鸭霉形体的分离和鉴定

Fahey(1955)首先报道了鸭的慢性呼吸道病,并指出病原有两种,一种是病毒,另一种是霉形体。Roberts(1964)从一群爆发窦炎的鸭窦中分离到霉形体,并将其命名为鸭霉形体(Mycoplasmaallatis),同时还分离到A流感病毒。鸭的窦炎在我国也存在,如北京、江西等地曾有过报道,但对其病原的检查及分析,特别是对鸭霉形体的分离、培养和鉴定还未见正式报道,本文旨在对上述问题作一些初步探讨。     

广西鸡毒霉形体的分离与鉴定

从广西不同地区采集疑似鸡毒霉形体 (MG)感染的 46份病鸡病料中分离到 7个菌株 ,经分离培养、L形细菌检验、理化特性鉴定、血清学定型、人工感染试验以及PCR扩增检测等方法鉴定 ,确定 7个分离株为MG。     

禽源霉形体的分离和鉴定

目前认为,禽源霉形体共有18种,计霉形体属14种,无胆甾原体属3种,尿原体1种。其特征详见下表。 禽类致病性霉形体有3种。鸡毒霉形体(Mycoplasma gallisepticum):引起鸡、火鸡及其它禽类的呼吸道疾病,引起鸡的气管炎、气囊炎,其特征是呼吸道罗音、咳嗽、流鼻液;有的侵嗜眼部,导致结膜     

鸡源霉形体的分离和鉴定

对乌鲁木齐市 2个大型鸡场鸡毒霉形体 (Mycoplasmagallisepticum ,MG)、滑液囊霉形体 (M .synoviae ,MS)感染情况用血清平板凝集试验 (SPA)进行了血清学抽样调查。结果表明 ,凝集抗体的阳性率分别为 6 6 .92 %和 35 .90 %,其中商品鸡场MG和MS的阳性率分别为 82 .5 0 %和 5 2 .5 0 %。从疑似MG、MS感染鸡的气管、肺、气囊、鼻裂和跗关节腔分离到 19株分离物。经初步鉴定 ,分离物均为霉形体属成员。用生化和血清学及其他生物学方法 ,对这些分离物进行了鉴定。结果 6株为MG ,3株为MS ,其余 10株也属于霉形体。     

河北省部分地区羊肺炎霉形体的分离和鉴定

自保定、廊坊、邢台、邯郸等市的 6个有呼吸道病的羊场采集病料 2 4份 ,分离纯化获得13株分离物 ,经理化特性和血清学鉴定 ,证实分离物与绵羊肺炎霉形体 (Mycoplas maovipneumoniae ,MO)标准株Y98为同一血清型。人工复制试验结果表明 ,分离物具有致病性     

一种新的鹅病毒病的病原分离与初步鉴定

对湖北省某县发生的一种以成年鹅皮下血包囊及内脏广泛性肿块为特征的传染性疾病的病原进行了初步分离、鉴定。用成年病死鹅和病鹅肝组织悬液接种12 日龄鹅胚,48~72 h鹅胚死亡,再用第一代鹅胚尿囊液连传6 代,鹅胚均死亡(GVF1~6)。用GVF2 接种鸡胚,48~96 h 死亡,连传4代,鸡胚均死亡(EVF1~4);用GVF3回归成年母鹅,出现与自然感染病例类似的病变;对EVF4进行毒力测定,其ELD50为10-5.3;鸡胚平均死亡时间为96 h;将EVF4鸡胚尿囊液进行纯化和浓缩,电镜观察,可见大小120~220 nm有囊膜的近似球形的病毒颗粒;该病毒能凝集鹅、豚鼠、牛、羊、人等多种红细胞,能被相应的血清和鸡新城疫血清所抑制,经核酸型测定,为RNA。初步确定本病毒是未曾报道过的一新型鹅副黏病毒。     

猪肺炎霉形体单克隆抗体的制备与鉴定

用KM 2培养基 (含马血清 )培养猪肺炎霉形体 (Mhp)ZCF2 3株 ,对培养物高速离心 ,用PBS悬浮 ,反复冻融裂解后作为免疫原 ,腹腔注射免疫BALB/c小鼠。利用淋巴细胞杂交瘤技术获得了 5株分泌特异性抗体的单克隆抗体细胞株 ,分别命名为 11C6、14C11、11B6 1、10C11 2和12E7 1。生物学特性鉴定结果表明 ,5株腹水单克隆抗体的间接ELISA效价均在 1∶10 0 0 0左右 ;免疫球蛋白亚类均为IgG3;免疫印迹结果显示 ,5株单克隆抗体所针对的抗原表位在 90、4 0、70和6 0ku左右的蛋白分子上 ,均不与马血清蛋白反应 ,说明这些单克隆抗体均是针对Mhp蛋白的特异性单克隆抗体。     

用毛地黄皂苷分离霉形体膜

用毛地黄皂苷分离霉形体膜逯忠新，邓光明，包慧芳，梁桂香（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）。渗透溶解是目前常用的分离无胞质污染霉形体细胞膜的方法。但渗透溶解霉形体的敏感性依赖于霉形体的种和生长时间，其中生长慢的霉形体（如羊肺炎霉形体）对渗透溶...     

