精液和阴道液混合斑中异常B型物质的检验

精液和阴道分泌液混合斑ABO血型的检验多采用中和法与热解离法同时检验，通过两种方法互相印证，有利于正确判定混合斑中的精斑血型。在检验O型或A型阴道分泌液与A型精液的混合斑时，偶而出现异常的B型物质，这一现象在国外已有报道[1、2]。本人在检案中见到三例，现将检验情况报道如下：材料与方法一、混合斑检林本室1984～1993年检验的已确证血型为O型或A型精液和阴道分泌液混合斑擦拭纱布43例。其中O型女子与A型男子的混合斑13例，A型女子与A型男子的混合斑15例，A型女子与O型男子的混合斑9例，O型女子与O型男子的混合斑6例。二、…     

混合斑中女性物质的PCR检验1例

１９９８年９月２７日,海阳大闫家镇村民某某将一１３岁小女孩骗至家中强奸。技术人员在现场提取了一团可疑的卫生纸,其上检出精斑。但犯罪嫌疑人拒不交代罪行,对于现场附有精斑的卫生纸,犯罪嫌疑人称是其与妻子发生性行为时所用。经常规ABO血型检验,受害人和犯罪嫌疑人妻子的血型均为“A”型;犯罪嫌疑人为“O”型,卫生纸上检出精斑且含“A”型物质。利用二步消化法分别将混合斑中的女性物质与精子DNA提取出来,进一步做DNA检验,经HUMTH０１犤AATG犦n、HUMFABP犤AAT犦n、pMCT１１８、apoB位点扩增、电泳、银染,结果…     

根据阴道液中蛋白的SDS-PAGGE谱型鉴定阴道液斑及混合斑

根据阴道液蛋白 SDS-PAGGE 谱型的器官特异性,认定了保存于—30℃、4℃达3年及室温达9年的阴道液斑和保存于室温2个月的混合斑,初步应用于案例鉴定。     

应用Differex~(TM)法提取混合斑中精子DNA

对混合斑中精子的检验,采用传统的Chelex-100两步消化法存在消化时间长、离心洗涤次数不易控制等缺点,一旦操作不当,就会因此而引起DNA混合、损失,导致PCR反应失败。本文应用D ifferexTM系统法,解决了部分混合斑检材的精子DNA提取问题,在实际的案件鉴定中取得了满意的效果。1材料与方法1.1案件检材所用检材系案件鉴定中含有精子的现场提取床单上的混合斑、被害人的短裤、擦拭用的报纸、被害人的阴道及口腔拭子,以及在室温下存放约1年的阴道拭子。1.2 DNA提取方法1.2.1 Chelex-100两步消化法[1]取适量检材剪碎,加入适量TNE,37℃水浴…     

从血液和体液的混合斑中提取血痕血型物质的检验

<正> 根据血液和其它体液(唾液、汗液、精液、阴道分泌物)中分别存在不同的脂溶性或水溶性血型物质.用1:2氯仿-甲醇液从血液与体液的混合斑中提取血痕的血型物质,然后进行血型检验。     

应用抗人精液单克隆抗体检验混合斑中精液成份的ABH血型物质

用本文报道的方法检测了123份混合斑检材（新鲜混合斑60份，陈旧混合斑63份），对保存在一年内的混合斑中精液成份中的血型物质检出率可达100％。     

混合斑的研究进展

混合斑组成复杂,长期以来是法医物证研究的难题之一。混合斑主要分为两类:一是性侵害案件中大量女性阴道上皮细胞混合少量精子;二是普通来源的生物检材之间的混合,如血-血、唾液-血液混合等。近些年来,对混合斑的研究日渐深入,技术层面或理论分析都更加客观和多元化。针对第一类混合斑,出现了荧光/磁性激活、显微操纵、声波差异分离法等分离精子的新技术;第二类混合斑是研究的难点,近年来大规模平行测序、液滴微流控技术、乳液PCR(e PCR)、全基因组扩增等技术的出现,提高了次要成分的检出机率。此外,遗传标记也有相应的发展,传统遗传标记常染色体STR、Y-STR、SNP等检测位点越来越丰富,新兴遗传标记DIP、DIP-STR、SNPSTR、mt DNA-SNP、微单倍型等在混合斑研究中发挥的作用初步显露出来。文章最后涉及混合斑分析理论和计算软件的最新发展。     

