昆明白小鼠胚胎生殖细胞的分离与培养

以昆明白品系小鼠胎儿生殖嵴为材料,以不同的培养液分离培养胚胎生殖细胞(EGcells),发现小鼠胎儿肝细胞条件培养液的效果好于未添加白血病抑制因子(LIF)的基础培养液,而差于添加了1 000 IU/mL LIF的基础培养液。同时,试验对比了从不同胎龄胎儿分离培养原始生殖细胞(PGCs)的情况,鉴定了EG细胞的生物学特性;EG细胞经体外培养,可以分化为神经样细胞、上皮样细胞和简单类胚体。     

青蒿浸膏对昆明小鼠和Wistar大鼠的急性毒性试验

青蒿浸膏为青蒿素提取过程中的初提物,它可以提高动物生长性能和机体免疫力,有抗鸡球虫、杀灭纤毛虫等功效,在畜牧养殖上有广泛的应用前景,然而其毒性大小尚未见报道。本试验采用Bliss法设计,分别对昆明小鼠和Wistar大鼠单次灌胃青蒿浸膏(青蒿素的质量分数为170 g/kg±10 g/kg),测定它对昆明小鼠和Wistar大鼠的半数致死量(LD50)及其95%可信限,分别观察7 d内昆明小鼠和Wistar大鼠的毒性反应和死亡情况,对昆明小鼠和Wistar大鼠分别进行大体解剖和组织病理学检查。结果,各剂量组小鼠均未出现明显的中毒症状,自由活动正常,饮食饮水正常,且无死亡个体;各剂量组雌、雄小鼠的体重也没有显著变化。与小鼠不同,大鼠毒性症状随青蒿浸膏的剂量增加而逐渐加重,4120 mg/kg剂量组仅见自发活动减少;6 460mg/kg和8 080 mg/kg组可见少量个体震颤、强制性-阵挛性抽搐,死亡等症状;10 100 mg/kg剂量组小鼠可见震颤、强制性-阵挛性抽搐、角弓反张、死亡等症状。Wistar大鼠的LD50为7 360 mg/kg,95%的可信限为6 256.38~8 658.82 mg/kg。上述试验结果表明,青蒿浸膏属于无毒物质。     

猪圆环病毒2型感染昆明小鼠模型的建立

将SPF级昆明小鼠随机分为3组,即一次攻毒组(S组)12只、连续攻毒组(M组)3只和对照组(C组)12只.S组和C组小鼠于第1d分别接种RPMI1640培养液和猪圆环病毒2型(PCV2)细胞培养毒,M组小鼠于第1、7、14、28、35d连续进行PCV2接种.S组和C组小鼠分别在接种后第7、14、28和42d各处死3只,M组小鼠在接种后第42d全部处死,分析其增重、病毒组织分布、抗体水平、病理组织学变化.结果,C组小鼠体重增长速率大于S组和M组,S组又明显高于M组;S组和M组小鼠体内存在病毒复制,而C组小鼠体内无病毒复制;S组和M组小鼠均产生PCV2抗体,但M组小鼠抗体水平明显高于S组,C组小鼠未检测到PCV2抗体;S组和M组小鼠有明显的病理损伤,其中淋巴结损伤最严重,C组未发现病理损伤.结果表明PCV2可以成功感染SPF昆明小鼠.     

感染旋毛虫昆明小鼠心肌中的脂肪酸组分及其相对含量的变化

为探讨旋毛虫致心肌炎的发生机制以及宿主抗旋毛虫感染的机制,分别取感染旋毛虫5、7、35 d后的小鼠心肌和健康小鼠心肌组织,利用AIB法提取心肌中总脂类,并经14%三氟化硼甲醇溶液进行甲酯化,做GC-MS分析.结果显示,感染旋毛虫的小鼠与健康小鼠心肌中主要脂肪酸的含量存在明显差异(P＜0.05).感染后的心肌中多不饱和脂肪酸及总n-6脂肪酸明显减少,主要是亚油酸的含量明显减少,由正常的17.23%±2.10%下降至9.21%±1.25%(P＜0.05).饱和脂肪酸则高于健康心肌的36.93%±2.53%,主要是因棕榈酸和硬脂酸的含量增加所致.受感染的心肌中C18:2和C20:4随着感染时间的延长先减少后恢复正常,而C22:5和C22:6的含量则先增加后降至正常水平.     

