不同血清学方法检测牦牛布病结果的比较分析

在家畜布鲁氏菌病(以下简称布病)的血清学检查中,世界各地所采用的主要常规方法有平板凝集试验(PAT)、试管凝集试验(SAT)和补体结合试验(CFT)3种,但发现采用的凝集反应受非特异性抗体的干扰较大。为此寻找特异性高、简便、又能排除非特异性的检验方法是十分重要的。近年来,国内一些单位先后应用EDTA(乙二胺四乙酸)改良SAT对牛、猪、羊布病检查做     

山西省牛肺疫血清学调查

用补体结合反应对山西省曾发生过于肺疫的３２个疫区和１０个有阳性牛的县进行了血清学调查，共检查牛１３７９７头，检出阳性牛１头，但经病理解剖无牛肺疫病理变化，认为属非特异性反应。从而证明山西省已达到稳定控制牛肺疫的目的。     

牛病毒性腹泻病毒三种核酸检测方法的比较

利用针对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的常规RT-PCR、实时荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR)和RT-环介导等温扩增技术(RT-LAMP)3种核酸检测方法对不同质粒浓度的样品和417份临床疑似样品进行了检测,以比较3种核酸检测方法的优越性。结果显示,3种核酸检测方法中,real-time RT-PCR和RT-LAMP一样敏感,均能检测到10拷贝/μL,常规RT-PCR只能检测到1×104拷贝/μL,但临床样品检测表明,常规RT-PCR方法敏感度低,会造成一部分漏检,RT-LAMP灵敏度高又会造成错检。综合比较3种方法后,推荐用RT-LAMP结合real-time RT-PCR,不仅节约成本,且结果更为准确可靠,可提高牛病毒性腹泻的检出率。     

三种不同方法检测猪伪狂犬病病毒血清抗体的比较

三种不同方法检测猪伪狂犬病病毒血清抗体的比较吴斌陈焕春方六荣李学伍周复春洪文洲（华中农业大学畜牧兽医学院武昌４３００７０）伪狂犬病是由伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）引起的一种传染病，给养猪业带来巨大损失。对该病的诊断方法主要有病毒分离鉴定、动物接种试验、血清...     

诊断奶牛早孕的三种方法比较

诊断奶牛早孕的三种方法比较刘深廷，徐希军李忠平，张为鹏，王晓东，房学礼（山东省莱西市职业中专２６６６１１）（莱西市畜牧办公室）为了探讨适合广大基层单位诊断奶牛早孕的方法，作者对１８４头配种后２１～２６天的奶牛分别用放射免疫法（ＲＩＡ）、酶联免疫吸附法...     

进口AA祖代种雏的血清学检测

1991年9月,宁夏某鸡场从美国引进2191只1日龄AA祖代种雏鸡,在隔离期间根据需要和有关备忘录的要求,我们对其做了5种病的血清学检测。 基本情况 该批雏鸡的原产父母鸡群曾在1990年10月至1991年1月先后接种过马立克氏病疫苗2次,传染性法氏囊病疫苗、鸡新城疫疫苗和病毒性关节炎疫苗各1次。种雏除1日龄时接种过马立克氏病疫苗外,没有接种过其他疫苗。     

三种贝类原虫多重PCR检测方法的建立

根据基因库中单孢子虫、派琴虫和马尔太虫的基因序列,分别设计了3对特异性引物,通过对多重PCR扩增条件的优化,建立了可同时检测鉴别这3种原虫的多重PCR方法.用该技术对同一样品中的单孢子虫、派琴虫和马尔太虫模板进行扩增,结果均同时得到3条大小与试验设计相符的244 bp(单孢子虫)、596 bp(派琴虫)和478 bp(马尔太虫)的特异性扩增带,对其他贝类病原核酸的扩增结果为阴性.敏感性试验结果表明,该技术最低能检测到10 pg的单孢子虫、派琴虫和马尔太虫DNA,提示该技术适用于这3种原虫的临床快速检测和鉴别诊断.     

家畜焦虫病的几种血清学诊断方法

近年来,许多国家利用血清学反应方法诊断和大群检疫家畜焦虫病,以及用于免疫作用的研究,其中对牛羊边虫病、马焦虫病、牛双芽焦虫病、牛泰勒焦虫病等都显有报导。随着抗原提纯方法的不断改进,血清反应的准确率也越来越高,目前已成为家畜焦虫病的诊断,免     

两种检测霉玉米中黄曲霉毒素B_1方法的比较

我区产玉米较多,每年都有不少的玉米因保管不善等原因,发生霉变,污染上黄曲霉,如1983年从隆安等县收集的100多份玉米样本、检测后发现都含有黄曲霉毒素B_1,有的竟高达5000～10000ppb,因此,建立一套适用于基层兽医站监测饲料中污染的黄曲霉毒素B_1的测定方法很有必要。目前,我国卫生部颁布的食品卫生检验方法(简称食品法)比较完善,但作为基层使用尚嫌费时和复杂。Toth等提出用氯仿直接提取测定黄曲霉毒素是可行的。我我们通过试验,采用氯仿定容提取玉米中黄曲霉毒素B_1,取滤液点板层析。只需40分钟左右     

