新鲜血痕样本直接扩增试验条件比较

目的探讨新鲜血痕在不同直接扩增试剂盒的试验条件。方法存放2d内的新鲜血痕FTA卡540份和存放1～3m的陈旧性血痕FTA卡270份,各分别随机均分为3组,每份血痕打3片1．0mm纸片,分别用ONATyper^TM15Plus试剂盒、Goldeye^TM20A试剂盒和华夏。”试剂盒在标准条件（说明书条件）、优化条件1（标准条件＋1μLDMSO）和优化条件2（标准条件＋室温浸泡1h）扩增检验,比较在3种条件下各组STR检验成功率。结果陈旧血痕样本用3种直扩试剂盒,在3种条件下,检验成功率均〉97．00％,且均高于新鲜血痕。新鲜血痕在标准条件和优化条件1下,成功率为27．22％～31．67％,在优化条件2下,检验成功率相似（〉97．00％）,与标准条件和优化条件1比较,有统计学差异（P〈0．01）。结论新鲜血痕在加入直接扩增试剂后于室温浸泡1h,可有效提高STR检验成功率。     

用酶标抗人Hb单克隆抗体检测微量血痕种属的实验

法医学血痕种属检验的方法很多，如环状沉淀试验，琼脂糖单扩散试验以及对流免疫电泳试验等。这些方法操作简便，但灵敏度低，易受血痕所附着的客体以及化学合成物等因素的干扰。笔者参照文献［1］介绍的方法，用酶标抗人Hb单克隆抗体检测微量血痕种属，取得良好的效果，现报道如下。材料与方法一、材料酶标扰人Hb单克隆抗体和8管反应板（华能公司博塞试剂研究所生产）；抗人Hb单克隆抗体（白求恩国际和平医院提供）；抗人Hb多克隆抗体（公安部第二研究所血清室提供）；三羟甲基氨基甲烷等试剂（北京化学试剂厂）；牛血清白蛋白（BSA）（…     

用酶标抗人IgG单克隆抗体直接ELISA法检测微量血痕种属

<正> 酶联免疫吸附试验(ELISA)在法医物证检验中已有许多研究和报道。国外不仅用于血痕种属鉴别,而且还应用于血型及器官特异性的检测。笔者采用酶标抗人 IgGMcAb 作直接 ELISA 法鉴别血痕种属.获得满意效果。     

用引物Y_3、Y_4和PCR方法鉴定性别的法医学应用

用Y3、Y4和Alu9．1、Alug．2两对引物和PCR方法检测陈旧血痕和毛根的性别获得成功。引物Y3、Y4扩增的靶序列位于Y染色体特异3．4Kb重复序列中，扩增产物为460bp；引物Alu9．1、Alu9.2用以扩增男女共有的Alu重复序列，扩增产物为130bP。室温保存13年之久的19例脐带血血痕（男性9冽，女性10例）和室温保存10～11个月的10例已知性别自然脱落毛根（男性6例，女性4例）的性别测定结果均正确；对一起凶杀案的血痕性别测定为定案提供了重要证据。本方法简化了样品的前处理过程。     

反向间接血凝(RPHA)法应用在血痕检验中的研究

血痕检验目前采用的方法有肉眼观察、预试验、确证试验、种属鉴别、血型检查及出血部位检验等.用免疫法制备抗人血红蛋白(Hb)的抗血清进行人血液的法医学种属鉴别已沿用很久,但国内还未见到RPHA法应用在血痕检验中的报导.本实验室建立了该法检测人粪便隐血,并对模拟血痕的检测也作了研究.认为本法对微量血痕     

单克隆抗体ELISA测定贵阳地区汉族G2m(23)因子及频率调查

用单克隆抗体ELISA按文献提供的方法，调查了贵阳地区汉族人群GZm（23）因子的频率。在239份样本血痕，GZm（23）因子阳性占4728％，计算GZm（23）的基因频率为0．2739，x’为0．00049，识别能力为0．3977。采集资阳地区239份无关汉族人静脉血制成血痕，晾干后放入冰箱内保存，1月内检验。检验结果见表且。GZm（23）广泛稳定地存在于人类血液、体液中，本文调查了贵阳地区GZm（23）因子频率为该地区法医学个体识别提供了一个基础数据。贵阳地区人群GZm（23）基因频率与成都地区人群GZm（23）基因频率0．5493比较显著差异（Pwto．05…     

十九世纪血痕、精液斑等物证检验史

十九世纪血痕、精液斑等物证检验史贾静涛（中国医科大学法医学系；沈阳１１００１１）法医物证检验的科学发展是十九世纪现代法医学形成的又一重要标志，但由于科学水平的限制，其发展要远比法医毒物学缓慢，基本上是从本世纪中期开始发展的。１血痕检验１．１化学试法化...     

