应用SPA法鉴定猪丹毒杆菌的血清型的研究

迄今为止,猪丹毒杆菌血清型已报道有Ia、Ib、2、3、4、5……22及N型共24型。 近年来,随着对猪丹毒研究的深入,不同血清型猪丹毒杆菌与流行病学、致病力及免疫间的关系已为许多学者所重视。利用葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal Protein A简称为SPA)作为一种特殊载体,进行细菌的定型(群),国内外已有不少报道。我们将猪丹毒杆菌特异性分型高免血清标记于SPA,鉴定猪丹毒杆菌血清型。确证它同样具有快速、敏感和简便等优点,现将111株不同来源的猪丹毒杆菌血清型鉴定的结果报道如下。 材料与方法     

猪丹毒杆菌表面抗原SpaA的原核表达纯化及免疫原性验证

本研究制备了一种具备优良免疫原性的猪丹毒杆菌表面抗原重组蛋白。采用基因调取的方式,构建质粒并亚克隆到表达载体pET28a上,进一步将改造质粒转化到大肠杆菌感受态BL21细胞中,构建了1株猪丹毒SpaA全基因重组表达菌株。之后通过IPTG诱导表达、镍离子层析柱分离纯化、梯度透析获得高纯度重组SpaA蛋白。经免疫攻毒试验验证,重组SpaA蛋白能够有效保护小鼠和猪免于猪丹毒杆菌强毒攻击,其中小鼠的重组SpaA蛋白最小免疫剂量为每只2.0μg,100μg的重组SpaA蛋白能够保护猪免于猪丹毒杆菌强毒株感染。以重组SpaA蛋白作为组分与猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗共同免疫小鼠,结果显示该混合疫苗对于猪丹毒杆菌及猪多杀性巴氏杆菌均有良好的保护效果。本研究结果证实,重组SpaA蛋白是我国现行猪丹毒杆菌传统灭活疫苗升级换代的理想候选抗原,同时也具备良好的抗原相容性,其高纯度及低免疫剂量的特点也为其他组分提供了充足的剂量空间。     

仔猪和马的李氏杆菌病病例

笔者于50年代末期至60年代中期曾在甘肃省靖远、临夏、天水等地调查了李氏杆菌病在仔猪中的流行情况。病猪均有明显的中枢神经系统症状。通过从自猪分离的六株细菌的分析,包括形态及培养特性、生化特性、对实验动物的致病力、血相等项目的检查,鉴定该菌为单核球增多性李氏杆菌。其共同特点为革兰氏染色阳性,无荚膜和芽胞,有运动性,发酵杨苷和蔗糖,对豚鼠有病原性。该菌与猪丹毒杆菌有许多相似之处,其主要区别点是:猪丹毒杆菌无运动性,不发酵蔗糖和杨苷,对豚鼠无病原性。剖检死于实验感染之     

猪丹毒杆菌和溶血性曼氏杆菌二重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

为建立一种快速、准确检测猪丹毒杆菌和溶血性曼氏杆菌二重TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据猪丹毒杆菌和溶血性曼氏杆菌16S rRNA基因保守序列设计种特异性引物及探针,并优化反应条件,建立了检测猪丹毒杆菌和溶血性曼氏杆菌的二重TaqMan荧光定量PCR检测方法。结果表明,所建方法特异性良好,与其他25种常见细菌均无交叉反应。猪丹毒杆菌检测在2.07×108~2.07×103copies/L范围内具有良好的线性关系,最低可以检测到2.07×102copies/L的标准品阳性质粒,批内和批间变异系数均小于3%;溶血性曼氏杆菌检测在1.07×108~1.07×103copies/L范围内具有良好的线性关系,最低可以检测到1.07×102copies/L的标准品阳性质粒,批内和批间变异系数均小于3%。应用建立的二重荧光定量方法和普通荧光定量方法对47份临床样品进行检测,符合率为100%。本研究结果表明,所建立的方法可用于猪丹毒杆菌和溶血性曼氏杆菌感染的高通量快速诊断以及猪丹毒杆菌和溶血性曼氏杆菌的快速鉴定及定量分析。     

