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以昆明系小白鼠为试验动物,观察了白细胞介素3(IL3) 对猪瘟病毒E2 囊膜糖蛋白( HCV E2) 基因疫苗免疫效果的增强作用。用DNA 重组技术将HCV E2 基因和小白鼠IL3 基因克隆到pIRES1neo 质粒,因在两者之间有脑心肌炎病毒(EMCV) 的核糖体进入位点(IRES) 片段,可得到HCV E2 基因和小白鼠IL3 基因双表达质粒pIRST IL3 ,用pIRSTIL3 免疫小白鼠后,经ELISA 法检测免疫小白鼠血清中抗HCV E2 抗体效价。结果显示,IL3 能显著提高HCV E2 基因疫苗的免疫效果,表明IL3 可作为HCV E2 基因疫苗的细胞因子佐剂。 相似文献
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应用RTPCR结合激光密度扫描定量分析方法,观察了不同途径免疫小白鼠的脾单个核细胞的细胞因子IL1β,IL2和IFNγ的mRNA动态表达水平。结果显示,穴位免疫组细胞因子IL1β和IL2的mRNA表达峰值和持续时间均大于非穴位免疫对照组。穴位免疫组与对照组比较,IFNγ的mRNA表达水平无统计学差异。这一结果在mRNA水平上证明经后海穴途径免疫可增强机体的免疫功能。提示在穴位免疫激活机体免疫应答的过程中,除了免疫系统自身调节外,尚有其他因素参与免疫调节。 相似文献
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利用反转录套式聚合酶链反应(RTnestedPCR)技术从北京地区3株鸡传染性支气管炎病毒(IBV)分离株(BJ1,BJ2,BJ3)中扩增出1054bpS1基因高变区。利用限制性内切酶SinⅠ和PstⅠ的酶切位点分析图谱进一步证实了RTnestedPCR的特异性。将3段S1基因分别克隆到pUC19质粒中,获得重组质粒pUCIBVS1BJ1,pUCIBVS1BJ2和pUCIBVS1BJ3。 相似文献
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应用聚合酶链反应(PCR)技术检测人工感染12周龄SPF鸡体内鸡传染性贫血病毒(CAV)的动态分布结果,感染后第2周可从外周血液白细胞中检出CAVDNA,在第3周时达到最高峰,然后逐渐下降,第6周时检出率仅为6.3%(3/48),第7周以后均未能从血液白细胞中检测到CAVDNA;人工感染后第2~12周均能从骨髓、胸腺、脾、肾、肝和腔上囊等组织检出CAVDNA,其中以骨髓和胸腺的检出率最高(85.0%),其次是脾(80.0%)、肾和肝(60.0%),腔上囊最低(25.0%),从12周以后上述几种组织中再未检测到CAVDNA。并从PCR检测结果为阳性的组织中也分离到CAV。 相似文献
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通过静脉注射方法,研究了大肠埃希氏菌内毒素(ET)对山羊肝线粒体膜损伤过程中,膜泵分子活性的变化及山莨菪碱(6542)的保护效应。结果,ET处理组Na+K+ATPase,Ca2+ATPase和Mg2+ATPase活性在5h和12h均低于对照组和6542处理组(P<0.05,P<0.01);6542处理组3种ATPase活性均高于对照组,除5hNa+K+ATPase,Ca2+ATPase差异显著(P<0.05)外,其余与对照组无显著性差异(P>0.05)。结果提示,ET具有诱导线粒体膜泵分子3种ATPase活性降低的效应,而6542有明显保护膜泵分子活性的作用。 相似文献
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用免疫组化ABC法对鸡出壳前17、20胚龄和出壳后5、10、15日龄的端脑内生长相关蛋白(GAP43)免疫反应神经纤维及终末分布和发育状况进行了研究。结果表明:GAP43在鸡出壳前17、20胚龄和出壳后5日龄时其分布仅局限在新纹状体、背髓板和旧纹状体,至10、15日龄时分布范围迅速扩大,在端脑前部的许多脑区和端脑内侧部的海马及隔核出现GAP43阳性神经纤维;从17胚龄到15日龄的发育过程中,GAP43阳性神经纤维密度分别呈现“低高低”和“低高保持不变”的变化规律。 相似文献
