人唾液中口腔粘膜脱落上皮细胞的ApoB VNTR位点扩增片段长度多态性

人类基因组中存在DNA重复序列，包括了多态性DAN片段，其多态性决定于DAN串联重复序列（variblenumbertandemrepeats，VNTR）。DNA多态性的检测方法有用South－ern印迹杂交进行限制性片段长度多态性（re－strictionfragmentlengthpolymorphism，RFLP）分析，以及聚合酶链式反应（polymerasechainreaction，PCR）两种。采用RFLP分析，可获得个体特异的．DNA指纹，它是确定VNTR遗传型极有效的方法，但是此法操作费时，而且需要较大量的未降解的DNA。利用PCR的技术，可以克服RFLP分析的不足，用其检测法科学实践中生物性检材…     

从陈旧性骨骼及牙齿中进行DNA分析的法医应用研究的现状

自DNA指纹技术和PCR技术问世以来，国内法医界已将DNA技术应用于法医学个体识别和亲子鉴定。目前已经从DNA指纹技术发展到VNTR－PCR，STR－PCR，MVR－PCR分型技术和一DNA测序技术。随着DNA分型技术的日趋成熟，从人类残骸中获取有用的信息将帮助法庭科学家解决一些历史案件中个人识别问题。由于骨骼和牙齿的DNA有外部硬组织的保护，在经过同样的时间和同样的环境条件下，比其他软组织对各种腐蚀有更高的抵抗性。因此在一些年代久远的案件中，以骨骼和牙齿作为检验对象将成为法医DNA鉴定的一个重要方向。一、研究历史及理…     

PCR-STR技术在交通事故鉴定中的应用

DNA分析技术的应用，为交通事故中肇事车辆的认定提供了另一有效的技术手段。但在实际检案中，交通事故尤其是肇事车逃逸案件能获取的生物学检材常为微量、污染，需与动物成分相区别，且难以满足 RFLPs、 VNTR等方法的检验需要。应用 PCR－ STR技术，选择种属特异性高的 STR基因座，既可对微量、降解生物学检材进行有效 DNA分析又可进行种属鉴定，适合于交通事故生物学检材的个体识别。本文研究了 vWA、 D19S253、 D8S1179三个 STR基因座同步扩增在此类检案中的应用，并对检验过程中一些常见问题进行了分析。 1材料和方法 1.…     

短串联重复DNA的多态性及其法医学应用

现代分子生物学两项重要进展不仅使应用于遗传作图和连锁分析工作的高信息标记得到迅速发展，而且也给法医学个人识别和亲子鉴定的方法带来一次飞跃。第一项是1980年Wvtnan［11首次报道了串联重复．DNA具有高度多态性，、使可变数目串联重复DNA（VariableNumbersofTandemRep。at。，VNTR）成为新的多态性标记；第二项是1983年Mitis发明了简便实效的多聚因链式反应（PCR），使体外特异性合成DNH片段成为可能。在此基础上发展起来的DNA指纹图、VNTR一RFLP分析及PCR—VNTR检测法，已经从对基因表达产物的检测上升到对DNA分子…     

甲醛固定组织的DNA提取

在法医物证检验中，分子量大于23kb的DNA分子可以直接作出指纹图谱，部分降解的DNA分子可以通过PCR扩增进行检验。但对甲醛处理的组织，用上述提取方法，只能得到已严重降解的小分子DNA，并由于甲醛溶液的影响，无法进行VNTR－PCR检验。因此，如何从甲醛处理的各种组织中提取大分子DNA是一个迫切需要解决的问题。本文摸索出从甲醛处理的组织中提取大分子DNA的方法。同时研究了固定时间对提取DNA质量的影响，找到了适合DNA释放的最佳PK酶解条件，包括离子强度、反应体系、酶解时间、温度等。材料与方法1．组织的处理取自同一个…     

18例案件物证Amp—FLP检测分析

80年代中期建立的聚合酶链反应(PCR)技术,以基因组DNA为模板在DNA聚合酶催化作用下,由一对寡核苷酸引物引导,在体外扩增靶DNA片段。经过约30个循环反应,靶DNA片段可扩增100万个拷贝。PCR技术使法医物证检验的灵敏度大为提高,达到纳克级DNA的超微量水平。近10年来,PCR技术在法医界迅速得以推广与使用,被称为第二代DNA分型技术。人类基因组内可变数目串联重复序列(VNTR)位点具有极高多态性,VNTR位点和片段长度等位基因多达数十,甚至数百。运用PCR技术扩增VNTR位点并经片段长度多态     

