幼鹅暴发多杀性巴氏杆菌病

黑龙江省宁安市某养鹅户饲养鹅 2 5 6只 ,饲养至 41日龄时开始发病 ,3ｄ内死亡 47只 ,死亡率为 18.4% ,经实验室诊断为幼鹅多杀性巴氏杆菌病。临床症状　病鹅精神萎靡 ,羽毛蓬松 ,闭目嗜睡 ,常缩颈蹲伏于地 ,食欲废绝 ;口、鼻流粘液 ,呼吸困难 ;下痢、排灰绿色稀便并混有粘液 ;症状出现后 1— 3ｄ抽搐死亡。剖检变化　气管粘膜充血、条状出血 ;肺暗红色 ,有粟粒大出血点 ;心内、外膜有针尖大至粟粒大出血点 ;肝、脾肿胀 ;肾充血、出血 ;胃、肠粘膜充血和出血 ,有大量粘液 ;肠道呈出血性炎症病变。实验室检验　镜检 :取肝、心血病料抹片 ,革…     

猫多杀性巴氏杆菌病诊断报告

1986年3月,我们在西安市兽医院工作期间遇到了以呕吐、腹泻、发热、发病急、死亡率较高为特征的猫病。经实验室综合诊断为猫多杀性巴氏杆菌病: (一)流行情况 对西安地区526例猫的病例调查表明:本病冬未至春季多发,12～4月份的发病率占全年的58.4％以上,其中尤以3月份的发病率最高,达11.9％;各种年龄、性别的猫都有发生,但以幼龄猫多发,发病率达73.2％,成年猫占26.8％。死亡率高。     

禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子的研究

禽多杀性巴氏杆菌交叉保护因子存在活鸡体培养物中。本文用鸡 活体培养禽多杀性巴氏杆菌C_(48-1)强毒株(血清1型),在菌血症时采血经 差速离心收获细菌,制成的死菌苗对异型菌株C_(44-42)(血清3型)和P_(1059) (血清3型)攻毒产生交叉保护作用。而41℃肉汤培养的C_(48-1)菌株则不具有这种交叉保护作用。 活体培养的细菌经冻融、溶菌酶、透明质酸酶、DN_(ase)、EDTA、Triton X-100等处理溶解后,细菌溶解物对异型菌株保护率达100％,而其溶解物的上清和沉淀时异型菌株保护率也达66.7％及80％。而溶解物沉淀经蛋白酶处理后,则失去了交叉保护能力,说明产生交叉保护作用的交叉保护因子(CPF)可能是蛋白质。 生化分析表明,活体培养的禽多杀性巴氏杆菌和肉汤培养的禽多杀性巴氏杆菌其物质含量是不同的。活体培养的细菌溶解物含CPF,其蛋白与糖含量比(P/C)为3.97:1,而肉汤培养的细菌P/C为1.01:1。SDS-PAGE分析表明,有一分子量在17200～30000之间的蛋白成分仅存在于活体培养的细菌中,经测算其分子量大约为19320。这些研究表明,分子量为19320的蛋白质可能就是存在于活体培养物中的交叉保护因子。     

一种培养多杀性巴氏杆菌的新方法

巴氏杆菌在组织涂片中,用美蓝、瑞特氏或姬姆萨染色呈两极浓染,但人工培养后这种现象即消失。因此人们为了观察菌体两极浓染以鉴定巴氏杆菌,长期以来都是将该菌接种试验动物,再取其病料涂片检查。这种方法费时且不经济,迄今国内外亦无新方法报道。我们将多杀性巴氏杆菌接种到脱纤血内培养,用这种培养物涂片染色镜检,获得满意效果。     

禽多杀性巴氏杆菌亚单位成分的免疫原性研究

禽多杀性巴氏杆菌是禽霍乱的病原,该病对养禽业危害较大,目前尚无理想的免疫制剂。学者们在筛选弱毒苗和研制灭能苗的同时,在研制禽多杀性巴氏杆菌亚单位苗方面作了一些尝试,为禽霍乱的免疫研究开辟了一条新路。本文就其亚单位成分的免疫原性、诱导产生保护作用及血清学反应等加以阐述。     

