常染色体InDel基因座判定疑难单亲鉴定1例

<正>1案例资料1.1案例来源王某,28岁,要求对其与女儿进行亲权鉴定。1.2检验方法DNA提取采用常规Chelex-100法提取基因组DNA。STR分型采用Goldeneye?20A试剂盒、AGCU EX22试剂盒及AGCU 21+1试剂盒在AB公司9700型PCR仪扩增,进行常染色体的STR分型检测,采用Investigator DIPplex kit(Qiagen,     

衣物类生物检材DNA检验的研究

目的建立对衣物类生物检材STR检验的有效自动提取纯化方法。方法对100例衣物类生物检材用EZ1DNA Investigator试剂盒、EZ1Advanced XL工作站的Large-Volume程序(大体积法)进行提取纯化,AmpFLSTR~Identifiler~Plus荧光STR复合扩增,3500x L型遗传分析仪分析结果。结果 69份检材中检出了单一DNA分型结果,9份检出了混合基因型,22份未检出基因型。结论该方法对衣物类生物检材DNA提取纯化后进行荧光STR检测,可应用于法庭科学实践。     

云南地区彝族人群17个STR基因座的遗传多态性

本文对中国云南地区彝族390个健康无关个体进行17个STR基因座遗传多态性调查。采用Chelex-100法提取样本DNA,用AGCU 17+1 STR荧光检测试剂盒进行扩增及检测。上述17个STR基因座共检出191个等位基因和704种基因型,其分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05),在所调查的彝族人群具有较好识别能力。     

AGCU免提取STR荧光检测试剂盒的验证

目的考察AGCU免提取STR荧光检测试剂盒．对保存在滤纸片或FTA卡上血液样本的直接扩增检测情况。方法使用人GCU免提取STR荧光检测试剂盒,对未经提取的滤纸片血液样本、FTA卡血液样本675份进行直接扩增和18个基因座的DNA分型,并对结果的可靠性进行研究。结果18个基因座检测结果与PP16和ID试剂盒分型结果一致,2000年数据库样本成功率92．3％,2001年数据库样本成功率92．6％,2004以后年数据样本及案件样本、亲子鉴定样本成功率在99％以上。结论AGCU试剂盒可以成功地对滤纸片、FTA卡样本的18个STR基因座进行直接扩增检测,检验结果稳定,分型准确。     

多种判定方法在半同胞姐妹关系鉴定中的综合应用

目的探讨综合运用三种不同方法进行半同胞姐妹关系的鉴定。方法对案例中的甲、甲母、乙和乙母分别使用Power Plex21试剂盒、AGCU Expressmarker 21+1试剂盒、Microreader 23sp-B试剂盒和AGCU X-19 STR试剂盒进行STR分型,根据STR分型结果分别利用ITO方法、判别函数法和IBS法进行半同胞关系鉴定。同时结合X-STR结果,进而综合判定是否为同父异母半同胞姐妹亲缘关系。结果本案例中通过ITO方法计算,HSI均在1.36×102~2.09×105之间,支持甲和乙为半同胞关系,判别函数同样得到了基本一致的结果,IBS法的结果也对此结果进行了验证。结论对于同父异母的半同胞关系鉴定,综合应用多种判定方法分析可获得较为可靠的鉴定意见。     

39个STR基因座在二联体亲子鉴定突变案例中的应用

目的探讨39个常染色体STR基因座在二联体亲子鉴定突变案例中的应用价值。方法提取全血基因组,采用AGCU Expressmarker 22荧光检测试剂盒进行二联体亲子鉴定,若出现1~2个矛盾基因座,则加做AGCU 21+1 STR荧光检测试剂盒,计算累计父权指数(CPI)值,根据亲子鉴定判断标准判定结果。结果共检测502例二联体亲子鉴定案例,其中排除亲权关系17例,485例不排除亲权关系,10例出现单基因座不符合。加做AGCU 21+1后除1例出现一个新的STR基因座不符合,其他均符合遗传规律,且CPI≥10 000。结论 39个STR基因座的联合应用能够有效解决二联体亲子鉴定中的大部分突变案例。     

荧光标记短片段STR复合扩增系统的法医学应用研究

目的解决严重降解(低于300bp)DNA检验问题,提高降解DNA的检出率。方法重新设计引物,减小扩增产物片段长度,用荧光标记短片段STR复合扩增体系进行DNA检验,扩增结果与用Identifiler试剂盒扩增出的结果进行比较。结果用荧光标记短片段STR复合扩增系统对实际案件中的高度降解DNA检材进行检验,可以获得满意分型。结论该系统可用于严重降解DNA检材的检验工作。     