有机法分离混合斑中精子

在性犯罪案件中，混合斑检材是常见的重要生物物证，其中精子的个体来源鉴定是案件侦破的关键。长期以来，两步分离法一直作为混合斑中精子分离的通用方法被广泛采用。在实际应用中，第一步消化后的精子一般需要4～6次反复洗涤才能够比较彻底地去除女性DNA成分，这一过程既耗费了大量的时间，而且每多洗一次精子都会有部分丢失。笔者采用有机法分离第一步消化后的精子，减少了洗涤的次数，缩短了分离时间，避免了精子由于多次洗涤造成的丢失。     

混合斑中精斑ABO血型的检验

<正> 1988年,壹岐裕志等报告了用吸附抗α_2-SGP 血清的硝化纤维素膜(NCF)检验混合斑中的精斑 ABO 血型,但耗时。本文作者通过对此方法的改进,采用常彩琴等研制的抗人精特异蛋白血清(anti-human seminalpeculiar protein,ASPP),采用蛋清粘片热解离法检验混合斑中精斑 ABO 血型,耗时短,效果好。现介绍如下。     

应用免疫磁珠分离混合斑中精子

目的探讨应用免疫磁珠法分离精子-上皮细胞混合液中精子的可行性。方法制备不同比例的精子-上皮细胞混合液各15例,分别应用免疫磁珠法及差异裂解法提取精子,经PCR扩增进行DNA-STR分型,比较两者的差异。结果免疫磁珠可以特异性捕获精子,对精子个数为500～2 000/mL的混合斑STR分型成功率(正确分型13个以上,RFU200)为93.33%,差异裂解法为46.67%,两种方法存在明显差异(P0.05)。结论免疫磁珠可有效分离精子和混合斑中其他成分,在精子个数低于2 000个/mL检材中优于差异裂解法。     

混合斑中女性成分鉴定2例

在强奸案件的检验鉴定中,一般只需对载体上(包括受害人阴拭、内裤、及现场提取的物品等)精斑中男性DNA成分与犯罪嫌疑人的血样进行比对,即可做出认定或排除的结论。但在某些特殊情况下,混合斑中女性成分的检验在案件鉴定中也起到很重要的作用。现报道两例如下。1案例材料案例1:     

混合斑中精子细胞分离实验条件探讨

在性犯罪案DNA检验中,含有精液和女性成分的混合斑检材,一般先采用两步裂解法分离精子与女性成分,然后再分别进行DNA检验。但在实践中发现,含有大量女性成分而精子较少的混合斑进行首次裂解需较长时间或需进行多次裂解,因不能得到足够的精子量使分型失败。为此本文通过调整试验条件,以期提高实验成功率。     

混合斑中精子DNA抽提方法的改进

目的改善混合斑中精子DNA的抽提效率。方法对不同条件下的混合斑采用不同方法提取精子DNA,进行PCR扩增及STR分型。结果联合运用Chelex法和商品化试剂盒进行精子DNA抽提,可比普通Chelex法快速、准确。结论Chelex法与商品化试剂盒的联合运用可提高混合斑DNA分型的成功率。     