昆明的黑夜与白天

看过了凤凰古镇最繁华妖娆以及最安详宁静的夜晚之后,回到客栈睡下,已是凌晨两点。本来还打算第二日早起,一睹她的被清晨薄雾面纱一般笼罩的素洁淡雅之容,可是由于旅途劳顿,实在困顿不堪,便一觉睡到大天亮。十一点起床之后,出去吃过一碗酸辣粉,回客栈收拾好行囊就悄然离去,正如我那时静悄悄的来。来过又走了,而风景和看风景的心情,却已深深镌刻于心底某个角落,在回忆的土壤里暗自滋长。     

小鼠卵巢组织玻璃化冷冻保存的研究

为了探索小鼠卵巢组织玻璃化冷冻保存的有效方法,以5周龄昆明小白鼠的卵巢为材料,分别采用不同的冷冻保护剂、平衡时间、冷冻载体和组织块大小对小鼠卵巢组织进行玻璃化冷冻保存。玻璃化冷冻保存的基本程序:取小白鼠卵巢,切块,玻璃化冷冻。玻璃化冷冻效果评判的方法是解冻玻璃化冷冻保存的卵巢组织块,收集其中的未成熟卵,体外培养和体外受精,观察其体外成熟、体外受精及所形成胚胎的发育能力。结果表明,小鼠卵巢组织玻璃化冷冻保存以卵巢组织块大小为1mm3、以半麦管作为载体、在75mL/LED(EG+DMSO)中平衡15min、以用150mL/L ED玻璃化冷冻液处理3min的方法,冷冻保存效果最好。     

中国东南亚研究会第八届年会在昆明召开

2011年1月5日-8日,由中国东南亚研究会、云南大学共同主办,云南大学国际关系研究院承办的“中国东南亚研究会第八届年会暨东南亚地区研究学术研讨会”在云南大学召开,来自北京大学、厦门大学、中山大学、暨南大学、南京大学、郑州大学、云南大学、国防大学、解放军外国语学院、解放军南京国际关系学院、广西大学、广西民族大学、云南民族大学、云南师范大学等十多所大学以及中国国际友好联络会和平与发展研究中心、中国社科院亚太研究所、中国现代国际关系研究院、上海国际问题研究院、云南省社科院、广西省社科院、湖南省社科院等多家科研机构的代表约200人参加了此次年会及研讨会,会议代表提交论文120余篇,许多论文具有较高的理论水平及应用价值,反映了当前中国东南亚研究的最新成果。     

第四届泰学研究国际会议将在昆明举行

根据1987年7月在澳大利亚堪培拉举行的第三届泰学研究国际会议的决定,第四届泰学研究国际会议将于1990年5月在我国昆明市举行。 泰学研究国际会议是由泰国学者发起的,其目的是加强世界各国对泰国的了解,增进各国泰学研究者之间的交流,推动和促进世界范围的泰学研究。泰学研究包括对泰国及泰语系民族的政治、经济、历史、文化、民族、宗教、社会等各个领域的研究。第二届,第三届泰学研究国际会议都有我国学者     

小鼠孤雌胚2-细胞阻滞的研究

为探讨小鼠孤雌胚2-细胞阻滞的机制,本试验以昆明小鼠为研究对象,通过输卵管上皮细胞和垂体细胞作为饲养层培养小鼠孤雌胚胎,分析其作用机理。小鼠卵母细胞通过70mL/L乙醇激活5min,再用2mmol/L 6-DMAP、5μg/mL CB激活3h后,分别在不同饲养层的KSOM培养液中进行培养,观察并比较各培养条件下孤雌胚胎的发育情况。结果,培养至第24小时,各组无显著差异(P>0.05),都有较高卵裂率。培养至第48小时,用两种饲养层细胞培养的孤雌胚胎4-细胞～8-细胞发育效果好,与用单独一种饲养层细胞培养相比,差异显著(P<0.05),与对照组相比,差异极显著(P<0.01);发育至桑囊胚的比例为49.4%(42/85)(P<0.01)。结果表明,含有输卵管上皮细胞和垂体细胞的KSOM培养液可有效促进小鼠孤雌胚胎的发育并通过2-细胞阻滞(通过2-细胞阻滞率为74.1%),并可进一步提高其发育率(桑囊胚率为49.4%)。     

杜仲对促进小鼠胶原蛋白合成的研究

用昆明系小白鼠,分幼龄组和老龄组,通过运动和运动加杜仲给药与对照组比较,分别测定肌肉、骨骼、心、肺、皮肤、血液、尿液中羟脯氨酸代谢变化;同时采用透射电子显微镜对两组小鼠骨骼肌超微结构进行了观察.结果表明,给药组小鼠肌肉、骨骼、皮肤、心、肺等羟脯氨酸合成均显著增加,但老龄组与幼龄组相比增势较低;另外运动本身也有一定的促进胶原蛋白合成能力,但没有给药组明显.超微结构观察显示,给药组与对照组相比,肌纤维间疏松结缔组织发达,其中胶原纤维和成纤维细胞数量明显增多,且胶原纤维粗而长,肌纤维中线粒体和肌质网也十分发达;这些超微结构的变化特点还表现出给药组比单纯运动组明显,而运动组又比对照组明显.     

