犬组织中艾司唑仑在甲醛溶液中的稳定性CSCD

目的研究甲醛溶液保存的生物样品中艾司唑仑的稳定性。方法犬以艾司唑仑37.6mg/kg剂量灌胃,2h处死,解剖取其心、肝、肾、脑并分割为1g/份,分别放置于4%甲醛溶液中固定,用高效液相色谱法测定各组织及甲醛液中的艾司唑仑含量。结果犬心、肝、肾、脑组织随着固定在甲醛溶液中时间的延长,组织及从组织溶解到甲醛溶液中的艾司唑仑含量均降低,保存至63d时,心、肝、肾和脑组织中艾司唑仑检出量分别为固定前的0.8%、1.7%、1.0%和2.2%。结论犬组织中的艾司唑仑会部分溶解到甲醛溶液中,艾司唑仑在甲醛溶液中容易分解。含艾司唑仑的生物样品应避免保存在甲醛溶液中。     

血中乙醇质量浓度与神经行为能力的关系

目的 研究血中乙醇质量浓度与神经行为能力的关系。方法 采用中文第三版计算机化神经行为测试评价系统（NES-C3）,通过自身对照的方式,对233名饮酒者进行神经行为能力的测试。结果 当血中乙醇质量浓度I〉0．157mg／mL时,视简单反应时和数字筛选能力指数有显著性下降;当血中乙醇质量浓度I〉0．204mg／mL时,心算、视觉保留、线条判断能力指数有显著性下降。结论 神经行为能力随着血中乙醇质量浓度的升高而下降,然后随着乙醇的不断代谢,血中乙醇质量浓度的降低,神经行为能力逐渐恢复。     

犬组织中艾司唑仑在甲醛溶液中的稳定性

目的 研究甲醛溶液保存的生物样品中艾司唑仑的稳定性.方法 犬以艾司唑仑37.6mg/kg剂量灌胃,2h处死,解剖取其心、肝、肾、脑并分割为1g/份,分别放置于4%甲醛溶液中固定,用高效液相色谱法测定各组织及甲醛液中的艾司唑仑含量.结果 犬心、肝、肾、脑组织随着固定在甲醛溶液中时间的延长,组织及从组织溶解到甲醛溶液中的艾...     

运用神经行为测试系统评价酒后行为功能的可行性研究

目的研究运用神经行为测试系统评价酒后行为功能的可行性。方法采用汉化第三版计算机化神经行为评价系统(NES-C3),通过自身对照的方式,对49名饮酒者进行神经行为功能的测试,并与步行回转试验进行比较。结果心算、视觉保留、线条判断和数字筛选均在酒后0.5￣2.5h的时间点上能力指数有所下降,视简单反应时能力指数下降则延续至酒后5.5h;步行回转在酒后0.5￣2.5h间有阳性案例。血中酒精质量浓度在0.50mg/mL以上,视觉保留、线条判断及视简单反应时的能力指数有明显下降;血中酒精质量浓度在0.80mg/mL以上,心算和数字筛选的能力指数有明显下降。步行回转实验的阳性人数在血中酒精质量浓度0.50mg/mL以上有明显增加。结论计算机化神经行为评价系统作为一个定量指标,可反应酒精质量浓度与神经行为功能的关系,且比步行回转试验更客观、更灵敏。     

超分子溶剂萃取-气相色谱-串联质谱法检测尿液中苯二氮䓬类药物

目的建立一种尿液中9种苯二氮?类药物的超分子溶剂样品气相色谱-串联质谱(gas chromatography-tandem mass spectrometry,GC-MS/MS)分析方法。方法含9种苯二氮?类药物对照品的尿液样品用四氢呋喃和1-己醇组成的超分子溶剂进行液液萃取,取溶剂层氮吹至干,残余物用甲醇复溶后进行GC-MS/MS分析,数据采集方式为多反应监测模式,采用内标法定量。结果尿液中地西泮、咪达唑仑、氟硝西泮和氯氮平质量浓度在1~100ng/mL,劳拉西泮和阿普唑仑质量浓度在5~100ng/mL,硝西泮和氯硝西泮质量浓度在2~100ng/mL,艾司唑仑在质量浓度0.2~100ng/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.9991~0.9999,定量下限为0.2~5ng/mL,提取回收率为81.12%~99.52%,日内精密度[相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)]和准确度(偏倚)分别小于9.86%、9.51%;日间精密度(RSD)和准确度(偏倚)分别小于8.74%、9.98%。室温和-20℃条件下,尿液中9种药物在15d内具有良好的稳定性。8名志愿者单摄口服阿普唑仑片后,在8~72h内尿液中阿普唑仑的质量浓度为6.54~88.28ng/mL。结论本研究建立的尿液中9种苯二氮?类药物的超分子溶剂萃取-GC-MS/MS分析方法,简便、快速、准确、灵敏,可为临床治疗及司法鉴定中苯二氮?类药物中毒监测提供技术支持。     