琼脂单向免疫扩散法在洗涤剂污染血痕检材中的应用

在血痕种属检验中,通常采用较为灵敏和快速的环状沉锭法。当遇有被肥皂、洗衣粉等污染的血痕检材时则往往得不到正确结果。我们采用琼脂单向免疫扩散法对常见洗涤剂污染的血痕检材进行实验,取得了满意的结果。 1 器材与试剂 (1)人血样品(医院血库提供)。 (2)抗人血红蛋白血清(华西医科大学法医系提供,效价:1∶10000)。 (3)琼脂糖,1.5％和5％的肥皂液,1.5％和5％伪洗衣粉液,1.5％和5％的餐具洗洁精液(以上液体均用自来水配制而成)。 (4)加热磁性搅拌器、冰箱、培养皿。 2 方法     

应用血膜热解离法检测体液斑ABO血型

血膜热解离法检验体液斑中的ABO型物质，具有操作简单、检验时间短、灵敏、特异性高等优点，而且与中和法相比具有节省检材的特点，在实际检验中取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1.已知血型的人唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱布各1（）份（从医院提取）；2抗A、抗B血清（淮北市公安局血清室提供）；3‘）型血痕纱布（采耳血涂在白绷带纱布上，室温保存，最长为1年）。二、实验方法（一）血膜热解离法检测体液斑ABt）血型l取ZCC长唾液斑、精斑、阴道分泌物斑纱线加入本理盐水3滴浸泡半小时或充分搅拌，取二满分别满于载被片两侧…     

应用ELISA检测人IgG进行血痕种属鉴别的研究——酶联免疫在物证检验中的应用研究之一

本文应用 ELISA-双抗体夹心法,通过检出血中的人 IgG 鉴定人血痕。双抗体夹心法是常用来检测抗原的一种方法,但在法医学上用于测定血痕种属尚少报道。我们建立的这种方法,新鲜人血痕的阳性结果可测到64万倍。保存三年的陈旧血痕仍可测出。马、牛、羊、狗、猪、鸡、鸭、鸽、兔、驴、骡和鹌鹑均为阴性。由于本法灵敏度高、特异性好、试剂易得,勿须贵重仪器,在物证检验中便于推广。     

一次检测微量血痕的种属来源、ABO血型及红细胞酶EsD、PGM_1的表型

本文介绍一种一次检测微量血痕的种属来源、ABO 型、红细胞酶 EsD、PGM_1表型的方法。用盲法共测151份已知血痕种属来源 ABO 血型、EsD 与 PGM_1表型的血痕纤维,均能正确判型、吻合率为100％。     

HPLC—ESI—MS／MS法测定全血中溴敌隆

目的建立全血中测定溴敌隆的高效液相色谱-电喷雾-质谱联用检测方法。方法血液样品经乙醚提取后，采用Ultra Cl8柱（150mm×2．1mm×5μm）；柱温：23℃；流动相：甲醇；流速：200μl／min；在负离子模式下，通过电喷雾电离（ESI），多反应监测（MRM）测定，外标法定量分析溴敌隆。结果在0．1-50mg／1范围内两者均呈良好的线性关系。溴敌隆的回收率为94．34％（RSD=7．3％），考察了方法的基质抑制作用（matrix effect，ME）（％）=B／A×100％=91．86％（RSD=4．78％）定量检出限为0．028ng。结论本方法简便、灵敏度高、定性定量准确，可以作为检验全血中溴敌隆检验的一种手段。     

HUMCYAR04基因座扩增片段长度多态性

HUMCYAR04基因座是Holly等人[1]报道的一个短串联重复序列（STR）基因座。笔者根据本实验室的条件，以中国人为研究对象，进行了此基因座的扩增和频率调查，并用于法医物证常见的血痕、混合斑的检验，取得了较好的效果。材料和方法一、实验材料1．血液取自昆明及玉溪地区191名无关汉族个体的静脉血，构椽酸钠抗凝；2混合斑及组织决、血痕血样实验室办案中积累；3．家系血样自愿者提供；4HUMCYAR04序列[1]：5’GGTAAGCAGGTACTTAGTTAGCTAC－3’；5’－GTTACAGTGAGCCAAGGTCGTGAG－3’。由北京赛百盛（美国）生物工…     

微量生物检材常规初检后再行PCR检验的方法

在实际检案中，经常遇到案发现场可获取的生物检材量微，在进行必要的种属检验、精斑确证实验、ABO血型检验等常规物证初检后，便无多余的生物检材移送DNA实验室进一步做法医DNA检验。因此，笔者通过对检案中遇到的上述微量物证检材的再行处理利用，在本实验室条件下，对其进行了TH０１、HUMACTBP２、AluVpA、DIS８０等位点的DNA－PCR分析，获得了良好的效果。使其在实际办案中更充分地发挥了证据作用，报告如下。１材料与方法检案中已经种属或ABO血型检验后的血痕、唾液斑（如烟蒂外层纸）浸泡凹板，加入３００μl去离子水，…     