甘肃甘南藏族人群21个非CODIS基因座的遗传多态性

正本研究采用AGCU 21+1荧光标记复合扩增系统对515例甘肃甘南藏族健康无关个体的21个常染色体非CODIS基因座进行遗传多态性分析,旨在为法医遗传学研究提供基础数据。1材料与方法根据知情同意原则,随机采集祖孙三代居住在甘肃甘南藏族自治州的藏族健康无亲缘关系个体FTA卡血痕样本515例,其中男性305例,女性210例。采用AGCU 21+1 STR荧光检测试剂盒(无锡中德美联生物技术有限公司)直接扩增血样DNA,样本     

IDentifier DNA分型盒（炎黄34）的法医学验证及应用评估

目的 测试IDentifier DNA分型盒(炎黄34)的技术性能指标,评估其法医学应用价值。方法 根据《法庭科学人类荧光标记STR复合扩增检测试剂质量基本要求》(GB/T 37226—2018),从种属特异性、分型准确性、灵敏度、适应性、耐受性、一致性、均衡性、反应条件验证、混合样本、稳定性、批间差11个方面对IDentifier DNA分型盒(炎黄34)进行测试。比较IDentifier DNA分型盒(炎黄34)与Power Plex^?Fusion 6C系统、Versa Plex^?27PY系统、Veri Filer^TM Plus PCR扩增试剂盒的系统效能。使用IDentifier DNA分型盒(炎黄34)检测日常案件中的拭子类生物检材,观察其STR检验结果 。结果 IDentifier DNA分型盒(炎黄34)具有良好的种属特异性、分型准确性、适应性、耐受性和均衡性,灵敏度可达0.062 5 ng,能检测案件中不同类型的检材、降解检材及混有抑制剂的检材,对混合比例为4∶1以内的样本均能获得完整分型。该试剂盒的系统效...     

X-STR在精斑混合检材检验中的法医学应用

目的应用X和Y染色体STR分析含有相同父系祖先个体DNA的混合检材。方法用差异裂解法提取混合检材基因组DNA,用PowerPlex 21试剂盒、GoldeneyeTM DNA身份鉴定系统27Y试剂盒、SureID?PathFinder扩增荧光检测试剂盒和GoldeneyeTM DNA身份鉴定系统17X试剂盒检测混合检材。结果根据X-STR和Y-STR单倍型成功鉴别具有相同父系祖先的嫌疑人,确定混合检材中存在4个男性个体DNA。结论 X-STR可以应用于检验精斑混合检材,结合Y-STR数据可区分相同父系男性个体,并辅助判断混合检材中男性个体的数量。     

广东潮州汉族人群17个STR基因座遗传多态性

本文对中国潮州地区汉族2 000个健康无关个体进行17个STR基因座遗传多态性调查。采用免提取直接扩增的AGCU17+1 STR荧光试剂盒进行扩增及检测。结果在17个STR基因座共检出227个等位基因和1 008种基因型,其分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05)。所调查的广东潮州汉族人群17个STR基因座具有较好识别能力。     

采用STR和SNP遗传标记鉴定全同胞姐妹关系

目的 通过对常染色体和X染色体遗传标记的检测,探讨全同胞姐妹关系的鉴定策略.方法 提取姐妹个体的DNA,采用SinofileTM试剂盒检验常染色体上的15个STR基因座、采用Mentype(R) Argus X-8试剂盒和多重X染色体STR检测试剂盒检验X染色体上的17个STR基因座,同时采用TaqMan技术对11个X-SNP位点进行分型检测.结果 依据常染色体STR基因座的检测结果计算全同胞指数,不排除被检个体的同胞姐妹关系:X染色体上各个STR基因座和SNP位点均检见1～2个相同的等位基因,进一步支持被检个体的同胞姐妹关系.结论 对于全同胞姐妹关系的鉴定案例,除了检测常染色体STR基因座外,还可以从X染色体上选择多态性遗传标记进行检测,获得更多的遗传信息.     

磁珠法自动化纯化现场检材DNA方法研究

目的利用TE-MAGS在TECAN工作站上结合磁珠试剂盒,建立自动化工作站批量纯化现场检材DNA的方法,并探讨其在法医物证检案中的应用。方法灵敏度测试:标准品使用0.1ng/μL 9947A,用200μL TES稀释制备DNA总量0.1ng~1ng共10种的标准样品,采用本文方法提取纯化,使用IdentifilerTM试剂盒扩增,用3130XL型测序仪检测,Gene Mapper ID-X分析,分析STR图谱质量;纯化能力测试:在1ng总量的标准样品中加入腐殖酸、血红素,采用本文方法提取纯化、扩增检测,分析STR图谱质量;实际案件应用对比:收集304份现场检材,分别采用本方法和硅珠法进行提取纯化,经扩增检测,统计对比两种提取纯化方法 STR分型成功率。结果灵敏度测试:0.1ng~0.2ng总量标准样品提取的DNA模板,扩增后可检测到部分基因座STR图谱,0.3ng~1ng总量标准样品提取的DNA模板,扩增后可以得到完整的STR图谱;纯化能力测试:对混合有一定浓度的腐殖酸、血红素的标准样品的提取产物检测图谱未见明显抑制;实际案件应用对比测试:304份现场检材工作站磁珠法检出成功率(50%)高于硅珠法(40.8%)。结论本文所建立的方法缓冲范围较大,回收率高,纯化能力强,提取产物STR分型成功率高,适合现场检材批量化DNA检验。     