二甲苯对小鼠卵巢组织损伤的研究

为了研究二甲苯对小鼠卵巢组织的损伤作用,以健康成年SD雌性小鼠作为实验动物,分3个试验组(低、中、高剂量组)和1个对照组,试验组腹腔注射不同剂量(按体重0.125、0.25、0.5mL/kg)的二甲苯,对照组每天腹腔注射生理盐水。采用石蜡切片和HE染色技术观察二甲苯染毒后小鼠卵巢组织结构的变化;采用分光光度法测定小鼠卵巢组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)含量。结果表明,二甲苯染毒导致小鼠卵巢发生萎缩,中、高剂量组的卵泡内都有黑色颗粒,且随二甲苯剂量的增加其病理变化更加明显;中、高剂量组卵巢组织的SOD活性与对照组相比显著下降,而MDA含量显著升高。证实,二甲苯对卵巢组织具有明显的损伤作用,且表现出明显的剂量效应。     

安全环境研究需要注意的两个问题

对中国所处国际环境保持清醒的认识 ,既意义重大 ,亦殊为不易。因为“9·1 1”以来世界形势的变化本就错综复杂 ,无抽丝剥茧之功根本就难窥其“真实” ;而要以“我”为主对本已复杂的国际环境作出判断 ,更会因每个人观察角度、分析方法的差异而见仁见智。这也是目前国内学术界对中国面临国际环境的判断存有较大争议的原因所在。为此 ,《现代国际关系》专家论坛于 1 1月 5日以“如何评估中国面临的国际环境”为主题 ,举行为时 1天的研讨会 ,来自京城的国际问题知名学者、专家围绕这一重大问题各叙己见 ,热烈交锋 ,予人以诸多启发。现将之分别加以整理刊登 ,以飨读者。     

劳动者需要的主旋律

正五一节前,全国五一劳动奖章获得者、著名词作家宋青松先生微信给笔者发来其刚与全国工会系统著名曲作家修骏先生,以及著名青年歌唱家汤非三人倾力合作打造的反映劳模精神讴歌劳动的新歌《劳动模范》试唱音频。细细品听后认为,无论词和曲以及演唱,给人耳目一新,不愧为新时代鲜见的主旋律歌曲的精品佳作。从此歌反映出来的旋律看,长期在工会系统工作的作曲家修骏先生很好地把握了宋青松先生歌词里所要体现出来的主题思想,在歌唱家汤     

犬瘟热病毒昆明分离株的生物学特性

从1只曾接种过犬瘟热弱毒疫苗但又发病的宠物犬血样中分离到1株犬瘟热病毒(CDV),命名为CDV昆明分离株(CDV-KM)。该毒株可使Vero细胞产生以细胞融合及空泡化为特征的细胞病变,病毒效价为105.8TCID50/mL或1.76×106PFU/mL,并能在鸡胚绒毛尿囊膜、鸡胚成纤维细胞及MDCK细胞上增殖。微量中和试验结果发现,自制的犬抗CDV-KM株同份血清对CDV-KM株与参考毒株CDV-Onder-stepoort的中和抗体效价即半数保护量分别为1:142和1:132,显示二者未存在明显的中和表位差异。RT-PCR、RFLP和DNA测序分析结果显示,使用参照组合引物CDV-P2/P3/P4扩增,均可得到被认为指示弱毒株特征的177bp核酸片段;而H蛋白全长基因扩增产物未见能指示野生毒株特征的NdeⅠ和SspⅠ酶切位点;H蛋白基因与Onderstepoort小空斑变异株、鸡胚适应株和大空斑变异株的核酸序列同源性分别为98.84%、98.90%和100%。表明该分离株属于疫苗基因群。     

昆明－河内－海防经济带建设研究中的交通问题思考

交通建设在昆明—河内—海防经济带规划研究中占有重要位置。没有便利通畅的交通设施作为基础和保障,拟议中的各项经济活动和项目都不能顺利开展,原料运不进,产品运不出,旅游受影响。因此在整个经济带规划研究中要特别注意交通问题。     

