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应用胶体金免疫层析一步法对呼伦贝尔地区蒙古族人群G1m(3)基因频率进行调查。1材料方法1.1血样由内蒙古呼伦贝尔市中心血站提供202名无血缘关系健康人的静脉血,滴加在96孔培养板的各孔内,置室温干燥后备检。1.2主要试剂G1m(3)分型试剂盒,购自公安部物证鉴定中心。1.3检测方法按文献[1]方法检测G1m(3)因子。2结果与讨论呼伦贝尔地区202例蒙古族无关健康人血样中,G1m(3)因子阳性为85例,阴性为117例(见表1)。该结果经卡方检验,符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。在本次调查中,G1m(3)阳性频率为0.2390,个人识别能力DP值为0.4874,说明该因子… 相似文献
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胶体金免疫层析一步法快速检测G1m(3)因子 总被引:1,自引:0,他引:1
建立一种简便快速的胶体金免疫层析一步法 ,用于检测 G1m(3)因子。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记抗人 G1m(3)单克隆抗体 ,研制出抗人 G1m(3)因子免疫层析检测试剂盒。样品的 G1m(3)因子 ,与测试条上的金标记抗体结合后沿着反应膜移动 ,再与膜上固相抗体结合形成肉眼可见的红色反应带。使用该方法可检出 10万倍稀释的血清样品 ,整个试验只需 5 min完成。对常见的 2 3种动物血 (痕 )检验 ,未出现交叉反应。在 10 0例样品的检测中 ,本方法的检测结果 ,与 Dot- EL ISA的检测结果的符合率为 10 0 %。该方法适用于法医物证快速检验。 相似文献
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应用酶标D_7E_8单抗Dot-ELISA快速检验人血痕G1m(3)因子 总被引:1,自引:0,他引:1
人类免疫球蛋白的亚类因子具有遗传多态性和很好的稳定性,在法医物证检验和遗传学研究中具有重要意义。1983年NeullP和Gerard等人用杂交瘤技术研制出Glm(3)单克隆抗体和相应的检测方法“-”。由于其方法操作繁琐,灵敏度不高,一直未用于法医检案。因Glm(3)因子分布频率好,且人类独有,适合法医亲子鉴定和个体识别。本文作者利用自制的酶标D,E。抗Glm(3)单克隆抗体,建立了D0t-ELISA法检验血.痕Glm(3)方法。该法简便灵敏,快速准确。现报道如下:材料与方法一、试剂与仪器1.自制辣根过氧化物酶标记的D7E8MCAb(HRP… 相似文献
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收集贵州省贵阳市及六盘水市两地区人群无关个体血样410例,按文献方法检测其G1m(3)因子,结果如下(表1、2)。本文调查的贵州省贵阳市及六盘水市人群是贵州省比较有代表性的两个城市人群。两地分别在贵州中部和西部,地理位置基本在一个纬度水平(北纬26"左右)。经用方差检验,P>0.05,两地无显著差异。经hardy-weinberg检验,符合遗传分布规律。
贵阳市和六盘水市汉族群体 G1m(3)因子频率调查@沙征凯$贵州六盘水市公安局刑警支队!553001王香菊,等.应用酶标D7E8单克隆抗体Dot-ELISA快速检验人血痕G1m(3)因子.中国法医学杂… 相似文献
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《律师世界》1996,(3)
一、判断题(每题1分,共10分)1、错2、错3、对4、错5、对6、对7、错8、错9、对10、错二、单项选择(每题1分,共25分)1、B2、D3、D4、A5、B6、A7、B8’D9、A10、B11、D12、D13、C14、A15、C16、c17、乙*趴D互g、c2氏A21、c22、E23、E2人c25、D三、乡和治抒(每*1分,共25分)1、AIXi2、CD3、ACD4、AIXID5、ABCD6、ABCD7、ABD8、ABD入ACD10’AJXi11、AC12、ABCD13、BD14、po15、AJMi16‘AIXID17、AC18、ABC19、阴阳、BD21、BD22、ACD23、CD24、CD历、用化D0、桑切分担(鲍IN4分,冗2回6公,羹3*9… 相似文献
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采用Amp-FLP技术研究人类血液、组织VNTR位点D1S80(pMCT118)、D17S30(pCNZ-22)和ApoB3’位点的遗传多态性,并应用于亲权鉴定案件,获得满意结果。D1S80、D17S30和ApoB3’的DP值分别为0.962、0.956和0.960,累积父权排除率(EPP)为94.51%,远远高于传统血型的DP值和EPP值,是亲权鉴定和个体识别有效方法。 相似文献
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抗丁丙诺啡单克隆抗体的制备 总被引:2,自引:2,他引:0