细胞培养中霉形体的感染问题

自从1956年Lucille R-binson和他的同事们报道从Hela细胞中分离出霉形体以来,霉形体对细胞培养的感染问题成了有关学者研究的热门课题,并且是使免疫学家、病毒学家、细胞生物学家和其他依赖细胞株进行研究工作的科学家深感头痛的问题。后来,许多研究工作者证明,霉形体对细胞培养的感染远比Robinson报道中想象的普遍,用微生物方法和血清学方法研究的结果表明,有大量细胞培养遭受霉形体感染(Hayflick,     

用表面免疫荧光法鉴定鸡源霉形体

本文报告了用表面免疫荧光法鉴定鸡源霉形体的结果。此法具有很高的特异性,能成功地用于分类鉴定的目的,并能检出培养物中混杂的霉形体种类。 (一)材料和方法 1.培养基:按Frey(1968)所介绍的配方经过适当修改后制成。 2.霉形体菌株:自国际霉形体中心Freundt教授处引进4种霉形体模式株:鸡毒霉形体(Mycoplasma gallisepticum,PG31株);雏鸡霉形体(M.pullorum,CKK株);滑液霉形体(M.synoviae WVU1853株);鸡霉形体(M.gallinarum PG16株)。新分离菌株有:从北京东沙种鸡场(DS)分离3株;从北京朝阳区十八里店公社西直河大队鸡场(XZ)分离13株;从海淀区四季青公社巴沟鸡场(BG)分离23株;从广西南宁市郊区(GX) 4个鸡场分离10株,共计49株。     

牛霉形体免疫相关性蛋白P51的筛选与鉴定

为了筛选免疫原性蛋白,建立牛霉形体的快速诊断方法,利用二维凝胶(2-D)电泳、Western-blot分析及蛋白质谱分析,筛选出一个免疫相关性蛋白P51。以牛霉形体中国分离株Hubei-1为模板,扩增了p51基因,并克隆到原核表达载体pET32a上。结果显示,重组蛋白pET32a-p51与牛霉形体阳性血清的Dot-blotting试验结果为阳性,而Western-blotting试验结果为阴性。以pET32a-p51重组蛋白为包被抗原的ELISA试验表明其能与自然感染和人工感染牛霉形体的阳性血清发生特异性反应,而与灭活疫苗免疫的阳性血清不发生特异性反应,与牛传染性胸膜肺炎的阳性血清没有交叉反应。表明P51可能是牛霉形体特有的一种构象依赖性免疫相关蛋白,是一种有前景的诊断用抗原。     

绵羊肺炎霉形体单克隆抗体的研制及初步应用

用绵羊肺炎霉形体（ＭＯ）抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，融合其脾细胞和ＳＰ２／Ｏ骨髓瘤细胞，筛选出６株分泌抗ＭＯ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）杂交瘤细胞系。用间接ＥＬＩＳＡ法对３株ＭｃＡｂ做特异性分析，该ＭｃＡｂ只特异地与ＭＯ抗原发生反应，而不与猪肺炎霉形体、山羊无乳症霉形体抗原发生反应。用检测ＭＯ抗体的间接ＥＬＩＳＡ与ＩＨＡ比较检测绵羊血清中抗ＭＯ抗体，前者的阳性检出率较后者高７．１４个百分点     

鸡感染鸡毒霉形体和滑液霉形体情况的调查

鸡毒霉形体感染和滑液霉形体感染是世界养鸡业中两种主要霉形体感染。毕丁仁(1984)自北京和南宁两地分离的49株鸡源霉形体中有27株是鸡毒霉形体,2株滑液霉形体,说明国内养鸡场中也存在着这个问题。但是国内这两种霉形体感染情况,却未见报道。作者在各兽医生物药厂监察室同志协助下,对来自20个省、市自治区的21个地区的鸡血清进行了血清学反应检测,对这种感染情况获得初步的数据。     

鹅副黏病毒的分离和鉴定

鹅副黏病毒病是由禽副黏病毒引起的一种急性高度接触性传染病 ,表现为发病急 ,传播快 ,发病率高 ,病死率高 ,在我国屡有发生 ,造成了一定的经济损失。我国学者已对该病做了详尽的研究 ,认为是由Ⅰ型禽副黏病毒即新城疫病毒引起的 ,基因型为Ⅶ型。 2 0 0 1年以来海南省发生了该病 ,笔者对此开展了流行病学调查 ,临床症状、解剖病变观察和病原分离鉴定。1　材料1.1　试验动物　 9～ 10日龄非免疫鸡胚 ,非免疫种鸡所产。 1日龄雏鸡 ,用非免疫鸡胚自行孵化。 6周龄小鸡 ,2 0日龄以上小鹅 ,严格隔离饲养 ,试验前测定新城疫HI效价为 1.0lb以下。 …     