不同发育时期小鼠腓肠肌Myostatin表达的研究

肌生成抑制素(myostatin,MSTN)是肌肉生长发育的反向调节因子,在骨骼肌中大量表达,其在成肌细胞的增殖、分化和融合过程当中扮演着重要的调控作用。本试验通过HE染色、免疫组织化学和PCR等技术研究了各个发育阶段小鼠腓肠肌中Myostatin的定位及其表达差异。结果,Myostatin在幼年、性成熟、体成熟和老年4个时期的小鼠腓肠肌中均有表达,且表达量存在明显的差异,Myostatin在腓肠肌中表达量最高的是在体成熟时期,最低的是在幼年时期,而在性成熟与老年时期的表达量则低于体成熟时期的小鼠。上述结果表明,Myostatin基因可能参与了小鼠骨骼肌的生长发育,这为提高肉用家畜产肉率和防治肌肉疾病提供了理论基础。     

阿维菌素对小鼠初级精母细胞致突变性的研究

以小鼠初级精母细胞染色体畸变分析方法研究阿维菌素(Avermectin)对小鼠雄性生殖细胞的诱变性.将昆明系雄性小鼠50只随机分为5组,每组10只,第1-3组为阿维菌素高、中和低剂量组,分别以9.60、4.80和1.92 mg/kg体重(相当于1/2、1/4和1/10 LD50)剂量的阿维菌素与1,2-丙二醇溶液1次灌胃;第4组为阳性对照组,以60 mg/kg体重剂量的环磷酰胺1次腹腔注射;第5组为阴性对照组,仅灌服溶剂.于给药后第12 d和13 d每组取5只小鼠,每只按2mg/kg体重剂量腹腔注射秋水仙素2 h后取材.试验结果表明,无论给药后第12 d和13 d,环磷酰胺阳性对照组与相应阴性对照组相比,其差异均极显著(P＜0.01),阿维菌素高、中和低3个剂量组与相应阴性对照组相比,其差异均不显著(P＞0.05),证明阿维菌素对初级精母细胞不具诱变性.     

阿维菌素对小鼠次级精母细胞致突变性的研究

将昆明系雄性小鼠随机分为 5组 ,每组 10只 ,第 1～ 3组为阿维菌素 (Avermectin)高、中和低剂量组 ,分别按体重 9.6 0、4 .80和 1.92mg/kg(相当于 1/ 2、1/ 4和 1/ 10LD50 )剂量灌服阿维菌素 1,2 丙二醇溶液 1次 ;第 4组为阳性对照组 ,以 2mg/kg剂量的秋水仙素 (colchicine)给小鼠 1次腹腔注射 ;第 5组为阴性对照组 ,给小鼠灌服溶剂。于给药后第 6和 14h ,每次每组各处死 5只小鼠 ,取其双侧睾丸 ,分离次级精母细胞。结果 ,不同时间取材的阳性对照组与相应阴性对照组相比 ,差异均极显著 (P <0 .0 1) ,不同时间取材的阿维菌素高、中和低 3个剂量组与相应阴性对照组相比较 ,差异均不显著 (P >0 .0 5 )。研究表明 ,阿维菌素对次级精母细胞不具非整倍体致突变作用     

捕食性真菌Duddingtonia flagrans胞外蛋白质的生化性质研究

为纯化捕食性真菌Duddingtonia flagrans分泌的胞外蛋白酶并研究其生化性质,利用枸橼酸液体培养基对D.flagrans进行培养,以灭菌的马圆线虫进行诱导,之后用盐析法粗提培养液,再使用Sephadex G-100分子筛进行层析纯化,最后对纯化物进行最适pH、温度及蛋白酶抑制剂的抑制试验。结果显示,被纯化出的3种胞外蛋白酶的分子质量分别为38、63、19ku;在pH 6.0~7.0、45~55℃条件下,其活性最高;它们都对酶抑制剂菲罗啉和抑肽素非常敏感,其中38ku的蛋白酶对抑制剂PMSF也很敏感。上述结果为进一步研究捕食性真菌分泌的胞外蛋白酶在杀线虫过程中的作用以及今后在生产中的具体应用提供了重要参考依据。     

一头需要放养的猪

话说我闷屋里好些天了,天亮起来,又黑下去,亮起来,又黑下去,还曾跟许多个凌晨的蓝光打过招呼,如此,也该成仙了吧,可惜没有,眼看着那苗上,我一直都是一头仰着脑袋左看右看上看下的猪——春末夏初的南京城太诱人了,一株株几近成妖的梧桐、香椿,空气里绿叶的清香,一阵忽而闪过会把你的心思勾走好久的花香,一只只修了毛会把你弄得心神荡漾的泰迪,我这是有多贱哪!