艾司唑仑体内分布1例

<正>1案例1.1简要案情某男，68岁，有抑郁症病史2年，长期使用艾司唑仑。某日上午，其子陪该男去医院开了3盒艾司唑仑（共60片，每片1 mg）。11:00许其子送该男回到小区门口，30 min后其子联系不上该男，家中也没发现在医院开的药物。3 d后，在距离小区约500 m处的河内发现该男尸体，已轻度腐败，经尸表检查，未发现可疑中毒现象。行尸体解剖，同时提取心血（20 mL）、胃内容物（50 g）、尿液（15 mL）送检，     

液相色谱/质谱法检测血液中的艾司佐匹克隆

目的建立手性分离-液相色谱/质谱法,用于分离检测血液中艾司佐匹克隆。方法血液经HLB小柱固相萃取后,采用手性分离柱,用电喷雾正离子模式离子化、多反应监测模式检测艾司佐匹克隆,外标法定量。结果采用本文方法可有效分离佐匹克隆的左旋、右旋异构体,血中艾司佐匹克隆在1～100ng/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.996 4,最低检出限为0.8ng/mL,回收率为76%～88%,日内与日间精密度均小于8%。结论本文所建方法简便、快速、分离度好,适用于血液中艾司佐匹克隆的检测。     

大鼠血液外泌体中外源性γ-羟基丁酸的检测

目的 建立基于外泌体的超高效液相色谱-质谱法（ultra-high performance liquid chromatographymass spectrometry,UPLC-MS）定量检测大鼠血液中的γ-羟基丁酸（gamma-hydroxybutyrate,GHB）,寻找区分内源性GHB和外源性GHB的方法。方法 将成年雄性SD大鼠分为给药1 h、5 h、10 h组与对照组,给药组单次腹腔注射GHB前体物质γ-丁内酯（gamma-butyrolactone,GBL）后,分别于注射后1 h、5 h、10 h腹主动脉采血5 mL,对照组给予等量生理盐水后1 h采血5 mL。其中0.5 mL血液经前处理后直接进行UPLC-MS检测,剩余血液经差速超速离心提取外泌体后进行检测。结果 对照组大鼠血液中GHB质量浓度为（87.36±33.48）ng/mL,给药1 h、5 h和10 h组大鼠血液中GHB质量浓度分别为（110 400.00±1 766.35）、（1 479.00±687.01）和（133.60±12.17）ng/mL。外泌体检测结果显示,对照组及给药10 h组均未检测到GHB峰...     

QuEChERS-LC/MS快速检测兽用麻药“舒泰”

目的本文对兽药"舒泰"中有效成分进行了结构确证,并建立了生物检材中替来他明和唑拉西泮的快速检验方法。方法在血液和尿液的生物检材中,通过加标实验,经QuEChERS萃取后,进行LC/MS对替来他明和唑拉西泮的定性定量检测分析。结果在血液和尿液的生物样品的加标实验中,替来他明的RSD%在0.5%~3.5%,唑拉西泮的RSD在0.5%~1.1%;替来他明的回收率在75.8%~100.3%,唑拉西泮的回收率在68.8%~76.6%,其中血液中替来他明的方法检出限为0.16ng/mL,尿液中为0.20ng/mL,唑拉西泮在血液中的方法检出限0.17ng/mL,尿液中为0.22ng/mL。结论建立的QuEChERS萃取方法,操作流程简便,方法重现性好,只需100μL取样量,更适合于痕量生物检材中替来他明和唑拉西泮的检验分析。     

