高度特异的李斯特菌单抗试剂的研制及鉴定

以单核细胞增生李斯特菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ，ＬＭ）制备免疫原，应用淋巴细胞杂交瘤技术，建立了３株能稳定分泌抗单核细胞增生李斯特菌、无害李斯特菌和格氏李斯特菌的单克隆抗体的细胞系，分别是ＬＪ１０Ａ，ＬＭ１１和ＬＢ５，而与其余种的李斯特菌和属外细菌不发生交叉反应。３株单抗均为ＩｇＭ，所识别的抗原为菌体表面蛋白     

进口冻禽产品中李斯特菌的检验

进口冻禽产品中李斯特菌的检验薛华平，王民，郑莹，邓海峰（深圳皇岗动植物检疫局深圳５１８０４５）为查清进口冻禽产品李斯特菌的污染情况，给进口肉食品的检疫后续管理提供资料，作者进行了本试验。１材料１．１参考菌株单核细胞增生李斯特氏菌，由河南信阳市卫生防疫...     

重组蛋白P60与LLO对单核细胞增多性李斯特菌灭活疫苗的免疫增强效果

为增强单核细胞增多性李斯特菌(简称单增李斯特菌)灭活疫苗的免疫效果,对单增李斯特菌入侵相关蛋白(P60)基因进行了克隆、表达及纯化,分别与低剂量李斯特菌溶血素O(LLO)、单增李斯特菌灭活菌混合,以MontanideISA206为佐剂制成疫苗,皮下接种家兔,并设灭活疫苗免疫组和PBS对照组,定期检测3组家兔的血清抗体、IL-4和IFN-γ水平的变化;二免后第21d每只家兔腹腔注射2×108CFU单增李斯特活菌攻毒,观察各组家兔的发病情况,每隔24h检测一次细菌在各组家兔体内的繁殖率。结果表明,添加P60和低剂量LLO重组蛋白的单增李斯特菌灭活疫苗免疫组家兔二免后抗体水平明显高于其他各组,且能诱导Th细胞向Th1型分化,抑制Th2型细胞的分化,调节抗原特异性免疫应答,能有效抵抗单增李斯特菌的感染,使细菌在家兔体内(外周血、脾)的几何增长率从64.69%降到24.06%,免疫效果明显优于灭活疫苗单独免疫组。证明P60和低剂量LLO能增强灭活疫苗的免疫保护效果。     

单核增生李斯特菌的随机扩增多态DNA分型研究

通过优化反应条件和筛选随机引物，建立了单核增生李斯特菌的随机扩增的多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析方法。在１０条长为１０ｂｐ的随机组合引物介导下，经过低温（３５℃）扩增收集到的８株不同血清型的单核增生李斯特菌可产生稳定、复杂的ＰＣＲ指纹图。图谱经过ＰＨＹＬＩＰＳ软件分析，绘制出菌株的遗传聚类树图。８株单核增生李斯特菌可分成３个聚类群，其中两株血清型相同但遗传距离较远。试验结果表明，ＲＡＰＤ可作为微生物的基因分型方法。     

少孢节丛孢菌的生长特性研究

少孢节丛孢菌（Ａｒｔｈｒｏｂｏｔｒｙｓｏｌｉｇｏｓｐｏｒａ）是一种捕食线虫性真菌，早在１８５０年由Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ从土壤中分离获得。此后，许多学者经过多年研究，证明该菌对多种线虫幼虫都具有很高的杀虫效率，与某些化学药品相比，有安全、无污染等优点。但...     

犊牛匐行疹的诊断和防治

犊牛匐行疹的诊断和防治匐行疹（Ｈｅｒｐｅｓｔｏｎｓｕｒａｎｓ）是由发癣菌属和小孢子菌属的真菌引起的皮肤性传染病，呈急性经过。主要特征呈突起、界限明显的结痂性癣斑，先似磨菇状，后期上面覆盖皮屑，面积逐渐扩大，剧痒，１９９４年７月中旬内蒙古哲里木盟科尔沁...     

