miRNA detection in blood, semen, and saliva using DNA extraction methods commonly utilized for forensic casework. RT‐qPCR analysis revealed that the tested miRNAs were consistently detectable across most tested DNA extraction methods, but detection was significantly reduced compared to RNA extracts in some biological fluids. DNase treatment was not necessary to achieve miRNA‐specific results. A previously developed miRNA panel for forensic body fluid identification was evaluated using DNA extracts, and largely demonstrated concordance with results from samples deriving from RNA extracts of semen, blood, and saliva.     

Identification of Saliva Using MicroRNA Biomarkers for Forensic Purpose

In the forensic science community, microRNA (miRNA) profiling has started to be explored as an alternative tool for body fluid identification. Several origins of body fluid can be distinguished by measuring differential expression patterns of particular miRNAs. However, most of reported saliva miRNAs are nonoverlapping and debatable. The aim of this study was to develop a strategy of identifying saliva using miRNA biomarkers for forensic purpose. Eight miRNA candidates were selected to examine expression abundance in forensically relevant body fluids using hydrolysis probes quantitative real‐time PCR (TaqMan qPCR). Results revealed that none of them was truly saliva specific, and only miR‐200c‐3p, miR‐203a, and miR‐205‐5p were higher or more moderate expression in saliva. A stepwise strategy that combines each of three miRNAs with different body fluid‐specific miRNAs was developed, and three miRNA combinations could effectively differentiate saliva from other body fluids.     

microRNA的检测技术及其法医学应用前景

microRNA（miRNA）是一类由18～25个核苷酸构成的非编码小分子RNA，在转录后水平调控基因的表达。miRNA的表达具有高度保守性、时序性和组织特异性。随着其检测技术的逐渐成熟，miRNA被引入到法医学的研究中。新近研究表明，miRNA在法医学体液鉴定、种属鉴定和PMI推断等方面有一定的应用前景。本文简述miRNA检测技术的发展，并对其在法医学中的应用及前景进行综述，以期为相关研究及实践提供参考。     

转化生长因子β1的研究进展及其法医学应用价值

转化生长因子pl（transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1）是一种具有多种生物学活性的细胞因子,存在于多种生物的不同组织中,广泛参与调节细胞增殖和分化等过程。本文综述TGF-β1的生物学特性及其在法医学中的应用价值,以期为损伤时间推断的基础研究和实际检案工作提供参考资料。     

Context Effects in Forensic Entomology and Use of Sequential Unmasking in Casework

Context effects are pervasive in forensic science, and are being recognized by a growing number of disciplines as a threat to objectivity. Cognitive processes can be affected by extraneous context information, and many proactive scientists are therefore introducing context‐minimizing systems into their laboratories. Forensic entomologists are also subject to context effects, both in the processes they undertake (e.g., evidence collection) and decisions they make (e.g., whether an invertebrate taxon is found in a certain geographic area). We stratify the risk of bias into low, medium, and high for the decisions and processes undertaken by forensic entomologists, and propose that knowledge of the time the deceased was last seen alive is the most potentially biasing piece of information for forensic entomologists. Sequential unmasking is identified as the best system for minimizing context information, illustrated with the results of a casework trial (n = 19) using this approach in Victoria, Australia.     

Forensic Gait Analysis and Recognition: Standards of Evidence Admissibility

Gait is one biological characteristic which has attracted strong research interest due to its potential use in human identification. Although almost two decades have passed since a forensic gait expert has testified to the identity of a perpetrator in court, the methods remain insufficiently robust, considering the recent paradigm shift witnessed in the forensic science community regarding quality of evidence. In contrast, technological advancements have taken the lead, and research into automated gait recognition has greatly surpassed forensic gait analysis in terms of the size of acquired datasets and demographic variability of participants, tested variables, and statistical evaluation of results. Despite these advantages, gait recognition presents with different problems which are yet to be resolved. Therefore, courts should treat gait evidence with caution, as they should any other form of evidence originating from disciplines without fully established codes of practice, error rates, and demonstrable applications in forensic scenarios.     

物证鉴定证据应用层级论

用物证鉴定结论证明犯罪需要经过推理过程,将物证来源鉴定结论转化为嫌疑人行为推论,后者再作为法律事实证明嫌疑人是否有罪。物证鉴定证据应用的递进证明关系,可以用由依次推理关系连接的物证来源结论层、行为推论层和定罪层构成的物证鉴定层级模型描述。该模型可直观表达和评估物证鉴定结论证据应用效力。     

二代测序技术在法医遗传学中的应用研究进展(2011～2016)

对生物检材进行DNA分型是解决法医遗传学实践中个体识别和亲权鉴定问题的重要步骤,法医学实践中复杂生物检材和复杂亲缘关系鉴定等一直是现有的检测分析技术的难点和挑战。随着DNA技术的发展,新的检测分析技术不断引入到法医遗传学领域,以期提高检测效能。二代测序技术具有测序通量高、成本低等特点,能够获得样本DNA详细序列和相对含量等信息,有助于生物检材的检测和案件的分析。二代测序技术在法医遗传学领域的应用受到广泛关注,相关的应用研究逐渐增多。本文就目前法医遗传学领域借助二代测序技术对遗传标记分析的研究进展进行总结,希望能为相关研究和应用提供参考。