超高效液相色谱串联质谱法测定血液中芬普雷司

目的 建立了超高效液相色谱-三重四级杆串联质谱法检测血液中芬普雷司的方法。方法 将血液用乙腈沉淀蛋白后，高速离心，取上清液经0.22μm PTFE滤膜过滤后进样，选用Kinetex^?C18 (100×2.1 mm,2.6μm)色谱柱，以0.1%的甲酸及5 mmol/L甲酸铵水溶液和乙腈为流动相，梯度洗脱，流速0.5 mL/min。选择电喷雾离子源(ESI)，采用多反应监测(MRM)的模式，优化质谱参数，离子对为：m/z 189.3/91.1和m/z 189.3/119.0。结果试验结果表明，芬普雷司0.5～500 ng/mL浓度范围内呈良好的线性关系，线性相关系数0.993 3，最低检测浓度(LOQ, S/N=3)为0.1 ng/ml，定量限0.5 ng/ml，空白添加回收率84.3%～92.1%，精密度为1.9%～2.8%。结论建立的LC-MS/MS分析方法准确、快速、有效，可应用于血液中芬普雷司定量和定性要求。     

实验性脑挫伤后 Fos蛋白和 NGFR变化与损伤时间关系的研究

目的 检测分析不同损伤时间组实验大鼠脑挫伤灶周围神经细胞中 NGFR阳性染色强度变化与损伤后经过时间之间的关系,对其在脑挫伤时间推断中的作用作出评价。方法 运用免疫组织化学技术（ SABC法）,结合计算机彩色图像分析技术观察大鼠实验性脑挫伤后原癌基因 c－ fos的表达产物 Fos蛋白和神经生长因子受体（ NGFR）的染色变化。结果 （ 1）伤后 0.5h组在挫伤灶周围可见 Fos阳性染色细胞出现。伤后 3h组阳性表达数量和强度达峰值,且分布广泛。后表达逐渐降低。 1d后各组未见 Fos阳性染色强度增加的细胞。对照组染色为阴性。（ 2）伤后 1d组在挫伤灶周围可见少量 NGFR阳性染色细胞,以神经细胞表达为主。伤后 3d组,阳性细胞表达与 1d组相比有显著性增强 (P< 0.01), 数 量 和 着 色 强 度 达 到 高 峰 , 量 多 且 染 色 深 。 之 后 逐 渐 缓 慢 减 弱 。 对 照 组 染 色 为 阴 性 。 可 见 脑 挫 伤 后 Fos和 NGFR在 损 伤 局 部 的 阳 性 染 色 分 别 在 伤 后 早 期 及 随 后 较 晚 时 段 里 出 现 。 前 者 表 达 时 间 短 暂 , 而 后 者 则 持 续 时 间 较 长 , 但 都 有 一 定 的 规 律 性 。 结 论 Fos蛋 白 和 NGFR变 化 可 用 于 脑 挫 伤 后 不 同 时 段 的 损 伤 时 间 推 断 。     

大鼠视神经损伤后Bad蛋白表达与视网膜神经细胞观察

目的观察大鼠视神经钳夹伤后视网膜神经节细胞(RGCs)和Bad蛋白表达变化。方法建立大鼠视神经钳夹伤动物模型,伤后1,3,5,7,9,14,28d处死,HE染色观察RGCs的改变,免疫组化方法检测Bad蛋白的表达水平。结果视神经损伤后1d节细胞开始减少,7d内呈快速减少,14d后呈慢速减少期,28d后趋于稳定;伤后3dBad蛋白表达明显增加,5d时达到高峰,7d后开始下降,14d后变化不明显。结论视神经损伤Bad蛋白的表达诱发RGCs丧失,是伤后视功能下降的重要原因,视功能评价应在损伤28d以后进行。     

大鼠液压冲击脑损伤BDNF及其受体TrkB表达的实验研究

目的研究脑损伤后BDNF及其受体TrKB蛋白表达及其时序性变化,进一步研究脑损伤的分子机制及法医学脑损伤时间推断.方法用免疫组织化学方法,观察液压冲击脑损伤大鼠BDNF及其受体TrKB蛋白在受伤后不同时间(5min、15min、30min、1h、3h、6h、12h、1d、3d、7d)的表达情况,以正常大鼠及手术大鼠作为对照.结果正常及手术对照组大鼠脑组织表达少量的BDNF及TrKB;脑损伤后1h大脑皮质颗粒和锥体细胞、海马CA3及小脑Purkinje细胞表达增强,3h达高峰,维持较高水平,12h开始下降,24h后降至对照水平.1h、3h、6h和12h与正常及手术对照组比较均有显著性差异.结论表明脑损伤可诱导BDNF及TrKB基因在脑内表达,其时序性改变可望用于法医学脑损伤时间推断.     