关于猪丹毒疫情的调查

六十年代以来,对猪普遍地进行了预防接种,猪丹毒病基本上得到了控制。但有些地区仍有散发流行。为了摸索发病规律,采取合理的防治措施,对猪丹毒疫情进行了调查研究。 (一)流行病学特点 近些年来,猪丹毒病出现以下新的流行特点: 1.易感年龄;收集的1966～1980年期间发生的657头猪丹毒病例中,40～100斤重架子猪602头,占91.62％;100斤以上肥育猪28头,占4.22％;100斤以上的种母猪10头,占1.52％,120斤以上的种公猪3头,占0.45％;40斤以下的仔猪13头,占1.98％。说明猪丹毒主要发生在40～100斤的架子猪中。     

葡萄球菌A蛋白在猪丹毒杆菌鉴定上的应用试验

葡萄球菌A蛋白(SPA),是金黄色葡萄球菌细胞壁所含的一种蛋白质,作为一种新的免疫学试剂,在医学领域广泛应用。笔者参考国内外有关资料,用猪丹毒高免血清致敏SPA,对保存的10株猪丹毒杆菌进行了鉴定,其结果介绍如下。     

干燥猪瘟、猪丹毒“二价苗”的研究和应用

一、引 言 猪瘟和猪丹毒是猪的两种主要烈性传染病,对养猪事业威胁很大。以前防制这两种疫病所用的猪瘟兔化疫苗,和猪丹毒氢氧化铝甲醛菌苗与猪丹毒弱毒菌苗,由于要在猪身上分开平”的教导,根据猪病防治上多年来存在的问题,发扬了为革命敢于创新的精神,实行了大协作和“三结合”,于1970年5月开始,进行了《干燥猪瘟、猪丹毒“二价苗”的研究和应用》的研究工作。经过一年半的努力,初步完成了“二价苗”的研究和生产工艺的探讨,试     

急性猪丹毒脾脏病理变化的研究

猪丹毒是当前危害养猪业的最严重传染病之一。特别是急性猪丹毒,发病急,症状不明显,突然死亡,流行速度快,一旦爆发要造成严重的经济损失。因此,如何发现第一头病猪对及时扑灭疫情具有重要意义。现场对第一头病猪能够确诊的方法,通常是以尸体剖检作出诊断,但这对于一般现场工作的广大兽医人员并不那么容易。为此,我们在1968年～1977年7月间对32例急性猪丹毒尸体剖检工作中,观察到急性猪丹毒脾切面白髓周围有颜色深于红     

两起爆发败血型猪丹毒病例分析

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的一种急性、热性传染病,临床上常以急性败血型、亚急性疹块型和慢性心内膜炎型出现,病理上的特点随病型而异,是我国养猪地区常见的疫病。近年来,由于菌苗的使用,已使本病的大流行基本得到控制。但由于防疫中有漏注猪只,有的地方在保藏、运输及使用疫苗的时候,常常有违反操作规程的情况,致使免疫效果不好,在某些地方仍有散发或小区域暴发的病例出现。在我们兽医门诊与化验室检查中,曾遇到两起小区域败血型猪丹毒暴发的病例,由于突然暴发、急骤死亡,临床症状与病理变化均不典型,分离物的某些特性(形态、染色、培养特性方面)也发生了一些变化。这给临床诊断与化验室鉴定均带来了一定困难。现将这两起暴发的典型病例介绍如下,以供兽医临床工作者与化验人员参考。     

猪附红细胞体病的诊断

猪附红细胞体病的诊断河南省辉县市某猪场发生了猪附红细胞体病。流行情况１９９７年７月上旬，某猪场的长白猪发生了以高热、贫血、轻度黄疸、皮肤发红为特征的疾病。由于该猪场猪群已用猪瘟、猪丹毒、猪巴氏杆菌病、仔猪副伤寒疫苗全部进行了免疫预防接种，因此怀疑为猪...     