鼠棒状杆菌检测方法的比较

鼠棒状杆菌检测方法的比较孙以方张文慧（兰州医学院７３００００鼠棒状杆菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｋｕｔｓｃｈｅｒｉ）是仅寄生于实验大、小鼠的常见致病菌，多以隐性感染形式存在。虽然鼠棒状杆菌不是普通级小鼠必须排除的细菌，但当机体受到其它病原微生物...     

奶牛乳房炎三种主要链球菌多重PCR检测方法的建立

链球菌是引起奶牛乳房炎的重要病原菌,其中无乳链球菌(S.agalactiae)、停乳链球菌(S.dysgalactiae)和乳房链球菌(S.uberis)是奶牛乳房炎主要的致病性链球菌。为同时、快速地检测牛奶样品中这3种重要链球菌,本研究根据无乳链球菌sip基因、停乳链球菌Mig基因及乳房链球菌pauA基因设计特异性引物,同时以细菌16S rRNA基因为内参,建立了多重PCR检测方法,并进行条件优化。结果显示,该方法最佳退火温度为58℃,最佳扩增循环数为25个循环,本方法同时检测无乳链球菌、停乳链球菌及乳房链球菌时,检测限分别为1×10³CFU/m L、1×10³CFU/m L及1×10⁴ CFU/m L,灵敏性高。该方法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌、单核细胞增生李斯特菌等10种菌均无交叉反应,特异性好。模拟样品结果显示,当奶样中3种菌的初始浓度均为1 CFU/m L时,37℃增菌6 h即可检出乳房链球菌,增菌8 h以上3种菌可全部检出。结果表明,该多重PCR检测方法具有较好的特异性和灵敏性,对同时快速检测...     

三种致奶牛流产病原多重巢式PCR检测方法的建立

为同步检测引起奶牛流产的新孢子虫、布氏杆菌和弓形虫这三种常见病原,本研究分别设计针对新孢子虫ITS1基因(Nc-ITS1)、布氏杆菌16S rRNA基因(Ba-16S rRNA)及弓形虫529 bp重复序列基因(Tg-529 bp)的特异性巢式PCR引物,建立并优化了能够同时检测这三种病原的多重巢式PCR方法。结果显示,多重巢式PCR对Nc-ITS1、Ba-16S rRNA及Tg-529 bp扩增产物的大小分别为601 bp、380 bp、245 bp。外引物退火温度为57℃,内引物为53℃;Taq酶、dNTP和Mg2+浓度分别为1.0 U、2.0 mmol/L和1.0 mmol/L;Nc-ITS1和Tg-529 bp外、内引物浓度均为0.4 m ol/L,Ba-16S rRNA为0.2 mol/L。该多重巢式PCR对Nc-ITS1和Ba-16S rRNA检测敏感性达3×102 copies/L,对Tg-529 bp达3×101 copies/L,对住肉孢子虫、大肠杆菌、沙门菌、李氏杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌扩增均无目的条带,表明该多重巢式PCR方法具有良好的敏感性和特异性。利用该方法对86份临床样品进行检测,结果显示新孢子虫阳性样品26份,布氏杆菌阳性样品2份,弓形虫阳性样品1份,其中新孢子虫和布氏杆菌均为阳性的样品1份,与单巢式PCR检测结果一致。结果表明,建立的多重巢式PCR方法可以用来对致奶牛流产的新孢子虫、布氏杆菌和弓形虫这三种常见病原进行快速、准确地检测。     

狐狸脑炎抗体的检测方法比较研究

本试验用犬腺病毒(CAV)Ⅱ型狐狸脑炎疫苗免疫接种2～2.5月龄离乳仔狐,分别用血凝抑制试验(HI)、补体结合试验(CF)、中和试验(NT)检测免疫后不同时期狐狸脑炎抗体滴度,结果表明免疫后7天三种抗体均出现滴度,21～30天达到高峰,直至屠宰前保持不降(中和抗体滴度略有下降)。其中补体结合试验具有操作简单、重复性好、特异性高、结果可靠等优点,适合大批狐狸脑炎抗体的检测。     