二联体鉴定出现2个基因座不符分析3例

<正>1案例资料1.1简要案情案例1孩子母亲(母1)与收养孩子(子1)来此进行母子亲权鉴定,用于落户。案例2父亲(父2)与儿子(子2)做二联体检测用于落户。案例3男性村民(父3)怀疑女儿(子3)非自己亲生,到本所做亲子鉴定。1.2检验方法使用Goldeneye~(TM)20A试剂盒(基点认知技术(北京)有限公司)、AGCU21+1 STR荧光检测试剂盒(无     

亲子鉴定中STR基因座可疑多步突变2例

正1案例两位母亲(胡某与杨某)均因为自己女儿(刘某与李某)办理出生医学证明所需,委托我中心进行亲子关系鉴定。本中心采集四位被鉴定人指尖血备检。用Chelex-100法提取基因组DNA,分别采用AGCU EX22、AGCU 21+1试剂盒(无锡中德美联生物技术有限公司)对常染色体上39个STR基因座进行复合     

AGCU Mini系统在法医学中的应用

目的考察及评价AGCU Mini系统在法医学实践中的应用价值。方法应用AGCU Mini系统检测12 775份陈旧血样,进行梯度DNA模板浓度分析,并与IdentifilerTM试剂盒检测结果进行比对,评价体系的检测成功率及方法的灵敏度。针对AGCU Mini系统中D19S253基因座,对699份浙江汉族无关个体进行多态性调查。结果 12 775份陈旧血样采用AGCU Mini试剂盒检测,12 885份(96.1%)分型成功,检测灵敏度为40pg(10μL体系),方法成功率及灵敏度均高于IdentifilerTM试剂盒。D19S253基因座共检出9个等位基因,频率范围为0.005 7～0.316 2,杂合度为0.814 0,多态性信息含量为0.772 9。结论 AGCU Mini系统可用于法医微量物证的STR分析,与相关试剂盒联合使用价值更高。     

利用STR分型方法进行同胞关系鉴定

本文运用人类短串联重复序列(shorttandemrepeats,STR)分型方法对1案例进行了同胞血缘关系鉴定,通过这一案例的分析得出了一些数据,供同行们参考。1案情2004年,应委托人王某之要求,对5位已知同胞兄弟姐妹与另一位可疑个体之间是否存在同父同母之同胞关系进行鉴定。2材料和方法2.1DNA抽提取5名同胞兄妹的血样(1,2,3,5,6号)和可疑个体血样(4号),用Chelex-100快速提取法[1]提取DNA。2.2PCR反应用ABI公司荧光标记扩增试剂盒(AmpFlSTRTCofilerPCRAmplificationKit、AmpFlSTRTMProfilerPluPCRAmplificationKit)对DNA进行PCR扩…     

联合应用chelex100和磁珠法检测霉变皮上衣微量DNA1例

微量疑难检材DNA的提取是目前检案的难点之一.笔者在办案中,遇到1份微量、陈旧、霉变的检材;经联合应用chelex100法和磁珠法(DNA IQIM)成功从检材中提取并获得了足量、高纯度的模板DNA,采用PCR扩增和荧光检测获得理想的STR分型结果,为破案提供可靠有力的科学依据.现报道如下.     

苏州地区汉族和哈尼族人群17个STR基因座的遗传多态性

<正>本研究采用AGCU17+1STR荧光检测试剂盒(无锡中德美联生物技术有限公司),对苏州地区哈尼族人群进行17个STR基因座的遗传多态性调查,获取了相关的群体遗传学参数,并与本地区汉族人群进行比较,旨在为该地区哈尼族人群的法医学个人识别和亲子鉴定以及群体遗传学研究提供基础数据。1材料与方法苏州地区2000名汉族无关个体口腔拭子样本(男性1640例,女性360例),215名哈尼族无关个体     

汗潜指印的STR分型检测在案件中的应用

目的探索案例中所涉及的汗潜指印DNA的提取和检验方法。方法采用Chlex-100法提取DNA,进行STR复合扩增,通过毛细管电泳检测荧光信号。结果案例中涉及的汗潜指印在ProfilerPlus试剂盒10个基因座的分型检测均获成功。结论含有汗潜指印的检材的发现和正确提取对最终检测成功至关重要。