单克隆抗体双位点一步ELISA方法检测MN血型

目的 :对法医学样品中微量液体血、血痕进行MN分型。方法 :利用抗M、抗N及抗血型糖蛋白A单抗 ,采用双位点一步ELISA方法。结果 :此法可检测的最低全血量约0 065μl,血痕约10～50ng。对455份新鲜血液及200份新鲜血痕的标本均正确检出 ;对58例陈旧血痕的检出率为96 6 %。结论 :此法准确率高且简便、快速 ,具有很大的实用价值。     

5种免提取试剂盒检验滤纸血痕结果的比较

目的探讨5种免提取试剂盒对滤纸血痕样本检验的效果。方法陈旧滤纸血痕(存放时间12～14个月)及新鲜滤纸血痕(存放时间小于1个月)各920份,分别随机分为5组。应用AGCU 17+1、Goldeneye 20A、Powerplex16HS、Identifiler Plus、Identifiler Direct 5种免提取试剂盒进行检验,对比各组检验结果。结果陈旧滤纸血痕5种试剂盒的检验成功率为98.91%～100%,各组间无差异(P>0.05);新鲜滤纸血痕,Identifiler Plus和Identifiler Direct试剂盒检验成功率高于AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒(P<0.01);将样本做陈旧化处理后再用成功率较低的3种试剂盒进行检验,成功率分别升至100%、99.46%、99.46%;Identifiler Plus试剂盒扩增循环27次效果优于28次。结论本文5种试剂盒均可用于滤纸血痕的直接扩增检验,但使用AGCU17+1、Goldeneye 20A及Powerplex 16HS试剂盒需将新鲜血痕做陈旧化处理;Identifiler Plus试剂盒需将循环次数降为27次。     

新鲜血痕样本直接扩增试验条件比较

目的探讨新鲜血痕在不同直接扩增试剂盒的试验条件。方法存放2d内的新鲜血痕FTA卡540份和存放1~3m的陈旧性血痕FTA卡270份,各分别随机均分为3组,每份血痕打3片1.0mm纸片,分别用DNATyperTM15Plus试剂盒、GoldeyeTM20A试剂盒和华夏TM试剂盒在标准条件(说明书条件)、优化条件1(标准条件+1μL DMSO)和优化条件2(标准条件+室温浸泡1h)扩增检验,比较在3种条件下各组STR检验成功率。结果陈旧血痕样本用3种直扩试剂盒,在3种条件下,检验成功率均97.00%,且均高于新鲜血痕。新鲜血痕在标准条件和优化条件1下,成功率为27.22%~31.67%,在优化条件2下,检验成功率相似(97.00%),与标准条件和优化条件1比较,有统计学差异(P0.01)。结论新鲜血痕在加入直接扩增试剂后于室温浸泡1h,可有效提高STR检验成功率。     

抗人Tf及抗人Hb试剂盒的比较

目的研究比较抗人Tf(转铁蛋白)和抗人Hb(血红蛋白)试剂盒的实验方法。方法采用胶体金标记单克隆抗体结合免疫层析技术,对不同稀释度的人血、动物血进行检测,并对保存时间、溶解度等影响因素进行研究。结果抗人Tf和抗人Hb试剂盒同样具有简单、快速、灵敏、稳定、特异性好的优点,但抗人Tf试剂盒能检测出陈旧及难以溶解血痕。结论抗人Tf试剂盒适用于法医物证的血痕种属检验。     

HRP标记探针MVR分型法在法医学上的应用

采用辣根酶标记寡核管酸探针数字编码小卫星MS可变重复序列（HRP标记探针MVR方法）,检验微量生物材料。结果表明,相当于5μl血液的血痕、单根有毛囊的毛发以及相当于4μl唾液的斑迹均获得了清晰易读的MVR图谱,灵敏度达1ng。将此方法应用于检案实践取得了较好的效果。MVR－PCR技术在法医学个人识别和亲子鉴定方面极有应用前景。     

二次扩增STR位点在凶杀白骨案中应用1例

凶杀案中有一些白骨常需与可疑血痕进行判定。白骨血痕是否同一个体。有些检材DNA量少、腐败，常规一次扩增结果不理想。我们利用PCR二次扩增STR位点方法成功的对1例白骨案进行了检验。现报告如下：家增1996年12月27日某村周某（男，48岁，农民）失踪。19对年3月28日发现其尸体埋在山脚下，死因为颅脑损伤死亡。侦查发现嫌疑人鲁某把家搬走，在其原来家中的木桶上发现喷溅状血迹，在屋内东西墙壁、东门背后也发现了陈旧血迹。经初步检验，死者周某牙齿（编为1号）血型为A型。木桶一一h喷溅状血迹（编为2号）为A型人血，嫌疑人曾某血（…