单核苷酸多态性与DNA芯片技术在法医学中的应用

８０年代中期,Jeffreys建立的DNA指纹技术是法医学DNA分型的里程碑。针对人类基因组小卫星VNTR位点靶序列作RFLP分析,获得高度个体特异性DNA指纹图,使法医学第一次能够作出认定同一性,认定亲生关系的鉴定结论。此为第一代法医DNA分型技术。８０年代后期,Mullis建立PCR技术,以基因组内STR位点多态性位点为靶序列作PCR扩增,利用电泳分离,分析STR位点多态性。PCR－STR分型结合了PCR高效扩增和STR位点高度多态性的特点,成功地解决了检测灵敏度问题,采用复合扩增多STR位点的办法,鉴别能力达到或接近DNA指纹水平…     

中国人pMCT118位点扩增产物HinfⅠ限制性片段长度多态性

pMCT118（又称DIS80）是一个高度多态性的VNTR位点（重复单位16bp，核心序列为GNNGTGGG），位于1号染色体上。用PCR方法分析其多态性，国内外已有报道ti，2］K。s。i等人（‘］通过对pMCTlls位点碱基序列进行分析，发现该位点扩增物正链5’端第61个碱基由C转换成T，引入了Hinfl的酶切位点，使其产生了两种多态性Hinfl十和Hinfl－。本文对中国人pMCTlls位点扩增产物Hinfl限制性片段长度多态性进行了研究，现报告如下。材料与方法1．样品48例中国人无关个体血样由本实验室日常积累，DNA提取用Chelex快速提取法［’］。2．pMC…     

西安汉人D1S80位点基因频率调查

利用PCR技术、小型聚丙烯酰胶凝胶电泳及银染法，检测D1S80位点的VNTR扩增片段长度多态性（Amp－FLP）。在175名无关的西安地区汉族人群中发现了22个等位基因，片段大小分布于320～750bp之间，频率分布为0．0057～03314，杂合度为82．3％，个人识别率（DP）为0.9588，非父排除率（EPP）为0．6704。对7个家系23名相关个体分析，证实DIS80位点的遗传符合孟德尔方式。已发现的64种基因型分布符合Hardg－Weinberg定律。     

微生物物证检验的核酸分析技术

本文阐述了核酸分析技术中的VNTR／MLVA、PFGE、AFLP、SNP等方法和这些方法在生物犯罪中的实际应用；对这些方法的特点进行了总结归纳，并提出了我国公安机关在当前形势下发展核酸分析技术的一些建议。     

PCR-STR分型技术在尿样DNA分型中的应用

目的：对尿样的DNA分型进行研究。方法：10份尿样随机收集于无关个体,同时采集血液样本做DNA分型对照,用PCR－STD分型技术对尿样DNA进行FIBRA和D18S535基因座分型。结果：10份尿样10ml、1ml及0．2ml体积均获得准确的分型结果,且与同一个体的血样DNA分型结果完全相同;室温储存4天及4℃及4周的尿样均分型成功。结论：PCR－STR分型技术对尿样DNA分型是一种有效的方法,在尿样的个人识别中具有极高的实用价值。     

HinfⅠ和HaeⅢ酶解条件对DNA指纹图的影响

用辣根过氧化物酶标记α-珠蛋白-3’－HVR探针检测同一个体的DNA，其所产生的DNA指纹图谱带随着酶解条件的变化而发生改变。由于谱带的改变，给亲子关系的同一认定带来了困难，尤其是多位点探针的检测。为了了解Hinfl和Hae皿两种酶在不同酶解时间和不同酶量的条件下对DNA指纹图谱带的影响，本文作者利用多位点探针a一珠蛋白一3’－HVR和单位点探针MSS进行检测VNTR图谱的实验。材料与方法一、材料1．无关个体血液样品取自平时破案中所剩检材；2．琼服糖（美国signla公司产）；3．Hinfl和HaeI（美国premagem公司）4．非同位素标记…     

亲子鉴定DNA分型亲权指数的简化计算法

PCR扩增DNA片段长度多态性位点，如AmP－FLP、PCR－STR分型技术，在亲子鉴定中应用日益增加。由于被选择应用的DNA位点均具高杂合度、高非父排除率，以及PCR技术取材广泛、灵敏度高等特点，PCR－DNA分型有。逐步取代常规血型检测的趋势。PCR－DNA分型结果表明，杂合子个体呈2条片段，纯合于及条片段，等位基因为共显性遗传，位点均具有不连续基因频率分布。所以，亲权指数计算并不复杂。本文依据单位点DNA分型特发，根据Esse。M6ller计算理论，提出一套简明亲权指数计算公式。同时对父子单亲亲子鉴定的亲权指数计算公式也作…     