猪源多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定

2014年3月至2015年2月从来源于全国15个省份的180份临床猪肺组织样品中共分离到71株多杀性巴氏杆菌,分离率为39.4%。利用PCR技术对所分离的多杀性巴氏杆菌进行荚膜血清型鉴定,其中A型菌株41株(占57.8%),D型菌株27株(占38.0%),F型菌株3株(占4.2%),71株多杀性巴氏杆菌中包括1株D型产毒素多杀性巴氏杆菌(占1.4%),说明当前在我国猪群中流行的多杀性巴氏杆菌主要为A型和D型菌株。应用PCR检测多杀性巴氏杆菌23种毒力基因,结果显示:多杀性巴氏杆菌毒力基因的数量大多分布在15~19之间,平均携带个数为17.5个;23种毒力基因中,ptfA,fimA,hsf-2,sodA,sodC,ompA,ompH,oma87,plpB,exbB,tonB,Fur,hgbB的检出率在90%以上,而toxA基因的检出率极低(1.4%),并且在猪源多杀性巴氏杆菌中未检测到t bpA的存在;分析毒力基因在不同血清型菌株中的携带及分布情况发现,A型的平均毒力基因携带数为18.2个,D型为16.4个;不同毒力基因在不同血清型的多杀性巴氏杆菌中的分布也存在一定的差异,其中唾液酸代谢酶基因nanB、透明质酸酶基因pmHAS及黏附基因tadD和pfhA在A型多杀性巴氏杆菌中的检出率高于其在D型多杀性巴氏杆菌中的检出率(P0.01);而黏附基因hsf-1在D型多杀性巴氏杆菌的检出率显著高于其在A型多杀性巴氏杆菌中的检出率(P0.01)。对所分离菌株的16SrRNA基因进行测序,并与NCBI上公布的10株多杀性巴氏杆菌16S rRNA基因进行进化树分析,结果显示:71株多杀性巴氏杆菌主要分为2个亚群,亚群Ⅰ和HB03及3480的亲缘关系较近,而亚群Ⅱ则与HN06、Pm70、36950等菌株的亲缘关系较近;遗传进化的结果说明,多杀性巴氏杆菌的亲缘关系与其来源、血清型及其导致的疾病种类并没有表现出特定的亲缘关系。     

西藏八一镇雏鸭多杀性巴氏杆菌病的调查

西藏八一镇雏鸭多杀性巴氏杆菌病的调查佘永新（西藏农牧学院林芝８６００００）近年来，随着西藏地区养禽业的迅速发展，禽病的流行亦日趋严重，其中以多杀性巴氏杆菌引起的禽霍乱为危害当地养育业的主要传染病之一。其特点是具有高度传染性和死亡率，常呈毁灭性爆发流行...     

四川省畜禽多杀性巴氏杆菌菌体抗原的血清学鉴定

1955～1961年,Carter氏用间接血球凝集法,根据菌株的不同荚膜物质,将多杀性巴氏杆菌分为A、B、D、E四型。1961年,Namioka和Murata氏以1N盐酸处理细菌,制成菌体抗原,用试管凝集法,将菌体抗原分为不同的1、2、3……12种变异群,并与Carte氏的荚膜群相结合,形成15个血清型。为了查明我省畜禽多杀性巴氏杆菌的血清学型别,我们在荚膜抗原分群的基础上,对从416株中选出的有代表性的171株菌,采用Namioka和Murata氏叙述过的分型法,进行了菌体抗原的血清学鉴定。     

水貂A型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及免疫原性研究

从送检的疑似多杀性巴氏杆菌感染的水貂中分离到1株病原菌,经培养特性、形态观察、生化试验、PCR鉴定等,确定RC1108菌株为血清A型多杀性巴氏杆菌。水貂回归试验表明,该菌株毒力较强,最小致死剂量为2.5×10~8CFU。制备的灭活疫苗在含菌量为1.5×10~9 CFU/m L时,即可在免疫后第21天提供保护。表明,该分离菌株可以作为水貂血清A型多杀性巴氏杆菌疫苗的候选株。     