目的建立抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备高特异性的丁丙诺啡单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。方法在丁丙诺啡的分子上连接活性羧基基团,通过缩合反应将丁丙诺啡半抗原连接于血蓝蛋白(KLH)和小牛血清白蛋白(BSA),形成完全抗原。以完全抗原免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,筛选等杂交瘤技术,建立稳定的分泌抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过腹腔注射杂交瘤细胞,诱导小鼠产生含有单抗的腹水。用辛酸-硫酸铵加亲和层析法纯化抗丁丙诺啡单克隆抗体。采用酶联免疫反应和胶体金膜层析实验测定丁丙诺啡单抗的特异性以及免疫反应动力学参数。结果共获得3株分泌抗丁丙诺啡单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为7E6,6G4和3C2。7E6,6G4抗体灵敏度为10.0ng/ml,3C2抗体灵敏度为20.0ng/ml。7E6,6CA和3C2抗体的亲和常数分别为3.6×10^-9 mol/L,4.3×10^-9 mol/L和6.3×10^-9 mol/L。特异性测试结果表明7E6和6G4抗体与40种药物、毒品无任何交叉反应,而3C2抗体与吗啡有交叉反应。结论杂交瘤细胞株7E6和6G4产生的抗丁丙诺啡单克隆抗体具有很高的特异性和灵敏度。 相似文献
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巴比妥单克隆抗体制备及其免疫学特性鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
目的建立抗巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗巴比妥单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。方法将巴比妥分子环状丙二酰脲环上氨基引入活性羧基,然后通过缩合反应分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)偶联,得到完全抗原BAR-KLH和BAR-BSA,并用紫外分光光度计鉴定。用BAR-KLH免疫Balb/C小鼠,利用细胞融合技术建立稳定分泌抗巴比妥单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备巴比妥单克隆抗体,饱和硫酸铵法、亲和层析法纯化,并进行免疫学特性鉴定。结果完全抗原偶联成功,其偶联率为30∶1;筛选出1株杂交瘤细胞命名为5C6,其产生的单抗效价为1∶6.4×104,属于IgG1/kappa,抗体亲和力常数为2.27×108L/moL。纯化后的巴比妥单克隆抗体用ELISA法检测其灵敏度为130ng/mL,并与其他7种镇静催眠类药物交叉反应率小于1%。结论本研究制备的杂交瘤细胞株5C6分泌的抗体具有高特异性和灵敏度。 相似文献
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分泌抗人精子单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
建立两株分泌抗人精子单克隆抗体的杂交瘤细胞株G_8与E_(10),采用洗涤人精子免疫Balb/c小鼠,取免疫脾与Balb/c小鼠的Sp2/0骨髓瘤细胞融合,杂交瘤细胞诱生腹水的方法。Elisa,IIF或酶标抗体免疫组化法结果发现,G_8与E_(10)单抗与人精子(射出精子、睾丸、副睾管及输精管中的精子)及睾丸各级生殖细胞均发生反应;与人甲状腺上皮细胞、肾小管上皮细胞、胰腺导管上皮细胞以及胰岛均发生不同程度的交叉反应,与其他33种人体正常组织、9种人体液与分泌液、8种不同种族的动物精子均不发生交叉反应,说明在一般情况下这两种抗体可用于鉴定人类的精液斑以及精液与阴道分泌液的混合斑。两种单抗与人精子的顶体部、赤道部、后核帽、颈部及中段结合,证明精子特异性表面抗原分布于这几个区域。两种抗体均属IgG_1,G_8与E_(10)抗体的效价分别为1:512与1:1024。 相似文献
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目的建立分泌抗三唑仑代谢物α-羟基三唑仑单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备高特异性的三唑仑代谢物单克隆抗体,为三唑仑及其代谢物免疫分析方法的开发奠定基础。方法在三唑仑分子的6位苯环对位上引入活性氨基基团,然后通过缩合反应分别与匙孔血蓝蛋白(KLH)和牛血清白蛋白(BSA)相偶联形成完全抗原。以三唑仑-KLH免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,筛选等杂交瘤技术建立稳定的分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。纯化后的单克隆抗体,分别用SDS-PAGE电泳法、间接ELISA法和胶体金免疫层析法对其纯度、效价及灵敏度和特异性进行测定。结果获得3株能稳定分泌三唑仑代谢物单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2G4,4B2和5H6。2G4和4B2抗体只与三唑仑代谢物α-羟基三唑仑有反应,灵敏度分别为500ng/mL和750ng/mL。与其他参试物无交叉反应。因5H6抗体为IgM,考虑到纯化难度和实际应用的限制,暂未做深入研究。结论本研究制备的2G4和4B2单克隆抗体仅识别三唑仑代谢物α-羟基三唑仑,具有高度特异性和灵敏度。 相似文献
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