64种中草药对猪丹毒杆菌的抑菌试验

在毛主席无产阶级革命路线指引下,遵照伟大领袖毛主席“阶级斗争、生产斗争和科学实验,是建设社会主义强大国家的三项伟大革命运动”的教导,为了对本县兽医常用中草药及其制剂进行科学鉴定,进一步探索治疗各种家畜传染病的有效中草药及其制剂,我们在县农林水利局、县人民医院有关部门的密切配合下,选择了一些本县兽医较常用的中草药和部分制剂,对生猪最常见的致病菌猪丹毒杆菌、猪肺疫杆菌、大肠杆菌、猪链球菌、葡萄球菌和普通药物常用鉴定菌枯草杆菌、八叠球菌等进行体外抑菌试验,并结合临床应用,进一步确定其疗效。现把64种中草药及其制剂对猪丹毒杆菌的抑菌试验报告如下。     

甘肃省天水地区猪屠宰检疫结果浅析

动物的屠宰检疫是控制疫病流行，保证人体健康的重要措施。甘肃省天水市食品公司所属２个肉联厂，每年屠宰猪８万头左右，在屠宰检疫中发现的疫病主要有猪瘟、猪巴氏杆菌病、猪丹毒、猪钩端螺旋体病、猪囊尾蚴病、猪旋毛虫病和住肉孢子虫病等。现根据天水市１９８５～１９...     

SPA协同凝集试验快速检测禽霍乱患禽组织中特异性抗原的研究

为了使禽霍乱的诊断方法简便、快速、准确、便于在广大基层兽医单位推广使用,近年来一些学者根据金黄色葡萄球菌的细胞壁成分A蛋白(简称SPA)能和人及某些哺乳动物IgG的Fc段发生非特异性结合,有抗体活性的Fab段暴露于SPA表面,当有特异性抗原存在时,则可发生协同凝集反应的原理,已用于多杀性巴氏杆菌的分型和菌体抗原的检测。如Rimler,(1978)对引起牛出血性败血症的多杀性巴氏杆菌的两个血清型进行了鉴定,并指示协同凝集反应能检测出多杀性巴氏杆菌实验感染小白鼠的肝脏提取物及血浆中的可溶性抗原,     

龙门县猪弓形体病发生流行情况调查

我县于1979年10月下旬开始发生猪弓形体病,至1980年1月底止,据统计,全县13个公社有12个公社、93个大队、874个生产队先后发生流行,分别占全县总大队数的6O％,总生产队数的43.6％;发病猪只达13371头,占存栏生猪的35.6%;死亡6671头,占发病猪只的49.9%。现将调查情况报告如下。 (一)流行情况 1.传染快,呈爆发性流行:首先在县城镇发现部分已经过猪瘟、猪肺疫、猪丹毒防疫     

127株不同来源的猪丹毒杆菌的分型鉴定

目前,按照Kuosera的分型系统,根据菌细胞壁的可溶性耐热抗原,将猪丹毒杆菌分为27个血清型(含亚型),命名为1、1a、1b、2、2a、2b、3………22型和N型。最近,徐克勤等(1984)又报告一种由健康猪扁桃体分离的不同于(国际标准血清型的新株,初步定为23血清型。我们用国际分型方法,通过琼脂扩散试验对127株不同来源的猪丹毒杆菌作了血清学分型,现将结果报告如下。     

哺乳及断奶仔猪猪丹毒伴显神经症状的初步观察

临症伴显神经症状的猪病较为常见。一般都疑为中毒(如食盐中毒、亚硝酸盐中毒、有机氯及磷中毒等)或伴发神经症状的传染病(如猪瘟、猪李氏杆菌病、猪伪狂犬病、猪溶血性链球菌病、猪脑脊髓炎等)。至于临症伴显神经症状的猪丹毒则一般文献尚未见有详细记述。 最近,我们在临床实践中先后发现7例伴显神经症状的猪丹毒患猪。以下就其临症、剖解及微生物检查的结果初步报导如下,以引起临床工作同志们的注意。     