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将北京地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 分离株BJ2 和BJ4 的ORF 7 及部分3’端非编码区( UTR) 的RTPCR 扩增产物克隆连接于p GEMTeasy 质粒载体上,重组质粒经EcoR Ⅰ酶切鉴定后进行了双链测序。测定的基因序列与欧美标准毒株已知序列比较发现,BJ2 和BJ4 株与美洲VR2332 株非常接近,在其长度为555 bp 的cDNA 序列中,仅与VR2332 株分别相差1 和2 个核苷酸,其中ORF 7 的核苷酸序列与VR2332 株同源性分别高达100 % 和99 .46 % ,其推导的氨基酸序列与VR2332 株同源性分别为100 % 和99 .25 % ,3’UTR 则完全相同;而与欧洲LV 株则有明显差异,其核苷酸序列同源性仅为68 .00 % 和67 .00 % ,推测的氨基酸序列同源性仅有65 .00 % 和64 .00 % ,且BJ2 和BJ4 株与LV 株相比缺失了KKSTAPM 和ASQG 两段氨基酸序列,而3’UTR 则比LV 株多出38 nt 的一段特征性核苷酸序列。序列分析结果表明,BJ2 和BJ4 株属于同一基因型,且具有VR2332 株的基因特点 相似文献
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用建立的斑点免疫金银染色(DotIGSS)法检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)抗原,确定兔抗IBV血清工作浓度为1∶400,SPA胶体金探针的工作浓度为1∶80,该法对纯化IBV抗原的最低检出量为0.4314ng/点。用DotIGSS与斑点酶联免疫吸附试验(DotELISA)同时检测15只人工感染IBV鸡的气管、肺、肾病料,IBV阳性检出率均为100%;对32份疑似IBV感染鸡病料检测,IBV阳性检出率分别为34.5%和31.0%,阳性符合率为93.3%(P>0.05)。 相似文献
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在用纯化3代的猫肾原代细胞(FKC)和犬肾原代细胞(CKC)皮下接种裸鼠无致癌致瘤性,以人类子宫颈癌细胞系(Hela)超二倍体KB株、X株及超二倍体和亚四倍体NM20/X株皮下接种裸鼠产生进行性恶性肿瘤比率分别为10/10,25/25和5/5的前提下,非洲绿猴肾细胞系亚二倍体(Vero2)JC株5~19代和超二倍体YA株12~18代分别皮下接种20和10只裸鼠,均未产生肿瘤,恒河猴肾细胞系亚四倍体(MA104)JC株4代皮下接种5只裸鼠亦未产生肿瘤。不同株的Hela和地鼠肾细胞系(BHK21)在3.3g/L琼脂中均具有抛锚独立生长特性,并在终浓度3.125~200mg/mL植物凝集素(PHA)作用下出现凝集现象,而FKC、CKC及Vero2细胞系JC株、YA株既不具有抛锚独立生长特性,在不同浓度PHA作用下也不发生凝集,符合非肿瘤源性细胞的特性。因此,Vero2细胞系JC株可用作病毒疫苗毒株的传代培养,而Vero2细胞系YA株和MA104细胞系JC株则不适宜。 相似文献
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从贵州省出现产蛋下降等症状的鸡群中分离出1株病毒,命名为HS1。该病毒对鸭胚致死率达556%~667%;在尿囊液中产生高效价的红细胞凝集素,第7代鸭胚尿囊液的血凝效价达到215~18;在DEF单层细胞上生长良好,并引起明显的细胞病变,感染细胞的核内观察到嗜碱性包涵体;将分离毒株回归蛋用鸡复制出与自然病例相类似的临床症状,全部感染鸡都产生EDS血清抗体;病毒呈球形粒子,直径70~80nm,无囊膜,对氯仿、乙醚不敏感;能凝集鸡、鸭、鹅的红细胞,不凝集哺乳动物的红细胞;病毒核酸类型是DNA,不分节段,分子含有336kb。在交叉血细胞凝集抑制试验中,分离毒株对红细胞的凝集特性能够被AV127超免疫血清所抑制,而不与新城疫阳性血清、正常健康鸡血清发生交叉反应;在病毒中和试验中,HS1与AV127毒株能够发生交叉中和反应,显示它们具有相同的抗原关系。根据对病毒分离株的致病性、血凝谱、理化特性和血清学关系的鉴定,证明从贵州分离的HS1与国际标准毒AV127属于同一血清型,是1株EDS病毒。 相似文献
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