256株鸭源多杀性巴氏杆菌血清学鉴定及病原特性研究

从四川省不同地区分离到２５６株鸭源多杀性巴氏杆菌，采用Ｃａｒｔｅｒ荚膜群鉴定法和Ｈｅｄｄｌｅｓｔｏｎ热稳定抗原鉴定法对其进行了血清学鉴定，并对病原的部分特性进行了研究。结果表明，有２５４株为荚膜Ａ群菌，占９９．２２％（２５４／２５６），其中５Ａ型占９５．７％（２４５／２５６），８Ａ型占１．９５％（５／２５６），９Ａ型占１．５６％（４／２５６），未定型占０．７８％（２／２５６）。测定了鸭巴氏杆菌对药物的敏感性。分离鉴定的鸭巴氏杆菌具有良好的免疫原性     

猪多杀性巴氏杆菌PCR检测方法的建立及其应用

设计了 1对用以检测猪多杀性巴氏杆菌的引物。对临床送检的有肺炎症状或萎缩性鼻炎症状的发病猪的病料进行细菌培养 ,然后挑菌做PCR ,同时对可疑菌落纯化培养后做生化鉴定。结果 ,从不同省 (市 )的送检病料中分离鉴定出 6 6株多杀性巴氏杆菌 ,PCR检测结果与生化鉴定结果完全符合 ;该引物对其他 6种猪的常见呼吸道病原菌的扩增结果均为阴性 ;该PCR检测方法能检出CFU为 10 3/mL的巴氏杆菌模板。     

应用ELISA检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体的动态变化

应用ＥＬＩＳＡ检测鸭抗多杀性巴氏杆菌抗体的动态变化黄忠黄引贤１）杜伟贤赵心贤伍惠卿（广东省农业科学院兽医研究所广州５１０６４０）鸭巴氏杆菌病是鸭的一种急性、败血性传染病。由于预防本病的疫苗免疫效果不同，许多种鸭场注射疫苗后仍有该病发生，给防治本病带来...     

多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达

为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理,采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51-17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pm9616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因,并对其进行序列分析。将C51-17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中,将重组表达载体pET30a-prfA转化到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blot分析。结果显示,这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95.6%~100%,在氨基酸水平上的同源性为98.9%~100%。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45.6ku,与预期的大小一致,以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应,具有良好的反应原性。     

兔F型多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及其致病性

对从山东某獭兔养殖场病死仔兔肺中分离的1株疑为巴氏杆菌菌株进行了菌落形态学观察及培养特性、革兰氏染色、生化反应、仔兔致病性回归试验、小鼠毒力试验,并采用PCR方法对该分离株进行了种属及荚膜血清型鉴定。结果显示,该分离菌株革兰氏染色阴性,生化试验及PCR鉴定结果显示为F型多杀性巴氏杆菌,能引起獭兔仔兔肺出血、坏死,并致部分仔兔死亡。表明该分离菌株为比较少见的兔F型多杀性巴氏杆菌。     

多杀性巴氏杆菌对一些常用抗菌药物的敏感性调查

多杀性巴氏杆菌的耐药性,系统的调查报道国内少见。我们将1978～1980年从广西各地不同畜禽病例中分离到的34个菌株和其它来源的7个菌株对14种常用抗菌药物敏感性进行了     

鸭源大肠杆菌与多杀性巴氏杆菌融合菌株DB4免疫原性的研究

本研究旨在评价融合菌株DB4的免疫原性以及对亲本大肠杆菌ZYD2(O78)株、亲本多杀性巴氏杆菌YB2(5∶A)株的攻毒保护力。制作DB4蜂胶灭活疫苗分为一免组、二免组对鸭进行免疫,对两组鸭的血清抗体效价、IL-4和IFN-γ水平、外周血淋巴细胞增殖活性、白细胞吞噬活性进行测定,并于首免后2周以大肠杆菌ZYD2(O78)、多杀性巴氏杆菌YB2(5∶A)攻毒。结果显示,DB4能够诱导鸭产生两种亲本抗体,效价达1∶29、1∶28,同时能刺激淋巴细胞增殖活性和白细胞吞噬活性,免疫后刺激指数增加3倍,与对照组差异显著(P0.05),白细胞吞噬率升高30%,血清中IL-4和IFN-γ含量分别高于对照组33.5、12.5 ng/L,可抵抗亲本菌株的攻击,保护率80%,表明DB4具有良好的免疫原性,可应用于研制大肠杆菌和多杀性巴氏杆菌二联疫苗。     