猪李氏杆菌病的诊断

兰州市某厂养殖场饲养的生猪于1990年6、7月爆发李氏杆菌病,主要为败血症型,亦有神经症状。短期内发病死亡较多,猪只损失很大。经实验室确诊后采取相应措施,使本病得以控制。(一)发病和病状 1990年6月中旬,该养殖场数个猪圈内有5头生猪突然死亡,尸体表现口鼻流血,血液颜色暗紫且凝固不良,尸僵不全,尸体腹部膨胀。当即对全部猪圈进行消毒和全群生猪注射青霉素、链霉素,同时停止饲喂可疑饲料。然而病情未能制止,于1个月内猪群中陆续发现病猪和死亡。病猪主要表现为食欲锐减或废绝,反应迟钝,体温升高38～40.5℃,呼吸困难,流涎,站立     

一次断奶仔猪伪狂犬病的暴发及其病原鉴定

我们在1982年秋末发现了一次断奶仔猪的暴发性伪狂犬病,现将有关流行病学、临床、剖解及病原分离与鉴定等资料报道于后。 (一)流行概况 四川省某农场饲养的3头母猪及33头架子猪,饲养管理条件比较良好,每年定期对所有猪只进行猪瘟、猪丹毒、猪肺疫及猪链球菌病预防注射两次。两头5岁母猪于1982年8月中旬产仔,共22头,断奶时存活16头。仔猪发育正常、体况中等、平均体重断奶时8～15公斤。10月23日突然死亡1头,同时发现有4头体温升高(41～41.4℃)及气喘,立即用大剂量青、链霉素按时治疗,其它猪只也用青、链霉素预防注射。10月24日对全群仔猪立即用猪瘟及猪丹毒二联弱毒苗进行紧急预防注射。鉴于病猪呼吸道症     

弯杆菌性肠炎的病理生理学

空肠弯杆菌(Campylobacter Jejuni)于1957年首次指出与肠道疾病有关。由于它在公共卫生上的重要性,促使研究工作者进行了许多阐明其病原学特征及所致疾病的研究。现仅就近年来弯杆菌性肠炎的病理生理学研究进展情况概述如下。 (一)病原菌的性质 空肠弯杆菌在分类上属于螺旋菌科,弯杆菌属。本菌革兰氏染色阴性,呈多形性,对数期培养物呈弧形或螺旋性杆状,老龄培养物则以圆球形为主。本菌藉助其一或多根两端鞭毛而有迅速移动的运动力。在微需氧环境(5～10％氧,3～10％二氧化碳)中于42℃生长最佳。可在许多基础培养基包括布氏杆菌琼脂和缪勒—亨通琼脂上生长,但欲获得最佳的分离需添加营养补充物,如溶解的全血、硫酸亚铁、次亚硫酸氢钠、丙酮酸钠等。最近,Tenover等(1985)应用一种原来用于培养淋球菌的化学上特定的改良培养基,发现58％的空肠弯杆菌分离物至少对一种氨基酸是营养缺陷型,并且研究出一种可用于空肠弯杆菌流行病学研究的生长定型法。     

猪丹毒78_((75))弱毒菌株的研究——78_((75))弱毒株的诱变和筛选

原猪丹毒78—78弱毒菌株是1978年从猪体分离所得的自然弱毒菌株。1983年以前在实验室条件下,经小白鼠、家鸽与猪进行了安全性、免疫原性及稳定性等系列试验,其结果均较良好。因此,于1984年采用78—78弱毒菌株制成了冻干菌,在区内的五个猪丹毒疫场和山东德州地区农村,对3500余头猪进行了田间试验,经过近期安全性和7～8个月的有效期考查,各试验点猪群均未见异常表现,也未发生过猪丹毒病。1985年初,用本菌种在北京市生药厂进行了6批次冻干苗中间试产,春防期间在江苏南通,湖南长沙、龙山,四川江津、江油和北京市郊区作了38744头猪的区域试验,其结果:本苗在南通、长沙和江津对约克、长白及其杂种猪,以皮下或肌肉注射法分别接种998头、108头和470头,各出现反应107头、10头和13头;在龙山对15455头湘西黑猪、北京郊区423头长白、荣昌、内江及其杂种猪,菌苗注射后,未见异常表现,以菌苗混饲喂服法,在江津和江油给约克、长白及其杂种猪群9734头和11556头投喂后,均未见异常表现。