Blind trials of an onsite saliva drug test for marijuana and opiates

The objective of these clinical trials was to calculate the performance, limit of detection, specificity and sensitivity of a novel, semi-quantitative immunoassay for drugs of abuse in saliva and to determine operator bias when measured blind by four different operators. The test is based on lateral flow gold particle technology coupled with digital photography to provide a semi-quantitative end point. The performance of the test was compared with that of enzyme immunoassays and GC/MS methods. Volunteers consumed marijuana or codeine and their saliva was collected 0.25 to 24 h later with the Cozart RapiScan collection device. The sensitivity and specificity of the opiate test were both 100%+/-10.4% for codeine for 9 h after dosing. The cutoff of the marijuana test at 10 ng/mL THCA was too high to detect marijuana use for more than a few hours after smoking. There was no operator bias because the results were presented in written form either as "positive" or "negative" for each of the five drug classes on the screen of the hand-held reader.     

大鼠液压冲击脑损伤bFGF及其受体FGFR1 mRNA表达

目的 观察脑损伤后 bFGF及其受体 FGFRl mRNA表达及其时序性变化,探讨脑损伤的分子机制及法医学脑损伤时间推断。方法 用原位杂交(ISH)和RT-PCR技术观察大鼠液压冲击脑损伤后bFGF及FGFRl mRNA在伤后不同时间(30min、1h、3h、6h、12h、1d、3d、7d)的表达情况,以正常大鼠及手术大鼠作为对照。结果(1)正常及手术对照组大鼠脑组织内有低水平的bFGF及FGFRl mRNA表达;(2)脑损伤后6h～3d,大脑皮质和脑干bFGF/FGFRl mRNA水平逐渐增加,7d时已有所下降,但仍未恢复到基础水平;(3)海马冲击后3h即开始显著增加,3d开始下降,7d时已恢复到基础水平。结论 脑损伤可诱导bFGF/FGFRl基因表达,机体对脑损伤存在自身保护机制,其表达的时序性改变可望用于法医学脑损伤时间推断。     

大鼠皮肤钝器伤血管内皮生长因子表达变化的研究

目的观察大鼠皮肤钝器伤后VEGF表达的变化规律。方法应用免疫组化技术观察大鼠皮肤钝器伤后不同时间(1h、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d、9d)VEGF的表达情况,并用MIAS图像分析系统进行图象分析。 结果正常对照组大鼠皮肤有低水平VEGF表达,钝器伤后VEGF表达逐渐增加,于伤后7d达峰值,伤后9d开始下降。 结论皮肤钝器伤可诱导VEGF表达增加,其时序性变化可望作为一种客观指标用于法医学损伤时间的推断。     

大鼠闭合性脑损伤后MAP-2的时序性表达

目的探讨大鼠闭合性颅脑损伤后脑组织微管相关蛋门－2（MAP－2）表达变化规律。方法建立大鼠闭合性颅脯挫伤模型,64只Wistar大鼠随机分为损伤后0．5h、6h、12h、ld、3d、7d、14d7个损伤组及对照组,每组8只。应用免疫组化和蛋h印记Western blot法及图像分析技术,检测脑挫伤后各设定时间点挫伤脯组织中MAP－2的变化。结果免疫纽化染色显示：对照组大鼠脑组织中可见MAP－2阳性表达;实验组伤后0．5h,挫伤灶及周同MAP－2阳性表达下降,伤后6h阳性表达降至最低,伤后12h,阳性表达逐渐增多,伤后14d,仍保持较高水平;蛋白印记结果与免疫组化结果一致。统计学分析显爪：MAP－2的表达各损伤组与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05）,伤后12h、3d及14d与上…组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论大鼠脑挫伤后14d内,MAP－2存脑组织挫伤灶及其周同呈现先减少后逐渐增多的表达变化,可作为推断脑挫伤经过时间的参考指标之一。