马泰勒虫不同PCR检测方法的比较

为寻求一种快速、有效的马泰勒虫PCR检测方法,用Bec-UF2、Equi-R;EMA-1F、EMA-1R两对引物对56份马血液样本中马泰勒虫的核蛋白体基因和表面蛋白基因进行了常规PCR方法检测,用EMA-5、EMA-6;EMA-7、EMA-8两对引物对56份马血液样本中马泰勒虫的表面蛋白基因进行了PCR和套式PCR方法检测。结果显示,以Bec-UF2、Equi-R为引物的PCR方法的阳性检出率为57.1%(32/56),以EMA-5、EMA-6;EMA-7、EMA-8为引物的套式PCR方法的阳性检出率为51.8%(29/56),以EMA-1F、EMA-1R为引物的PCR方法的阳性检出率为17.9%(10/56)。结果表明,以Bec-UF2、Equi-R为引物的常规PCR方法为检测马泰勒虫的最佳方法。     

三种猪腹泻病毒性病原多重RT-PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪A群轮状病毒(GAR)的基因序列保守区,分别设计了3对引物。通过对引物浓度、退火温度等条件进行优化,建立了检测PEDV、TGEV和GAR的三重RT-PCR方法,并对其灵敏度、特异性进行了检测。该方法的最低检测量分别为PEDV 0.24pg、TGEV 2.3pg、GAR 1.5pg;特异性试验显示,它对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪萨佩罗病毒、猪博卡病毒、猪环曲病毒、猪源大肠杆菌、猪链球菌2型、猪源沙门菌、空肠弯曲杆菌和金黄色葡萄球菌等均不产生非特异性扩增。利用该方法对采自四川省6个猪场的46份样品进行检测,结果,PEDV阳性率达76.1%,TGEV阳性率为19.6%,而GAR未被检出;表明同场样品中存在PEDV与TGEV的混合感染。同时用文献报道的单一RT-PCR法对上述样品进行检测,结果符合率均为100%。结果表明,建立的三重RT-PCR具有较高的灵敏度和特异性,可用于PEDV、TGEV和GAR的检测。     

七种猪传染病的血清学调查

近年来 ,随着甘肃省养猪业规模化、集约化的发展和畜禽及其产品的频繁流通 ,猪传染病越来越多 ,危害日趋严重 ,尤其是猪繁殖障碍病、猪呼吸系统疾病和腹泻病是目前制约养猪业健康发展的主要“瓶颈” ,已成为现阶段猪病防制的重中之重。因此 ,为了进一步查清猪繁殖障碍病和猪呼吸系统疾病的感染及免疫状况 ,为更加有效地防制提供科学依据 ,笔者在甘肃省某规模化养猪场采集猪血清 2 0 84份 ,对猪瘟 (CSF)、猪伪狂犬病 (PR)、猪繁殖与呼吸综合征 (PRRS)、猪细小病毒感染 (PPVI)、猪乙型脑炎(JE)、猪传染性胸膜肺炎 (APP)和猪霉形体病 (…     

PEDV-TGEV-RV三重PCR检测方法的建立

根据G en Bank中已登陆的猪流行性腹泻病毒(PED V)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(RV)的参考基因序列,设计3对引物分别用于扩增PEDV的N基因、TGEV的M基因、RV的VP7基因的目的片段;通过优化反应体系,建立了同时检测PEDV、TGEV、RV的三重PCR检测方法。敏感性和特异性试验的结果表明,该方法对这3种病毒的最低核酸检出量分别为39.5 pg(PEDV)、38.1 pg(TGEV)和51.6 pg(RV)。该方法可同时扩增477 bp(PEDV)、263 bp(TGEV)、355 bp(RV)的特异性基因片段,而对猪瘟病毒(CSF V)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和伪狂犬病病毒(PRV)等病毒的检测结果均为阴性。三重PCR与单一PCR的符合率为100%。上述结果表明,该方法的建立对于这3种病毒的临床快速检测与流行病学调查具有十分重要的意义。     

云南省红河州鸡衣原体感染的血清学检测

云南省红河州鸡衣原体感染的血清学检测王琼秋，刘伯庶（云南省红河州畜牧兽医站蒙自６６１１００）１９９４年１１月，红河州部分商品肉鸡场陆续发生鸡的衣原体病并造成严重的经济损失。为了解本病在我州的感染情况和提出有效的防治措施，我们对个旧、开远、建水、屏边、...     

青海省班玛县牦牛衣原体病血清学检测

青海省班玛县牦牛衣原体病血清学检测董才行，张乃忠（青海省果洛州畜牧兽医研究所玛沁８１４０００）张安岁，刘滋泽，田生珠，李生福（班玛县兽医站）班玛县地处青海、四川交界处，东、南、西分别与四川省阿坝、壤搪、色达等地区交错接壤，疫值复杂，其中牦牛流产一直是...     

甘肃省酒泉地区猪伪狂犬病血清学检测

在甘肃省酒泉地区 15个未经猪伪狂犬病 (PR)疫苗免疫的规模化猪场采血清 2 5 4份 ,经PR斑点酶联免疫吸附试验 (Dot ELISA)检测 ,在 12个猪场检出PR抗体 ,检出阳性血清 48份 ,平均阳性率 18.9%。提示 ,在该地区部分猪场有猪伪狂犬病毒 (PrV)感染