用免疫组织学方法检测猫皮下伪肿瘤中的皮肤真菌

应用小鼠抗犬小孢子菌（Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍｃａｎｉｓ）特异性多克隆抗体，以生物素－亲和素酶标免疫组织学方法检测猫皮下伪肿瘤病理切片中对应的犬小孢子菌抗原，并与其它病原真菌进行了对比。试验结果显示，将真菌体外培养物经轻度匀浆的混悬液给小鼠皮下接种，可获得高滴度的特异性抗体。１５００～１１０００稀释的血清和１１００的二抗，以氨基乙烯苄唑（ＡＥＣ）作底物进行免疫组织学检验，可将组织切片中对应的抗原染成红色。犬小孢子菌抗体与所检酵母型真菌的抗原不发生交叉反应，与褐色丝状真菌瘤中的常见病原如烟曲霉菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓ）、短颈扫帚霉菌（Ｓｃｏｐ－ｕｌａｒｉｏｐｓｉｓｂｒｅｖｉｃａｕｌｉｓ）、脱毛分枝孢子菌（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍｔｒｉｃｈｏｒｃｈｅｓ）、疣状瓶霉菌（Ｐｈｉａｌｏｐｈｏｒａｒｅｒｒｕｃｏｓｅ）也无交叉反应，与链格孢菌（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａａｌｔｅｒｎａｔａ）有部分交叉。从而可区别皮肤真菌与其他常见病原真菌，为研究皮肤真菌感染非典型病理提供了一种可靠的手段     

下痢菌制剂预防仔猪黄白痢的临床试验

下痢菌制剂预防仔猪黄白痢的临床试验章寿民，章宇飞（江西农业大学畜牧兽医学院南昌３３００４５）（中国科学院化工冶金研究所）下痢菌制剂属于蜡状芽胞杆菌（Ｂａｓｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓ）微生态制剂，与其他微生物制剂如调痢生、促菌生等比较，虽都属同一菌种制剂，...     

产单核细胞李斯特菌溶血素O基因在大肠杆菌中的优化表达及ELISA检测方法的建立

在克隆产单核细胞李斯特菌(LMO)hlyA基因并构建其原核表达载体的基础上,进一步对IPTG浓度、诱导时间、诱导温度等影响目的蛋白表达的重要条件进行了优化.根据确定的最佳诱导条件,使目的蛋白获得了高效表达.对表达的李斯特菌溶血素O(LLO)进行了纯化,以其作为靶抗原,采用间接ELISA方法检测了动物血清中的特异性LLO抗体.结果表明,用表达产物作为靶抗原可对LMO感染动物进行初步诊断,为建立基于LLO的动物李斯特菌病血清学诊断技术奠定了基础.     

埃立克体病原与流行病学研究进展

埃立克体（Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ）是一类革兰氏染色阴性、专性细胞内寄生菌，可感染人和多种动物，引起埃立克体病。自从１９３５年发现第１种埃立克体———犬埃立克体（Ｅ．ｃａｎｉｓ）以来，又有６种埃立克体相继发现并被命名，它们是：腺热埃立克体（Ｅ．ｓｅｎｎｅｔ...     

结核分枝杆菌Ag85B和ESAT-6基因重组产单核细胞李斯特菌的构建

对编码结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的基因片段进行了扩增,并将其克隆入穿梭载体DKSV7,利用基因同源重组技术构建了表达结核分枝杆菌抗原Ag85B和ESAT-6的重组产单核细胞李斯特菌(LM).结果表明,外源基因成功整合入LM基因组并获得转录;Western-blot分析结果显示,重组菌携带的外源基因在动物体内能够表达;溶血试验与细胞感染试验表明,较之野生型李斯特菌,外源基因的插入破坏了重组菌LM(pKSV7-H85-6B)的溶血活性,显著降低了对细胞的侵袭能力.证实,携带结核分枝杆菌保护性抗原Ag85B和ESAT-6的重组李斯特菌对结核病新型疫苗的研究具有潜在应用价值.     

猪和鸡源性产vero毒素大肠埃希氏菌的检测

产ｖｅｒｏ毒素大肠埃希氏菌（ｖｅｒｏｔｏｘｉｎｐｒｏｄｕｃｉｎｇＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ，ＶＴＥＣ），又名产志贺样毒素大肠埃希氏菌（ｓｈｉｇａｌｉｋｅｔｏｘｉｎｐｒｏｄｕｃｉｎｇＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ，ＳＬＴＥＣ），可以引起人...     

副鸡嗜血杆菌在鸡胚中的生长试验

副鸡嗜血杆菌（Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓｐａｒａｇｌｉｎａｒｕｍ）是鸡传染性鼻炎（ＩＣ）的病原菌，引起急性呼吸道病，以鼻道和窦产浆液性到粘液性分泌物、面部水肿和结膜炎为最明显的特征。可导致产蛋率及孵化率下降、淘汰率增加，从而造成严重的经济损失。该菌对培养基...     