28株禽源多杀性巴氏杆菌热浸抗原的分型研究

多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)是禽出血性败血症(即禽霍乱)的病原体,其抗原结构甚为复杂。中国兽药监察所以及河北、四川、吉林、广东等地对我国禽源多杀性巴氏杆菌的K、O抗原进行了大量的分析研究,确认我国各地绝大多数的禽源多杀性巴氏杆菌的O抗原为5,K抗原为A,( 5:A),但利用琼脂扩散法(Agar diffusion method)鉴定禽源多杀性巴氏杆菌的热浸抗原的分析研究,报道较少。我们参考Heddleston的研究方法,对28株禽源多杀性巴氏杆菌进行了琼扩分型鉴定,以了解我国禽源多杀性巴氏杆菌的血清型,为进一步研究各种分型方法的关系以及为研制理想的禽霍乱菌苗提供理论根据。     

两株不同血清型禽源多杀性巴氏杆菌的理化特性研究

禽源多杀性巴氏杆菌Ｐ１０５９（８∶Ａ 型） 和Ｃ４８１（５∶Ａ 型） 对营养的需要较高,在一般培养基上生长不良,相比之下,Ｃ４８１比Ｐ１０５９ 生长更差,但在胰蛋白胨肉汤和加５ ｍ Ｌ／Ｌ 血清的普通培养基中两株菌均生长丰盛;两株菌的生长曲线显示,Ｃ４８１在对数生长期的繁殖速度较快,最高菌数略低,但衰落期细菌死亡速度较慢;对培养基中ＮａＣｌ 含量的要求,Ｃ４８１ 为０ ～２ ．７ ％ ,Ｐ１０５９ 为０ ．９ ％ ～２ ．１ ％ ;对ｐＨ 的要求,Ｃ４８１ 为７ ．４ ～７ ．８ ,Ｐ１０５９ 为７ ．０ ～７ ．４ ;两株细菌用小白鼠连续传５ 代复壮后,对小白鼠的最小致死量（ ＭＬＤ） ,Ｃ４８１为６ 个菌,Ｐ１０５９ 为９ 个菌。     

间接血凝试验检测鸡血清中多杀性巴氏杆菌抗体

近几年来,国内外对禽多杀性巴氏杆菌(Pas-teurella multocida)的免疫应答研究表明,体液免疫和细胞免疫在抵抗巴氏杆菌的再感染均有重要的作用。并应用试管凝集反应、间接血凝(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)等检测多杀性巴氏杆菌免疫后鸡和火鸡的血清抗体,并认为此3种方法所检出的抗体滴度与对抗强毒的保护作用一致。本研究优化了检测鸡血清抗体的IHA试验及抗原制备的条件,并比较了IHA滴度与攻毒保护的关系。(一)材料和方法1.菌种:中国兽医药品监察所保藏的C_(48)-1强毒菌株,用前通过小白鼠3代,鸡1代复壮,然后接种于血液马丁肉汤或血液马丁琼脂培养,培养移植不超过3次,菌液10~(-8)稀释0.1ml(含2～     

多重PCR在多杀性巴氏杆菌荚膜定群中的应用

为了修订行业标准《猪巴氏杆菌病诊断技术》(NY/T 564-2002),改进多杀性巴氏杆菌荚膜定群方法,制备了多杀性巴氏杆菌分群抗血清,并建立了多重PCR,对53株菌同时用血凝方法及多重PCR进行定群。经正向间接血凝试验测定,制备的各型血清仅与对应型抗原发生凝集反应,表明血清具有较高的特异性,可作为多杀性巴氏杆菌的荚膜定群抗血清。53株多杀性巴氏杆菌均扩增出了相应的预期片段,PCR结果与Carter氏间接血细胞凝集试验结果相一致。结果表明,可将多重PCR增添至行业标准中,用其代替原有血清学方法进行多杀性巴氏杆菌荚膜定群。