Differex~(TM)系统在混合斑精子DNA分离提取中的应用

叶某,女,7岁。某日放学途中被诱骗奸杀,3日后发现其尸体,且已高度腐败。提取阴道内容物送检。阴道拭子浸出液沉淀经涂片,检见少量精子和阴道上皮细胞。用传统差异裂解法[1]分离提取混合斑精子DNA,扩增分型效果不佳(照片1)。本文作者应用D ifferexTM系统分离提取混合斑精子DNA,取得扩增分型的满意结果。现报道如下。1 D ifferexTM系统分离提取精子DNA1.1主要仪器与试剂D ifferexTM试剂盒(含消化缓冲液、分离液、无核酸酶水)、DNA IQTM纯化系统、PowerPlexTM16试剂盒为美国Promega公司产品;金牌酶、AB I3100遗传分析仪、9700PC…     

不同温度对精液(斑)中酸性磷酸酶(ACP)活性的影响

<正> 酸性磷酸酶广泛分布于人体组织,含量最高的是前列腺液和精液。精液(斑)中酸性磷酸酶的检验,是有价值的一种常规预试验,特别是对作了绝育术的人的精液(斑)鉴定时,酸性磷酸酶的检验更为     

混合斑中女性成分DNA检验2例

<正> 在强奸案的检验鉴定中,只要能从受害人的阴棉、内裤以及现场提取的物品上的精斑成分中鉴定出嫌疑男性的DNA,即可能为案件提供证据。但有时仅有男性DNA成分鉴定还不能完全构成强奸案的必要证据,必须同时鉴定精斑中的女性成分才能提供直接、确凿的证据。现报道两例如下。     

手纸中混合斑的精子DNA提取方法探讨

混合斑的精子DNA提取是法医物证DNA分析中的一种重要技术,能否从中成功地提取有效的模板DNA,将最终决定能否将罪犯绳之以法。在实际检案中,当遇到手纸中的混合斑时,由于手纸遇水后纤维分解,形成糊状物质,导致混合斑与载体难以分离去除;有些手纸中含有漂染剂,对PCR扩增有抑制作用。为此,手纸中混合斑的精子DNA提取是一个广泛性的难题。笔者对通用的混合斑二步提取法进行改良,有效地解决了上述难题,并在实际检案应用中取得了满意的结果。1检材与方法1.1检材日常检案中涉及的含有混合斑的手纸30份。1.2方法1.2.1DNA提取1.2.1.1常规法(1…     

混合斑中无精子精斑DNA检验的研究

在日常性侵犯案件的DNA 检验中,经常遇到无精子精斑的混合斑,按照常规的二步消化分离法提取DNA进行STR检验则难以成功,对于此类案件常常不予检验,不能充分发挥DNA在案件中的证据作用.籍针对此类案件以Y-Plex6试剂盒对无精子精斑及其混合斑进行了检验,取得成功,现报道如下:     

显微操作法提取混合斑中精子细胞方法的探讨

目的尝试建立一种提取混合斑中精子细胞的检测方法。方法在人为控制条件下,制备精液—阴道液混合斑,分别使用显微操作法与差异裂解法分离精子细胞,提取DNA,进行STR基因型检测。结果采用显微操作法检测成功率11/12,差异裂解法成功率1/12,两者有显著性差异。结论显微操作法可有效获取精子细胞,排除女性物质和其它杂质的干扰,STR分型成功率优于差异裂解法。     

阴道液斑的检验近况

在强奸案的法医物证检验中,过去多只注重检验遗留在被害人的衣、物、身体和现场上的精斑及型物质证实犯罪,但有时可能检不出精斑,而在嫌疑人的衣服和身体上却可能有阴道液斑,或者遗留的斑迹系精液-阴道液混合斑(以下简称混合精斑),因而阴道液斑的检验有时有其重要意义。现将阴道液斑检验概况作一概述。 1 阴道液的成分 阴道液是阴道粘膜的漏出液、分泌液、脱落上皮细胞及卵管、宫内膜、宫颈粘液、阴道正常菌群代谢产物等组成的混合物,阴道脱落上皮细胞随月经周期呈周期性变化,分泌液的性状及量也