PCR寡核苷酸探针和分离培养法检测食品单核细胞增多症李氏菌比较

单核细胞增多症李氏菌(Listeria monocy-togenes)是一种危害严重的人畜共患病病原体。近年来,世界各地尤其是北美和西欧均发现经食品感染单核细胞增多症李氏菌病患者呈增加趋势。国内食品中李氏菌的污染也相当严重,直接影响着人民的健康。食品中单核细胞的检测,一直采用分离培养法,从采样到获得结果需要几周时间。Datta等(1988)、Bessesen等(1990)和Deneer等(1991)分别应用同位素标记的寡核苷酸探针和     

微量血凝抑制试验检测鸡传染性支气管炎抗体的研究

用Ａ型产气荚膜梭菌（ＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓＩ）ｔｅ菌培养液和磷酸酯酶Ｃ分别处理的４株传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）浓缩液，经用微量血凝（ＨＡ）试验测定，ＩＢＶＭ，．株血义价较高，Ｈ（１２０）和Ｈ＿（１２０）株血凝价较低，Ｄ＿（４１）无血凝性，而以细菌培养液处理的Ｍ＿（４１）株，其血凝价最高。通过传染性支气管炎（ＩＢ）血凝抑制试验（ＨＩ）的研究以及对血清样品和卵黄样品的测定，表明所建立的微量ＨＩ可用于鸡ｍ血清和卵黄抗体的测定。     

可溶性CD_2分子及其配体的功能研究

检测了绵羊、猪红细胞培养上清中可溶性ＣＤ２配体（ｓＣＤ２Ｌ）和猪血清可溶性ＣＤ２分子（ｓＣＤ２）在猪外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）增殖及对绵羊红细胞破坏中的作用。结果表明，ｓＣＤ２对绵羊红细胞的溶血作用可被ｓＣＤ２Ｌ所抑制，ｓＣＤ２Ｌ的这种抑制作用随其红细胞培养浓度在一定范围内的升高而加强；绵羊红细胞培养上清中ｓＣＤ２Ｌ能单独或辅助植物血凝素Ｐ（ＰＨＡＰ）促进猪ＰＢＭＣ增殖，其作用强弱与红细胞培养浓度密切相关，当绵羊红细胞浓度为１．４×１０９个／ｍＬ时效果最佳。ｓＣＤ２对ｓＣＤ２Ｌ诱导的猪ＰＢＭＣ增殖具有抑制作用，抑制作用随ｓＣＤ２水平上升而增强。     

小熊猫尾部脱毛症的诊疗

小熊猫尾部脱毛症的诊疗王强何光昕余星明赵波（成都动物园６１００８１）徐时敏吴光玉谢鸿飞（成都市第三人民医院）作者对两只尾部患有脱毛症的小熊猫（Ａｉｌｕｒｕｓｆｕｌｇｅｎｓ）进行了观察治疗，认为该病是由表皮葡萄球菌、皱褶念珠菌、絮状表皮癣菌等混合感染所...     

市售淡水鱼肠内气单胞菌及类志贺邻单胞菌的调查

对市售的６种淡水鱼共采肠内容物样品７３份，检出气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）３２株，阳性率为４３．８４％；类志贺邻单胞菌（Ｐｌｅｓｉｏｍｏｎａｓｓｈｉｇｅｌｌｏｉｄｅｓ）１７株，阳性率为２３．２９％。其中有８份样品同时检出上述两菌。对３２株气单胞菌用８项生化试验鉴定为４个种，分别是嗜水气单胞菌（Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｅ）１６株，豚鼠气单胞菌（Ａ．ｅａｖｉａｃ）８株，温和气单胞菌（Ａ．ｏｂｒｉａ）７株，简达气单胞菌（Ａ．ｊａｎｄｅｉ）１株。     

影响类志贺邻单胞菌脱羧酶及氧化酶试验因素的探讨

影响类志贺邻单胞菌脱羧酶及氧化酶试验因素的探讨李槿年汪秀娟（安徽农业大学畜牧水产学院合肥２３００３６）类志贺邻单胞菌（Ｐｌｅｓｉｏｍｏｎａｓｓｈｉｇｅｌｏｉｄｅｓ，ＰＳ）是新近发现的传染性腹泻的病原菌。氨基酸脱羧酶和氧化酶的测定是鉴定该菌的两个关键性...     

鸡抗猪大肠埃希氏菌卵黄抗体的研制与应用

鸡抗猪大肠埃希氏菌卵黄抗体的研制与应用肖驰周淑兰涂志罗建模周兴举（四川省养猪研究所荣昌４０２４６０肠毒素型大肠埃希氏菌（ＥｎｔｅｒｏｔｏｘｉｇｅｎｉｃＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ，ＥＴＥＣ）引起的腹泻是仔猪的一种常见病和多发病（Ｗｉｌｓｏｎ，１９８...