用血细胞吸附抑制试验快速鉴定鸡毒霉形体

鸡源霉形体的鉴定,通常用已知的标准阳性血清与分离物进行生长抑制试验(GI)、代谢抑制试验(MI)或用表面免疫荧光法(epi-IF)进行,前两种方法费时,往往需要1～2周才能得出结果;后一种方法需要荧光显微镜,不易普及应用。笔者根据鸡毒霉形体菌落有很强的吸附鸡红细胞的特点,试用已知的阳性血清进行菌落血细胞吸附抑制试验(HAI)来鉴定鸡毒霉形体。结果表明,这种方法与GI、MI、epi-IF一样具有很强的特异性,而且方法简单快速,对琼脂培养基表面的菌落2小时内可得出结果。(一)材料与方法1.抗血清:鸡毒霉形体抗血清、滑液霉形体     

PCR检测鸡毒霉形体和鸡滑液囊霉形体的研究

根据禽霉形体 16SrRNA的基因序列设计、合成了 1对引物 ,用这对引物对鸡毒霉形体 (Mycoplasmagallisep ticum ,MG)和鸡滑液囊霉形体 (Mycoplasmasynoviae ,MS)菌株DNA进行PCR扩增 ,得到了与预期大小相一致的约 5 80bp的PCR产物 ,而这对引物对其他禽病病原DNA或RNA模板的扩增结果为阴性。PCR方法对MG和MS的最小检出量分别为 2 pg和 3pg。应用已建立的PCR方法检测MG人工感染样品和临床样品 ,从人工感染样品中均检测到MG ,临床样品的MG阳性检出率为 10 .2 5 % ,高于常规分离培养的阳性检出率     

应用聚合酶链反应检测鸡毒霉形体和滑液霉形体的研究

利用鸡毒霉形体（ＭＧ）与滑液霉形体（ＭＳ）基因一定区域互补的序列,合成能分别针对ＭＧ和ＭＳ目的基因的２对引物。用这２对引物对１０个国际标准的ＭＧ与ＭＳ菌株ＤＮＡ模板进行ＰＣＲ扩增,结果均得到与预期大小相一致的约７３２ｂｐ（ＭＧ）和２０７ｂｐ（ＭＳ）的ＰＣＲ产物。特异性试验结果表明,这２对引物对其它９种禽病病原ＤＮＡ或ＲＮＡ模板扩增均为阴性;敏感性试验结果显示,ＭＧＰＣＲ能检出１００ｆｇ的ＭＧＤＮＡ,ＭＳＰＣＲ检出量为１０ｆｇ的ＭＳＤＮＡ。     

绵羊肺炎霉形体的培养与保存

绵羊肺炎霉形体的培养与保存谢琴何存利王东陈祝三余桂芳（宁夏农林科学院畜牧兽医研究所银川７５０００２）霉形体是一种很小的原核生物，无细胞壁，可在人工培养基上生长并形成小菌落。霉形体因为生长速度慢，生长条件苛刻而难以培养，这对防治这类疾病的研究造成困难。...     

猪霉形体肺炎的诊治

20 0 1年 7月 ,安徽省含山县某猪场暴发以喘气为特征的呼吸道传染病 ,发病率达 10 0 % ,致死率 3 3 %。根据临床症状、剖检变化及实验室检验 ,确诊为猪霉形体肺炎。1　发病情况该猪场曾于 2 0 0 1年 5月上旬先后 2次购进育肥猪 12 5头 ,2 0 0 1年 6月上旬接种猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联疫苗。 2 0 0 1年7月中旬其中一圈的 10头育肥猪出现咳嗽症状 ,继而整个猪舍的育肥猪全部发病。2　临床症状病猪食欲不振 ,日渐消瘦 ,体温升至 40℃。呼吸增快 ,呈腹式呼吸 ,有的张口呼吸。随着病情逐渐加重 ,出现痉挛性咳嗽 ,口、鼻流黏性和脓性鼻液 ,死亡猪…     

从鸡蛋和18日龄鸡胚培养鸡毒霉形体试验

从鸡蛋和１８日龄鸡胚培养鸡毒霉形体试验郭建华陈德威张冰（中国农业大学实验动物研究所１０００９４）赵良仓（山西省畜牧兽医学校鸡毒霉形体（ＭＧ）引起的鸡的慢性呼吸道病，给养鸡业造成严重的经济损失，特别是和其他呼吸道病原体混合感染时更是如此，而且这种病难以...