HLA-DQ_α基因的PCR扩增分型技术在88例刑事案件物证检验中应用的回顾

自从PCR（聚合酶链反应）技术问世以来，已有许多基因位点的分型系统开始应用于法医物证的DNA分析[1]，其中应用最为广泛，技术最为成熟的则是HLA－DQ。基因分型系统。此系统应用PCR技术扩增HLA－DQα基因特异片段，结合等位基因特异性寡核着酸（ASO）探针杂交技术检测HLA－DQα位点的四个等位基因，具有特异性好、灵敏度高、结果稳定、准确可靠等优点。本文应用姜先华等人[2]报告的方法，对88例刑事案件的物证进行了HLA－DQα基因的PCR扩增与分型。现报告如下：材料和方法一、检材233份检材来自于全国十九个省市送检的88例刑…     

法庭科学DNA检验设备的现状和发展

法庭科学DNA检验技术是上世纪80年代发展起来的一项新型检验技术,该技术自应用于刑事案件侦查领域以来,因其能够进行个体认定而倍受关注,成为提供法庭证据的主要技术之一。我国公安系统DNA检验技术研究紧跟国际先进水平,研究人员在最短时间内完成了实验室技术研究和实际办案技术转化，相继研发出DNA指纹图技术、PCR技术、STR技术、DNA数据库技术、国产DNA检验试剂、DNA提取纯化试剂与仪器等，并陆续在侦查办案工作中应用，为打击各类刑事犯罪提供了大量证据和线索，发挥了突出作用。     

当前法医DNA研究热点

自80年代后期DNA技术应用于法科学以来,国内外有许多实验室都在法医DNA技术的研究上投入大量精力,由最初的RFLP（DNA指纹技术）拓展到了VNTR·PCR、STR－PCR、MVR－PCR、线粒体DNA测序技术及其他PCR相关技术,并将这些技术应用于办案实践。法医DNA技术在近几年进入了一个平台期,没有大的突破性研究进展,但仍存在着一些有待探索的课题。王法医DNA质量保证体系t‘〕法医DNA质量保证体系属于软科学研究领域。由于DNA检验结论能够认定或否定嫌疑人,是破案的重要甚至唯一的证据,也因为DNA检验复杂、难度大。环节多,…     

微量DNA:容易忽略的生物物证

PCR技术的出现,大大提高了法医DNA分析技术的灵敏度,尤其是STR复合扩增技术的应用,不仅如同DNA指纹技术一样能够进行同一认定,而且使其灵敏度达到了纳克级以下的水平,大大提高了其解决微量、降解DNA的分析能力.Findlay等[1]成功地分析了低至单个细胞水平的模板DNA;Van Hoofstat等[2]利用DNA技术分析现场遗留指纹进行检验;Barbaro等[3]利用DNA技术对毛干进行检验;Schmerer等[4]和Burger等[5]分别用60和50个循环分析古代骨骼DNA;Van Oorschot和Jones[6]利用PCR检验,从电话话筒、钢笔、手提箱把手等提取的检材样品中得到DNA分型;Wickenheiser[7]从被盗汽车的方向盘上提取DNA进行STR分型,从而认定罪犯.以上研究报道的结果表明,现有的DNA技术能够对微量DNA进行检验.     

硬组织中D1S80位点基因型分析

用PCR技术分析硬组织中DIS80位点基因型及其DNA含量。当DNA部分降解时．此法仍然可行。证实了在同一个体，骨-血液及牙齿-血液DIS80位点的AmP－FLP的一致性。可应用于微量硬组织个人识别及骨化遗骸身源鉴定。     

p33.4位点扩增片段长度多态性及其法医学应用的研究

以聚合酶链反应（PCR）、聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳和银染法对中国100名无关个体小卫星区域p33．4位点的扩增片段长度多态性（Amp－FLPs）进行了研究，检出了8个等位基因。通过BIOTRAC系统进行数据处理．各等位基因重复单位的数目分别为7、10到15，其中在13～14之间发现一差值不足一个重复单位长度的罕见等位基因。片段长度分布于603～1115bP之间，基因频率分布于0.5～33．5％间，杂合度为64％，DP值为84．5％。对5个家庭25名相关个体进行分析，符合孟德尔遗传定律；对同一个体不同组织的DNA进行P33.4位点的分型研究表明，该技术适宜于法医物证检验。此外，本研究以Chelex处理不同检材制备DNA模板用于扩增，率先建立了比常规方法更快、更简便、更为实用的检验方法。     

微量生物检材常规初检后再行PCR检验的方法

在实际检案中，经常遇到案发现场可获取的生物检材量微，在进行必要的种属检验、精斑确证实验、ABO血型检验等常规物证初检后，便无多余的生物检材移送DNA实验室进一步做法医DNA检验。因此，笔者通过对检案中遇到的上述微量物证检材的再行处理利用，在本实验室条件下，对其进行了TH０１、HUMACTBP２、AluVpA、DIS８０等位点的DNA－PCR分析，获得了良好的效果。使其在实际办案中更充分地发挥了证据作用，报告如下。１材料与方法检案中已经种属或ABO血型检验后的血痕、唾液斑（如烟蒂外层纸）浸泡凹板，加入３００μl去离子水，…